黄芩总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的观察黄芩总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法 SD大鼠随机分为5组:对照组、模型组、泼尼松龙阳性对照(3.34 mg/kg)组、黄芩总黄酮高剂量和低剂量(50、25 mg/kg)组。大鼠气管内注射博莱霉素制备肺纤维化模型后,各给药组ig给予相应药物,每天给药1次。28 d后处死动物,观察大鼠血清中总抗氧化能力(T-AOC)、还原性谷胱甘肽(GSH)、髓过氧化物酶(MPO)的水平;取固定部位肺组织分别行HE、Masson染色,进行病理组织学检查;RT-PCR法检测黄芩总黄酮对大鼠肺组织中TGF-β1、Smad2、Smad7、α-SMA、胶原I的mRNA表达水平。结果与模型组相比,黄芩总黄酮给药组大鼠血清中T-AOC、GSH水平均升高,MPO水平显著降低;肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻(P<0.05、0.01);TGF-β1、Smad2、α-SMA、胶原I基因表达显著降低,Smad7表达显著升高(P<0.05、0.01)。结论黄芩总黄酮对博莱霉素所致大鼠肺纤维化具有一定的治疗作用,其机制可能与抗氧化损伤、抑制炎症细胞的浸润活化及调控TGF-β1/Smad信号通路有关。     

桔梗皂苷-D对大鼠肺纤维化的干预作用及部分机制研究

目的:研究桔梗皂苷-D(PD)对大鼠肺纤维化的干预作用。方法:50只Wistar大鼠随机分为假手术对照组、模型组、PD 25 mg/kg组、PD 50 mg/kg组、甲强龙组。大鼠一次性气管内滴注盐酸博莱霉素诱导肺纤维化模型。观察各组大鼠的生存状况;检测大鼠血清中I型胶原(C-I)、III前胶原肽(PIIIP)、透明质酸(HA)的含量并进行比较;检测大鼠肺组织TGF-βmRNA的表达情况。结果:PD组大鼠的生存率较模型组高,PD能有效降低大鼠血清中C-I、PIIIP、HA的含量(P0.05),并能下调大鼠肺组织TGF-βmRNA表达(P0.05)。结论:PD可以改善盐酸博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠的一般情况,并通过抑制大鼠肺组织TGF-βmRNA表达,以达到抗纤维化的作用。     

人工冬虫夏草联合糖皮质激素对大鼠肺纤维化的干预作用

目的:探讨人工冬虫夏草(虫草菌液)联合糖皮质激素对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用.方法:50只SD大鼠,随机分为5组:正常对照组、模型组、虫草菌液组、强的松组、虫草菌液联合强的松组(联合组).采用气管内注射博莱霉素建立模型,次日起分别给药灌胃治疗,正常组和模型组给予生理盐水.第28天处死动物,肺组织标本行HE染色及MASSON染色进行病理形态学观察、Ashcroft纤维化评分,碱水解法检测肺组织HYP含量,免疫组化检测肺组织CTGF蛋白表达,酶联免疫法检测肺泡灌洗液上清TGF-β1含量.结果:与模型组相比,虫草菌液、强的松组能够降低肺组织纤维化评分,减少肺组织胶原沉积、HYP含量,下调肺组织CTGF蛋白表达,降低BLAF中TGF-的含量;联合组分别与虫草菌液组、强的松组比较,能够进一步减少肺纤维化评分、胶原面积、HYP含量,进一步下调CTGF蛋白、TGF-蛋白表达.结论:虫草菌液、强的松对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有治疗作用,且虫草菌液联合强的松能产生协同治疗效果.     

虫草复方对博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用及其机制

目的探讨虫草复方对博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用及其机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,复方虫草高、低剂量(150、75 mg/kg)组和醋酸泼尼松(3.33 mg/kg)组,每组18只。除对照外其余各组大鼠采用气管内一次性滴注盐酸博莱霉素造模,对照组大鼠气管内一次性滴注等体积生理盐水。造模后第2天开始给药,对照组和模型组分别ig给予等体积生理盐水。各组动物于7、14、28 d随机处死6只,分别观察大鼠肺指数、肺组织羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及血清中MDA的量和SOD的活性。同时取固定部位肺组织进行病理组织学检查,并应用免疫组织化学法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原在肺组织中的表达;观察各组大鼠动脉血气的变化。结果虫草复方能明显降低肺纤维化大鼠肺指数和肺组织Hyp的量,并可提高血清和肺组织中SOD活性,降低血清和肺组织中MDA和肺组织TGF-β1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达;虫草复方可使肺纤维化大鼠动脉二氧化碳分压[p(CO2)]降低和血氧分压[p(O2)]提高;虫草复方明显改善实验性大鼠肺纤维化程度。结论虫草复方对大鼠肺纤维化具有一定的干预作用,其机制可能与抗脂质过氧化、抑制TGF-β1表达、减少肺泡间质胶原沉积及改善肺呼吸功能有关。     

水蛭对肺纤维化大鼠的影响及机制探讨

目的:观察水蛭对肺纤维化大鼠PAI-1的作用,并探讨其机制及意义。方法:采用气管内注入博来霉素制作大鼠肺纤维化模型,成膜后随机分为两组,模型组(BM组)和水蛭组(HD组),另设鼠龄、体重相匹配的正常对照组(NC组)。28天后ELISA法测定血浆PAI-1含量,并测定其活性,同时检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量。结果:NC组PAI-1含量及活性明显低于其它各组,BM组PAI-1含量及活性高于HD。NC组、HD组HYP低于BM组。结论:水蛭可能通过减少凝血酶在肺内的表达,抑制PAI-1生成及活性,使u PA活性升高,减少纤维蛋白沉积,对肺纤维化大鼠肺组织具有保护作用。     

红豆杉活性成分巴卡亭Ⅲ对大鼠肺纤维化的干预作用

目的：观察红豆杉活性成分巴卡亭Ⅲ对实验性大鼠肺纤维化的干预作用。方法：大鼠随机分为空白组、模型组、强的松组和巴卡亭Ⅲ组。通过气管内注射博莱霉素（BLM）复制肺纤维化模型,于造模后第2天治疗组开始给药,给药后第14天处死大鼠,取肺组织,行HE染色,并行免疫组化细胞外信号调节酶（ERK1）测定。结果：巴卡亭Ⅲ能减轻大鼠肺泡炎症及肺纤维化程度（P＜0．01）,并能减少ERK1的表达。结论：巴卡亭Ⅲ对BLM诱导产生的大鼠肺纤维化有一定的干预作用。     

清金补肺汤对博莱霉素致大鼠肺纤维化干预作用的研究

目的探讨清金补肺汤对实验性大鼠肺纤维化的保护作用及其相关机制。方法将45只清洁级Wistar雄性大鼠随机分为盐水对照组15只、BLM模型组15只和治疗组15只。模型组和治疗组采用一次性气管内注入BLM诱导大鼠肺纤维化模型,盐水对照组在相同条件下给予等量的生理盐水气管内滴注。治疗组造模后第2天起给予清金补肺汤2 mL灌胃,模型组和盐水对照组给予等量的蒸馏水灌胃。各组分别于造模后第7天、第14天和第28天随机处死5只大鼠,留取血清及肺组织。用酶联免疫吸附测定法检测血清中TNF-α的含量;应用HE染色和Masson染色观察肺泡炎和肺纤维化的动态变化。结果病理切片可见模型组造模成功。模型组大鼠血清中的TNF-α含量较盐水对照组各时间点明显升高(P均<0.01);与模型组比较,治疗组各时间点血清中TNF-α含量均明显降低(P均<0.01)。结论清金补肺汤可降低博莱霉素所致肺纤维化大鼠血清中TNF-α的含量;早期应用清金补肺汤干预治疗博莱霉素致肺纤维化大鼠,可减缓其肺纤维化进程。     

芩味胶囊防治肺纤维化的作用及其机制探讨

目的:探讨芩味胶囊对博莱霉素致小鼠肺纤维化的作用。方法:雄性小鼠假手术组经气管注射生理盐水,其他各组经气管注射博莱霉素以制备肺纤维化模型,术后第二天将注射博莱霉素注射的小鼠分为模型组、芩味胶囊2.0,4.0原生药g/kg组,醋酸泼尼松10 mg/kg。每天灌胃给药1次,连续4周。假手术组和模型组给予等体积0.5%CMC-Na溶液,末次给药后24 h,取肺脏称湿重并计算其脏器指数,取右肺测定其羟脯氨酸,左肺用于HE、Masson染色及免疫组化法测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1的表达。结果:模型组肺组织炎细胞浸润明显增加,羟脯氨酸含量明显升高,胶原堆积及α-SMA表达明显增加,与假手术组比较差异均有统计学意义。芩味胶囊2.0,4.0原生药g/kg组均可降低Hyp羟脯氨酸含量,减少胶原堆积及α-SMA和TGF-β1的表达,减少炎细胞浸润。结论:芩味胶囊对博莱霉素所致的小鼠肺纤维化具有较好的防治作用,其作用可能与其抑制TGF-β1表达、减少成纤维细胞活化有关。     

肺康灵对实验性大鼠肺纤维化的作用

肺康灵可显著降低博莱霉素所致肺纤维化大鼠肺系数，明显减轻肺间质成纤维细胞增生及炎细胞浸润，显著降低纤维化大鼠肺组织羟脯氨酸含量，降低血清过氧化脂质含量及单胺氧化酶活性。     

丹参对大鼠肺纤维化的影响研究

目的:观察丹参对博莱霉素(BLM)诱导肺纤维化大鼠肺内羟脯氨酸含量变化及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,以探讨丹参防治肺纤维化可能的作用机制.方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和丹参组各20只.模型组和丹参组大鼠气管内滴注博来霉素(5mg/kg)诱导肺纤维化.造模24h后模型组大鼠用1mL生理盐水灌胃,丹参组大鼠用丹参药液10mL/kg灌胃给药.3组均正常饲养.各组分别在灌胃后第28天处死大鼠,取肺组织样本,按试剂盒方法检测肺内羟脯氨酸含量以判断肺纤维化程度;免疫组化方法检测肺组织CTGF的表达.结果:模型组大鼠肺内羟脯氨酸含量及肺组织CTGF表达均明显升高,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01),丹参组肺组织羟脯氨酸含量及CT-GF表达均明显低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:丹参治疗肺纤维化的作用机制可能与其抑制结缔组织生长因子在肺组织中的表达有关.     

二至丸与失笑散对胆汁淤积性肝纤维化大鼠uPA的调控

目的 研究不同治则中药复方二至丸与失笑散对胆汁淤积性肝纤维化大鼠uPA/PAI-1纤溶途经的调控作用.方法 SD雄性大鼠60只随机分为假手术组和造模组,造模组于1周后随机分为模型对照组、二至丸组、失笑散组及合方组.各治疗组分别给予相应药物灌胃,模型对照组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,4周末处死大鼠.观察内容包括一般情况、肝功能、肝组织病理、Western 印迹法检测uPA蛋白表达、RT-PCR法检测肝组织PAI-1的表达.结果 与模型对照组比较,3个中药复方均能降低胆汁淤积性肝纤维化大鼠血清ALP,ALT,AST水平(P<0.01),失笑散及合方能降低TBil(P<0.01);合方改善ALP,ALT优于两个单方.3个复方均能不同程度地减轻模型大鼠肝纤维化程度(P<0.01),合方优于两个单方.3个复方均能显著降低胆汁淤积性肝纤维化大鼠PAI-1 mRNA表达(P<0.01),提高uPA的表达(P<0.05,P<0.01).合方对上述环节的调控优于两个单方.结论 不同治则中药复方均能改善胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝功能,减轻纤维化程度,合方作用优于两个单方,其机制可能与通过调控uPA/PAI纤溶途径有关.     

益肾活血汤抗单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化作用及机制的研究

目的 探讨益肾活血汤对大鼠肾间质纤维化的拮抗作用及机制.方法 将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、益肾活血汤治疗组、贝那普利治疗组.制备单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型,在术后第21日处死大鼠留取梗阻侧肾组织观察肾间质病理变化,并用免疫组化法测定肾组织中纤溶酶原激活剂抑制物-1（PAI-1）、转化生长因子-β（TGF-β）及结缔组织生长因子（CTGF）的表达,处死前留取24 h尿测定尿蛋白,心腔穿刺取血测定血清尿素氮（BUN）、血清肌酐（Scr）.结果 益肾活血汤组24h尿蛋白、BUN、Scr水平、肾间质纤维化程度及PAI-1、TGF-β、CTGF的表达量均明显低于模型组（P＜0.05）,但与贝那普利组差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 益肾活血汤对肾间质纤维化具有拮抗作用,其机制可能为通过减少PAI-1、TGF-β、CTGF等致纤维化因子在肾组织中的过度表达来抑制肾间质纤维化.     

银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠肺组织结缔组织生长因子表达的影响

目的 观察银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠肺组织中结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 96只健康Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、强的松组(C组)和银杏叶提取物干预组(D组),每组各24只,除A组外,其余各组采用博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,造模第2天起,D组用银杏叶提取物灌胃,C组用强的松混悬液灌胃,A、B组用生理盐水灌胃.每组分别于7,14和28 d随机处死8只大鼠,制备肺组织切片,用免疫组化SABC法分别检测各时间点各组大鼠肺组织中的CTGF的表达.结果 与A组比较,各时间点B、C、D组CTGF表达均显著增高(P＜0.01).与B组比较,各时间点,C、D各组CTGF表达均低于B组(P＜0.01或P＜0.05).结论 CTGF可能在肺泡炎、肺纤维化的发生发展过程中起着重要的作用,其表达程度与肺纤维化的程度密切相关;银杏叶提取物可能通过抑制CTGF的表达对肺组织起着修复及保护作用.     

补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白表达影响

目的:观察补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织中基质金属蛋白-9(MMP-9)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达及肺组织病理变化的影响。方法:雄性SD大鼠,随机分成4组:空白组、模型组、强的松组、补肺汤组。除空白组外,其余3组均采用博莱霉素(BLM)制作肺纤维化大鼠模型,每日灌胃给药,造模后7、14、28天取材。通过免疫组织化学染色方法,检测肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白表达,采用光学显微镜观察肺组织病理变化。结果:与模型组比较,补肺汤组、强的松组各时间点肺泡炎和肺纤维化程度均较轻;与模型组比较,各时间点强的松组、补肺汤组肺组织MMP-9蛋白表达明显减低;与模型组比较,各时间点的强的松组、补肺汤组肺组织TIMP-1蛋白表达明显降低。结论:补肺汤能够抑制早期肺泡炎的发生,降低肺组织MMP-9与TIMP-1蛋白表达,纠正MMP-9/TIMP-1失衡,改善细胞外基质的异常代谢,从而抑制或延缓博莱霉素致大鼠肺纤维化的发生和发展。     

汉防己甲素、维拉帕米治疗肺间质纤维化的实验研究

目的:观察中西药钙拮抗剂对肺间质纤维化的治疗作用。方法:将72只 SD大鼠一次性气管内注入博莱霉素 A_5复制肺纤维化模型,次日随机分组给药,并测定分析各组给药后第7、14、28天肺组织内羟脯氨酸、脂质过氧化物含量、组织病理学变化以及比较各组第28天肺系数。结果:汉防己甲素组及维拉帕米组各期肺组织脂质过氧化物及羟脯氨酸含量均较模型组明显降低(P<0.05或P<0.01),肺系数明显减小(P<0.001或 P<0.01),组织病理学显示肺泡炎及肺纤维化程度均明显减轻,其中汉防己甲素优于维拉帕米。结论:中药钙拮抗剂汉防己甲素治疗肺间质纤维化疗效满意,值得进一步研究。     

扶正化瘀方对博莱霉素诱发大鼠肺间质纤维化的干预作用

目的：探讨扶正化瘀方对肺纤维化的干预作用.方法：采用博莱霉素诱导肺间质纤维化模型,分别观察各组大鼠的死亡率、肺系数、肺组织羟脯氨酸（Hyp）含量以及肺组织形态学变化.结果：与模型对照组比较,扶正化瘀方能显著降低大鼠肺系数和肺组织Hyp含量,改善肺组织纤维化程度.结论：扶正化瘀方具有明显的抗博莱霉素所致的大鼠肺纤维化的作用.     

活血、益气、软坚不同中医治则逆转大鼠肝纤维化的实验观察

目的:对照观察活血、益气、软坚不同中医治则对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的治疗效果,探讨并进一步论证中医不同治则抗肝纤维化的作用机制。方法:采用四氯化碳(CCl4)法复制大鼠肝纤维化模型,分别予以活血、益气、软坚药物组进行治疗实验,并与抑肝纤进行对照观察。实验结束后常规HE及Masson染色观察肝组织病理形态学改变;比色法测定肝组织匀浆羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量;免疫组化方法检测肝组织转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)、1-型纤溶酶原激活物抑制物(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)在肝内的表达及定位;并用多媒体彩色病理图文分析系统对肝组织TGF-1β、PAI-1和胶原纤维进行图像半定量分析。结果:抑肝纤组、活血组、益气组大鼠病理学改变有明显改善,肝组织Hyp含量、胶原纤维面密度及肝组织TGF-β1、PAI-1蛋白表达量较模型组明显下降,软坚组各项指标较模型组变化不明显,各治疗组组间比较亦有显著性差异。结论:活血化瘀可明显下调TGF-1β、PAI-1蛋白表达而发挥抗肝纤维化作用,PAI-1将是治疗肝纤维化的一个潜在靶点;益气健脾法亦具有一定的下调TGF-1β、PAI-1蛋白表达作用,并可能会弥补单用活血化瘀法治疗肝纤维化存在的不足;单用软坚散结对已经形成的肝纤维化无逆转作用;中药复方抑肝纤具有促进大鼠肝纤维化逆转的综合优势。     

化瘀理肺方对肺纤维化大鼠治疗作用的研究

目的：探讨化瘀理肺方对博莱霉素致大鼠肺间质纤维化的治疗作用及机制。方法：将大鼠随机分为对照组、模型组、中药组、激素组,采用博莱霉素经气管内插管注入方法（5mg/kg）建立肺间质纤维化模型,对照组注入生理盐水（0.25mL/只）作为正常对照,从造模后的第2天起中药组给予化瘀理肺方药物灌胃（13410mg/kg）;对照组、模型组予生理盐水灌胃（2mL/只）;激素组予氢化可的松琥珀酸钠腹腔注射（25mg/kg）,于给药后的第14天、28天分别处死,取肺组织行苏木素-伊红（HE）染色观察病理变化情况,免疫组化法测定肺组织中Smad3、Smad7蛋白的表达情况以及应用凝胶酶谱法检测MMP-2/9的活性。结果：中药组可见炎性细胞较少,肺泡结构基本正常,肺泡炎与肺纤维化较轻。中药组Smad3蛋白表达明显低于模型组和激素组;Smad7蛋白表达明显高于模型组和激素组;中药组MMP-2/9的活性明显低于模型组和激素组。结论：化瘀理肺方可明显减轻大鼠肺泡炎和肺纤维化的程度,可能通过Smad信号通路从而影响MMP-2/9的活性发挥作用。     

巨噬细胞与肺纤维化的相关研究进展＊

肺纤维化是一种治愈难度大、死亡率高的慢性进行性间充质性肺疾病，主要是组织的异常修复致胶原异常沉积和肺泡结构紊乱，进而致肺功能进行性障碍的呼吸系统疾病。研究发现，巨噬细胞是具有可塑性和多功能性的免疫细胞群体，在多种疾病中，如心血管疾病、纤维化、癌症中发挥重要的作用。目前，抗纤维化治疗常用的方法有激素类药物、免疫抑制剂、中医药等，但抗纤维化的机制仍不十分清楚。了解巨噬细胞活化及其极化的调控可能为寻找新的治疗手段、设计新的治疗策略提供重要的参考价值。