葡萄糖氧化酶产生菌的分离及固体发酵条件优化

采用Fiedure.K.J显色法,从土壤中分离得到1株命名为LJ-1的葡萄糖氧化酶产生菌。经过形态学观察并基于ITS-rDNA序列分析构建系统发育树对菌株LJ-1进行鉴定。采用固体发酵法和单因素试验法研究培养基组成和发酵条件对菌株LJ-1产葡萄糖氧化酶活力的影响,在单因素试验结果的基础上,采用响应面法对影响葡萄糖氧化酶活力较大的因素进行优化。结果表明：菌株LJ-1被鉴定为褐红篮状菌LJ-1(Talaromyces pinophilus LJ-1)。适宜的发酵培养基组成为：葡萄糖14%,硝酸钠0.64%,KH₂PO₄0.2%,MgSO₄·7H₂O 0.25%,CaCl₂0.2%,Zn SO₄0.25%,吐温801%;优化后的发酵条件为：固水比1:0.85,发酵温度33℃,发酵时间8 d,装量17.5 g/250 mL三角瓶,初始p H 6.5,接种量6%。在此条件下,葡萄糖氧化酶活力达到46.30 U/g干基。试验结果为葡萄糖氧化酶的生产提供了新的途径。     

几株高产蛋白酶菌株的分离鉴定及初步研究

从采集的245份海洋生物及环境样本中筛选高产蛋白酶菌株,进行形态学和分子生物学鉴定,并对其生物学特性和菌株间的配伍效果进行研究。结果显示,所分离的菌株中Pe、Pc为枯草芽孢杆菌,Ps为地衣芽孢杆菌。培养16 h后进入生长平台期,Pc和Ps菌株生长的最适pH均为7.0,最适生长温度均为35℃;菌株Pe的最适pH为6.5,最适生长温度是30℃。菌株Pe与Ps 1:1配伍后产酶效果最好。     

天然发酵青贮饲料中优势菌株的分离与鉴定

本试验从河北省5个不同地区共采集天然发酵青贮饲料5份,从中分离并鉴定优势发酵菌种4类,共141株,分别为乳酸菌50株(链球菌属8株,乳杆菌属17株,丹毒丝菌属25株),枯草芽孢杆菌15株;酵母菌40株(酒香酵母菌属10株,酵母菌30株);霉菌35株(毛霉菌3株,链霉菌32株)。     

1株产蛋白酶菌株的分离鉴定及其产酶条件的优化

为得到具有实际应用价值的高效产蛋白酶菌株,以甘肃省夏河地区深度20～30 m处的土样为基质,以菌株生长出的透明水解圈直径大小与菌落大小之比为基础,进行菌株产蛋白酶的活力测定,从而筛选得到优良菌株.结果表明,自甘肃夏河土壤中分离得到的编号为NWMCC0320的菌株产酶活力最高,为114.21U/mL;经多种有效的菌株鉴定...     

1株产β-葡萄糖苷酶菌株的分离、鉴定与发酵条件初步优化

试验旨在从自然界中筛选β-葡萄糖苷酶高产菌株,对其进行鉴定和产酶条件优化。采用七叶苷显色技术分离和筛选β-葡萄糖苷酶菌株,采用固体发酵技术对其产酶条件进行优化,通过形态学特征及系统发育分析对其进行鉴定。结果表明,在广西河池喀斯特地貌自然植被区筛选出1株产β-葡萄糖苷酶的菌株,将其鉴定为棘孢曲霉（Aspergillus aculeatus）,得到最佳产酶条件为pH值7.0、温度28℃、装液量40 mL/250 mL,经过优化后该棘孢曲霉菌株的产酶能力达到了42.75 U/mL,相较于出发条件提高了10.9倍。研究表明,研究筛选得到的棘孢曲霉能够稳定产生β-葡萄糖苷酶,经固体发酵技术优化后产酶能力得到了较大提高,且在中性条件下产酶量最高,在饲料生产中具有应用价值。     

白僵菌菌株的分离鉴定及生物学特性研究

以9株白僵菌菌株为材料,对其进行鉴定并探讨了菌株的生物学特性。结果表明,有2株为卵孢白僵菌,7株为球孢白僵菌;以营养生长量、产孢量、抗紫外线能力和致病力等生物学指标进行综合比较筛选,球孢白僵菌B1为生产白僵蚕的最佳接种菌株。     

诱变选育木聚糖酶高产菌株及其发酵条件的研究

以黑曲霉(Aspergillus niger)XE6为出发菌株,经微波(MW)和硫酸二乙酯(DES)诱变处理,选育出一株遗传性状稳定的高产木聚糖酶菌株mAn1。利用单因素轮换法和正交试验法对菌株mAn1固态发酵产酶工艺进行了研究。结果表明:最适产酶条件为麸皮与玉米芯的添加比例6:4,硝酸铵2g,培养基起始pH值为4.5,固液比为1:1.8,500ml三角瓶中装培养基50g,30℃培养72h,在此条件下所产木聚糖酶的酶活为81151U/g,比出发菌株的酶活提高了34.88%。     

高产脂肪酶菌株的分离鉴定及其酶学性质研究

本研究旨在筛选出一株高产脂肪酶的菌株并进行鉴定,同时评定所产脂肪酶的酶学性质,为饲用脂肪酶的开发提供理论依据和实用参考。通过平板法筛选产酶菌株,根据菌株形态、培养特征、生理生化试验和ITS-r DNA序列分析确定其属种,并对产酶菌株进行初步的酶学性质研究。从富含油污的土壤中筛选出一株高产脂肪酶菌株FZ-4,并鉴定为白地霉(Galactomyces geotrichum),其初步酶学性质研究表明,该菌株所产脂肪酶为胞外酶,在28℃、250 r/min条件下培养96 h所产脂肪酶活力达16.7 U/m L,该酶最适反应p H为7.5,最适反应温度为40℃,在p H为7.0~9.0和20~45℃具有较好的稳定性,且该酶对C16脂肪酸有较强的底物专一性。分离获得的Galactomyces geotrichum FZ-4是一株高效的产脂肪酶菌株,具有潜在的研究和开发价值。     

牛瘤胃产蛋氨酸热带假丝酵母菌的分离鉴定及发酵条件优化

试验旨在从牛瘤胃微生物中筛选出能够合成并分泌蛋氨酸的菌株.试验以草原红牛瘤胃液为样品,使用蛋氨酸缺陷培养基分离纯化,通过革兰氏染色、游离蛋氨酸含量测定、16S rDNA测序等鉴定菌株.采用单因素设计和正交试验对培养基和发酵条件进行优化,通过体外模拟瘤胃发酵试验测试菌株.结果 显示,分离的菌株为热带假丝酵母菌(Candi...     

一株高产酸乳酸菌的分离、鉴定及高密度发酵研究

为获取产酸能力强、发酵性能好、具有强抑菌能力的乳酸菌,本试验以35日龄断奶健康仔猪粪便为菌源,对其乳酸菌进行筛选、分离、鉴定,并对分离菌株进行发酵性能研究。从35日龄断奶健康仔猪粪便中分离得到6株目标菌株,经产酸测试及抑菌试验后,得到一株产酸能力强、抑菌效果良好的筛选菌株,命名为RSJ-5。通过对RSJ-5菌株的菌落与菌体形态观察、生理生化鉴定试验、糖醇发酵试验,确定其为嗜酸乳杆菌。利用50 L发酵罐接种RSJ-5菌株厌氧发酵36 h,发酵液活菌数达158 CFU/mL,乳酸钙含量为85 mg/mL,pH4.2,发酵液对大肠杆菌、沙门氏菌有较强抑菌作用。结果表明RSJ-5嗜酸乳杆菌具备优良乳酸菌发酵剂的性能,探索了发酵工艺的可行性,为液体饲料(乳酸菌发酵液)大规模发酵生产提供参考。     

天然产牛黄菌株的分离、鉴定

牛黄(Calculus bovis)系脊椎动物哺乳纲偶蹄目牛科动物的胆囊、胆管或胆管中的结石,是多种中成药的材料,是一种珍贵的药材。但是,由于天然牛黄货源奇缺,价格昂贵,为此,在国内有很多人采用人工合成牛黄来代替天然牛黄。由于天然牛黄中含有多种微     

猪链球菌的分离鉴定及16S rDNA序列分析

为明确导致新疆某猪场猪急性死亡的病原菌,试验对采集的猪病变淋巴结、肺脏进行病原菌分离培养、形态观察、16S rDNA测定、生化鉴定、药敏试验以及PCR血清型鉴定.将该分离株与国内外13株分离株构建系统进化树进行比对分析.结果 显示:分离菌株镜捡观察为革兰氏阳性长链状球菌,具有β溶血性,可发酵大多数糖类,符合猪链球菌的生...     

牛源性蛋氨酸生产菌的分离筛选及发酵条件优化

为了从奶牛瘤胃中筛选出高产蛋氨酸微生物,无菌采集10份成年奶牛瘤胃内容物样本,经分离筛选得到18株菌株,将这些菌株进行分离纯化培养,并利用HPLC法检测各菌株发酵液中蛋氨酸的含量,最终筛选出1株蛋氨酸含量较高的菌株。经过形态观察和16S rDNA序列分析,该菌株与甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)之间的同源性为100%。利用单因素试验确定了摇瓶发酵的最优条件:葡萄糖15%,硫酸铵3.5%,玉米浆2.5%,磷酸氢二钾1.5%,发酵时间为72 h,装液量为50 mL/500 mL。在最优条件下进行发酵试验,蛋氨酸产量提高到平均2.40 g/L,较发酵优化前产量提高了175.86%。     

牦牛肠道与粪便乳酸菌的分离鉴定及PCR-16SrDNA鉴定

以取自四川省不同地区的牦牛粪便、肠道内空物为材料，用MRS琼脂双层培养基进行厌氧培养，分离到50株乳酸菌，经生化鉴定为嗜热链球菌（2株）、乳酸乳球菌（1株）、保加利亚乳杆菌（5株）、嗜粪乳杆菌（10株）、嗜酸乳杆菌（8株）、乳酸乳杆菌（9株）、肠乳杆菌（10株）、弯曲乳杆菌（5株）。采用乳酸菌16 SrDNA通用引物，对分离的8种菌的16S rDNA-段可变区序列进行扩增，均得到大小约470bp的产物；扩增产物经纯化、测序后与GenBank中标准菌株的核甘酸序列比较，同源性均大于97．5％，同源性分析与生化试验的结果是一致的。证实，牦牛肠道和粪便的乳酸菌较为丰富，且乳杆菌的数量较多，这可能与牦牛复杂的生长环境有关。     

一株产脂肪酶菌株的分离筛选及鉴定

采用梯度稀释涂布法及平板筛选法从松树林下分离到12株产脂肪酶菌株.复筛到一株产脂肪酶性能较好的菌株TS-2,在30℃、180rpm条件下培养48h脂肪酶活为4.8U/mL.综合菌落形态、生长特性镜检形态及5.8S rDNA-ITS区序列系统进化分析证明所分离的菌株TS-2为解脂耶氏酵母酵母(Yarrowia lipol...     

牛链球菌的分离鉴定及生物信息学分析

本研究对某动物医院的一头病牛粪样进行细菌分离鉴定,PCR扩增细菌16S rDNA基因并测序,构建进化树,对该菌进行药敏试验分析及生长曲线的测定。结果显示,该菌在血琼脂、巧克力琼脂、LB琼脂等培养基上均能长出光滑凸起,边缘圆润,大小各异,颜色不同的菌落,而在MRS琼脂、高盐甘露醇琼脂上却不生长;生化鉴定结果显示,乳糖、麦芽糖、甘露醇等均为阴性,葡萄糖、西蒙氏柠檬酸盐、尿素均为阳性,上述结果初步鉴定此菌为牛链球菌;进化树的构建进一步证明了分离菌属于牛链球菌,其与牛链球菌RD09的同源性为99%;药敏试验结果显示,牛链球菌对强力霉素、卡那霉素极敏感,对红霉素高度敏感,对链霉素、新生霉素、复方新诺明、头孢曲松、庆大霉素均敏感,对氯霉素、头孢拉定、阿莫西林均耐药;从牛链球菌生长曲线可看出2~23 h是牛链球菌的高度繁殖期,23~28 h是稳定期,28 h以后开始衰退。本试验结果为进一步研究牛链球菌奠定基础。     

高效降解棉酚菌株的分离、鉴定及发酵条件优化

棉酚是存在于棉籽粕中对动物有害的一种物质,因此若将棉籽粕作为动物饲料蛋白源,其利用率会大幅降低(不足30%)。通过生物降解的方法去除有害物质,成为提高棉籽粕利用率的有效手段。首先研究以醋酸棉酚为唯一碳源,分别从河南省新乡市周边不同的棉田和棉花榨油厂等土壤地取样,初筛48株对棉酚具有降解能力的菌株,通过复筛得到6株降解棉酚能力较强的菌株,然后对其进行菌株形态学观察及18S r DNA分子鉴定,结果发现:6株菌分别是黑曲霉、黄曲霉、产紫青霉、土曲霉、青霉及酿酒酵母;利用间苯三酚法对6株菌的棉酚降解能力进行比较,结果发现土曲霉的降解能力明显优于其他菌株,其纯棉酚降解率达33.6%。最终以土曲霉为发酵菌株,棉粕为发酵底物,进行固态发酵;结果在料水比1.0∶0.6(g/m L),接种量6%,蛋白胨3%,麦芽糖10%,30℃恒温培养72 h的条件下,土曲霉菌株脱毒效率最好可达88.3%。该菌株的获得和鉴定,能为其在饲料工业化生产中的应用奠定基础。     

牧草中异型发酵乳酸菌的分离与鉴定

本试验以禾本科牧草为研究对象,从人工种植的无芒雀麦(Bromus inermis)、披碱草(Elymus dahuri-cus)和野生牧草老芒麦(E.sibiricus)、野生冰草(Agropyroncristatum)、羊草(Leymus chinensis)上共分离得到8株异型发酵乳酸菌(Lactobacillus),依据生理生化试验方法,将8株异型发酵乳酸菌鉴定到种的水平,其中布氏乳杆菌(L.buchneri)4株、短乳杆菌(L.brevis)2株、果糖乳杆菌(L.fructivorans)2株。通过测定8株异型发酵乳酸菌的生长曲线和产酸速率,研究这8株异型发酵乳酸菌的生长特性,最终筛选出生长速度快、产酸性能好、适宜用作青贮饲料添加剂的2株布氏乳杆菌。     

鸡大肠杆菌菌株的分离鉴定与药敏试验

2001年、2002年从济南周边县分离了16株鸡致病性大肠杆菌，对它们进行了生化鉴定和药敏试验，并与标准株O1、O2、O78相对照，发现该地区鸡的大肠杆菌对临床上常用的喹诺酮类药物产生了明显的耐药性，但与两年前有了明显的好转。同时还发现引起该地区鸡发病的大肠杆菌对丁胺卡那霉素、卡那霉素、新霉素等药物最为敏感。