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鲟鱼软骨素提取工艺研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以西伯利亚鲟鱼骨为原料,对比不同提取工艺对鲟鱼软骨素提取效果的影响,优化确定鲟鱼软骨素酶解的最佳工艺条件,并对分离纯化方案进行初步研究。结果表明,碱解与酶相结合的提取路线能使鲟鱼软骨素提取产品有更高的纯度,最佳工艺为原料加入1∶6(m/v)的6%NaOH,40℃水浴条件下碱解7h,用盐酸调至pH7,加入1%胰蛋白酶,在50℃水浴条件下酶解7h,95℃加热5min灭酶,冷却至室温,调pH至中性,加入1∶1.25(v/v)95%乙醇,在4℃沉淀8h,沉淀物用烘箱45℃干燥约2h,得到的鲟鱼软骨素粗产品得率为16.65%,产品中氨基己糖含量为17.35%。 相似文献
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鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌细胞抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
探究鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌细胞的生长抑制能力,并初步确定影响结直肠癌细胞生长的主要原因。选取3株具有代表性的结直肠癌细胞Caco-2、HCT-116、SW480,采用CCK-8法测定细胞生长曲线、硫酸软骨素对癌细胞增殖的抑制能力;以其中一株结直肠癌细胞HCT-116为模型,用流式细胞仪测定其周期和凋亡情况,用细胞核染色法观察处理前后细胞形态,结合caspase-3凋亡酶活力的测定,考察鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌细胞的促凋亡能力,并初步确定作用途径。研究结果表明,鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌细胞Caco-2、HCT-116、SW480的增殖具有一定抑制作用,最高抑制率分别为70.94%、90.00%和75.00%,明显高于阳性对照处理组;处理后,细胞周期G1/G0期比例升高至88.56%,S期比例降低至4.47%,阻滞细胞G1/G0期;同时,使用鲟鱼硫酸软骨素处理细胞后,细胞形态发生变化,出现细胞核固缩以及细胞破碎等现象,细胞主要的凋亡酶活力显著升高,酶活力可达1 645 IU/μg,使细胞发生凋亡,凋亡率可达63.73%。研究结果证明,鲟鱼硫酸软骨素具有促进结直肠癌细胞凋亡、抑制细胞增殖的能力。 相似文献
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超声波辅助法提取硫酸软骨素的工艺研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以猪喉管为原料提取硫酸软骨素,使用超声波辅助手段进行碱处理,浸出液再用木瓜蛋白酶进一步去除蛋白质。结果表明:最佳工艺条件为超声波处理时间139min、超声功率491W、木瓜蛋白酶酶解pH6.8、酶加入量1.3:1000(mg/mL)、酶解温度45℃、酶解时间1h,该工艺制备得到硫酸软骨素为白色粉末得率达23.15%,澄清度0.038,蛋白质含量2.48%,氨基己糖含量30.52%,硫酸软骨素纯度86.06%,水分6.32%,pH6.7,各项指标完全符合国家相关标准要求。 相似文献
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以鲟鱼软骨为原料,采取碱提-酶解-醇沉的方式提取硫酸软骨素后,采用普通粉碎、超微粉碎联合辐照技术分别对硫酸软骨素样品进行降解后,再利用离子色谱法、紫外-可见光光谱扫描法、红外吸收光谱法、核磁共振波谱法研究硫酸软骨素的化学结构。单糖分析表明,粗样中的鼠李糖经超微粉碎加辐照共处理后含量从56.16%增加到59.31%,粗样中的葡萄糖醛酸经超微粉碎加辐照共处理后含量由33.69%降低到31.84%;而纯化样品中葡萄糖醛酸含88.77%。紫外光谱分析表明硫酸软骨素经超微粉碎与辐照的共处理方式使硫酸软骨素的分子结构发生断裂即糖苷键的分裂及产生C=O基团。红外光谱结果表明普通粉碎及经超微和辐照降解共处理的硫酸软骨素均呈现4-硫酸软骨素和6-硫酸软骨素的典型特征。核磁共振分析得出经超微粉碎和辐照的处理使硫酸软骨素上的乙酰半乳糖胺和葡萄糖质子信号增强,且推测鲟鱼硫酸软骨素包含GlcA (β1→3) GalNAc-4SO3和GlcA (β1→3) GalNAc-6SO3重复单元结构。 相似文献
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∶探索了用稀碱-酶解法从鲨鱼软骨中提取硫酸软骨素的生产工艺,通过实验确定了酶解的温度、酸度和加酶量的范围,并对提取液温度、盐解液温度等重要参数作了研究,最后确定了稀碱-酶解法的工艺路线,为工业化生产提供了依据. 相似文献
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采用响应面分析法,研究不同提取条件(温度、时间、碱浓度)对鲨鱼硫酸软骨素(ChS)得率的影响,建立提取条件与得率之间的数学模型,并进一步研究不同的超声波处理时间对硫酸软骨素提取率和纯度的影响,确定适宜的硫酸软骨素提取条件。结果:1)采用响应面分析法建立提取条件与硫酸软骨素得率的数学模型为ChS(%)=14.56 - 0.34x2 - 0.34x1x2 - 0.82x12 - 1.45x22 - 0.47x32,其中碱提温度对硫酸软骨素得率影响最为显著,其次为碱液浓度;2)通过响应面交互作用分析与优化,鲨鱼硫酸软骨素适宜的碱提条件为碱液浓度4%、碱提温度35℃、碱提时间3h,ChS 得率为14.50%;3)在优化的碱提条件处理之前利用超声波处理20min,硫酸软骨素得率可提高到18.07%,纯度为91.58%。 相似文献
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鸡胸软骨硫酸软骨素的制备及结构分析 总被引:1,自引:0,他引:1
首先分析了鸡胸软骨中主要营养成分,再用酶法提取生物活性多糖硫酸软骨素,并用三氯乙酸除蛋白、乙醇沉淀和柱色谱进行分离纯化得到高纯度产品。反相高效液相色谱和原子吸收光谱分析表明鸡胸软骨富含呈味氨基酸和钙、镁和锌等矿物元素。高效凝胶过滤色谱和琼脂糖凝胶电泳证明该纯化后的硫酸软骨素产品均一,纯度达到99%,其分子量为21007D。其红外光谱呈现4-硫酸软骨素的典型特征,没有发现6-硫酸软骨素存在。气相色谱分析发现其中中性单糖主要为葡萄糖、木糖和半乳糖,与猪喉软骨存在明显差异。 相似文献