miR-21调控HTN1蛋白对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨miR-21调控HTN1蛋白对胃癌细胞迁移和侵袭能力的作用.方法 定量聚合酶链反应检测胃癌组织和胃癌细胞中miR-21的表达情况,过表达miR-21后蛋白免疫印迹法检测HTN1的表达,双荧光素酶实验检测miR-21和HTN1表达在胃癌细胞中的关系,划痕实验检测过表达miR-21对胃癌细胞迁移能力的影响,Transwell侵袭实验检测过表达miR-21对胃癌细胞侵袭能力的影响.结果 miR-21在胃癌组织及胃癌SGC7901细胞中表达水平均降低(P<0.05).miR-21的表达与病理分期及有无淋巴结转移有关(P<0.05).过表达miR-21胃癌SGC7901细胞株荧光素酶活性、HTN1基因和蛋白表达水平均低于对照组(P<0.05).过表达miR-21胃癌SGC7901细胞的迁移速率较对照组减慢,侵袭细胞数目少于对照组(P<0.05).结论 miR-21在胃癌中表达下调,其可以调控HTN1表达影响胃癌细胞迁移和侵袭能力.     

阿司匹林对胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响及其机制研究

目的 探讨非甾体类抗炎药阿司匹林对人胰腺癌细胞株PANC-1侵袭和迁移能力的影响,并对其分子机制进行初步的探讨.方法 胰腺癌PANC-1细胞经低剂量(1 mmol/L和2 mmol/L)阿司匹林作用后,撤药培养,分析细胞活性,并用Transwell细胞培养小室试验检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力的变化,并用酶联免疫吸附测定法检测药物对肿瘤细胞金属蛋白酶2(MP2)活性的影响.结果 PANC-1细胞经低剂量(1 mmol/L)阿司匹林处理24h后,活性无明显改变(t=2.11,P=0.10),但侵袭和迁移能力下降(t=3.93,P=0.02),并且伴随着MMP2活性明显降低(t=4.70,P=0.01).结论 阿司匹林可能通过降低MMP2活性减弱胰腺癌细胞PANC-1的侵袭和迁移能力.     

木姜子乙醇提取物对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响及机制初探

目的：探讨木姜子乙醇提取物（Litsea pungens ethanol extract,LPEE）对肝癌细胞侵袭转移能力的影响及其相关机制。方法：MTT法测定LPEE对肝癌细胞株HepG2和QGY-7703的IC50;transwell迁移实验和matrigel侵袭实验检测LPEE对HepG2和QGY-7703细胞迁移和侵袭能力的影响;qRT-PCR和Western blot检测LPEE对各组细胞中E-cadherin和VEGF基因和蛋白水平的表达变化。结果：LPEE可显著抑制HepG2和QGY-7703细胞穿过transwell小室和matrigel基质胶的细胞数（P<0.05）;50和100 μg·mL^-1 LPEE作用组与0组相比,可明显降低VEGF mRNA和蛋白水平的表达（P<0.05）,而促进E-cadherin mRNA和蛋白水平的表达（P<0.05）。结论：LPEE可抑制肝癌细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制VEGF表达和促进E-cadherin表达有关。     

lncRNA-AC005062.1对结直肠癌细胞侵袭及迁移的影响及其机制研究

目的 研究lncRNA-AC005062.1对结直肠癌细胞侵袭及迁移的影响并研究其机制.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测新鲜结直肠癌及癌旁正常组织中lncRNA-AC005062.1表达差异,通过siRNA转染结直肠癌细胞HT29,敲低lncRNA-AC005062.1表达量,qRT-PCR验证转染效率....     

IFITM2在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 探讨干扰素诱导跨膜蛋白2(IFITM2)在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞迁移和侵袭的影响。方法收集南方医科大学顺德医院2012年1月至2015年1月收治的54例胃癌患者癌组织及对应的癌旁组织样本,检测胃癌与癌旁组织、胃癌细胞MKN45与正常胃黏膜上皮细胞GES-1中IFITM2的表达水平,分析胃癌组织中IFITM2的表达与临床病理特征及预后的关系。沉默IFITM2表达,检测MKN45细胞的迁移和侵袭能力,及对E-cadherin和Vimentin表达水平的影响。结果 胃癌组织及MKN45细胞中IFITM2的表达水平明显高于癌旁组织(P 0.01),胃癌组织中IFITM2的表达水平与TNM分期、肿瘤浸润程度、淋巴结及远处转移情况相关(P 0.05),并与患者的预后不良相关(P 0.05)。沉默IFITM2后,MKN45细胞的迁移和侵袭能力降低(P 0.05),并能上调E-cadherin的表达和抑制Vimentin的表达(P 0.05)。结论IFITM2在胃癌组织和细胞中高表达,通过调控E-cadherin和Vimentin的表达而促进胃癌细胞的迁移和侵袭,并与患者的预后不良显著相关。     

毛萼乙素联合FBXO11基因siRNA对胃癌细胞增殖、迁移侵袭的影响及其机制研究

目的:探讨毛萼乙素(EriB)联合F-box蛋白11(FBXO11)基因siRNA对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制.方法:以人胃黏膜上皮细胞GES-1为对照,Western blotting法检测胃癌MGC-803、MKN-28及BGC-823细胞中FBXO 11蛋白表达.将FBXO11小干扰RNA(si-FB...     

甲氟奎对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制

目的 研究甲氟奎对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制.方法 运用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)法检测甲氟奎(5、10、15、30μmol/L)对食管鳞癌细胞KYSE140的增殖的调控,筛选最适浓度30μmol/L;用β连环素(β-catenin)信号通路激活剂Wnt3a或二甲基亚砜(DMSO)与30...     

粉防己碱对神经母细胞瘤细胞增殖和迁移、侵袭能力的影响及其机制研究

目的:探讨粉防己碱(TET)对神经母细胞瘤细胞增殖和迁移、侵袭能力的影响及其作用机制。方法:以人神经母细胞瘤细胞系IMR-32细胞、SH-SY5Y细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)方法检测浓度分别为0(空白对照)、2.5、5、10、15、20μmol/L的TET对细胞增殖的影响;采用Transwell小室迁移实验和侵袭实验,考察正常对照组(TET浓度为0μmol/L)和TET组(10μmol/L,IMR-32细胞;15μmol/L,SH-SY5Y细胞)的细胞跨膜情况;采用Western blotting法检测按上述浓度TET处理后的IMR-32细胞和SH-SY5Y细胞中金属基质蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、β-catenin、糖原合成激酶3β(GSK3β)、磷酸化GSK3β(p-GSK3β)的蛋白表达水平。结果:5、10、15、20μmol/L的TET可显著降低IMR-32细胞和SH-SY5Y细胞的存活率(P<0.05或P<0.01),其半数抑制浓度分别为10.148、14.461μmol/L。细胞迁移实验和侵袭实验结果显示,与正常对照组比较,TET组跨膜细胞数均显著减少(P<0.01);Western blotting法检测结果显示,与正常对照组比较,TET组细胞中MMP-2、MMP-9、β-catenin、p-GSK3β蛋白表达均显著降低(P<0.01)。结论:TET对神经母细胞瘤细胞的增殖和迁移、侵袭能力具有明显的抑制作用,其机制与下调细胞中MMP-2、MMP-9蛋白表达及抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

溴苯基姜黄素对胆管癌细胞凋亡、迁移和侵袭的影响及机制研究

目的:研究溴苯基姜黄素(GL63)对人胆管癌RBE细胞凋亡、迁移和侵袭的影响,并基于Janus激酶(JAK)/信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路探讨其作用机制.方法:采用MTT法检测不同浓度GL63[0(空白对照,下同)、1.25、2.5、5、10、20、40μmol/L]作用48 h对RBE细胞增殖的影响,并...     

人类表皮生长因子受体 2对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响

目的 研究人类表皮生长因子受体2(HER2)对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响,并探讨其机制.方法 2018年11月至2019年6月,运用实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测永生化的正常胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、BGC-823中HER2的表达;将空载体(pcDNA 3.1)、HER2过表达载体(pcDNA 3.1-HER2)、小干扰RNA阴性对照(si-NC)、HER2小干扰RNA(si-HER2)用脂质体法转染至SGC-7901细胞.噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;Tran-swell小室检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞中p16、p21、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、裂解的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP)、裂解的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达.结果 与正常胃上皮细胞GES-1相比,胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、BGC-823中HER2的表达[(3.02±0.28),(2.51±0.21),(2.36±0.19)比(1.00±0.08)]明显升高,其中SGC-7901细胞中的表达最高(P<0.05);过表达HER2后,SGC-7901细胞的增殖[(1.12±0.09)比(0.61±0.06)]、迁移[(170±15)比(100±9)]和侵袭[(130±12)比(75±6)]能力均明显上调,细胞的凋亡力[(8.03±0.69)％比(19.46±1.44)％]明显下调(P<0.05);敲减HER2则可下调SGC-7901细胞的增殖[(0.59±0.05)比(0.89±0.08)]、迁移[(55±5)比(100±8)]和侵袭[(36±4)比(75±6)]能力,上调细胞的凋亡[(16.82±1.15)％比(8.01±0.65)％]能力(P<0.05).重要的是,过表达HER2可明显抑制SGC-7901细胞中增殖抑制蛋白p16、p21,迁移侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9,凋亡促进相关蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3的表达,敲减HER2具有相反的作用.结论 HER2可促进胃癌细胞的增殖、迁移侵袭,抑制凋亡,其可能与调控功能增殖、迁移侵袭及凋亡相关蛋白表达有关.     

PRPF19对肝癌细胞Huh7增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的:探究PRPF19对肝癌细胞Huh7增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:基于生物信息学分析PRPF19在肝癌中的表达、预后及其药物敏感性,并通过实时荧光定量PCR和免疫组化法验证PRPF19在人体肝癌组织中的表达水平。采用瞬时转染技术在Huh7细胞中敲低PRPF19,并通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹试验验证敲低效果。CCK-8和集落形成试验检测敲低PRPF19对Huh7细胞增殖能力的影响。Transwell和划痕试验检测敲低PRPF19对Huh7细胞迁移和侵袭能力的影响。通过蛋白免疫印迹试验检测p-p53(Ser20)、p53等蛋白的表达水平。结果:PRPF19在肝癌中高表达并与患者的预后显著相关(P<0.05)。与对照组相比,敲低PRPF19后,肝癌细胞Huh7的增殖、迁移及侵袭能力明显降低,p-p53(Ser20)、p53等相关蛋白表达量明显上升(P<0.05)。同时,PRPF19高表达的患者对索拉非尼和舒尼替尼有高敏感性(P<0.01)。结论:PRPF19在肝癌中具有良好的预后价值,敲低PRPF19可能通过激活p53通路抑制肝癌细胞Huh7的增殖、迁移及...     

油酸抑制舌鳞癌细胞侵袭迁移能力的研究

目的 研究油酸对舌鳞癌细胞株CAL27侵袭和迁移能力的抑制作用.方法 配置不同浓度的油酸培养基(50、100、150、200、250、300、350、400μM)培养舌鳞癌细胞株CAL2724h,CCK8实验观察油酸对CAL27细胞的抑制率,计算24h半数抑制浓度(IC50).细胞划痕实验、Transwell侵袭实验和...     

CCR2在胃癌中的表达及其对胃癌细胞侵袭转移能力的影响

目的：探讨CCR2在胃癌中的表达及其对胃癌细胞侵袭转移能力的影响。方法80例新鲜胃癌原发灶组织为原发灶组;术中发现胃癌腹膜转移的20例大网膜上的种植灶为转移组;以20例良性病变的手术切缘正常胃组织标本为对照组。SP免疫组化法检测各组CCR2表达水平。应用彩色病理图像分析系统在高倍镜下测定免疫组化结果。结果3组之间的CCR2阳性表达率存在显著性差异,转移组CCR2阳性表达率显著高于原发灶组和对照组（P〈0.05）。 CCR2在胃癌原发灶中的表达与临床分期、浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）,与年龄、性别、肿瘤大小及分化程度无关（P〉0.05）。结论 CCR2在胃癌中高表达,与临床分期、浸润深度及淋巴结转移,可促进胃癌细胞的胃黏膜转移。     

微小 RNA-590对口腔鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制

目的 探讨微小RNA(miR)-590对口腔鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响和分子机制.方法 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测2014年1月至2017年1月菏泽市牡丹人民医院52例口腔鳞癌组织中miR-590的表达.将口腔鳞癌细胞Tca-8113分为miRNA抑制物阴性对照(anti-miR-NC)组、miR-590抑制物(anti-miR-590)组、空载体(pcDNA3.1)组、大肿瘤抑制基因1(LATS1)过表达载体(pcDNA3.1-LATS1)组、anti-miR-590+小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、anti-miR-590+LATS1小干扰RNA组(si-LATS1).四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞活力,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭数.双荧光素酶报告基因实验和蛋白质印迹法检测验证miR-590和LATS1的靶向调控关系.结果 与癌旁组织比较,口腔鳞癌组织中miR-590的表达水平显著升高[(0.73±0.07)比(0.30±0.03),P<0.05].与anti-miR-NC组比较,anti-miR-590组细胞活力[(0.40±0.04)比(0.78±0.08)]、迁移[(46±5)个比(136±13)个]和侵袭数[(42±4)个比(128±13)个]显著降低(P<0.05);与pcD-NA3.1组比较,pcDNA3.1-LATS1组细胞活力[(0.49±0.05)比(0.78±0.08)]、迁移数[(56±6)个比(136±13)个]和侵袭数[(50±5)个比(128±13)个]显著降低(P<0.05).LATS1靶向负调控LATS1表达.与anti-miR-590+si-NC组比较,anti-miR-590+si-LATS1组细胞活力(0.61±0.06)比(0.40±0.04)、迁移数[(94±9)个比(45±4)个]和侵袭数[(87±9)个比(40±4)个]显著升高(P<0.05).结论 抑制miR-590通过靶向调控LATS1表达从而抑制口腔鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭.     

芒果苷通过抑制糖酵解反应影响胃癌细胞迁移及侵袭

摘 要 目的：考察芒果苷对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其与细胞糖酵解反应的关系。 方法: 考察不同浓度（10,30,90 μmol·L-1）芒果苷对人胃癌SGC 7901和BGC 823细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并检测肿瘤细胞的乳酸及葡萄糖消耗水平,同时将芒果苷与丙酮酸激酶M2（PKM2）抑制剂联合（30 μmol·L-1+ 30 μmol·L-1）给予不同胃癌细胞,初步考察芒果苷影响胃癌细胞迁移及侵袭的机制与胃癌糖酵解反应的关系。 结果: 芒果苷可浓度依赖性抑制不同胃癌细胞的增殖活力,降低肿瘤细胞迁移及侵袭的能力,并减少细胞乳酸及葡萄糖消耗水平,抑制糖酵解反应,抑制PKM2二聚体的表达,与空白对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。与PKM2抑制剂联合使用后,芒果苷联合抑制剂组与单一抑制剂组相较,对肿瘤细胞增殖活力、细胞迁移及侵袭的的调节作用差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论: 芒果苷可通过抑制PKM2二聚体的表达,抑制胃癌细胞糖酵解反应,继而抑制胃癌细胞增殖活力并降低其迁移及侵袭能力。     

miR-125a-5p对卵巢癌细胞的增殖迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨miR-125a-5p对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用的靶基因。方法 购入正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC,卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910各1株,通过实时定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测人卵巢上皮细胞HOSEpiC以及卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平。利用生物信息学方法预测miR-125a-5p的靶基因,构建预测靶基因3’端非编码区（3’-UTR）的野生型（WT）和突变型（mut）荧光素酶报告基因质粒,通过双荧光素酶报告基因法验证miR-125a-5p与预测靶基因的靶向作用。利用慢病毒感染的方法建立稳定过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞,使用荧光定量PCR和Western blot检测靶基因的表达水平。利用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞增殖能力的变化,通过Transwell迁移和侵袭试验分析过表达miR-125a-5p的SKOV3细胞迁移和侵袭能力的变化。结果 正常人卵巢上皮细胞HOSEpiC中miR-125a-5p的表达水平高于卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2和HO8910中miR-125a-5p的表达水平,其中SKOV3中miR-125a-5p的表达水平最低,差异均有统计学意义（P<0.05）,选择SKOV3进行后续实验。生物信息学分析显示,miR-125a-5p能够靶向结合Rab3D的3’-UTR;双荧光素酶报告基因分析证实miR-125a-5p能够靶向作用于Rab3D的3’-UTR。筛选稳定表达miR-125a-5p和si-Rab3D及相应对照的SKOV3细胞,分别命名为SKOV3/miR-125a-5p组,SKOV3/si-Rab3D组,SKOV3/miR-NC组和SKOV3/si-NC组。在SKOV3/miR-125a-5p组中,Rab3D的表达水平低于SKOV3组和SKOV3/miR-NC组,差异均有统计学意义（P<0.05）。细胞增殖能力检测结果显示,与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,SKOV3/miR-125a-5p组在72小时和96小时细胞增殖能力降低,差异有统计学意义（P<0.05）。Transwell迁移和侵袭试验结果显示,SKOV3/miR-125a-5p组分别与SKOV3组和SKOV3/miR-NC组相比,细胞迁移和侵袭能力均显著下降,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 miR-125a-5p能够靶向作用Rab3D,抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

血管生成素1基因转染对胃癌细胞侵袭能力的影响

目的 探讨人血管生成素1(Ang-1)对人胃癌细胞BGC-823基质会属蛋白酶2(MMP-2)表达情况的影响.方法 利用腺病毒作为载体将已构建成功的含Ang-1基因的重组腺病毒(Ad-Ang-1)瞬时转染人胃癌细胞BGC-823为实验组,转染编码绿色荧光蛋白的复制缺陷型腺病毒重组体(Ad-GFP)为阴性对照组,未转染的正常细胞为对照组.应用RT-PCR和Western blot印迹检测三组细胞中MMP-2在mRNA和蛋白表达的情况.结果 MMP-2在实验组中表达明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05).结论 Ang-1能显著提高人胃癌细胞BGC-823的MMP-2的表达,提示Ang-1可能具有促进肿瘤细胞侵袭的作用.     

联合使用脱甲基化药物和紫杉醇对肾癌细胞的侵袭能力影响机制研究

目的：观察联合使用脱氧杂胞苷（ DAC）与紫杉醇（ PTX）对肾患细胞是否存在协同作用,并探究其机制。方法离体培养肾透明细胞癌ACHN细胞株,将120培养皿随机分为空白对照组、DAC组、PTX组、联合组,每组30个。 DAC组：用DAC：0．5、1、2、4、8μmol／L处理3 d;PTX组：用PTX：1、2、4、8、16 nmol／L处理3 d;联合组：用DAC＋PTX处理3 d。使用高速分选流式细胞仪观察T肽协同树突状细胞对肾癌细胞的凋亡率;通过ELISA检测淋巴细胞增强因子（LEF1）和E－cadherin在肾癌细胞中的表达;通过ELISA技术检测凋亡蛋白caspass－3在肾癌细胞中的表达。结果 DAC组、PTX组以及联合组对肿瘤细胞的抑制作用明显,其中联合组对肿瘤细胞的抑制作用最强（ P＜0．05）,而且DAC和PTX对肿瘤细胞的抑制作用与药物浓度成正比（P＜0．05）。与DAC组、PTX组比较,联合组中LEF1的表达水平最低（P＜0．05）,E－cadherin、caspass－3的表达水平最高（P＜0．05）,而且DAC和PTX对LEF1表达的抑制作用、对E－cadherin、caspass－3的表达的促进作用与药物浓度成正比（P＜0．05）。结论 DAC与 PTX联合干预肾癌细胞,具有协同作用,而且LEF1是新的肾癌治疗靶点,DAC与 PTX合用可以提高肾癌细胞的凋亡率,并且降低肾癌细胞的侵袭转移能力。