HPLC-MS测定黄芪药材中3种成分的含量

黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus （Fisch．）Bge．var．mongholicus（Bge．）Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus（Fisch．）Bge．的干燥根，具有补气固表、利尿脱毒、敛疮生肌等功效。黄芪中的主要有效成分为皂苷和黄酮类化合物，研究证实黄芪中的黄酮类成分具有清除氧自由基、抑制脂质过氧化、维持血中NO浓度和保护缺血再灌注损伤等多种药理活性，而黄芪皂苷在抗衰老、调节免疫功能、保护心肌和大脑缺血等多方面具有显著作用.     

高效液相色谱-质谱联用技术分析甘草及其提取物中黄酮类成分

本文运用高效液相色谱-质谱联用技术分析不同产地的甘草药材及其提取物中黄酮类成分.研究表明不同产地的甘草生药中黄酮类成分的种类和含量有着明显的差别,其高效液相色谱的指纹图谱存在显著差异.     

丹参中丹参酮成分的HPLC-MS(n)研究

目的研究丹参中丹参酮成分的ESI-MS（n）规律,建立其HPLC-MS（n）特征图谱。方法以丹参酮ⅡA为代表,初步探讨丹参酮成分的ESI-MS（n）规律。应用HPLC-MS（n）,ESI（＋）模式,以水-乙腈为流动相,检测波长254 nm,梯度洗脱绘制丹参中丹参酮成分的特征图谱。结果得出丹参酮成分的ESI-MS（n）可能的裂解途径,得到其HPLC-MS（n）特征图谱,对特征图谱中11种主要化合物进行了精确归属。结论丹参酮类成分具有相似的ESI-MS（n）行为,根据质谱提供的各流份的分子量信息及多级质谱的裂解信息,可用于鉴别丹参酮类成分。所得到的丹参中丹参酮成分的MS（n）TIC图,可用于丹参药材中丹参酮类成分的指纹鉴别。     

丹参中丹参酮成分的HPLC-MS(n)研究

目的 研究丹参中丹参酮成分的ESI-MS(n)规律,建立其HPLC-MS(n)特征图谱。方法 以丹参酮ⅡA为代表,初步探讨丹参酮成分的ESI-MS(n)规律。应用HPLC-MS(n),ESI(＋)模式,以水-乙腈为流动相,检测波长254 nm,梯度洗脱绘制丹参中丹参酮成分的特征图谱。结果 得出丹参酮成分的ESI-MS(n)可能的裂解途径,得到其HPLC-MS(n)特征图谱,对特征图谱中11种主要化合物进行了精确归属。结论 丹参酮类成分具有相似的ESI-MS(n)行为,根据质谱提供的各流份的分子量信息及多级质谱的裂解信息,可用于鉴别丹参酮类成分。所得到的丹参中丹参酮成分的MS(n)TIC图,可用于丹参药材中丹参酮类成分的指纹鉴别。     

蒙古黄芪中黄酮类有效成分指纹图谱研究

目的建立蒙古黄芪中黄酮类有效成分的指纹图谱，为科学评价黄芪的内在质量提供参考。方法应用高效液相色谱-紫外检测法，测定5批蒙古黄芪黄酮类成分提取物的指纹图谱。色谱条件：C18柱[（250×4．6）mm，5μm）]，流动相：A相为乙腈-甲醇（2：8v／v），B相为醋酸盐缓冲液（pH=4．0）梯度洗脱，流速为0．8ml／min，检测波长为254nm，柱温为25℃。结果5批黄芪药材有8个共有峰，其HPLC指纹图谱基本一致，各共有峰保留时间的比值基本一致，共有峰面积之和均大于总峰面积的90％，但其共有峰面积的比值有一定差异。结论该方法重现性好，建立的指纹图谱为黄芪的质量控制及评价提供依据。     

黄芪药材HPLC特征图谱研究(2)黄酮类成分

目的:建立黄芪中黄酮类成分的HPLC、UPLC特征图谱。方法:优化HPLC液相条件确定特征性成分,以HPLC为基础实现HPLC、UPLC条件转换。结果:5个特征性成分在HPLC及UPLC条件下均分离良好。结论:本方法简便易行,所选特征性成分可用于黄芪中黄酮类成分的检查。     

HPLC-MS/MS法同时测定毛樱桃叶中7种黄酮类成分的含量

目的建立高效液相色谱-串联三重四级杆质谱法(HPLC-MS/MS)测定毛樱桃叶中槲皮苷、金丝桃苷、槲皮素、山奈酚、阿福豆苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷和芦丁7种主要黄酮类化合物的含量。方法以Agilent ZORBAX SB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5.0μm)为分析柱,以乙腈(A)和体积分数为0.1%的甲酸水溶液(B)为流动相体系,梯度洗脱,流速为0.8 m L·min~(-1)。采用电喷雾电离源(electrospray ionization,ESI)负离子化方式检测,以多重反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式进行扫描定量。结果槲皮苷、金丝桃苷、槲皮素、山奈酚、阿福豆苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷和芦丁分别在质量浓度为125~4 000、35~1 120、6.75~216、1.4~44.8、65~2 080、3.75~120、65~2 080μg·L-1内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.999,7种成分的加样回收率为96.8%~103.4%(RSD<3%,n=6)。7种黄酮类化合物的含量质量分数分别为5.234%、0.203%、0.053%、0.005%、0.605%、0.011%、1.130%。结论该方法可用于测定樱桃叶中含量差异较大的黄酮类化合物的含量,为樱桃叶的质量控制提供参考依据。     

液质联用法对两种虫草中核苷类成分的研究

目的优化色谱条件,在最佳条件下对蒙山九州虫草和冬虫夏草子座中核苷类化合物进行定性和定量研究,并比较两种虫草的不同。方法用高效液相色谱(HPLC)法对供试品中核苷类成分进行初步定性和定量的研究,然后用质谱(MS)法进行成分验证。结果HPLC与MS法联用能准确地对各组分进行定性和定量分析;洗脱液的最佳配比为:先以99%水+1%乙腈梯度洗脱5 min后过渡为96%水+4%乙腈至洗脱完全。结论首次将此方法用于虫草中核苷类成分的研究,发现蒙山九州虫草含有比冬虫夏草种类更多的核苷类成分,有望替代价格昂贵的冬虫夏草应用于临床。     

人血浆中罗红霉素的HPLC-MS测定及生物等效性研究

目的建立人血浆中罗红霉素的HPLC-MS测定方法,研究罗红霉素胶囊的生物等效性.方法采用双交叉实验设计,血样用乙腈沉淀后直接测定,根据血药浓度-时间数据计算药动学参数,估算相对生物利用度,采用双单侧t检验判断其生物等效性.结果两种罗红霉素制剂的t1/2分别为(13.18±2.01)h和(13.31±2.45)h,tmax分别为(1.8±1.2)h和(2.2±1.1)h,cmax分别为(6.14±1.76)μg·mL-1和(6.47±2.42)μg·mL-1,AUC0～72h分别为(71.81±28.40)μg·h·mL-1和(73.12±31.77)μg·h·mL-1,受试制剂的相对生物利用度为(100.6±11.4)%.结论本实验建立的方法灵敏、准确、简便,统计学结果表明两种制剂生物等效.     

HPLC-DAD、HPLC-MS联用检测中药中混入莨菪碱类成分

目的:建立一种简便、快速、灵敏、准确地鉴定中药中莨菪碱类成分混入的高效液相色谱-阵列二极管检测器(HPLC- DAD)、高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS)分析方法。方法:色谱柱为Lichrospher Si正相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm), DAD检测条件:流动相:30 mmol·L-1醋酸铵溶液-乙腈=30:70,检测波长210 nm,流速1.0 ml·min-1。HPLC-MS以离子阱为检测器,采用正离子检测模式进行检测。结果:运用此方法成功的确证中药煎剂中阿托品、山莨菪碱、东莨菪碱类成分。结论:本方法简便准确,可做为中药中莨菪碱类成分混入的检测方法。     

硫磺熏蒸对黄芪中黄酮类和皂苷类成分的影响

目的测定硫磺熏前后黄芪中黄酮类和皂苷类成分的变化,确定硫磺熏对黄芪药材质量的影响,为评价熏硫加工对黄芪质量的影响提供依据。方法对收集的黄芪进行熏硫加工,采用HPLC-DAD法测定了毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种黄酮成分,UPLC-ELSD法测定了黄芪皂苷I、黄芪皂苷II、黄芪皂苷III、黄芪甲苷4种皂苷成分。结果硫磺熏过的黄芪药材中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷含量降低,毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷I、黄芪皂苷III、黄芪甲苷的含量变化不明显。结论黄芪熏硫加工后,黄酮苷成分有所降低,其余成分变化不明显。     

黄芪有效成分的药理作用与质量控制研究进展

黄芪是大宗药材,有效成分主要包括多糖类、皂苷类和黄酮类。多糖类成分是黄芪中含量最多的活性成分,具有提高免疫力、抗衰老、改善记忆力等药理作用;皂苷类成分具有抗炎、免疫调节、抗氧化等作用;黄酮类成分具有显著的抗氧化、抗衰老等作用。黄芪有效成分的质量控制方法以高效液相色谱法最为常用,根据不同有效成分的特性可选用不同的检测器;另外,红外光谱法、色谱-质谱联用技术等也是其质量控制的有效方法。综述黄芪有效成分的药理作用及其质量控制研究进展,明确黄芪有效成分的药理作用并为黄芪各有效成分的质量控制提供参考和依据。     

基于网络药理学探讨黄芪在卒中相关性肌少症中的作用机制

目的 利用网络药理学方法对黄芪进行多成分、多靶点研究,分析其在卒中相关性肌少症中的作用靶点及相关通路。方法 采用TCMSP数据库收集黄芪活性化合物并进行初步筛选;采用Swiss Target Prediction数据库预测活性化合物靶点,通过GeneCards数据库预测卒中相关性肌少症作用靶点,取两者交集获得交互靶点。采用String数据库及Cytoscape软件Network analyzer功能构建共同靶点PPI网络。采用DAVID数据库并结合Cytoscape软件对共同靶点进行GO及KEGG富集分析。结果 收集筛选出黄芪20个活性化合物,616个作用靶点,卒中相关性肌少症136个作用靶点,交集出25个交互靶点,其中AKT1、IL-6、TNF、IGF1R、ESR1等蛋白相互作用最明显,主要在细胞基质中影响类固醇结合、锌离子结合、蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶活性、雌激素受体活性、胰岛素及能量代谢等生物过程,通过胰岛素抵抗、HIF-1信号通路、TNF信号通路等在卒中相关性肌少症中发挥作用,AKT1、PI3CG、mTOR、IL-6、TNF等交互靶点在各通路中参与次数较多。结论 黄芪在卒中相关性肌少症中体现了多成分、多靶点、多途径的特点,其可能通过调控IRS-1/PI3K/AKT2/mTOR信号通路,靶向调控胰岛素抵抗途径相关能量代谢障碍,进而治疗和预防卒中相关性肌少症。     

基于网络药理学探讨黄芪治疗代谢相关脂肪性肝病作用机制

目的 使用网络药理学方法探讨黄芪治疗代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）的作用机制。方法 根据TCMSP数据库、GeneCards数据库和比较毒物基因组学数据库数据库,预测和筛选黄芪的活性成分和MAFLD的相关基因,得到黄芪治疗MAFLD的潜在靶点,使用Cytoscape 3.8.0软件和STRING数据库,构建黄芪活性成分与MAFLD相关靶点的成分-靶点网络,分析网络获得重要靶点,并利用Metascape数据库对其进行GO和KEGG通路富集分析。结果 从黄芪中筛选得到叶酸、槲皮素、山柰酚、异鼠李素等20个活性成分,能够作用于91个MAFLD相关靶点,其中IL4、EGFR、MAPK8、TNF、HIF-1α等27个靶点是重要靶点,可能通过调控糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、白细胞介素-17信号通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化等通路,参与调节MAFLD脂质代谢、氧化应激反应和炎症反应等多种生物过程。结论 黄芪可以通过多靶点、多途径参与MAFLD的治疗。     

基于网络药理学和分子对接技术探讨黄芪干预腹膜纤维化的机制

目的 运用网络药理学方法及分子对接技术探讨黄芪干预腹膜纤维化的可能机制。方法 利用中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)检索黄芪的主要化学成分及靶点,并补充文献报道相关药理作用的成分作为潜在活性成分。以"peritoneal fibrosis"为关键词分别在OMIM、Genecards获取目前已知的与腹膜纤维化相关的疾病靶点,后取两者的交集靶点;对交集基因通过STRING数据库与Cytoscape 3.7.2软件构建"药物-成分-靶点-疾病"网络及蛋白互作(PPI)网络并筛选核心网络。基于R软件使用Bioconductor生物信息软件对核心靶点进行GO及KEGG富集分析,最终采用AutoDock软件将主要有效成分与核心靶点进行分子对接,得出其结合能力。结果 筛选出20个黄芪活性成分及文献报道有相关药理作用4个, 457药物作用靶点,与674个腹膜纤维化病靶点取交集,得到86个共同靶点。GO功能富集分析提示黄芪拮抗腹膜纤维化主要参与了蛋白激酶B信号转导的调节、细胞对化学的应激反应、炎症反应的调节等通路; KEGG通路富集分析主要涉及调控肿瘤、磷脂酰肌醇-3-羟激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、晚期糖基化终末产物/晚期糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)、人类巨细胞病毒感染、HIF-1信号通路等;分子对接结果显示关键靶点与活性成分具有较好的结合能力。结论 黄芪治疗腹膜纤维化的分子机制,可能与抑制炎症及氧化应激反应、调节多种信号通路等相关。     

黄芪的质量评价研究概述及质量标志物研究策略初探

黄芪是常用的补气类中药,是典型的多效中药。临床上以黄芪为君药的复方不胜枚举,功效十分广泛,仅目前《中国药典》中收载的含黄芪的复方就有200多种。然而,现行的质量评价方法难以准确判断黄芪药材的优劣,更无法有效关联黄芪在不同复方配伍环境中的定向功效。鉴于黄芪药材的多效性,急需新的技术与思路,构建符合中医药辩证论治观的质量评价体系。综述目前黄芪药材质量评价的研究进展,并从质量标志物的寻找策略出发提出关于黄芪质量评价的新的见解和策略。     

基于网络药理学探究黄芪辅助治疗肺结核的作用机制

目的 通过网络药理学方法探究黄芪治疗肺结核的作用机制.方法 运用TCMSP数据库筛选黄芪的活性成分及其作用靶点;借助GeneCard数据库筛选肺结核疾病靶点,并获得交集靶点;利用STRING数据库构建靶点蛋白相互作用网络;将交集靶点进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(kyoto ...     

基于大鼠体内多成分代谢的黄芪质控成分遴选

目的 基于中药多成分作用特点,探讨黄芪多成分在体内的代谢情况,遴选黄芪质控成分。方法 制备黄芪水提物,ig给予大鼠（生药20 g/kg）,每天3次,连续给药3 d,腹主动脉采血、代谢笼收集尿液,结合超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）技术对黄芪水提物主要成分、入血成分和尿液排泄成分进行鉴别,并分析主要的代谢途径,遴选黄芪质控成分。结果 黄芪水提物主成分共鉴别出包括毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、calycosin-7-O-glc-6"-O-malonate、毛蕊异黄酮、芒柄花素等在内的15个化合物;血浆样品中指认出11个成分,包括7个代谢成分和4个原型成分;尿液样品中指认出14个成分,9个代谢成分及5个原型成分。结论 根据质谱数据分析结果,遴选出黄芪中以原型入血的成分和参与体内代谢的成分,包括毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、大豆苷元、3-hydro-9,10-diMP、isomer of 3-hydro-9,10-diMP、calycosin-7-O-glc-6"-O-acetate和formononetin-7-O-glc-6"-O-acetate,作为黄芪的质控成分。     

生川乌配伍白蔹、白及反药组合在大鼠血中移行成分的研究

目的鉴定生川乌配伍白蔹、白及的入血成分,比较配伍前后血中移行成分的变化特征。方法大鼠ig给予生川乌配伍白蔹、白及提取物,收集血浆样品并采用UPLC-QTOF/MS法鉴定入血成分,由半定量分析比较配伍前后血中移行成分的变化。结果检测配伍组20个成分,均为来自于生川乌的原形成分,配伍组中双酯型生物碱的相对质量分数均显著降低,单酯型生物碱中苯甲酰乌头原碱的相对质量分数显著降低,醇胺型生物碱中宋果灵的相对质量分数显著降低,其他没有显著性变化。结论生川乌配伍白蔹、白及能够改变其血中移行成分的体内过程。     

基于HPLC-MS/MS法的脑灵素制剂中人参掺伪检查研究

目的 建立脑灵素制剂中人参掺伪检测方法。方法 高效液相色谱法-串联电喷雾三重四级杆质谱法（HPLC-MS/MS）,采用Aglient ZORBAX EclipsePlus C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 µm）,以乙腈-水为流动相,流速为0.35 mL·min^-1;柱温为40 ℃,进样量为5 µL,多反应监测（MRM）模式。结果 66批脑灵素制剂样品中,有36批样品检出拟人参皂苷F11成分,检出率为54.5%。结论 脑灵素制剂中存在人参掺伪使用的现象,本方法准确可靠,可为脑灵素制剂中人参质量控制提供参考。