流式细胞仪对系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞亚群及NK细？…

研究系统性红斑狼疮患者的细胞免疫功能。方法用流式细胞仪检测了３０例ＳＬＥ患者外周血Ｔ细胞亚群及ＮＫ细胞百分数，结果ＳＬＥ活动组病人，ＣＤ４＾＋细胞百分率显著降低，ＣＤ８＋细胞百分率增高，ＮＫ细胞数降低，与对照组相比具有非常显著差异。     

慢性丙型肝炎患者外周血T细胞亚型及NK活性的研究

目的：检测慢性丙型肝炎患者外周血Ｔ细胞亚型和ＮＫ活性，并与正常人比较，以观察ＨＣＶ感染对患者细胞免疫功能的影响。方法：采用间接免疫荧光－流式细胞分析法检测外周血Ｔ细胞ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８表达，采用ＬＤＨ释放法测定ＮＫ活性。结果：慢性丙型肝炎患者外周血ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值、ＮＫ活性明显降低，与正常人比较差异有显著性（Ｐ值分别＜０．０１，＜０．０１和＜０．０５），而ＣＤ８升高（Ｐ值＜０．０５）；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性组与ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性组比较，ＣＤ４／ＣＤ８比值、ＮＫ活性进一步下降，差异有显著性（Ｐ值分别＜０．０５）。结论：慢性丙型肝炎患者存在细胞免疫功能紊乱，提高其细胞免疫功能可能有利于患者的愈后。     

胎盘免疫调节因子对鼻咽癌放疗病人免疫功能的影响

观察了胎盘免疫调节因子（ＰＦ）对鼻咽癌病人Ｔ细胞亚群和ＮＫ细胞活性的影响。结果显示鼻咽癌病人细胞免疫功能均较正常人低。放疗病人辅以ＰＦ治疗后外周血ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８及ＮＫ细胞活性明显升高。对照组病人经放疗后ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８及ＮＫ细胞活性均明显降低。提示ＰＦ能提高放疗中鼻咽癌患者的细胞免疫功能。     

慢性丙型肝炎患者外周血T细胞亚型及NK活性的研究

目的：检测慢性丙型肝炎患者外周血Ｔ细胞亚型和ＮＫ活性，并与正常人比较，以观察ＨＣＶ感染对患者细胞免疫功能的影响。方法 采用间接免疫荧光－流式细胞分析法检测外周血Ｔ细胞ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８表达，采用ＬＤＨ释放法测定ＮＫ活性。结果 慢性丙型肝炎患者外周血ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值ＮＫ活性明显降低，与正常人碾 显著性，而ＣＤ８升高；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性组一ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性组比较，ＣＤ４／ＣＤ８比值、Ｎ     

肝癌患者外周血NK和LAK活性及T细胞亚群的变化

采用３ＨＴｄＲ释放法测定了２０例肝癌患者的外周血自然杀伤细胞（ＮＫ）活性及淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）活性，同时用ＡＢＣ法检测其外周血Ｔ细胞亚群变化。结果显示，肝癌患者的外周血ＮＫ和ＬＡＫ活性显著低于正常人（Ｐ＜０．０１），Ｔ细胞亚群ＣＤ３及ＣＤ４细胞减少（Ｐ＜０．０１），ＣＤ８细胞增多（Ｐ＜０．０１），ＣＤ４／ＣＤ８比值显著降低（Ｐ＜０．０１）且出现倒置。上述结果提示肝癌患者细胞免疫功能出现紊乱及免疫活性细胞功能有缺陷。     

膀胱癌患者外周血TcR－γ／δ细胞及其他细胞表型分析

１０例膀胱癌患者外周血ＴｃＲ－γ／δ细胞、ＮＫ细胞百分率、ＩＬ－２受体表达均显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；浅表型膀胱癌与浸润性膀胱癌比较无差异．患者ＣＤ、ＣＤ、ＣＤ细胞百分率减少，ＣＤ／ＣＤ细胞比例下降，术后ＣＤ、ＣＤ、ＣＤ细胞百分率显著高于术前（Ｐ＜０．０１）．４例浅表型膀胱癌患者术后ＣＤ／ＣＤ细胞比例技术前升高，初步探讨ＴｃＲ－γ／δ细胞在膀胱肿瘤过继免疫治疗中应用的可能性。     

柯萨奇B组病毒性心肌炎的自然杀伤细胞活性及T细胞亚群的测定

目的 了解细胞免疫功能低下或失调对病毒性心肌炎发病、预后的影响。方法 检测柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）性心肌炎７０例,正常人（ＮＣ）４０例外周血的自然杀伤细胞９ＮＫＣ）活性和Ｔ细胞亚群。结果 病毒性心肌炎（ＶＭＣ）组ＮＫＣ活性高于ＮＣ组。Ｔ细胞亚群与ＮＣ组比较,急性ＶＭＣ患者总Ｔ细胞（ＣＤ３）,辅助性Ｔ细胞（ＣＤ４）,和抑制性Ｔ细胞（ＣＤ８）,及ＣＤ４／ＣＤ８比值均减少,Ｐ〈０．０５￣０．０１。慢性Ｖ     

小儿癫痫NK细胞和白细胞介素－2分泌细胞的观察

本文用酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）测定４４例小儿癫痫（ＥＰ）患者外周血白细胞介素－２（ＩＬ－２）分泌细胞及ＣＤ（ＮＫ细胞）的百分率，发现单纯ＥＰ组，ＩＬ－２分泌细胞及ＮＫ细胞均较正常对照组高，差异高度显著（Ｐ＜０．００１），ＥＰ伴病毒感染组ＩＬ－２及ＮＫ细胞下降与单纯ＥＰ组比较，差异高度显著（ＮＫＰ＜０．００１）（ＩＬ－２０．０１＞Ｐ＞０．００５）。ＥＰ伴病毒感染组与正常对照组之间ＮＫ细胞及ＩＬ－２分泌细胞差异无统计学意义。这种改变可能为多种原因导致的脑细胞群异常放电引起的脑功能紊乱，通过神经－内分泌－免疫网络系统由内啡肽等递质的作用影响了细胞免疫的结果。     

结核病患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的检测分析

应用ＣＤ单克隆抗体对４０例结核病患者和３０例健康对照组的外周血Ｔ淋巴细胞亚群和自然杀伤（ＮＫ）细胞进行检测，结果发现结核病患者ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８明显减少，与正常对照组比较，差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１），表明结核病患者细胞免疫功能普遍低下。而不同年龄、性别的患者相互比较各比值差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。并讨论了结核病Ｔ细胞亚群和ＮＫ细胞变化的临床意义     

五类肿瘤患者细胞免疫功能调查

检测了鼻咽癌等五类肿瘤患者初诊时Ｔ细胞（ＣＤ）及其亚群（ＣＤ，ＣＤ），自然杀伤细胞（ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌ，ＮＫ）和白细胞介素２（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ，ＩＬ－２）。发现在类肿瘤患者的Ｔ细胞及亚群（ＣＤ，ＣＤ），ＮＫ细胞活性和ＩＬ－２活性水平均低于正常人群（Ｐ＜０．０１）。各类肿瘤患者ＣＤ相对升高。提示肿瘤患者治疗前均有不同程度的细胞免疫功能低下；处于不同期和不同类的肿瘤患者其细胞免疫功能有差别，与病理学分型无关。     

流式细胞仪对系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞亚群及NK细胞的检测

目的 研究系统性红斑狼疮（SLE）患者的细胞免疫功能。方法 用流式细胞仪检测了30例SLE患者外周血T细胞亚群及NK细胞百分数。结果 SLE活动组病人,CD4+细胞百分率显著降低（P<0.01）,CD8+细胞百分率增高（P<0.01）,NK细胞数降低,与对照组相比具有非常显著差异（P<0.01）。稳定期病人CD4+细胞百分率正常,CD8+细胞百分率稍高于对照组 (P>0.05),NK细胞百分率高于活动组病人组仍低于正常对照组。结论 SLE病人细胞免疫功能是异常的,T细胞亚群和NK细胞的测定可作为诊断活动期与非活动期SLE病人的一项有价值的参考指标。     

外生殖器尖锐湿疣患者NK细胞的研究

目的检测外生殖器尖锐湿疣患者外周血NK细胞（CD56＋）及活化NK细胞（CD56^＋CD69^＋）的变化。方法采用免疫荧光三标记流式细胞术检测36例检测外生殖器尖锐湿疣患者外周血CD56＋和CD56^＋CD69^＋细胞,同时以29例正常人作为对照。结果外生殖器尖锐湿疣患者外周血CD56^＋CD69^＋细胞百分率均显著高于正常对照组（均为P〈0.01）,长病程组和短病程组无明显著性。结论外生殖器尖锐湿疣患者外周血CD56^＋CD69^＋细胞百分率增高,说明NK细胞在外生殖器尖锐湿疣发病中起着非特异性抗病毒免疫的重要作用。     

肝硬化、慢性乙型肝炎患者外周血自然杀伤细胞亚群的研究

用荧光激活细胞分类计数器检测了肝硬化和慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者外周血中自然杀伤细胞(NK)的亚群状况。结果发现,肝硬化组的总 NK 百分比显著高于对照组和慢乙肝组(P<0. 04和 P<0. 005) ;慢乙肝组的 CD16~+CD57~-亚群百分比与细胞绝对数均明显低于对照组(P<0. 005) ;而肝硬化组的 CD16~+CD57~+亚群百分比则明显地高于慢乙肝组(P<0. 02) 。这些结果表明,慢乙肝患者体内的 NK 反应性低下,而肝硬化患者的 NK 反应性偏强。     

重型再生障碍性贫血患者外周血自然杀伤细胞亚群百分比及功能变化

目的 分析重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)前、后外周血自然杀伤(NK)细胞亚群占淋巴细胞百分比、功能变化及其与造血功能相关性,探讨NK细胞在SAA发病机制中的作用.方法 用流式细胞术检测2010年4月至2010年12月天津医科大学总医院收治的12例初治(初治组)、30例IST后恢复(恢复组)的SAA患者的外周血NK细胞(CD3-CD56+/CD16+)及其亚群[CD3-CD56brightCD16-(CD56bright)、CD3-CD56dimCD16+(CD56dim)、CD3-CD56-CD16+]占淋巴细胞百分比、活化性受体(NKG2D和NKp46)、穿孔素、颗粒酶β表达,并与13名健康对照(对照组)比较;分析上述变化与外周血中性粒细胞比例(ANC%)、淋巴细胞比例、网织红细胞计数及骨髓造血功能(增生程度、粒系百分比、红系百分比、巨核细胞数量、淋系百分比)的相关性.结果 (1)初治组NK细胞、CD56bright细胞百分比(10.30%±6.08%、0.11%)均显著低于恢复组(16.47%±8.29%、0.68%,P＜0.05)和对照组(19.45%±6.88%、0.53%,均P＜0.05);初治组CD56dim细胞百分比(9.62%±6.04%)明显低于对照组(18.21%±7.16%,P＜0.05);恢复组CD3-CD56-CD16+细胞百分比(0.79%)显著高于初治组及对照组(0.37%、0.41%,均P＜0.05).(2)初治组与恢复组NK细胞NKp46、穿孔素表达[初治组(88.23%、64.97%±21.61%),恢复组(82.97%、66.14%±20.73%)]显著高于对照组(40.99%、42.11%±27.25%,均P＜0.05).(3)NK、CD56bright及CD3-CD56-CD16+细胞的百分比与SAA患者ANC%呈正相关(r分别为0.423、0.609、0.468,均P＜0.05),与骨髓粒系百分比呈正相关(r分别为0.357、0.517、0.434,均P＜0.05);NK、CD56bright、CD56dim和CD3-CD56-CD16+细胞的百分比与SAA患者骨髓增生程度呈正相关(r分别为0.455、0.412、0.404、0.451,均P＜0.05),与骨髓淋系百分比呈负相关(r分别为-0.522、-0.435、-0.411、-0.547,均P＜0.05);NK细胞NKG2D、NKp46、穿孔素、颗粒酶β表达与各造血指标无相关性(均P＞0.05).结论 SAA患者外周血NK细胞、CD56bright、CD56dim亚群占淋巴细胞百分比降低及穿孔素途径增强可能引起免疫耐受被破坏、T细胞功能亢进而导致造血功能衰竭.

Abstract：

Objective To analyze the percentage and functional changes of natural killer(NK)cell subsets in peripheral blood of severe aplastic anemia(SAA)patients before and after immunosuppressive therapy(IST)so as to evaluate the relationships between these changes and hematopoietic functions and explore the role of NK cells in the pathogenesis of SAA.Methods By flow cytometry,the percentages of NK cells(CD3-CD56+/CD16+)and its subsets[CD3-CD56brightCD16-(CD56bright),CD3-CD56dimCD16+(CD56dim),CD3-CD56-CD16+]in peripheral blood lymphocytes were detected in 12 untreated patients,30 recovered patients and 13 normal controls respectively from April 2010 to December 2010 in our hospital.NK cells activating receptors(NKG2D and NKp46),pofforin and granzyme-β of patients and normal controls were also detected.The correlation between these changes and hematopoietic functions,including the percentages of neutrophil granulocyte(ANC%),lymphocyte and reticulocyte absolute value in peripheral blood,and hyperplasia degree,percentage of granulocytes,erythrocytes,lymphocytes and megakaryocytes absolute value in bone marrow were evaluated.Results (1)The percentages of NK cells (10.30% ± 6.08%)and CD56 bright cells(0.11%)in untreated patients were significantly lower than those of recovered patients(16.47% ± 8.29%,0.68%,both P ＜0.05)or normal controls(19.45% ±6.88%,0.53%,both P ＜0.05).The percentage of CD56dim cells in untreated patients was significantly lower than that of normal controls(9.62% ±6.04% vs 18.21% ±7.16%,P ＜0.05).The percentage of CD3 CD56 CD16 + cells was significantly higher in recovered patients than that of untreated patients or normal controls(0.79% vs 0.37%,0.41%,both P＜0.05).(2)The expression of NKp46 and pefforin of NK cells in untreated(88.23%,64.97% ± 21.61%)and recovered patients(82.97%,66.14% ±20.73%)were significantly higher than those of healthy controls(40.99%,42.11% ±27.25%,all P ＜0.05).(3)The percentage of NK CD56bright and CD3-CD56-CD16+ cells of patients was positively correlated with ANC%(r=0.423,0.609,0.468 respectively,all P＜0.05)and the percentage of granulocytes in bone marrow(r=0.357,0.517,0.434 respectively,all P＜0.05).The percentages of NK,CD56bight,CD56dim and CD3-CD56-CD16+ cells were positively correlated with the hyperplasic degree of bone marrow(r=0.455,0.412,0.404,0.451 respectively,all P＜0.05),but they were negatively correlated with the percentage of lymphocytes in bone marrow(r =-0.522,-0.435,-0.411,-0.547 respectively,all P ＜0.05).The expression of NKG2D,NKp46,pefforin and granzyme-β of NK cells had no correlation with hematopoiesis(all P＞0.05).Conclusion The lowered percentage of NK CD56bright,CD56dim cells and a higher expression of pefforin may cause the over-function of T lymphocytes and thus lead to hematopoietic failure in SAA.     

原发性肝癌患者癌组织中IL-18的表达与机体细胞免疫关系研究

目的探讨原发性肝癌（PHC）患者癌组织中白介素-18（IL-18）的表达情况及其与机体NK细胞、CD4^＋和CD8^＋T细胞的关系。方法取PHC患者癌组织,免疫组化检测癌组织中IL-18的表达情况,同时流式细胞术检测患者术前和术后的NK细胞、CD4^＋和CD8^＋T细胞的表达,并探讨它们的相关性。结果 PHC患者癌组织和癌周组织中的IL-18积分值分别为（2.16±1.84）分和（2.89±3.11）分;术前术后外周血CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞和NK细胞表达频数分别为（35.9±7.2）%、（32.3±10.7）%、（12.1±5.8）%和（39.9±11.2）%、（20.6±7.5）%、（16.3±11.0）%。讨论PHC患者术后NK细胞、CD4^＋T细胞表达升高,CD8^＋T细胞表达降低,癌组织中IL-18含量与NK细胞、CD4^＋、CD8^＋T细胞的表达具有相关性。     

5-氟尿嘧啶缓释剂瘤内植入对胰腺癌患者肿瘤标记物和细胞免疫的影响

目的　观察 5 氟尿嘧啶 (5 FU)缓释剂瘤内植入对胰腺癌患者血清肿瘤标记物和细胞免疫的影响 ,评估其临床疗效。方法　 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 3年 2月经手术探查不能切除之胰腺癌 6 9例随机分成 3组。 5 FU缓释剂瘤内植入治疗组 :手术中在胰腺肿瘤实体内注入 5 FU缓释剂 2 0 0mg ;术后行 5 FU静脉化疗组 :5 FU静脉滴注 5 0 0mg/d ,共 5d ;对照组 :术后 2周内未予化疗。所有病人分别于术前 1天和术后第 14天采血 ,测定血清中NK细胞、T细胞亚群和CEA、CA5 0、CA19- 9、CA12 5、CA2 4 2等 5种血清肿瘤标记物水平。结果　 (1)治疗前各组在CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD4 + /CD8+ 和NK细胞等各项细胞免疫指标水平和血清肿瘤标记物CEA、CA5 0、CA19- 9、CA12 5和CA2 4 2水平无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;(2 )术后 5 FU缓释剂瘤内植入治疗组和对照组的上述各项细胞免疫指标无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,而CD4 + /CD8+ 和NK细胞水平两组均高于静脉 5 FU化疗组(P <0 .0 5 ) ;(3)术后 5 FU缓释剂瘤内植入治疗组上述血清肿瘤标记物水平明显低于对照组和静脉 5 FU化疗组 (P <0 .0 5 )。结论　 5 FU缓释剂植入胰腺癌实体内 ,能明显降低CEA、CA5 0、CA19- 9、CA12 5、CA2 4 2等血清肿瘤标记物水平 ,同时对患者的细胞     

尖锐湿疣患者皮损及外周血CD4+和CD8+细胞免疫功能的检测

目的通过对尖锐湿疣(CA)患者皮损及外周血CD4+和CD8+细胞免疫功能检测的分析,探讨尖锐湿疣患者细胞免疫功能的变化及其对CA的影响。方法通过流式细胞仪(FCM)对40例CA患者及20名正常人外周血进行反映细胞免疫功能的T淋巴细胞亚群的检测,实验采用免疫组化的方法对40例CA皮损样本中CD4+和CD8+细胞的数目进行检测。结果CA患者外周血及皮损较正常对照组中的CD8+细胞百分率增加,CD4+细胞百分率及CD4+/CD8+比值降低。结论CA患者存在全身和局部的细胞免疫功能低下,而且局部皮损细胞免疫功能低下可能在CA的发病中具有重要作用。     

焦虑和抑郁情绪对妇科肿瘤患者细胞免疫功能的影响

目的探讨焦虑、抑郁对妇科肿瘤患者细胞免疫的影响。方法采用Zung抑郁自评量表和焦虑自评量袁测定67例妇科肿瘤患者的焦虑反应、抑郁反应,并测定其CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋比值、NK细胞、TNF、1L-2、IL-6。结果焦虑、抑郁在妇科肿瘤患者中的发生率较高。单纯焦虑障碍、单纯抑郁障碍和焦虑合并抑郁障碍的患者CD3＋、CD8＋、NK细胞、IL-2显著低于无抑郁焦虑障碍的患者,而CD4＋／CD8＋、IL-6显著高于无抑郁焦虑障碍的患者（P〈0．05）。焦虑合并抑郁的患者CD3＋、CD8＋、NK细胞、IL一2、TNF显著低于单纯焦虑和单纯抑郁障碍的患者,而CD4＋／CD8＋、IL-6显著高于单纯焦虑和单纯抑郁障碍的患者（P〈0．05）。单纯焦虑的患者CD8＋、NK细胞显著低于单纯抑郁障碍的患者,而TNF却显著高于单纯抑郁障碍的患者（P〈0．05）。结论焦虑、抑郁反应可导致妇科肿瘤患者细胞免疫功能损害。焦虑合并抑郁反应对妇科肿瘤患者的细胞免疫功能的损害较单纯焦虑和单纯抑郁反应更加严重。     

含色氨酸的肠外营养对急性白血病患者免疫功能的影响

目的观察含色氨酸的肠外营养对急性白血病患者免疫功能的影响。方法利用流式细胞术检测急性白血病患者外周血淋巴细胞亚群(CD3 、CD4 、CD8 、自然杀伤(NK)细胞及CD4 /CD8 )水平。结果急性白血病患者治疗前与健康对照相比较,CD3 T淋巴细胞、CD4 T淋巴细胞、NK细胞百分率以及CD4 /CD8 值均降低,差异有显著性(P<0.05);化疗后CD3 T淋巴细胞百分率较化疗前升高,但统计差异无显著性(P>0.05);CD4 T淋巴细胞、NK细胞百分率以及CD4 /CD8 比例也升高,与化疗前相比较,差异有显著性(P<0.05);在化疗的同时予以含色氨酸的肠外营养治疗后,CD3 T淋巴细胞、CD4 T淋巴细胞、NK细胞百分率以及CD4 /CD8 比例与联合治疗前相比较均升高,差异有显著性(P<0.05);单纯化疗组和联合治疗组比较,CD3 、CD8 T淋巴细胞以及NK细胞百分率两组之间无显著性差异(P>0.05),CD4 T淋巴细胞百分率和CD4 /CD8 比例联合治疗组高于单纯化疗组,差异有显著性(P<0.05)。结论急性白血病患者外周血淋巴细胞亚群水平存在异常,通过化疗可以得到改善。在化疗的同时予以含色氨酸的肠外营养可以更进一步改善患者的免疫功能。     

梅毒血浆反应素快速试验持续阳性患者外周血淋巴细胞亚群的检测及其临床意义

OBJECTIVE: To observe the changes in peripheral blood lymphocyte subsets in patients with latent syphilis after treatment, who had persistent positive results of test for rapid plasma reagin (RPR) and remained infectious. METHODS: T-lymphocyte subsets and natural killer (NK) cells in peripheral blood were measured with flow cytometry (FCM) in these 43 patients and 30 normal subjects served as controls. RESULTS: Peripheral blood CD3, CD4 and NK cells exhibited no significant difference between the latent patients and the controls (P>0.05), but CD8 cells were higher in these patients (P<0.05). The treated patients with persistent positive RPR within two years had elevated levels of CD3, CD4 and CD8 lymphocytes (P<0.05), but NK cells appeared to be lowered (P<0.05); in patients with positive RPR for over two years, CD3, CD4 and NK cells were comparable with those in the controls (P>0.05), but CD8 cells was elevated (P<0.05). Patients with RPR positivity within two years had higher CD3 and CD4 lymphocytes, but lower NK cells in comparison with the patients with more than two years' of positivity (P<0.05); CD8 cells were comparable between the two groups (P>0.05). CONCLUSIONS: Cellular immunity imbalance and immune suppression can be present in treated syphilis patients with persistent positive RPR and the risk to transmission, which may lower the host ability to resist and clear Treponema pallidum and is associated with the difficulty in treating syphilis patients and the persistence of positive RPR even after treatment.