肠道病毒71型感染手足口病患儿TLR7、α干扰素、IL-6水平及TLR7基因多态性

目的分析肠道病毒71型(EV71)感染手足口病患儿Toll受体7(TLR7)、α干扰素(Interferon-α, IFN-α)、白细胞介素-6 (Interleukin,IL-6)表达水平变化及TLR7基因多态性。方法选择2016年3月-2019年3月医院门诊和住院EV71感染手足口病患儿508例,其中无中枢神经系统并发症患儿327例作为轻症组,合并中枢神经系统并发症患儿181例作为重症组,选择同期在医院儿童保健科门诊体检儿童305名作为对照组。检测各组受试儿童TLR7、IFN-α以及IL-6 mRNA相对表达量,并分析TLR7 rs179019和rs3853839基因位点单核苷酸多态性。结果 EV71病毒感染患儿TLR7 mRNA、IFN-αmRNA以及IL-6 mRNA表达均显著高于对照组(P0.05),其中重症组患儿上述指标表达量均高于轻症组(P0.05)。轻症组、重症组及对照组TLR7 rs179019基因位点基因型分布及C、A等位基因分布差异均无统计学意义,TLR7 rs3853839基因位点基因型及G、C等位基因分布比较差异具有统计学意义(P0.05),其中重症组C等位基因分布率高于轻症组和对照组(P0.05)。结论 TLR7、IFN-α、IL-6参与EV71病毒感染过程中,可能是EV71感染并发展成为重症感染的关键因子,同时TLR7 rs3853839位点基因多态性与患儿EV71重症感染密切相关。     

急性心肌梗死介入术后肺部感染与外周血 IL-17A和IL-23R基因多态性的关联性

目的分析急性心肌梗死(AMI)冠状动脉介入治疗(PCI)术后肺部感染患者外周血白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-23受体(IL-23R)基因多态性的关联。方法回顾性分析156例建德市第一人民医院心血管内科接受PCI的AMI患者临床资料,其中33例PCI术后7 d内发生肺部感染,纳入感染组,另123例未发生肺部感染患者纳入未感染组;比较两组外周血IL-17A、IL-23R基因多态性,多元逐步回归分析AMI患者外周血IL-17A、IL-23R基因多态性与PCI术后肺部感染的关系。结果 PCI术后肺部感染组患者年龄较未感染组患者大(P0.05);两组外周血IL-17A rs2275913和IL-23R rs6682925位点基因型及等位基因分布差异有统计学意义(P0.05);多元逐步回归分析显示年龄,IL-17A rs2275913位点AG、GG基因型、G等位基因,IL-23R rs6682925位点CC基因型、C等位基因均与AMI患者PCI术后肺部感染密切相关(P0.05),且方差膨胀因子(VIF)3。结论 IL-17A rs2275913和IL-23R rs6682925基因多态性是AMI患者PCI术后肺部感染的易感基因型,且年龄与AMI患者PCI术后肺部感染也存在显著相关性。     

NLR TLR7基因多态性与肠道病毒感染患儿预后及临床表型的相关性

目的 探讨中性粒细胞/淋巴细胞(NLR)及Toll样受体7(TLR7)基因单核苷酸多态性(SNP)与肠道病毒感染患儿不同临床表型及不同感染型别的相关性。方法 应用巢式RT-PCR进行肠道病毒分型；TapMan探针基因分型技术，对200例感染者和100名健康对照TLR7基因rs3853839位点进行基因分型，比较其等位基因频率的差异；检测相关SNP位点不同基因型携带与不同临床表型的相关性。结果 测序分析分型：EV71型8.5%(17/200)、CoxA16型17.5%(35/200)、CoxA6型28.5%(57/200)、CoxA10型22.0%(44/200),其他肠道病毒型23.5%(47/200);EV71感染者rs3853839基因型GC和CC的频率明显高于其他型别感染组(P<0.05);脑炎/无菌性脑膜炎组rs3853839基因型C的频率也明显高于其他症状组(P<0.05);重症组患儿NLR高于轻症组(P<0.05),NLR升高与疾病严重程度显著相关。回归分析确定NLR升高(HR=2.46,95%CI为1.99～4.669)。结论 TLR7基因rs38538...     

HMGB1和IL-1β基因多态性与老年心衰患者合并肺部感染的关联

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-1β(IL-1β)基因多态性与老年心衰患者合并肺部感染的关系。方法 选取首都医科大学附属北京世纪坛医院2016年5月-2020年12月310例老年心衰患者，根据其肺部感染发生情况，分为感染组56例、未感染组254例，比较两组HMGB1、IL-1β基因型以及基因频率分布差异，对比感染组不同基因型患者血清HMGB1、IL-1β水平。结果 感染组HMGB1基因rs1045411位点GG基因型及G等位基因频率均低于未感染组(P<0.05),IL-1β基因rs1143634位点CC基因型及C等位基因频率均低于未感染组(P<0.05);感染组患者外周血HMGB1、IL-1β水平高于未感染组(P<0.05);感染组HMGB1-rs1045411位点AG或AA基因型患者血清HMGB1、IL-1β水平高于GG基因型，IL-1β-rs1143634位点CT或TT基因型血清HMGB1、IL-1β水平高于CC基因型(P<0.05)。结论 老年心衰患者HMGB1-rs1045411位点AA或AG型、IL-1β-rs1143634位点...     

Toll样受体7、CTLA-4基因多态性与重症哮喘的关联性分析

目的 探讨Toll样受体7、CTLA-4基因多态性与重症哮喘的关联性。方法 选取2018年2月至2020年3月秦皇岛市第一医院呼吸科收治的175例哮喘患者作为研究对象(轻症109例、重症66例),同期纳入该院门诊健康体检者248例为正常对照组。测定上述各组Toll样受体7、CTLA-4基因多态性,通过计算比值比(OR)和95%置信区间(CI)评估Toll样受体7、CTLA-4多态性与重症哮喘之间的关系,应用logistic回归分析评估Toll样受体7、CTLA-4多态性位点的基因型与重症哮喘的关联强度。结果 重症哮喘组、轻症哮喘组TLR7 rs3853839 CC基因型比例、CTLA-4 rs231725 AA基因型比例、TLR7 rs3853839 C等位基因频率、CTLA-4 rs231725 A等位基因频率高于正常对照组(P<0.05),重症哮喘组TLR7 rs3853839 CC基因型比例、CTLA-4 rs231725 AA基因型比例、TLR7 rs3853839 C等位基因频率、CTLA-4 rs231725 A等位基因频率高于轻症哮喘组(P<0.05)。TLR...     

慢性心衰合并肺部感染患者TLR7和IL-23与IL-17信号通路及心脏功能

目的 探讨慢性心衰合并肺部感染对Toll样受体7(TLR7)和白细胞介素-23(IL-23)与IL-17信号通路及心脏功能的影响。方法 回顾性选取2020年1月-2022年1月新乡市中心医院收治的300例慢性心衰患者为对象，根据住院期间肺部感染情况分为感染组134例和未感染组166例；采用酶联免疫吸附法检测IL-23、IL-17水平，荧光定量检测法检测外周血TLR7-mRNA表达量，超声检查评估患者心功能。结果 感染组共培养分离病原菌156株，其中革兰阴性菌98株占62.82%,革兰阳性菌48株占30.77%,真菌10株占6.41%;感染组TLR7低于未感染组，IL-23、IL-17高于未感染组(P<0.05);感染组左室射血分数(LVEF)低于未感染组，左室收缩末期容积指数(LVESVI)、左室舒张末期容积指数(LVEDVI)高于未感染组(P<0.05);感染组中，心功能Ⅳ级患者TLR7水平低于Ⅱ级、Ⅲ级患者，IL-23、IL-17水平高于Ⅱ级、Ⅲ级患者，Ⅲ级患者IL-23、IL-17水平高于Ⅱ级患者(P<0.05);感染组心血管不良事件发生率(17.16%)高于未...     

IL-17、TLR4、P2X7基因多态与慢性阻塞性肺疾病的关联研究

目的 探讨炎症相关基因白细胞介素17（interleukin-17,IL-17）、Toll样受体4（toll-like receptors 4,TLR4）、嘌呤受体（purinergic receptor P2X 7,P2X7）遗传多态与慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）易感性的关系。方法 采用病例对照研究设计,病例组为2015年6月~2016年5月南通市第三人民医院收集的COPD确诊患者,共152例。对照组来自参加健康体检的居民,按年龄和性别与病例进行频数匹配,共201例。基因分型采用TaqMan分型技术,关联强度采用OR值及95%CI值表示。结果 采用Bonferroni校正后,IL-17基因rs2275913、rs763780;TLR4基因rs10759932、rs2737190;P2X7基因rs1718119遗传多态与COPD的易感性关联均有统计学意义（均有P<0.05）。rs2275913A等位基因（OR=0.62,95%CI:0.46~0.86,P=0.003）;rs763780C等位基因（OR=1.96,95%CI:1.29~2.98,P=0.001）;rs10759932C等位基因（OR=0.49,95%CI:0.34~0.73,P<0.001）;rs2737190G等位基因（OR=0.51,95%CI:0.37~0.71,P<0.001）。结论 IL-17、TLR4、P2X7基因多态影响COPD遗传易感性。     

肺部感染对乳腺癌手术妇女TLR7、IL-23、IL-17信号通路的影响

目的探讨肺部感染对乳腺癌手术妇女Toll样受体(Toll-like receptors,TLR7)、白细胞介素-23(Interleukin-23,IL-23)、白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)信号通路的影响。方法回顾性分析2015年7月-2018年7月于内蒙古医科大学附属医院接受治疗的866例乳腺癌患者的临床资料,根据患者是否并发肺部感染分为并发感染组(n=304)和未并发感染组(n=562),采用酶联免疫吸附法检测患者感染前后血清白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)、白细胞介素-23(Interleukin-23,IL-23)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)炎症因子水平变化情况。采用流式细胞仪检测血液T淋巴细胞4(T Cell response,CD_4~+)、T淋巴细胞8(T Cell response,CD_8~+),分析血液中免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)免疫抗体含量。采用荧光定量检测法检测外周血TLR7 mRNA表达量。结果乳腺癌患者肺部感染后血清IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17-IL-23、TNF-α、CRP指标水平分别高于感染前,差异具有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者肺部感染前后CD_4~+免疫细胞含量、IgA免疫抗体含量对比无统计学差异,乳腺癌患者肺部感染后CD_8~+免疫细胞含量、IgG、IgM免疫抗体含量低于感染前,差异具有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者肺部感染后单个核细胞TLR7 mRNA表达为(0.76±0.08),TLR7蛋白表达为(0.49±0.04),低于感染前单个核细胞TLR7 mRNA表达,TLR7蛋白表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺癌患者发生肺部感染后血清IL-17、IL-23指标水平明显上升,且肺部感染抑制机体TLR7 mRNA表达量和蛋白表达量,TLR7表达量下降会促进乳腺癌患者IL-23/IL-17信号通路的活化程度。     

慢性阻塞性肺疾病继发肺部感染的炎性因子及TLR7/IL-23/IL-17信号通路作用

目的探究慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)继发肺部感染的炎性因子及Toll样受体7/白细胞介素-23/白细胞介素-17(Toll like receptor-7/Interleukin-23/Interleukin-17,TLR7/IL-23/IL-17)信号通路作用。方法选取2015年6月-2019年1月海口市中医医院收治的COPD患者120例,根据是否并发肺部感染及感染严重程度分组,选取同期于医院体检的健康者30名作为对照组,患者均抽取空腹静脉血5 ml,部分置于含有EDTA的抗凝管中,部分离心上清,-80℃保存待测。取部分血液样本,采用荧光定量PCR法(qPCR)检测外周血单个核细胞TLR7表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-17、IL-23、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ-干扰素(γ-interferon,IFN-γ)水平;采用流式细胞术检测pDC及T细胞亚群比例;采用免疫比浊法检测免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)水平。结果轻度感染组和重度感染组的TLR7表达水平均高于对照组(P<0.05);重度感染组的TLR7表达水平高于未感染组(P<0.05);轻度感染组和重度感染组的IL-6、IL-17、IL-23、TNF-α、IFN-γ水平高于对照组和未感染组,IL-2水平低于对照组和未感染组(P<0.05);轻度感染组和重度感染组的pDC、CD4^+、CD4^+/CD8^+比例高于对照组,CD8^+低于对照组(P<0.05);重度感染组的pDC、CD4^+、CD4^+/CD8^+比例高于未感染组,CD8^+低于未感染组(P<0.05);重度感染组的IgA、IgG、IgM水平低于对照组和未感染组(P<0.05)。结论COPD继发肺部感染患者的TLR7表达上升,抑炎因子水平下降,促炎因子分泌增加,提示炎症反应持续。     

长期卧床患者肺部感染危险因素及其TLR7 mRNA 和IL-23与IL-17的预测价值

目的 脊柱手术后长期卧床患者肺部感染患者危险因素及其Toll样受体7(TLR7)和白细胞介素-23(IL-23)与IL-17信号通路的预测价值。方法 收集2019年1月-2022年9月绍兴文理学院附属医院收治的脊柱手术后长期卧床未并发肺部感染患者123例设为未感染组,选取同期于医院接受治疗的33例脊柱手术后长期卧床并发肺部感染患者作为感染组,采用多因素Logistic回归分析归纳脊柱手术后长期卧床患者肺部感染的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析TLR7、IL-23、IL-17信号通路对脊柱手术后长期卧床患者肺部感染的预测价值。结果 多因素Logistic回归分析结果显示,慢性肺部疾病、合并糖尿病、机械通气均为脊柱手术后长期卧床患者肺部感染的危险因素(OR=3.323,2.646,2.259,P<0.05);联合预测脊柱手术后长期卧床患者肺部感染发生的曲线下面积(AUC)值均高于TLR7 mRNA、IL-23、IL-17单独检测(P<0.05); TLR7 mRNA及联合敏感度高于IL-23、IL-17(P<0.05); IL-23及联合检测特异度高于TLR...     

TLR7/8 agonists activate a mild immune response in rabbits through TLR8 but not TLR7

Toll-like receptors 7 (TLR7) and 8 (TLR8) recognize viral single-stranded RNA and small molecular weight agonists to activate anti-viral immune responses. TLR8s from different species have distinct ligand recognitions. For example, human TLR8 is responsive to ligand stimulation, but mouse and rat TLR8 are activated by small molecular weight agonists only in the presence of polyT-oligodeoxynucleotides. TLR7 and TLR8 have been reported to be absent and pseudogenized, respectively, in rabbit (Oryctolagus cuniculus). In this study, we detected the expression of rabbit (rab)TLR8 in immune-cell-associated tissues. Cell proliferation and cytokine expressions in rabbit splenocytes were induced by the TLR7/8 ligand but not by the TLR7 ligands, suggesting that rabTLR8 is functional but rabTLR7 is not. In rabbits, CL075, a TLR7/8 ligand, activated an antigen-specific antibody response, although one not as potent as aluminum salt or Freund's adjuvant. Nevertheless, CL075, alone or in combination with aluminum salt, generates fewer adverse effects than Freund's adjuvant at the injection sites. To further investigate the activation of rabTLR8, we cloned its cDNA. In cell-based assay, this rabTLR8 is activated by TLR7/8 ligand but not activated by TLR7 ligand. Upon stimulation the rabTLR8 had a lower activation compared to the activation of TLR8 from other species, except the mouse and rat TLR8s. Using different deletion and human-rabbit chimeric TLR8 expressing constructs, we showed that an extra peptide in the undefined region results in reduced activity of rabTLR8. These results provide a molecular basis for the mild activities of TLR7/8 ligands in rabbits, and suggest TLR7/8 agonists may provide safer immune stimuli in rabbits than in other non-rodent species.     

Evaluation of novel synthetic TLR7/8 agonists as vaccine adjuvants

Small-molecule adjuvants that boost and direct adaptive immunity provide a powerful means to increase the effectiveness of vaccines. Through rational design several novel imidazoquinoline and oxoadenine TLR7/8 agonists, each with unique molecular modifications, were synthesized and assessed for their ability to augment adaptive immunity. All agonists bound human TLR7 and TLR8 and induced maturation of both human mDCs and pDCs. All agonists prompted production of type I interferon and/or proinflammatory cytokines, albeit with varying potencies. In most in vitro assays, the oxoadenine class of agonists proved more potent than the imidazoquinolines. Therefore, an optimized oxoadenine TLR7/8 agonist that demonstrated maximal activity in the in vitro assays was further assessed in a vaccine study with the CRM197 antigen in a porcine model. Antigen-specific antibody production was greatly enhanced in a dose dependent manner, with antibody titers increased 800-fold compared to titers from pigs vaccinated with the non-adjuvanted vaccine. Moreover, pigs vaccinated with antigen containing the highest dose of adjuvant promoted a 13-fold increase in the percentage of antigen-specific CD3⁺/CD8⁺ T cells over pigs vaccinated with antigen alone. Together this work demonstrates the promise of these novel TLR7/8 agonists as effective human vaccine adjuvants.     

TLR7和TLR9在系统性红斑狼疮中的作用

近年来,关于天然免疫在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)发病机制中的作用逐渐成为研究重点。核酸免疫复合物通过与Toll样受体结合激活天然免疫并促进自身抗体的增殖,因此对Toll样受体直接通路的药物调节可能为SLE提供新的治疗途径。     

The activation of CD14, TLR4, and TLR2 by mmLDL induces IL-1β, IL-6, and IL-10 secretion in human monocytes and macrophages

Abstract  

Atherosclerosis is considered a chronic inflammatory disease in which monocytes and macrophages are critical. These cells express CD14, toll-like receptor (TLR) 2, and TLR4 on their surfaces, are activated by minimally modified low-density lipoprotein (mmLDL) and are capable of secreting pro-inflammatory cytokines. The aim of this research was thus to demonstrate that the activation of CD14, TLR2, and TLR4 by mmLDL induces the secretion of cytokines.     

TLR7基因多态性与丙型肝炎病毒感染转归的关系

摘要:目的　探讨TLR7（Toll-Like Receptor 7,）基因多态性与丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus,HCV）感染转归的关系。方法　运用TaqMan-MGB荧光探针法检测1146例健康对照者,299例HCV自限清除者以及410例HCV持续感染者中TLR7多态性位点,比较不同位点基因型与HCV感染转归的关系。结果　在女性人群中,rs179009位点突变基因型GG可增加HCV感染的风险（OR＝2.40,95% CI:1.09～5.27）,rs3853839位点突变基因型CC降低HCV感染慢性化的风险（OR＝0.31,95% CI:0.10～0.94）;单倍型AC和GG可显著降低HCV感染慢性化的风险。结论　TLR7基因多态性可能与女性丙型肝炎易感性及慢性化有关。     

中国HIV感染者IL-2和IL-7参与高效抗反转录病毒治疗的抗病毒免疫反应及其在病毒控制中的作用

目的观察中国HIV-1感染者在高效抗反转录病毒治疗（Highly active antiretroviral therapy,HAART）中,外周血HIV-1RNA、CD4＋T淋巴细胞数量和IL-2、IL-7的相关关系,探讨这些^y链细胞因子与抗HIV病毒免疫应答及其在病毒控制中的作用。方法2009年6月至2010年12月,35椤iI接受初次HAART的慢性HIV-1感染者被纳入本研究并随访48周,检测HAART治疗0、24、48周时的外周血HIV．1RNA定量、CD4＋T淋巴细胞数、IL-2以及IL-7水平,并分析其相关性。结果35例HIV．AIDS在HAART治疗前的IL-2水平[（9．67±2．6）pg／ml]明显低于正常对照值[（27．36±5．05）pg／ml],在经过48周治疗后显著升高[（19．8±3．3）pg／ml],而在HAART治疗前的IL-7水平[（81．74±20．47）pg／ml]明显高于正常对照值[（2．06±1．52）pg／ml],在48周治疗后则显著降低[（8．36±2．16）pg／ml]。IL-2水平在HAART的0、48周与CD4＋细胞计数呈相同变化趋势但相关性不明显（O周：R=0．21,P=0．063;48周：R=0．19,P=0．103）,24周呈正相关（R=0．24,P=0．033）,而IL-7水平在HAART的0周与CD4＋细胞计数呈负相关（R=-0．28,P=0．012）,在24、48周无相关。IL-2水平和HIVRNA病毒载量呈负相关（R=-0．17,P=0．032）,而IL-7水平和HIV RNA病毒载量关系不明显（P=0．76）。结论48周HAART治疗中IL-2和IL-7水平均有明显变化。与CD4＋T细胞计数变化密切相关,与外周血HIV RNA水平有一定关系。提示这些细胞因子在免疫重建和病毒控制中起重要作用。     

单核细胞TLR4介导LPS经ERK1/2信号通道传导的研究

目的探讨Toll样受体4（TLR4）与ERK1/2信号通道的相互关系。方法 收集人单核细胞体外培养，加入不同浓度的TLR4阻断剂（终浓度分别为5μg/mL，20μg/mL，30μg/mL）孵育30min后，以终浓度10ng/mlLPS刺激，8h后收集上清液，ELISA法测上清液IL-6浓度。分空白组：不加LPS及TLR4阻断剂；对照组：只加终浓度10ng/ml的LPS及RPMI1640；试验组：分别加入终浓度为5μg/mL，20μg/mL，30μg/mL的TLR4阻断剂。孵育30min后再加入终浓度10ng/ml的LPS刺激，20min后Western Blot检测ERK1/2的活化。结果LPS导致单核细胞ERK1/2的活化，TLR4受体阻断剂可阻断LPS这一效应。LPS刺激单核细胞引起上清液IL-6水平增加，TLR4受体阻断剂可显著降低IL-6水平。结论LPS可通过单核细胞膜TLR4受体激活胞内ERK1/2信号通道。