SD在鼠红藻氨酸诱导性癫痫发作时一氧化氮合酶与γ—氨基丁…

目的：根据形态学观察对一氧化氮在癫痫发作中的意义、ＮＯ与抑制性神经递质γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）的关系进行探讨。方法：选用红藻氨酸（ＫＡ）诱导的复杂部分性癫痫模型。ＳＤ大鼠２０只，随机分为ＫＡ３０，６０，９０，２００ｍｉｎ组及对照组。脑组织进行还原性辅酶Ⅱ依赖性黄递酶染色，在Ｎｄ染色的基础上进行ＧＡＢＡ免疫组织化学染色。结果：在海马ＣＡ１区、ＣＡ３区、齿状回（ＤＧ），ＫＡ建模组各时点一氧化氮合酶（Ｎ     

红藻氨酸诱导癫痫发作大鼠海马NOS的表达

目的：研究ＫＡ诱导癫痫发作对大鼠海马ＮＯＳ表达的影响;方法：采用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法显示ＮＯＳ的变化。Ｎｉｓｓｌ染色显示神经元的变性坏死;结果：ＫＡ３０ｍｉｎ海马各区ＮＯＳ阳性细胞明显增加,以ＣＡ１、ＣＡ２区为著,ＫＡ１ｈ、２ｈ与对照无差异（Ｐ〉０．０５）,以后逐渐增加,至ＫＡ６ｈＮＯＳ阳性细胞最多,然后逐渐减少。Ｎｉｓｓｌ染色神经元缺失ＣＡ３＝齿状回〉ＣＡ１区;结论：ＫＡ诱导癫痫发作引起海     

红藻氨酸致癫痫大鼠脑内一氧化氮合酶的动态表达研究

目的探讨一氧化氮合酶（NOS）的三种不同亚型nNOS、iNOS、eNOS在红藻氨酸（KA）了致癫痫SD大鼠模型中不同部位和不同时间的变化情况。方法KA点燃癫痫SD大鼠,随机分为对照组、KA组,在致痫1、7、14、21和28d各个时间点,观察大鼠癫痫发作后的行为学变化,脑电图描记,采用免疫组化的方法研究三种不同NOS（nNOS、iNOS和eNOS）的表达。结果注射KA后大鼠出现癫痫发作,7～28d可见癫痫慢性自发发作。EEG表现为尖、棘波节律,7～28d仍可见痫性活动。KA致痫后1d,nNOS在CA1、CA2、CA3区表达较对照组明显增多,7d时开始出现下降,在cA2、CA3区14d后又出现增多,在颞叶从1d开始就持续高水平的表达,而在齿状回和丘脑不同时间点nNOS阳性细胞表达都很低。iNOS在1d时各区表达均较对照组增高,之后在CA1、CA2、CA3区及颞叶阳性细胞出现减少,而在齿状回及丘脑7、14d有所下降,之后又出现高表达。eNOS在KA致痫后1d在CA1、CA2及齿状回区表达较对照组增高,7d时出现下降,之后叉出现增多,但eNOS阳性细胞在CA3区却表现为癫痫发作后1、7d时出现少,在14d以后才大量出现,并逐渐增加,在颞叶及丘脑,1d时与对照组无明显差异,7d时才开始表达增高,并持续高表达至28d。结论KA诱导癫痫发作大鼠脑内不同类型NOS在不同的时间和部位表达不同。     

γ-氨基丁酸对情绪应激大鼠额叶皮质一氧化氮合酶和一氧化氮水平的影响

目的 观察γ-氨基丁酸(GABA)对情绪应激大鼠一氧化氮合酶(NOS)和一氧化氮(NO)含量的影响,结合行为学实验,探讨γ-氨基丁酸抗焦虑作用机制.方法 将40只雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠按随机数字表法分为5组:对照组,模型组,GABA 0.5、1、2 mg/kg组,采用不确定性空瓶刺激的方法建立焦虑大鼠模型,并在应激前分别给予大鼠灌服生理盐水或相应剂量的GABA,14 d后进行旷场实验并分析各组大鼠额叶皮质一氧化氮合酶和一氧化氮水平的差异.结果 应激14 d后对照组与其余各组的食物利用率差异极显著(P＜0.01);各组大鼠在中央区域的停留时间差异极为显著(P＜0.01);对照组、GABA 1 mg/kg和2 mg/kg组进入中央区域的次数显著高于模型组(P＜0.05);模型组的修饰次数显著高于GABA 1 mg/kg和2 mg/kg组(P＜0.05);总运动距离和直立次数均无显著性差异(P＞0.05);对大鼠额叶皮质NOS及NO的分析显示对照组和GABA 2 mg/kg组的NOS活力及NO含量显著高于模型组(P＜0.05).结论 GABA与焦虑大鼠额叶皮质的NOS及NO均呈剂量-效应关系,提示GABA可能通过调节焦虑大鼠额叶皮质中的一氧化氮含量发挥抗焦虑作用.     

迷走神经刺激抑制红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作相关脑区内Nd酶的活性

探明瞳神经刺激疗法抗癫痫的分子机制,为临床工作奠定基础。方法利用免疫组化的方法,观察ＶＮＳ前后,红藻氨酸致痫大鼠海马及弧束核等相关脑区Ｎｄ酶活性的变化,并结合动物行为及脑电图指征探讨一氧化氮介质途径在甚或其中的可能作用。结果ＶＮＳ ＫＡ诱发的首次全身强直－煌发作的潜伏期,且发作持续发时间缩短,频率降低。     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作时海马mGluR1mRNA表达的动态变化

目的：探讨红藻氨酸（ＫＡ）诱导大鼠癫痫发作时海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达变化的时空特征．方法：采用地高辛标记的ｃＤＮＡ探针原位杂交法检测海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达,通过图像分析系统进行定量处理．同时观察大鼠行为学及脑电变化．结果：ＫＡ注射后大鼠均出现严重边缘性惊厥,脑电图表现为持续性癫痫样放电．海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达在注射ＫＡ后１ｈ开始增高,４ｈ￣８ｈ达高峰,之后逐渐回落,７２ｈ降至     

刺激迷走神经抑制红藻氨酸致癫痫大鼠海马c—fos的表达

目的；观察刺激迷走神经对红藻氨酸诱发癫痫大鼠海马内ｃ－ｆｏｓ表达的变化，探讨此方法抑制癫痫的机制及可能途径。     

一氧化氮及一氧化氮合酶在遗传性癫痫易感大鼠惊厥发作中的作用

目的：探讨一氧化氮、一氧化氮合酶在遗传癫痫易感大鼠惊厥发作中的变化及作用。方法：选择惊厥评分在30－40的P77PMC大鼠35只，均分A－G7组，A组为对照组、G组预先30min腹腔注射一氧化氮合酶抑制剂L－NAME，分别于铃声刺激致惊后0．5、1、2、4,12h断头处死，取出脑组织分离双侧大脑皮层、海马等组织匀浆，测定一氧化氮及一氧化氮合酶，分别统计并进行t检验。结果：惊厥后0．5－1h皮层、海马一氧化氮、一氧化氮合酶逐渐升高，2h达峰值，4－12h恢复正常，应用L－NAME后，一氧化氮、一氧化氮合酶升高被抑制，但大鼠惊厥评分增高并致1例惊厥后死亡和明显延长惊厥持续时间。结论：惊厥后大鼠体内一氧化氮、一氧化氮合酶合成增加，给予合成酶抑制后能明显下降，但能加重惊厥程度和延长持续时间，提示一氧化氮于惊厥后升高，可能作为内源性抑制性性质，在惊厥发作自行终止机制中具有重要作用。     

反复热性惊厥过程中γ-氨基丁酸B受体对一氧化氮/一氧化氮合酶体系的调节作用

目的:探讨γ-氨基丁酸B受体(γ-aminobutyric acid B receptor,GABABR)对热性惊厥(febrile seizure,FS)大鼠一氧化氮(nitric oxide,NO)/一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)体系表达的影响.方法:将21 d龄SD大鼠随机分为对照组、FS组、FS+巴氯芬(baclofen)组和FS+法克罗芬(phaclofen)组.采用热水浴诱导大鼠FS,隔日诱导1次,共10次.采用分光光度计法测定大鼠血浆中NO含量;用原位杂交方法观察神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)mRNA表达情况;用免疫组化方法观察nNOS蛋白表达情况.结果:FS+baclofen组NO含量低于FS组[(19.02±9.31)μmol/L比(40.03±9.12)μmol/L],同时nNOS蛋白和mRNA表达也较FS组减弱;而FS+phaclofen组NO含量高于FS组[(66.46±8.15)μmol/L比(40.03±9.12)μmol/L],同时nNOS蛋白和mRNA表达也较FS组增强.结论:反复热性惊厥过程中,GABABR的改变可影响NO/NOS体系的表达.     

红藻氨酸致痫大鼠外周血炎性因子与癫痫发作程度的相关性研究

目的探讨红藻氨酸（kainicacid,KA）致痫大鼠外周血炎性因子的水平与癫痫严重程度的关系。方法140只Wistar大鼠随机分为对照组和模型组,每组70只。模型组以10mg／kgKA腹腔注射建立模型,对照组以生理盐水同样处理。观察行为学变化。以ELISA方法检测不同时点血清TNF-α、IL-1β、IL-4和IL-10的表达水平。结果KA注射后,大鼠在3h-9h进入癫痫大发作期。与对照组相比[6h：（12．3±3．1）pg／ml,12hl（11．5±3．8）pg／ml],模型组在6h-12h促炎因子TNF—α[6h：（21．5±3．2）pg／ml,12h：（20．6±4．2）pg／ml]和IL-1β的水平明显升高（P〈0．05）;抗炎因子IL-4只在12h时明显升高[（53．55±3．08）pg／ml,（33．26±4．16）pg／m1]（P〈0．05）,IL-10水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论促炎因子TNF-α和IL-1β参与了癫痫的发作过程,其水平与癫痫发作程度密切相关;抗炎因子IL-4和IL-10水平的变化与癫痫的发作程度无显著相关性。     

海仁酸致NOS神经元损伤与神经功能联系障碍的关系

目的 研究局部皮质注射海仁酸导致NOS神经元损伤及血管收缩与神经功能联系障碍的关系。方法将微量海仁酸注射到大鼠顶叶，β—NADPH组织化学及EA50组织学染色。结果 注射后1h双侧大脑皮质、海马和小脑皮质均可见NOS神经元和一些非NOS神经元溃变;4h后NOS阳性神经元损伤区域微血管的直径缩小了32％～39％；8h后NOS阳性神经末梢溃变呈细颗粒状；1d后双侧海马和伤侧间脑等部位的Nos神经元溃变：2—5d后皮质、海马等部位的部分神经元诱导表达Nos活性；7d后双侧海马cA3和cA4大量神经元丢失。结论神经功能联系障碍与兴奋性神经毒所致的跨突触Nos神经元和非Nos神经元损伤有关，N0s神经元损伤所致的No减少导致血管收缩，引起受损区域的脑血流减少及代谢功能障碍。     

海人酸致痫SD大鼠海马神经元树突棘的可塑性变化

目的 分析癫痫敏感形成期海马齿状回颗粒细胞和CA1区锥体细胞树突棘的可塑性变化特征,探讨树突可塑性在神经环路重组形态学机制中的作用。方法 本研究采用SD大鼠颈部皮下注射海人酸[KA,10 mg/（2mL·kg）]癫痫模型,对照组注射生理盐水。24只动物随机分成正常对照组（NS组）、癫痫发作3 d组（KA3d组）和癫痫发作7 d组（KA7d组）。癫痫动物发作达4级为造模成功,鼠脑经高尔基染色和火棉胶包埋与切片,在光镜水平检测海马齿状回分子层和CA1腔隙层树突棘的形态和密度。结果 KA3d组齿状回分子层内带和外带树突棘密度分别为（26.8±4.06）个/50 μm和（29.1±4.40）个/50 μm,显著高于对照组（P<0.05）;KA7d组分别为（30.7±6.78）个/50 μm和（32.8±8.59）个/50 μm,显著高于KA3d组（P<0.05）,其中KA3d和KA7d组无颈短棘密度均明显高于对照组,相反,KA3d组分子层内带有颈长棘密度未见显著变化,但其平均长度明显下降。KA7d组分子层内、外带有颈长棘密度明显高于对照组和KA3d组。齿状回分子层内带和外带的比较分析发现KA3d组齿状回分子层内带树突棘密度明显低于外带树突棘密度。KA7d组内、外带树突棘密度无明显差别,但外带的有颈长棘密度以及其在树突总数中的比例均显著高于内带。在海马CA1区腔隙层,KA3d组树突棘密度为（0.79±0.278）个/μm出现下降趋势,KA7d组树突棘密度为（0.69±0.313）个/μm明显低于对照组和KA3d组（P<0.05）。结论 海马结构内树突棘可塑性变化可能参与了癫痫敏感性形成的形态学机制。     

SD大鼠扩张型心肌病模型的建立

目的:探讨用多柔比星腹腔注射建立扩张型心肌病模型的可行性。方法:取10周龄雄性SD大鼠(350±50)g,共40只。随机分为4组:对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,给药组腹腔注射量分别为8、16、24 mg/kg,并于给药前及给药后第2、4、6、8周用心脏超声观察收缩期、舒张末期内径及射血分数;第9周取心肌观察病理形态特征结果:心脏超声检查显示给药8周后中、高剂量组大鼠左心室收缩期末口径及舒张期末口径增大,左心室射血分数下降(P<0.05);组织病理检查符合扩张型心肌典型病理特征,但高剂量组大鼠生存率较低。结论:予以大鼠多柔比星腹腔注射每周2 mg/kg,8周可建立扩张型心肌病实验模型。     

DEN诱发SD大鼠原发性肝癌形成过程中AFU价值的研究

目的总结探讨a-L-岩藻糖苷酶(AFU)对原发性肝癌的早期诊断价值。方法将65只SD雄性大鼠随机分为诱癌组和对照组,两组分别于第6,8,11,14,17,20周行尾静脉采血进行血清学指标检查,同时进行MR平扫及其他影像学检查和病理检查。结果AFP直到第18周肝癌演变期与正常对照组无显著性差异;AFU从第14周早期肝癌形成时就与正常对照组有显著性差异,并且随着肝癌的动态发展过程进一步升高。结论AFU对原发性肝癌具有较高的早期诊断价值。     

氧化苦参碱和槐定碱对癫痫的比较研究

目的探讨氧化苦参碱和槐定碱对癫痫的作用。方法大鼠腹腔注射青霉素制作癫痫模型,以苯巴比妥钠作阳性对照,观察氧化苦参碱和槐定碱的不同作用。结果氧化苦参碱中、高剂量组和槐定碱低剂量组可延长癫痫大鼠惊厥潜伏期,明显减轻大鼠痫样发作程度;氧化苦参碱低、中、高剂量组和槐定碱低剂量组对大鼠皮层脑电图有明显改变;在青霉素致痫后,光、电镜观察可见神经细胞肿胀、细胞器损伤等改变,使用氧化苦参碱和槐定碱后神经元细胞肿胀明显减轻,细胞器等损伤能够得到改善。结论不同剂量的氧化苦参碱和槐定碱对癫痫具有不同的影响。     

坎地沙坦干预KA致痫大鼠心肌细胞ERK1/2的表达及其机制

目的：探讨坎地沙坦干预后海人藻酸（KA）致痫大鼠心肌细胞细胞外信号调节激酶（ERK1/2）的表达及其机制。方法：雄性Wistar大鼠（n=105）随机分为3组：A对照组（n=35）;B_1-5 致痫组(n=35);C_1-5坎地沙坦组(n=35),1-5分别表示癫痫后0、0.5、2.0、4.0及6.0 h。采用立体定位仪下杏仁核内注射KA方法制备大鼠癫痫模型,于致痫后不同时程进行灌流固定、心肌组织的石蜡包埋、切片及免疫组织化学染色,检测不同时程心肌细胞ERK1/2表达的灰度值。结果：与对照组比较,致痫组及坎地沙坦组心肌细胞于致痫后0.5 h ERK1/2表达均开始增加（P<0.05）,致痫后2 h两组大鼠心肌组织ERK1/2的表达均达到高峰（P<0.01）,随后逐渐下降,致痫后6 h,两组大鼠心肌组织ERK1/2表达均回到对照组水平（P>0.05）。即致痫组及坎地沙坦干预两组大鼠心肌ERK1/2蛋白表达组间比较,坎地沙坦组ERK1/2表达较低（P<0.05）。结论：ERK1/2在KA致痫大鼠心肌细胞中表现为短时程表达增加,坎地沙坦可使心肌ERK1/2表达降低。     

迷走神经刺激对致(癎)大鼠脑内NOS免疫反应阳性细胞的影响

目的 :探讨迷走神经刺激抗癫作用与脑内一氧化氮 ( NO)的关系。　方法 :大鼠用戊四氮 ( PTZ)腹腔注射致 ,行迷走神经刺激抗癫 ,应用免疫组化方法观察大鼠脑皮质及海马一氧化氮合酶 ( NOS)免疫反应阳性神经细胞的变化。　结果 :PTZ致后 ,大鼠皮层、海马 NOS阳性细胞数及阳性细胞光密度较对照组明显增加 ( P<0 .0 1) ;而行迷走神经刺激 ( VNS)抗癫组动物上述脑区 NOS阳性细胞及光密度明显减少 ( P<0 .0 1)。　结论 :VNS的抗癫作用与脑内 NO的减少相关 ,VNS可能通过抑制脑内谷氨酸的释放而发挥抗癫作用     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作时海马mGluR5 mRNA表达变化的动态观察

目的 探讨红藻氨酸（KA,10mg.kg^-1)诱导大鼠癫痫发作时海马代谢型谷氨酸受体5亚型（mGluR5)mRNA表达变化的病理特征。方法 采用同位素S^35 dATP标记寡核苷酸探针原位杂交法检测大鼠癫痫发作前后海马mGluR5mRNA的表达变化。通过图像分析系统进行定量处理。同时观察大鼠行为学及脑电变化。结果 KA注射后大鼠均出现严重边缘性惊厥,脑电图表现为阵发性癫痫样放电,正常大鼠海马中有丰富的mGluR5 mRNA表达,以齿状回和CA1区表达较高,KA注射后海马各区mGLuR5 mRNA表达呈时间依赖性下调,CA1,CA3,CA4区表达在2h呈现出显著性差异（P＜0．05）,齿状回区表达在1h即有显著性差异（P＜0．01）,至72h各区表达均至最低。结论 mGluR5在癫痫发作后表达下降可能有助于限制神经元网络的异常兴奋性,使细胞发挥自身保护性作用。     

胡椒碱对海人藻酸致惊作用的影响*

[目的]观察胡椒碱的致惊作用并分析其机制.[方法]小鼠和家兔的实验性癫痫模型;利用氨基酸自动分析仪检测小鼠脑内氨基酸含量;大鼠脑片谷氨酸释放实验.[结果]胡椒碱对小鼠脑室注射(icv)海人藻酸(KA)引起的阵挛性惊厥有较强的对抗作用,其半数有效量(ED50)为24.0(18.7～33.7)mg/kg.对家兔海马注射KA引起的异常脑电放电有一定的抑制作用.明显降低小鼠脑内谷氨酸(Glu)和天冬氨酸(Asp)含量,并且能够降低Glu+Asp/γ-氨基丁酸(GABA)的比值.10-6mol的胡椒碱对大鼠大脑皮质脑片预载的3H-Glu的释放有明显的抑制作用.[结论]胡椒碱有较强的抗实验性癫痫作用,其机制可能与降低了中枢神经系统兴奋性氨基酸(EAA)的功能有关.