氟虫腈对小菜蛾幼虫体内解毒酶的影响

本文从解毒酶系的角度研究了小菜蛾Plutella xylostella(L.)对氟虫腈的短期生理生化响应。用氟虫腈LC50剂量处理小菜蛾3龄幼虫一定时间后,测定小菜蛾幼虫体内多功能氧化酶(MFO)、酯酶(EST)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性的动态变化。研究结果表明:经氟虫腈处理后小菜蛾体内解毒酶的活性均显著高于未经处理的对照,并且随着处理时间的延长,解毒酶活性逐渐提高。这说明氟虫腈对小菜蛾敏感品系的解毒酶具有一定的诱导作用,反之,解毒酶加快了小菜蛾体内对氟虫腈的代谢,降低了小菜蛾对氟虫腈的敏感性。     

五种植物精油对氟虫腈的增效与渗透促进作用

采用点滴法测定了花椒Zanthoxylum bungeanum Maxim,艾蒿Artemisia grgyi Levl. Et Vant,马尾松针Pinus massoniana Lamb,侧柏Platycladus orientalis(L.)Franco,黄蒿Artemisia annua L. 5种植物精油与氟虫腈联用对小菜蛾2龄幼虫的触杀毒力.研究结果表明,当植物精油浓度为1μL·mL-1时对氟虫腈的LC50均无显著增效作用,当上述精油浓度含量为10μL·mL-1时,艾蒿与侧柏氟虫腈能显著提高氟虫腈对小菜蛾幼虫的毒杀效果;致死中时(LT50)测定结果表明,当植物精油浓度为lpLL·mL-1时,仅艾蒿精油能缩短氟虫腈对小菜蛾幼虫的LT50,但当植物精油浓度为10μL·mL-1时,所有精油均能缩短氟虫腈对小菜蛾幼虫LT50;松针精油和侧柏精油能提高氟虫腈透皮吸收量,其余精油对氟虫腈没有显著促进渗透作用.     

害虫对氟虫腈的抗药性研究进展

氟虫腈是第一个商品化的苯基吡唑类杀虫剂,其作用机理是抑制γ-氨基丁酸(GABA)受体氯离子通道。氟虫腈为防治一些世界性的重大害虫包括对以前使用的杀虫剂具有严重抗性的害虫作出了重要贡献。然而,随着氟虫腈的大量使用,害虫对该药的抗药性问题受到日益关注。至今,重要的农业害虫如小菜蛾,烟粉虱、褐飞虱、白背飞虱,二化螟及斜纹夜蛾等已经对氟虫腈产生抗药性。文章就害虫对氟虫腈的抗药性发生概况、交互抗性及抗药性机理策略进行综述,以期为氟虫腈的合理使用提供理论基础。     

杀虫单、氟虫腈及其混剂对二化螟的防治效果

20 0 0～ 2 0 0 1年在安徽省庐江县进行了 2次药剂及剂量对二化螟的防治和保苗效果试验。试验1表明 ,40 %氟虫腈·杀虫单WP 42 0g(每hm2 有效成分用量 )处理的虫口减退率为 94 7% ,与 5 40g,660g及 5 %氟虫腈 (锐劲特 )SC 3 0g处理相差不大。试验 2表明 ,3 0 %杀虫单·氟虫腈WP 2 70g喷雾即可达到96 2 %的防效 ,接近 3 60g和 5 %氟虫腈SC 2 2 5g的效果。 2次试验中各处理的保苗效果与虫口减退率基本一致。比较药剂成本 ,可见这 2种新型复配剂对二化螟具有良好的防治和保苗效果 ,且上述剂量是经济高效的。     

福建省不同产地及不同生育期土荆芥精油化学成分的比较

采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS),对来源于福建省不同产地(福州新店镇、平潭县城关、连城县城关)以及不同生育期(苗期、生长期、果熟期)土荆芥(Chenopodium ambrosioides L. )地上部分精油的化学成分及其相对含量进行了比较分析.结果表明,福州新店镇、平潭县城关和连城县城关产土荆芥精油的主要化学成分(相对含量0.04%以上)分别有12、11和27种,3个产地的共有成分为11种;福州新店镇产土荆芥精油中相对含量较高的成分有对-聚伞花素(49.60%)、α-松油烯(26.81%)和异驱蛔素(8.16%)等,平潭县城关产精油中相对含量排在前3位的成分也为对-聚伞花素(47.25%)、α-松油烯(27.27%)和异驱蛔素(8.82%),连城县城关产精油中相对含量较高的成分有对-聚伞花素(36.33%)、2,5-二甲基-3-己炔-2,5-二醇(20.03%)、α-松油烯(12.71%)和异驱蛔素(3.07%)等.苗期、生长期和果熟期土荆芥精油的主要成分分别有17、12和12种,3个时期的共有成分为10种;苗期精油中相对含量较高的成分有对-聚伞花素(49.75%)、异驱蛔素(10.77%)、1-(1,3-二甲基-3-环己烯-1-基)乙酮(8.08%)和2,5-二甲基-3-己炔-2,5-二醇(7.79%)等;生长期精油中相对含量较高的成分有对-聚伞花素(49.60%)、α-松油烯(26.81%)和异驱蛔素(8.16%)等;果熟期精油中相对含量较高的成分有对-聚伞花素(43.65%)、α-松油烯(24.09%)和异驱蛔素(19.12%)等.研究结果显示,产地的地理环境和土荆芥的生育期对福建产土荆芥地上部分精油的化学成分及其相对含量均有一定的影响.     

羧酸酯酶介导的小菜蛾对氟虫腈的抗性

【目的】羧酸酯酶（carboxylesterases, CarEs）是昆虫重要的解毒代谢酶之一,可以介导靶标昆虫对多种杀虫剂的代谢抗性。本研究检测了羧酸酯酶对小菜蛾Plutella xylostella 抗药性的介导功能,旨在阐明羧酸酯酶在小菜蛾代谢解毒中的生理生化和分子机理。【方法】采用点滴法测定氟虫腈对小菜蛾敏感种群和抗氟虫腈种群的毒力,以及羧酸酯酶抑制剂磷酸三苯酯（triphenyl phosphate, TPP）对氟虫腈的增效作用;以LC₃₀和LC₅₀浓度的氟虫腈处理抗性小菜蛾,测定药剂处理后CarEs酶活性的变化;利用qRT-PCR技术分析Pxae22和Pxae31两个基因在小菜蛾不同发育阶段、组织和种群的表达模式;利用dsRNA干扰Pxae22和Pxae31后观察基因的表达变化和小菜蛾3龄幼虫对药剂敏感性的变化。【结果】TPP可以削弱小菜蛾3龄幼虫对氟虫腈的抗性,增效倍数约为6倍;使用较低剂量（LC₃₀和LC₅₀）氟虫腈处理小菜蛾3龄幼虫后,处理组CarEs比活力明显高于对照,提示氟虫腈对小菜蛾CarEs活性具有诱导作用。对羧酸酯酶基因Pxae22和Pxae31在小菜蛾不同发育阶段、4龄幼虫不同组织和不同种群3龄幼虫中的表达模式分析发现,这两个基因在小菜蛾4龄幼虫中的表达量最高;在4龄幼虫中以中肠组织中的表达量较高,头、表皮、脂肪体中的表达量很低; 抗性种群中的表达量显著高于敏感种群。通过干扰 Pxae22和 Pxae31后的qRT-PCR验证,两个基因的表达量均显著降低,进一步的氟虫腈毒力测定发现,干扰P xae22和 Pxae31后的小菜蛾3龄幼虫对氟虫腈的敏感性分别增加了1.63倍和1.73倍。【结论】羧酸酯酶在小菜蛾对氟虫腈解毒代谢中具有重要作用;Pxae22和Pxae31是小菜蛾的两个抗性相关基因,其表达水平的变化直接影响小菜蛾对氟虫腈的敏感性。     

湖北省褐飞虱对吡虫啉、噻嗪酮及氟虫腈的抗药性监测

采用稻茎浸渍法监测湖北省武穴、天门、监利、通城、孝感、公安及枣阳七地褐飞虱Nilaparvata lugens(Sta1)田间种群对吡虫啉、噻嗪酮、氟虫腈的抗药性。结果表明:2006、2007和2008年3年7地褐飞虱种群对吡虫啉的抗性分别为98.89～389.19倍、69.00～153.33倍和56.32～116.89倍,达高水平至极高水平抗性,但3年期间总体抗性水平呈现一定程度的下降趋势;2007和2008年2年7地褐飞虱对噻嗪酮的抗性分别为13.39～41.06倍和6.94～20.44倍,达低水平至高水平抗性;2007和2008年2年7地褐飞虱对氟虫腈抗性分别为0.97～2.64倍和0.63～1.42倍,为敏感阶段。此外,还对褐飞虱的治理进行讨论。     

氟虫腈、吡虫啉作为黑翅土白蚁诱杀药剂的效果

毒力测定结果表明,0.025~0.4μg/mL氟虫腈和吡虫啉分别在药后3 d和5 d对黑翅土白蚁Odontotermes formosanus表现出明显的毒杀效果,氟虫腈和吡虫啉药后1 d的LC50分别为药后5 d的509倍和63.8倍,2种药剂对黑翅土白蚁的毒杀效果均比较缓慢。毒性传递试验表明,0.5μg/g毒沙处理白蚁1 h后,氟虫腈和吡虫啉的致死毒性均可被传毒白蚁传递给受毒白蚁。驱避作用试验表明,50μg/mL氟虫腈对黑翅土白蚁无明显的驱避作用,而50μg/mL吡虫啉对黑翅土白蚁表现出了明显的驱避作用。可见,2种供试药剂中,氟虫腈是较理想的白蚁诱杀药剂。     

QuEChERS-GCMS测定液态乳中氟虫腈及其代谢物残留量

采用QuEChERS净化模式,通过气相色谱质谱仪（GCMS）建立了液态乳中氟虫腈及其代谢物残留量检测方法,并对两种不同净化材料的净化效果进行比较。样品由乙腈提取,QuEChERS净化,浓缩复溶后,通过GCMS进行检测,外标法定量。结果表明：氟虫腈及其代谢物残留量在2.00~200ng/mL内呈良好线性,线性相关系数（R2）均大于0.999,检出限为 0.400~1.00μg/kg;氟虫腈及其代谢物残留量在4 个添加水平（2.50、5.00、20.0、80.0μg/kg）下的加标回收率为 74.4%~120.2%,相对标准偏差（RSD,n=3）为1.0%~4.9%,小于10%。该方法准确、简单、快速,可适用于液态乳中氟虫腈及其代谢物残留量的同时测定。     

土荆芥提取物对玉米象的触杀与熏蒸活性

测定了土荆芥(Chenopodium ambrosioidesL.)4种溶剂(100%乙醇、丙酮、乙酸乙酯和石油醚)提取物对玉米象Sitophilusz eamais Motschulsky的触杀和,蒸活性。4种溶剂提取物在6.494mg/cm2浓度下对玉米象的触杀效果:48h后100%乙醇提取物和石油醚提取物的校正死亡率均达100%;丙酮提取物次之,为92.31%;乙酸乙酯提取物最低,为64.10%,但72h后达94.17%。4种溶剂提取物对玉米象的,蒸活性:72h后0.50mg/mL浓度处理下校正死亡率为98.73%～100%。     

龙柏精油对小菜蛾的生物活性

龙柏精油对小菜蛾Plutella xylostella(L.)的室内生物活性测定结果表明,熏蒸作用是龙柏精油对小菜蛾的主要作用方式,熏蒸实验中当龙柏精油浓度为5.00 mg/L2、.50 mg/L时,处理后48 h小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率分别为92.33%、80.29%。龙柏精油对小菜蛾具有较强的非选择性拒食作用和产卵忌避作用,但由于精油的挥发性效果不持久。当龙柏精油浓度为5.00 mg/L和2.50 mg/L时,24 h小菜蛾的产卵忌避率分别为80.45%和77.42%;而48 h则降为72.30%和61.79%。当龙柏精油浓度为5.00,2.50和1.25 mg/L时,24 h的非选择性拒食率分别为86.70,74.36和70.93%,48 h的非选择性拒食率分别降为82.36,71.40和60.40%。龙柏精油对小菜蛾具有一定的触杀活性,当龙柏精油浓度为5.00 mg/L时效果最好,24 h和48 h的校正死亡率分别为60.00%和76.67%。     

Distinct roles of two RDL GABA receptors in fipronil action in the diamondback moth (Plutella xylostella)

The phenylpyrazole insecticide fipronil blocks resistance to dieldrin (RDL) γ-aminobutyric acid (GABA) receptors in insects, thereby impairing inhibitory neurotransmission. Some insect species, such as the diamondback moth (Plutella xylostella), possess more than one Rdl gene. The involvement of multiple Rdls in fipronil toxicity and resistance remains largely unknown. In this study, we investigated the roles of two Rdl genes, PxRdl1 and PxRdl2, in P. xylostella fipronil action. In Xenopus oocytes, PxRDL2 receptors were 40 times less sensitive to fipronil than PxRDL1. PxRDL2 receptors were also less sensitive to GABA compared with PxRDL1. Knockout of the fipronil-sensitive PxRdl1 reduced the fipronil potency 10-fold, whereas knockout of the fipronil-resistant PxRdl2 enhanced the fipronil potency 4.4-fold. Furthermore, in two fipronil-resistant diamondback moth field populations, PxRdl2 expression was elevated 3.7- and 4.1-fold compared with a susceptible strain, whereas PxRdl1 expression was comparable among the resistant and susceptible strains. Collectively, our results indicate antagonistic effects of PxRDL1 and PxRDL2 on fipronil action in vivo and suggest that enhanced expression of fipronil-resistant PxRdl2 is potentially a new mechanism of fipronil resistance in insects.     

土荆芥生物总碱对家蝇的毒杀作用及药剂敏感性的影响

通过室内毒力测定和生化分析方法,测定了土荆芥生物总碱对敌百虫抗性种群,溴氰菊酯抗性种群,敏感种群等3个家蝇(Musca domestica)种群成虫的毒杀效果,土荆芥生物总碱处理前后家蝇种群成虫对溴氰菊酯和敌百虫的药剂敏感性变化,以及对家蝇成虫羧酸酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶的活力的影响。结果表明,土荆芥生物总碱不仅对家蝇有毒杀效果,处理后能提高家蝇对杀虫剂的敏感性,而且能抑制家蝇体内解毒酶系活性。土荆芥生物总碱对不同种群家蝇成虫的LD_(50)没有显著差异;土荆芥生物总碱处理前后,敌百虫对抗性种群和敏感种群的LD_(50)比值分别为1.6277和1.2914,溴氰菊酯对抗性种群和敏感种群的LD_(50)比值分别为2.0768和1.3871;土荆芥生物总碱处理前后,家蝇敌百虫抗性种群、溴氰菊酯抗性种群和敏感种群成虫的羧酸酯酶活性比值分别为1.1692、1.2947和1.2259,谷胱甘肽-S-转移酶活性比值分别为1.2476、1.6519和1.0570。     

小菜蛾对几种常用药剂的敏感性测定

采用叶片浸溃法,在2001年10月和2002年10月分别测定了福州上街蔬菜基地的小菜蛾,对10种杀虫剂的敏感性。结果表明,上街菜区小菜蛾对灭多威、杀虫双、辛硫磷、毒死蜱、杀灭菊酯和功夫菊酯等农药极不敏感,已不能有效控制小菜蛾的危害。而小菜蛾对氟啶脲、阿维菌素、氟虫腈和虫螨腈比较敏感。通过两次毒力测定比较(2002年10月的LC50;2001年10月的LC50),结果表明,大多数杀虫剂敏感性变化较小。但小菜蛾对阿维菌素敏感性明显下降,毒力倍数达6．65倍,对氟虫腈毒力倍数相差1．48倍。此外,2002年10月小菜蛾对功夫菊酯的LC50为2001年10月的2．02倍。用浸叶法和浸溃法测定多杀菌素、氟虫腈与虫螨腈推荐浓度对小菜蛾幼虫的毒杀作用。结果表明3种药剂浸叶法处理效果均较理想。     

土荆芥精油的超临界CO2萃取条件及杀虫活性的初步研究

采用超临界CO2萃取技术,应用正交设计方法,以萃取率为评价指标,优化土荆芥精油的提取工艺,并对土荆芥精油的杀虫活性进行初步研究。结果表明,超临界CO2萃取土荆芥精油的较佳萃取条件为:粒度为60-80目,萃取压力为20MPa,萃取温度为55℃,解析压力为6 MPa,解析温度为60℃,萃取时间为65 min,CO2流量为34-36 L.h-1,在此条件下的萃取率为7.92%,而水蒸气蒸馏法仅为0.45%;此外采用熏蒸方法,土荆芥精油对家蝇成虫和黄曲条跳甲成虫的致死中浓度(LC50)分别为1.6102和1.3232 mg.L-1,采用点滴法,触杀致死中量(LD50)分别为166.4336和306.8287μg.头-1。     

土荆芥的石油醚提取物及精油对冈比亚按蚊的杀虫活性

在室内条件下测试了土荆芥Chenopodium ambrosioides 叶片的石油醚提取物及精油对冈比亚按蚊Anopheles gambiae 0～2 d龄成虫和1～4龄幼虫的毒性。每一龄期各取30头幼虫分别接触50,100,250,500,750和1 000 mg/L提取物和精油,于24 h和48 h后记录死亡幼虫的数目。30头成虫在密封的长方形玻璃笼子中分别接触0.8,1.6,2.4 μL/L土荆芥精油蒸气, 24 h后记录死亡率。结果表明,测试的提取物和精油对冈比亚按蚊的各龄幼虫和成虫均具有毒性。48 h致死中浓度（LC50）的测试结果表明,石油醚提取物对1龄幼虫的毒性最强（14.89 mg/L）,其次是对4龄幼虫（18.90 mg/L）,对3龄幼虫的毒性最低（183.77 mg/L）; 精油对4龄幼虫毒性最强（36.62 mg/L）,其次是对1龄幼虫（90.75 mg/L）。推算的土荆芥精油对冈比亚按蚊的LC50为1.01 μL/L。本研究揭示了土荆芥对冈比亚按蚊的防治潜力。     

萜类化合物对小菜蛾幼虫的拒食活性

采用叶碟浸液法测试从松节油合成的26个不同结构萜类化合物样品对小菜蛾Plutella xylostella(L.)4龄幼虫的拒食活性。结果显示,编号为2,4,8,13,27,31的6个化合物,即诺卜醇、诺卜丙基醚、内型异莰烷基甲醇丙酸酯、4-(1-甲基乙烯基)-1-环己烯-1-乙醇丙酸酯、羟基香茅醛丙酸酯、羟基香茅醛1,2-丙二醇缩醛具有较高的拒食活性。处理有效成分为0.01g/mL时,这6个化合物24h拒食率为70%～100%。其中2,4,8号3个化合物拒食活性最高,处理有效成分为0.01g/mL和0.001g/mL时,24h拒食率分别为98.33%,99.80%,100.00%和85.60%,83.90%,66.97%;并且持效性较好,72h拒食率分别为92.67%,89.97%,98.73%和63.20%,63.30%,45.93%。     

Repellent action and contact toxicity mechanisms of the essential oil extracted from Chinese chive against Plutella xylostella larvae

Botanical pesticides play increasingly important roles in the control of agricultural pests. In this study, the insecticidal effects, specifically the repellent action and contact toxicity, of the essential oil extracted from Chinese chive (EOC) against Plutella xylostella larvae were confirmed. The mechanisms of repellent’s action were studied using electroantennograms (EAGs), and the effects on glutathione S‐transferase (GST), carboxylesterase (CarE), and acetyl cholinesterase were investigated after EOC treatments. The EOC affected the EAG results and inhibited the activities of GST and CarE in treated P. xylostella larvae, which could explain its insecticidal effects. And, four pyrazines showed greater repellent activities than that of the EOC, which was confirmed as the main active compounds of EOC.     

土荆芥挥发油对蚕豆根尖细胞的氧化损伤

土荆芥是一种入侵植物,对周围植物具有较强的化感潜力.采用培养皿土培法和培养皿滤纸法,分别模拟土荆芥挥发油通过淋溶和挥发两条途径对蚕豆根尖细胞膜脂过氧化和抗氧化酶活性的影响,并分析了挥发油诱导的细胞凋亡.结果表明:在培养皿土培和培养皿滤纸处理中,在处理前期(24 h),蚕豆根尖细胞超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性均随土荆芥挥发油剂量的增大呈先升高后降低的趋势;根尖丙二醛含量随处理时间的延长和处理剂量的增大呈上升趋势.在处理中期(48 h)和处理后期(72 h),出现了典型的DNALadder条带,表明土荆芥挥发油可诱导蚕豆根尖细胞凋亡,并且随着挥发油剂量的增大和处理时间的延长,细胞凋亡程度加剧.土荆芥挥发油可以通过淋溶和挥发两种途径作用于周围植物,使受体植物的膜脂过氧化程度加剧,抗氧化酶活性受到抑制,诱导根尖细胞发生氧化损伤和细胞凋亡,从而抑制周围植物生长.而且,当挥发油以淋溶途径进入土壤时,蚕豆根尖抗氧化酶活性整体较高,DNA损伤程度较小,土荆芥挥发油通过挥发途径的化感作用大于通过淋溶途径.     

Combined analysis of the essential oil of Chenopodium ambrosioides by GC, GC-MS and 13C-NMR spectroscopy: quantitative determination of ascaridole, a heat-sensitive compound

A commercial sample of the essential oil of Chenopodium ambrosioides L. from Madagascar was analysed by GC, GC-MS and 13C-NMR. By GC analysis, the major constituents were found to be ascaridole (1) (41.8%), isoascaridole (2) (18.1%), p-cymene (16.2%), alpha-terpinene (9.7%) and limonene (3.8%). However, ascaridole undergoes a partial thermal isomerisation to 2 and hence the amount of 1 is under-estimated by GC analysis. The actual contents of 1 and 2 (55.3 and 4.6%, respectively) were obtained following combined analysis of the sample by GC and 13C-NMR. Several hydroxy- and polyhydroxy-menthanes were identified by 13C-NMR.