菱角壳黄酮提取工艺优化及抑肿瘤细胞增殖活性作用

本实验旨在优化菱角壳黄酮提取工艺,并考察其对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用。采用单因素实验考察了提取时间、料液比、乙醇浓度以及提取温度对菱角壳总黄酮得率的影响,并以菱角壳总黄酮得率为响应值进行响应面分析,得出菱角壳黄酮提取的最佳提取工艺。同时,采用CCK-8法测定菱角壳黄酮对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响,并测定其IC₅₀值,考察菱角壳黄酮的抗肿瘤活性。结果表明,菱角壳黄酮最佳提取工艺为:提取时间28 min、料液比1:33 g/mL、乙醇浓度53%。在该条件下菱角壳粗提物总黄酮的提取率可达3.455%±0.16%。5、100、200、400、800 μg/mL浓度的菱角壳黄酮粗提物、纯化物溶液孵育均对Hela细胞增殖均具有较好的抑制作用,且存在时间和剂量依赖性。以作用时间48 h为例,菱角壳黄酮粗提物、菱角壳黄酮纯化物、5-Fu的IC₅₀值分别为271.46、268.16、152.09 μg/mL。因此,同等时间下,菱角壳黄酮提取物的对于Hela细胞的增殖抑制作用弱于阳性对照5-Fu。     

水生蔬菜提取物抑制人肝癌HepG2细胞和人胃癌SGC7901细胞的增殖

为探究水生蔬菜不同部位提取物对人肝癌HepG2细胞和人胃癌SGC7901细胞增殖的影响。本研究对菱角、芡实、莲藕、水芋头、茭白、荸荠和慈姑等7种常见的水生蔬菜的不同部位进行醇提和水提获得15种醇提物、15种水提物。采用CCK-8法检测不同提取物对人肝癌HepG2、人胃癌SGC7901细胞增殖的影响。结果表明菱角壳醇提物、芡实壳醇提物及水提物对HepG2的增殖具有明显的抑制作用及剂量效应,其浓度在400 μg/mL时抑制率分别为70.20%、83.52%、71.89%,相同浓度下阳性药五氟尿嘧啶（5-Fu）的抑制率为73.19%。菱角壳醇提物及水提物、芡实壳醇提物与水提物、芡实肉醇提物、藕节醇提物和荸荠皮醇提物对SGC7901的增殖有较好的抑制作用及剂量效应,其浓度在400 μg/mL时抑制率分别为58.86%、46.79%、41.27%、67.11%、49.93%、57.3%、58.96%,相同浓度下阳性药五氟尿嘧啶（5-Fu）的抑制率为49.33%。Pearson相关性分析表明水生蔬菜提取物对肿瘤细胞增殖的影响与其黄酮、多酚的含量有关。     

菱角梗、菱角壳提取物抑菌活性及其活性成分分析

采用滤纸片扩散法研究菱角梗、菱角壳乙醇提取液及其不同溶剂萃取物的抑菌活性,并考察不同温度、pH、紫外辐照对菱角梗、菱角壳乙酸乙酯萃取物抑菌活性稳定性的影响,最后,采用高效液相色谱法和超高效液质联用法对菱角梗、菱角壳乙酸乙酯萃取物中的成分进行鉴定。结果表明:菱角梗、菱角壳乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和酿酒酵母菌的最小抑菌浓度分别为0.391、0.391、3.125 mg/mL和0.098、0.195、1.563 mg/mL,抑菌效果显示,菱角壳乙酸乙酯萃取物优于菱角梗乙酸乙酯萃取物,二者萃取物均对革兰氏阳性菌具有显著抑菌作用,且效果强于革兰氏阴性菌,对真菌的抑菌作用最弱;菱角梗、菱角壳乙酸乙酯萃取物在温度20~100℃、pH5~9和紫外光处理10~40 min时,均表现出良好的抑菌稳定性。经鉴定,菱角梗乙酸乙酯萃取物中含量最高的是没食子酸和1,2,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖,含量为45.87%,菱角壳乙酸乙酯萃取物中含量最高的是1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖、槲皮素-3-O-半乳糖苷和1,2,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖,含量为57.84%。本文为菱角梗、菱角壳提取物作为抑菌剂的实际应用提供了参考。     

托盘根不同溶剂萃取物的活性成分及其体外抗氧化活性

采用溶剂萃取法对托盘根水提物中的活性物质进行萃取,并测定不同溶剂萃取物中总黄酮、总皂苷和总酚酸的含量,运用DPPH、ABTS和超氧阴离子等体外抗氧化活性模型,研究托盘根不同溶剂萃取物的体外抗氧化活性。结果显示,托盘根正丁醇萃取物中总黄酮、总皂苷、总酚酸含量分别为5.06%、7.41%、6.18%,高于氯仿萃取物和乙酸乙酯萃取物。体外抗氧化活性实验表明,乙酸乙酯萃取物清除DPPH和超氧阴离子的作用最强,IC₅₀分别为94.64 μg/mL和50 μg/mL。正丁醇萃取物清除ABTS的作用最强,IC₅₀值为66.43 μg/mL。结论:托盘根提取物中含有黄酮类、皂苷类、酚酸类成分,氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物具有较好的体外抗氧化活性,为进一步开发托盘根为天然抗氧化剂或健康食品提供理论基础。     

金花葵花黄酮提取物不同溶剂萃取物的抗氧化活性

目的:研究金花葵花黄酮不同极性溶剂萃取物的体外抗氧化能力,并考察黄酮含量与抗氧化活性的相关性。方法:采用不同极性溶剂对金花葵花乙醇提取物进行液-液萃取,得到金花葵花黄酮样品为:石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相、水相萃取物。测定不同极性溶剂萃取物中总黄酮含量,研究各萃取物的清除DPPH自由基能力、清除羟基自由基能力、还原能力、清除超氧阴离子能力和抗油脂氧化能力,分析黄酮含量与抗氧化活性的相关关系。结果:金花葵花黄酮不同极性溶剂萃取物均有抗氧化活性,顺序均为乙酸乙酯相正丁醇相乙醇提取物石油醚相水相。在0.20～1.00 mg/mL的萃取物质量浓度范围内,随着质量浓度的增加,抗氧化活性相应增大。质量浓度在1.00 mg/mL时,乙酸乙酯和正丁醇相萃取物的抗氧化活性接近于V_C。各萃取物中黄酮含量与抗氧化活性呈现较好相关关系(p0.05)。结论:金花葵花黄酮具有较高的体外抗氧化能力,乙酸乙酯相和正丁醇相萃取物可作为分离活性成分的研究重点。     

阳荷不同极性部位体外抑菌活性研究

为研究阳荷的体外抑菌活性,采用70%乙醇回流提取阳荷粉末,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取乙醇提取物,得到乙醇提取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物;用滤纸片对乙醇提取物及不同极性萃取物进行抑菌活性测定,有抑菌活性的部位进一步测定其最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)。试验结果表明阳荷乙醇提取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物,MIC值在3.125 mg/mL~12.5 mg/mL之间,MBC值为25 mg/mL;阳荷乙醇提取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物对枯草芽孢杆菌有较强的抑菌效果,MIC值在3.125 mg/mL~12.5 mg/mL之间,MBC值为25 mg/mL;阳荷乙醇提取物和石油醚萃取物对大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌均有抑菌效果;阳荷乙醇提取物、石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物对苏云金芽孢杆菌没有抑菌作用。阳荷对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有广谱抑菌活性。     

三种菱壳不同极性部位提取物的生物活性

对三种菱壳进行乙醇提取并分级分离获得不同极性部位提取物,分析其多酚、黄酮和皂苷含量,并利用DPPH和Fe3+还原力体系评价抗氧化能力,MTF法考察体外抑癌活性 不同极性部位对比表明,乙酸乙酯相的多酚和黄酮含量最高,氯仿相的皂苷含量最高;乙酸乙酯相和正丁醇相具有较高的DPPH自由基清除能力和Fe3+还原力;乙酸乙酯相和氯仿相均对胃癌细胞SGC7901的生长有抑制作用,且前者优于后者.不同菱壳对比发现,四角菱壳的多酚含量最高,无角菱壳的黄酮和皂苷含量最高;四角菱壳的抗氧化活性最强;无角菱壳的抑癌活性最强.     

石榴皮多酚超高压提取物的纯化、分离及功能性研究

为探明超高压提取石榴皮多酚的组分和功能特性,研究了石榴皮多酚超高压提取物的大孔树脂纯化和有机溶剂分级萃取,并对提取物、纯化物和分级产物的体外抗氧化活性和抑菌性能进行了测定。结果表明:大孔树脂纯化物的总酚含量高达77.40%,且抗氧化活性和抑菌性能均有显著提高;HPLC测定结果显示,大孔树脂纯化未改变多酚种类;有机溶剂分级萃取法能有效地将纯化物进一步分离,其中正丁醇相的萃取得率达到55.28%;不同萃取相产物的总酚含量大小顺序为:正丁醇相>乙酸乙酯相>水相,它们的抗氧化活性强弱顺序为:乙酸乙酯相>正丁醇相>水相;正丁醇相产物的抑菌活性最高,显著高于水相和乙酸乙酯相。     

水生蔬菜提取物抑菌活性研究及其在冷鲜鸭肉保鲜中的应用

为探究7种常见水生蔬菜不同部位提取物抑菌能力及对生鲜鸭肉的保鲜效果,应用福林酚比色法以及铝盐显色法测定提取物中总酚、总黄酮含量,采用抑菌圈法及MIC值测定检测其对冷鲜肉常见腐败菌的抑菌能力,将筛选后的提取物应用于冷鲜鸭肉保鲜。化学成分测定结果表明:芡实壳提取物、菱角壳提取物的黄酮含量较高,其中芡实壳醇提物、芡实壳水提物黄酮含量高达(45.1261±0.6307)%、(40.4707±0.5891)%;芡实壳提取物、菱角壳提取物、藕节提取物多酚含量较高,其中芡实壳醇提物、水提物多酚含量为(43.9588±0.0969)%、(38.5691±0.1937)%。抑菌圈法以及MIC实验结果表明:菱角壳提取物、芡实壳提取物、芡实肉醇提物对金黄色葡萄球菌、腐败希瓦氏菌、假单胞菌、热杀索丝菌、乳酸菌均有抑菌效果,其中菱角壳醇提物、菱角壳水提物、芡实壳醇提物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度达12.5 mg/mL,抑菌效果强于阳性对照ε-聚赖氨酸。初步相关性分析可知提取物的抑菌效果与其黄酮、多酚的含量有显著相关性。将筛选后的菱角壳醇提物、芡实壳醇提物及水提物应用于冷鲜鸭肉保鲜,可延长其货架期1～2 d。     

栓皮栎橡子壳多酚的体外抗氧化与抑菌活性研究

为开发橡子壳功能成分,采用溶剂萃取、化学定性、光谱分析及体外清除自由基、抑菌试验探索了秦巴山区栓皮栎橡子壳多酚的功能特性。结果表明:橡子壳可提取4.39%的粗多酚,经乙酸乙酯、正丁醇和水萃取分离可得到3类萃取物,经紫外光谱和红外光谱分析表明均含有酚羟基、羰基、芳烃C=C骨架、C-H键和C-O-C键结构,为多酚类物质;HPLC分析表明乙酸乙酯萃取物以鞣花酸为主,含有4种多酚,正丁醇萃取物中含阿魏酸、鞣花酸、没食子酸、表没食子酸儿茶素、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、原儿茶酸、咖啡酸、表儿茶素没食子酸酯、山奈酚等11种酚类物质,水萃取物以阿魏酸含量最高,含4种多酚;体外清除DPPH·能力为Vc水萃取物正丁醇萃取物粗提物乙酸乙酯萃取物,清除ABTS~+·能力为Vc正丁醇萃取物水萃取物乙酸乙酯萃取物粗提物,清除·OH能力为Vc水萃取物粗提物正丁醇萃取物乙酸乙酯萃取物;粗提物及溶剂萃取物均对金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、大肠杆菌和沙门氏菌具有不同程度抑制活性,抑菌能力为乙酸乙酯萃取物正丁醇萃取物粗提取物水萃取物。证明橡子壳多酚含量高,种类多,具有较强抗氧化和广谱抑菌活性。     

桔梗根提取物不同溶剂萃取物的抗氧化活性

该试验对桔梗根提取物用不同溶剂进行萃取,并对不同溶剂萃取物中总多酚、总黄酮的含量和抗氧化活性进行比较分析。选取石油醚、正丁醇、乙酸乙酯和正己烷对桔梗根提取物水溶液进行液-液萃取,得到样品不同溶剂萃取物。测定不同溶剂萃取物总多酚、总黄酮的含量及其抗氧化活性。桔梗根提取物正丁醇萃取物中总多酚含量最高,石油醚萃取物中总黄酮含量最高。各溶剂萃取物表现出不同程度的抗氧化活性,并呈现剂量依赖性,顺序均为:正丁醇>石油醚>乙酸乙酯>正己烷。正丁醇和石油醚萃取物可被用于总多酚和总黄酮的分离纯化;综合考虑抗氧化活性,正丁醇萃取物可被用来作为天然抗氧化剂应用于食品和药品领域。     

Antiproliferative effects of sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) extracts on human colon and liver cancer cell lines

Sea buckthorn berries contain many bioactive compounds that have anticancer properties. To investigate whether the antiproliferative effects could be associated with the presence of certain compounds, a sequential extraction was performed. The extraction started with heptane followed by ethyl acetate, ethanol, and water. A second protocol using ethanol:water (1:1) was also used. The contents of the extracts were determined and their effects on cell proliferation were investigated in both Caco-2 and Hep G2 cells. The ethyl acetate fraction was exclusively found to contain high levels of ursolic acid, together with low amounts of phenolics. The ethanol:water extracts contained high levels of phenolic compounds and proanthyocyanidin, but little ursolic acid. When the antiproliferative effects were examined, the strongest inhibitory effect was found in the ethyl acetate extract for the Caco-2 cells and in the ethanol:water extract for the Hep G2 cells. The antiproliferative effects were in both cases dose-dependent and were in the case of the ethyl acetate extract associated with an increase in apoptosis. The results obtained show that the choice of extraction solvent is of considerable importance and that ursolic acid might be more important than the polyphenols in inhibiting the cancer cell proliferation.     

孜然乙醇提取物的工艺优化及对酪氨酸酶活性的抑制作用

以孜然为原料,在单因素实验的基础上,以酪氨酸酶抑制率为指标,采用响应面法优化孜然乙醇提取物的提取工艺,并测定不同极性部位对酪氨酸酶的影响及孜然乙醇提取物中主要活性成分的含量。结果表明,孜然乙醇提取物抑制酪氨酸酶的最优提取工艺为:乙醇体积分数71%,液料比16:1 (mL/g),提取时间2.2 h,提取温度83 ℃,在此条件下其对酪氨酸酶活性的抑制率达(42.61%±0.56%),与预测值43.20%接近,表明响应面分析的结果可靠;孜然乙醇提取物中多酚、黄酮、皂苷、多糖四种活性成分的含量分别为(1.35%±0.03%)、(4.40%±0.29%)、(0.76%±0.04%)、(4.89%±0.28%);孜然乙醇提取物不同极性部位对酪氨酸酶均有抑制作用,且呈浓度依赖关系,其IC₅₀大小顺序为:水相 > 石油醚相 > 正丁醇相 > 乙酸乙酯相。因此,优化得到的孜然乙醇提取物抑制酪氨酸酶的提取工艺合理、可行,乙酸乙酯和正丁醇部位对酪氨酸酶活性的抑制能力较强,多酚、黄酮、皂苷、多糖等都可能是孜然乙醇提取物抑制酪氨酸酶的功效成分。     

三叶青茎部不同溶剂提取物的功能成分、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性研究

目的 以三叶青茎部为原料,探究三叶青不同溶剂提取物的功能成分、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性。方法 采用乙醇超声法提取三叶青,获得醇提液及残渣。醇提液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对其进行分步萃取,残渣则采用蒸馏水多次提取,最终得到4种提取物。分别测定4种提取物总酚、总黄酮、总皂苷、总多糖、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性,并进行相关性分析。结果 4种提取物中乙酸乙酯萃取物总酚、总黄酮、总皂苷含量最高,分别为40.22%±1.01%、38.56%±0.64%、6.15%±0.21%,正丁醇萃取物总多糖含量最高,为9.29%±0.25%。各萃取物均具有抗氧化和酪氨酸酶抑制活性,其中乙酸乙酯萃取物清除1,1-二苯基-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、超氧阴离子、2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-3-氧代-1-氧(2-phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-3-oxide-1-oxyl,PTIO)自由基、羟自由基能力和铁离子还原能力(ferric reducing antioxidant power, FRA...     

蛇菰提取物体外抗氧化活性研究

采用DPPH·法及Fe3+ 还原力法对蛇菰提取物的抗氧化活性进行研究,分别测定蛇菰乙醇提物、石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水层部分、水提粗多糖及碱提粗多糖的抗氧化作用,同时以VC 作为阳性对照。结果表明：蛇菰提取物具有较强的抗氧化活性,尤其是乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、总醇提取物及水提粗多糖;它们对DPPH·的清除作用与VC 相当,其中乙酸乙酯提取物IC50 值为6.0μg/mL,活性略高于VC,同时以上提取物对Fe3+ 也具有很强的还原能力。     

红豆越橘不同溶剂萃取物组成及抗氧化相关性

以矮丛红豆越橘为研究对象,用体积分数95%乙醇提取后,分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,评价乙醇粗提取物和不同溶剂萃取物中总酚、总黄酮、总花色苷、齐墩果酸含量及体外抗氧化能力(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐自由基(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS~+·)清除能力)。红豆越橘粗提取物及不同溶剂萃取物均具有一定的抗氧化活性,其中乙酸乙酯、正丁醇萃取物的抗氧化活性较强,乙酸乙酯萃取物具有最好的DPPH自由基清除能力(半抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC_(50))为0.27 mg/m L)与ABTS+·清除能力(IC_(50)为0.05 mg/m L)。不同溶剂萃取物的抗氧化活性与总黄酮和总酚的含量具有较强的相关性。     

黄花倒水莲不同极性部位抗氧化和降血糖活性研究

探究黄花倒水莲醇提物的不同萃取物的抗氧化和降血糖作用。采用95%乙醇制备黄花倒水莲提取物,通过有机溶剂萃取法对其进行纯化,分别得到石油醚部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分、氯仿部位和水相部分;采用Folin-Ciocalteu法分别测定其多酚含量,采用NaNO₂-Al(NO₃)₃法分别测定其黄酮含量;通过ABTS法、DPPH法、羟自由基法、α-葡萄糖苷酶抑制活性来评价黄花倒水莲的体外抗氧化、降血糖活性。结果显示,黄花倒水莲醇提物中多酚、黄酮含量丰富,经萃取分段后乙酸乙酯萃取物中多酚含量最高,可达(483.9±0.8)mg/g,石油醚部位黄酮含量最多高达(53.1±0.57)mg/g。黄花倒水莲醇提物及各萃取物均表现出很好的抗氧化能力。ABTS总抗氧能力显示乙酸乙酯部位抗氧化活性最强,其对羟自由基,DPPH自由基清除率远高于阳性对照V_C,此外其对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制活性(IC₅₀=(0.064±0.013)mg/mL),其作用强度远高于阳性对照阿卡波糖(IC₅₀=(0.867±0.032)mg/mL)。因此,黄花倒水莲各部位均有抗氧化,降血糖作用,乙酸乙酯部位最佳,可能活性成分为多酚类化合物。     

维药材小檗果提取物的体外抑菌实验研究

观察小檗果不同极性提取物的体外抑菌活性。采用微孔板法和对倍稀释法研究小檗果不同极性提取物对变异链球菌和大肠杆菌生长及其生物膜形成的影响。结果显示,乙醇、水、乙酸乙酯和正丁醇提取物对变异链球菌生物膜的形成有一定抑制作用,其中乙醇和水提取物抑制作用很强;乙酸乙酯提取物对大肠杆菌的生长有一定抑制作用,正丁醇、乙酸乙酯、氯仿提取物对大肠杆菌生物膜的形成有一定抑制作用,其中氯仿提取物的抑制活性最强。小檗果含有有效抑制供试菌生长及其生物膜形成的活性成分,值得进一步研究开发。