细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的研究进展

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）属于B7／CD28家族成员，具有下调免疫应答为主的多种免疫学效应。CTLA-4有多个位点基因多态性，其基因多态性可影响CTLA-4分子的表达和功能，同某些免疫因素相关性疾病有关。CTLA-4可表达于免疫细胞为主的多种细胞，有膜结合和可溶性等两种形式。CTLA-4Ig和抗单抗是CTLA-4用于防治自身免疫性疾病、移植排斥及肿瘤的两种分子，其效能在动物试验及临床应用中已得到证实.     

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4Ig和anti-CD154单抗在移植中的研究进展

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原(CTLA)-4Ig和anti-CD154单抗是目前器官移植的新型生物免疫抑制剂.两者均通过阻断协同刺激信号来抑制T淋巴细胞的活化,从而起到免疫耐受作用,在器官移植中有很好的应用前景.CTLA-4 Ig和anti-CD154单抗在动物模型实验中研究发现单用或联用有长久强效的免疫耐受作用能延长移植物的存活期.在临床中的应用尚处于初期,其临床副作用、安全性及长期的疗效有待进一步观察.     

稳定表达细胞毒性T淋巴细胞相关抗原CTLA-4的293T细胞株的建立

目的：构建稳定表达细胞毒性 T 淋巴细胞相关抗原-4（cytotoxic T lymphocyte antigen-4, CTLA-4）的293T 细胞株。方法首先从人外周血获取 PBMC 加以 T 细胞活化; PCR 扩增 CTLA-4转录本,连接pUCm-T 质粒引入 HindⅢ和 EcoRⅠ双酶切位点后转入真核细胞表达质粒 pcDNA3．1;重组质粒 pcDNA3．1-CTLA-4经脂质体转染293T 细胞,以抗生素 G418筛选表达 CTLA-4的293T 细胞;定量 PCR、免疫荧光分别检测293T 细胞 CTLA-4表达与细胞定位。结果血样来源 T 细胞经活化后表达 CTLA-4转录本。 HindⅢ和EcoRⅠ双酶切证实重组质粒内 CTLA-4插入序列正确; RT-PCR 及免疫荧光检测证实293T 细胞能够稳定表达目的蛋白 CTLA-4,并定位于细胞膜表面。结论成功构建的 pcDNA3．1-CTLA-4重组真核表达载体,在293T 细胞膜表面实现了稳定表达,为进行相关生物学理论与应用研究打下基础。     

肾移植受者排斥反应与外周血T细胞亚群变化

<正> 我们用OKT单克隆抗体(McAb)检测肾移植受者外周血T细胞亚群,并对16例尸体肾移植受者进行分析,其中8例进行手术后(用CsA前),用CsA及时发生排斥(治疗前)时检测比较。另8例较典型病例则分析其排斥反应出现与否以及与T细胞亚群的变化。结果显示OKT检测和临床判断基本相符,提示OKT检测为研究和诊断肾移植受者的急性排斥提供了较好的手段,现报道如下。     

T细胞亚群的检测在肾移植术后急性排斥反应时的临床意义

通过流式细胞仪对５４例肾移植术后受者外周血Ｔ细胞亚群进行动态监测。结果显示肾移植术后发生稳性排斥反应时，ＣＤ＾３＋，ＣＤ＾＋４细胞及ＣＤ＾４＋／ＣＤ８＾＋比值均升高，经激素冲击治疗有效的病人ＣＤ＾３＋，ＣＤ＾＋４细胞及ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８比值逐下降，而ＣＤ＾３＋，ＣＤ＾＋４细胞及ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋３比会主同不降者说明激素冲击治疗无效。Ｔ细胞亚群检测可作为对是能肾移植术后急性排斥反应监测的一种方     

细胞毒T淋巴细胞相关抗原4基因C-658T多态性与溃疡性结肠炎相关性研究

,与UC患者的病变范围有显著相关(P=0.037;P=0.0067);UC组C61T基因型频率与对照组相比,差异无统计学意义(P=0.192).结论 CTLA-4基因启动子区C-658T位点T等位基因与中国汉族UC存在显著相关性.     

同种异体肾移植急性排斥反应的细胞及分子机制研究进展

同种移植排斥反应的细胞及分子机制研究为临床上早期诊断、鉴别诊断和寻找更为恰当的免疫抑制治疗方案提供了重要的理论依据和途径。本文就同种异体肾移植急性排斥反应中T细胞抗原识别、共刺激分子、细胞因子和细胞因子多态性、趋化因子、凝血酶和凝血系统的激活等机制的研究进展进行了综述。     

艾灸干预免疫抑制兔细胞毒性T淋巴细胞抗原-4的作用效应分析

目的：比较不同艾灸干预下免疫抑制兔细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)及程序性死亡受体1(PD-1表达变化的异同。方法：20只大耳白兔随机分为空白组、模型组、艾条灸（MSM）组与隔药饼灸（HPM）组,每组5只,连续7 d腹腔注射环磷酰胺（CTX）诱导免疫抑制模型。造模成功后分别进行MSM与HPM干预,均为隔日灸,共治疗10次。治疗结束后麻醉白兔,取血清、肝脏与脾脏,ELISA检测血清中PD-1、PD-L1含量,免疫组化法检测肝组织PD-1含量,RT-qPCR检测肝、脾组织CTLA-4 mRNA含量。结果：HPM和MSM均可降低免疫抑制下PD-1及PD-L1水平,并可有效抑制脾脏CTLA-4和肝脏PD-1、CTLA-4水平升高,与免疫抑制模型组相比差异均存在统计学意义（P<0.05）,且Pearson相关性检验表明肝组织中CTLA-4与PD-1呈显著正相关（r=0.780 7,P<0.001）。结论：HPM可通过调控多个免疫抑制位点改善机体免疫功能。     

抗激活小鼠T细胞抗原单抗抑制同种移植物排斥反应的作用及其机理

为阐明活化 T 细胞主动免疫同系小鼠诱导同种移植物存活期延长的机理,利用本室制备的抗活化小鼠 T 细胞抗原单克隆抗体(2H_3)观察它对同种免疫反应的影响;结果表明给接受同种移植物的受者转输2H_3能显著地延长同种心肌移植物的存活时间;在 ConA 诱导的淋巴细胞增生反应、混合淋巴细胞反应和诱导同种 T 杀伤性细胞的体外实验中加入2H_3,观察到2H_3对上述反应的明显抑制作用。提示活化 T细胞主动免疫同系小鼠诱导同种移植物存活期延长的机理,可能与免疫动物体内产生了相应的抗体,抑制了同种免疫反应的进行有关。     

MLC上清液中细胞因子的检测与肾移植急性排斥反应的研究

探讨混合淋巴细胞培养中细胞因子水平与急性排斥反应的关系。方法随机选取２４例接受同种异体肾移植术的患者为检测对象。在其接受手术当日，分离其外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）与供者单个核细胞进行混合白细胞培养（反应组），同时以单纯自身ＰＢＭＣ进行培养（对照组）。在培养第１、３、５ｄ测ＭＬＣ上清中ＩＬ－２、ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水平，并观察其分 动态变化。结果发生急性排斥反应的患者，在３次时间点上，细胞因子水平     

Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4 inhibits integrin-mediated stimulation

The negative role exerted by cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4 (CTLA-4) in the regulation of T-cell activity, as induced by T-cell receptor (TCR)/CD3 and CD28 costimulation, has been widely described. In the present work we investigated the role of CTLA-4 in the control of cell activation, as induced by costimulation of the adhesion molecule lymphocyte function-associated antigen-1 (LFA-1) in murine CD4+ T cells. Results show that CTLA-4 engagement inhibits interleukin-2 (IL-2) production, not only when induced by CD3/CD28 costimulation, but also when CD4+ T cells are costimulated by anti-CD3 and anti-LFA-1 monoclonal antibodies (mAbs). LFA-1 has been described to induce Ca2+ mobilization also in the absence of TCR engagement. Moreover, we found that CTLA-4 engagement negatively affects Ca2+ mobilization and NF-AT activation, as induced by LFA-1 engagement alone. PLCgamma1 phosphorylation was also dampened within minutes after CTLA-4 engagement. Altogether these data indicate that through the control of signals induced by different receptors, CTLA-4 could be a global attenuator of T-cell activation.     

肾移植后急性体液性排斥反应的治疗

背景：肾移植后急性体液性排斥反应是一类人类白细胞抗原抗体介导的排斥反应,常导致移植物丧失功能。目前,强效免疫抑制剂和B淋巴细胞抑制剂的应用使急性体液性排斥反应的逆转率明显提高。 目的：探讨肾移植后急性体液性排斥反应的治疗方案。 方法：对20例发生急性体液性排斥反应的肾移植受者进行回顾性分析,患者给予抗胸腺球蛋白、蛋白A免疫吸附和大剂量丙种球蛋白联合治疗,所有患者均在蛋白A免疫吸附初次治疗前和末次治疗后留血标本测定群体反应性抗体和血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM。 结果与结论：20例患者急性体液性排斥反应均有效逆转。随访48个月,1例患者在移植后5个月时因合并严重的肺部感染而停用免疫抑制剂,继而发生剧烈的急性排斥反应而行移植肾切除,恢复血液透析,其余患者移植肾功能良好,至随访终点时平均血肌酐浓度为(132.6±44.2)µmol/L。提示,抗胸细胞球蛋白联合蛋白A免疫吸附和大剂量丙种球蛋白能够有效逆转肾移植后急性体液性排斥反应,成功率高,并发症少,且完全逆转的急性体液性排斥反应并不影响移植肾的预后。     

Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4 polymorphism in patients with rheumatic heart disease

Acute rheumatic fever (ARF) is a systemic inflammatory disease occurring as a consequence of an exaggerated immune response to group A, beta haemolytic streptococcal pharyngitis. The molecular mimicry between human target organs/tissues and specific components of the infectious organism leads to the development of autoimmune reactions and cardiac tissue damage in rheumatic heart disease (RHD). Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4 (CTLA-4) is a negative regulator of T cell activation and proliferation during the immune response. CTLA-4 gene polymorphism has been shown to affect the inhibitory function of CTLA-4. We aimed to analyze the association of CTLA-4 gene locus at position 49 of exon 1 with susceptibility to ARF/RHD. This study included a total of 98 patients with RHD as a sequela of ARF, who fulfilled the revised classification criteria of Jones and 154 healthy unrelated controls. CTLA-4 +49 A/G polymorphism was genotyped by using PCR-RLFP technique. Data was analyzed by binary logistic regression models. The frequencies of GG, GA and AA genotypes were found to be 14%, 47% and 39%, respectively, in patients and 6%, 45% and 49%, respectively, in controls. The GG genotype was found to be significantly different between patients and controls (OR: 3.11; P = 0.016). GA and AA genotypes did not statistically differ between patients and controls. Our data showed a significant association of +49G /G polymorphism in a small patient group with RHD.     

尿CD54+淋巴细胞在肾移植急性排斥反应中的变化

背景：正常肾脏、肾小管上皮和血管内皮细胞仅有少量CD54表达,当发生急性排斥反应时,肾小管上皮细胞和血管内皮细胞CD54表达明显增加,同时大量白细胞浸润;间质浸润细胞和肾小管上皮细胞CD54表达增加。 目的：探讨流式细胞仪检测尿CD54⁺淋巴细胞对移植肾急性排斥反应的诊断价值。 方法：来自解放军成都军区总医院的肾移植后恢复正常者(n=18)、出现急性排斥反应者(n=8)、移植肾功不全者(n=9)以及健康志愿者(n=10)。流式细胞仪比较各组移植前后尿液中CD54⁺淋巴细胞比率变化。 结果与结论：尿CD54⁺淋巴细胞在肾移植患者出现排斥反应时明显增加(P < 0.01),抗排斥治疗后逐渐下降。移植肾功能正常者和移植肾功不全者CD54轻度升高。提示尿液中CD54⁺淋巴细胞水平能准确反映肾移植物移植后患者的免疫状态,可作为肾移植后急性排斥反应的特异标志。     

彩色多普勒超声在肾移植术后急性排斥反应诊断中的应用

目的探讨彩色多普勒超声在肾移植术后急性排斥反应诊断的临床应用与价值。方法采用双功能彩色多普勒超声动态观察97例肾移植术后患者移植肾的形态结构和血流动力学。结果22例发生急性排斥反应的移植肾的彩色多普勒超声具有特征性改变，表现为皮质出现片状无回声区；移植肾体积增大超过5％；肾窦回声消失；RI值升高，与移植肾功能稳定组比较有统计学意义（P〈0．05）。结论双功能彩色多普勒超声可动态、有效及时地监测移植肾的急性排斥反应。     

抗CD25单克隆抗体预防肾移植术后急性排异反应的研究

目的 :研究抗CD2 5单克隆抗体预防肾移植术后急性排异反应的作用。方法 :71例肾移植患者随机分为抗CD2 5单克隆抗体治疗组 2 6例与对照组 4 5例 ,治疗组于肾移植手术前后应用抗CD2 5单克隆抗体 2次 ,对术后急性排异反应发生率、移植肾功能及外周血T细胞亚群进行动态监测。结果 :术后 1、3、6、12个月时急性排异反应的发生率治疗组为 7.7%、19 .2 %、2 3.1%、30 .8% ,对照组为 15 .6 %、2 8.9%、35 .6 %、4 6 .7% ,两组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;术后 1、6及 12个月时治疗组移植肾功能优于对照组 (P <0 .0 5 ) ;术后两组CD3+ 与CD4 + 的表达均下降 ,但两组间无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :抗CD2 5单克隆抗体可以明显降低肾移植术后急性排异反应的发生率 ,而对T细胞亚群无明显影响。     

高PRA介导肾移植后延迟性超急排斥反应

目的：了解HLA-A、B、DR、DQ表现型为纯合子的终末期肾脏疾病患者的PRA水平,并研究其与肾移植预后的关系。方法：对2006年8月至2007年8月间在我院登记等待首次肾移植的438例终末期肾脏疾病患者HLA、PRA情况以及其中1例PRA65的HLA纯合子患者肾移植效果进行分析。HLA基因分型采用PCR-SSP技术,PRA、抗体强度及抗体特异性分析采用ELISA技术,数据统计采用SPSS11.5统计软件。结果：438例患者中有HLA纯合子12例,杂合子426例;12例纯合子中PRA阳性者6例,阳性率50,平均HLA抗体强度为55,广泛致敏率达100;426例杂合子中PRA阳性者65例,阳性率15.26,平均HLA抗体强度为28,广泛致敏率为40;纯合子与杂合子之间的PRA阳性率、平均HLA抗体强度和广泛致敏率相比差异均有统计学意义（P〈0.05）,纯合子高PRA的风险大（OR=5.29,95CI：1.67～16.70）;1例PRA65的纯合子患者术前经血浆置换、蛋白免疫吸附、静滴丙种球蛋白治疗使PRA降低至阴性,在舒莱免疫诱导下行尸体肾移植术,供受者HLA抗原2个错配,术后移植肾功能逐渐恢复,第3天开始PRA呈阳性并逐渐升高,伴随临床逐渐出现尿少、血压升高、移植肾区疼痛等排斥反应征象,血清肌酐逐渐升高,移植肾B超见动脉阻力指数逐渐升高,提示急性排斥反应,采用术前有效清除HLA抗体的所有方法再次治疗无效,于术后第36天因移植物失功行移植肾切除。结论：HLA纯合子产生高PRA的风险大;文中1例PRA阳性的HLA纯合子早期移植肾功能恢复随后出现不可逆排斥反应致移植肾失功的情况,提示近年来随着各种有效清除HLA抗体的治疗方法不断用于临床导致了抗体介导的延迟性超急排斥反应（AMDR）的出现从而使移植肾失功;高PRA患者行肾移植术需高度慎重,应尽可能避开受者PRA峰值时的全部抗体谱来选择供体。     

移植肾急性排斥与移植前后血清细胞因子表达的变化

背景：目前异体器官移植后细胞因子变化己经有较多的报道,但有关细胞因子在肾移植患者中的动态变化规律及其与移植急性排斥反应的关系鲜有报道。 目的：观察肾移植受者移植前后血清细胞因子表达变化,并探讨其与移植肾急性排斥的关系。 方法：选择2008年9月至2011年9月武警后勤学院附属医院收治的接受肾移植患者48例,均为首次肾移植,分为肾功能稳定组和急性排斥反应组。另选择健康体检者30人为对照组。 结果与结论：肾功能稳定组、急性排斥反应组移植前1 d血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素8水平与对照组相比差异无显著性意义(P > 0.05)。肾功能稳定组血清3种细胞因子水平均于移植后第1天即开始逐渐升高,在3 d时显著升高(P < 0.05),5 d时开始下降,7 d下降显著(P < 0.05),14 d左右趋于降至移植前水平,21-28 d表达稳定在移植前水平。急性排斥反应组血清3种细胞因子水平于移植后第1天即显著升高(P < 0.05),7-14 d维持在高水平 (P < 0.05),21-28 d稳定下降,但仍明显高于移植前(P < 0.05)。相同时间段,急性排斥反应组血清3种细胞因子水平均明显高于肾功能稳定组(P < 0.05)。提示移植后血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素8动态水平变化在一定程度上反映肾移植受者的免疫反应状态,可作为辅助早期诊断急性排斥反应的免疫生物学指标。