胞苷合成途径改造对大肠杆菌嘧啶核苷发酵的影响

嘧啶核苷包括尿苷和胞苷,是生产抗病毒和抗肿瘤药物的重要中间体.为获得胞苷高产菌,该研究以高产尿苷的大肠杆菌UR6为出发菌株,利用CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术对其进行了一系列的代谢工程改造.结果显示,cdd、cmk和ygdH 3个基因的敲除阻断了胞苷及其前体物的主要降解途径,使胞苷产量达到了2.8 g/L,...     

金属离子及添加表面活性剂对谷氨酸发酵的影响

在谷氨酸发酵过程中,用单因素实验方法研究不同金属离子和表面活性剂对谷氨酸发酵的影响,利用Design Expert 7.0软件响应面分析法优化最适合谷氨酸合成的金属离子浓度以及表面活性剂的加入时机对谷氨酸发酵的影响。研究表明,发酵培养基中金属离子Mg2+浓度为0.204g/L,K+浓度为1.003g/L,最适宜于谷氨酸棒杆菌合成谷氨酸,提高发酵水平,并且在发酵过程中OD为0.40时,添加0.2g/L的Tween-80可以增加谷氨酸的产量。      

表面活性剂对大肠杆菌产L-鸟氨酸的影响

系统研究了表面活性剂种类(Tween-40、Tween-60、Tween-80、曲通-X-100(Triton X-100)、十二烷基硫酸钠(SDS)、十六烷基三甲基溴化胺(CTAB))、表面活性剂添加浓度以及表面活性剂添加时间对大肠杆菌BW25113生长和发酵产L-鸟氨酸的影响。研究结果表明,发酵0h添加浓度范围为0.1g/L 2g/L的表面活性剂时,Tween-40、Tween-60、Tween-80、Triton X-100和SDS对大肠杆菌BW25113的生长和L-鸟氨酸的产量均无影响,而CTAB对L-鸟氨酸生物合成有一定的促进作用。CTAB的作用效果因CTAB的添加浓度和添加时间的不同而有所差异。发酵8h添加与0.1g/L为CTAB最适添加时间和最佳添加浓度。在该条件下,添加CTAB对大肠杆菌BW25113发酵产L-鸟氨酸的促进作用最大,L-鸟氨酸产量可达743mg/L并且几乎不影响大肠杆菌BW25113的生长。与不添加CTAB的对照组相比,L-鸟氨酸产量提高1.25倍,发酵周期也缩短10h。     

大肠杆菌cdd和thrA基因的敲除及其对胞苷积累量的影响

以大肠杆菌AU39作为出发菌株,通过基因工程手段对其进行改造,旨在提高胞苷产量。首先,通过Red重组系统敲除了大肠杆菌AU39基因组上的胞苷脱氨酶基因cdd,阻断了胞苷的分解代谢;敲除了E．coliAU39（Acrid）基因组上的高丝氨酸脱氢酶基因thrA,阻断天冬氨酸向高丝氨酸的代谢途径。然后,分别对不同基因缺失菌株进行培养发酵,与出发菌株E．coliAU39相比,两株突变株都有不同程度的胞苷积累,E．coliAU39（Acdd）与E．coliAU39（AcddAthrA）的胞苷产量提高了1．25倍与1．6倍,而尿苷产量均相对有所降低。     

胞苷的发酵培养基优化

为了提高大肠杆菌生产胞苷的能力,研究了培养基中碳氮源对菌株生产胞苷的影响,从而确定发酵培养基的最适碳源、氮源,并同时确定其最适使用浓度;经实验验证,发酵培养基中的最适碳源为甘油,其使用浓度为80g/1;最适氮源为酵母膏和蛋白胨,其使用浓度分别为20g/l和5g/l.在优化的培养基条件下,胞苷积累量相较于初始培养基提高了57.9％.     

绿色表面活性剂烷基多苷的合成研究

以葡萄糖、十二醇为原料，采用直接法合成了十二烷基多苷，研究了反应温度、压力、糖醇量比、催化剂用量等因素对产品得率的影响，获得了最佳的合成工艺为：反应温度115℃，压力392Pa，醇糖量比6：1，催化剂用量为1％（对葡萄糖质量）．     

表面活性剂对谷氨酸结晶的影响

本文介绍了表面活性剂对等电点提取谷氨酸的收得率之影响。通过正交试验确定提取过程的最佳条件。试验结果表明,它可使等电点法收得率提高10～20％。     

介绍几种绿色表面活性剂

绿色表面活性剂是近年来表面活性剂工业的发展方向。它具有极高的安全性 ,生物降解性 ,且性能可靠 ,应用广泛等特点。有逐渐取代传统表面活性剂的趋势。1、茶皂青 :是一种五环三萜类皂素 ,是从山茶科植物种子提取的一种糖式化合物。茶皂素是一种天然非离子表面活性剂 ,具有良好的去污、乳化、分散、润湿及发泡功能。有如下三方面应用 :①作洗涤剂 :其具有很强的抗硬水性能 ,即在硬水中有很好的去污力 ,以茶皂素配制的洗涤剂 ,洗涤丝毛织物 ,具有保护作用 ,又使织物显得亮丽。用其配制的香波 ,有松发、止痒、祛头屑 ,洗发后 ,头发乌黑光亮 ,…     

不同有机氮源对发酵法生产肌苷影响的研究

以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HX1026为研究对象,研究大豆蛋白胨、酵母粉、玉米浆干粉和豆粕水解液4种有机氮源对 发酵法生产肌苷产量的影响。 结果表明,以豆粕水解液为有机氮源时,肌苷产量高于其他有机氮源,其中山东1号豆粕水解液摇瓶发 酵肌苷产量最高,达到31.2 g/L。在20 L发酵罐验证实验中,肌苷产量达到51.2 g/L,发酵罐中肌苷晶体的形成过程清晰可见,进一步证 实山东1号是最适合B. subtilis HX1026发酵生产肌苷的有机氮源。 山东1号的主要技术参数如总氮含量、氨基氮含量、氨基氮/总氮比 值分别是3.22%、2.06%、0.639,可以作为肌苷发酵生产过程中选择有机氮源的标准,以确保肌苷发酵过程的稳定性。     

不同培养基对耶氏解脂酵母合成共轭亚油酸的影响

为了提高共轭亚油酸(CLA)在耶氏解脂酵母重组菌株中的产量,选择YEA、YPD、YP2D4、YNBDO2和YNBDL25种培养基,对其进行摇瓶发酵,分析其生长状态,并利用气相色谱法测定菌体中的总脂含量及脂肪酸组成.结果表明:培养基中充足的碳源和氮源是提高菌体生物量及重组蛋白表达量的前提;在培养基中添加脂肪酸显著提高了菌体中的总脂含量和t10,c12-CLA产量;在5种培养基中,YNBDL2是最适合t10,c12-CLA合成的培养基,其培养基中t10,c12-CLA产量为185.8 mg/L,是YPD培养基中t10,c12-CLA产量的13倍.     

不同还原性碳源对重组大肠杆菌厌氧发酵生产丁二酸的影响

以过量表达苹果酸酶的大肠杆菌NZN111为出发菌株,考察菌体对不同碳源的利用情况,并用3L发酵罐以不同还原性碳源作为底物测定发酵过程中菌体生长、代谢物浓度以及NADH量和氧化还原电位值(ORP)的变化.结果表明,以甘露醇、葡萄糖和葡萄糖酸钠作为碳源时,丁二酸收率分别为99.7%,83.0%和40.5%,还原性越强的碳源发酵过程产生的NADH量越多,且NADH量随着发酵时间逐渐降低,发酵结束时ORP分别为-358mV,-367mV和-384mV.由此可知,还原性越强的碳源产生的NADH量越多,发酵结束时丁二酸产量越高,副产物乙酸产晕越低,氧化还原电位值越高.     

不同发酵剂对红枣果酒发酵品质的影响

选取4种不同的发酵剂（帝伯仕LA DELICIEUSE活性干酵母（LA-D）、安琪酵母、清香型酒曲和薯曲）分别对红枣进行发酵,通过对感官评分、酒精度、色度以及发酵过程中营养成分含量变化和抗氧化活性等指标进行比较,筛选出一种性能较优的发酵剂。结果表明,LA-D酵母发酵酒的色泽透亮,为琥珀色,苦味较小,枣香味浓郁,感官评分达88.5分,酒精度为10.6%vol;在发酵第12天,VC含量为213.37 mg/100 mL、总黄酮含量为3.49 mg/mL、氨基酸态氮含量为933.3 mg/100 mL,均高于其他三种酵母发酵酒,总多酚含量为0.212 mg/mL,仅次于清香型酒曲发酵酒。枣酒的抗氧化性实验结果表明,在发酵末期,LA-D酵母发酵酒的还原力、羟基、超氧阴离子、DPPH自由基清除率分别为2.425、77.38%、88.75%、92.8%。通过以上实验,分析得出LA-D酵母是最适合红枣果酒发酵的酵母。     

Lipase production by solid fermentation of soybean meal with different supplements

The aim of this work was to study the production of extracellular lipases by solid state fermentation in soybean meal with different supplements. Lipase production by two microorganisms, screened by their potential for lipase production, was followed in terms of hydrolytic activity at different pH values(4, 7 and 9). The supplementation of the medium with urea and soybean oil significantly increased the enzyme production for all studied pH and microorganisms. Microorganism Penicillium P58 and P74 showed the possibility of production of different lipases with alkaline and acidic characteristics. In soybean meal supplemented with urea and soybean oil, this microorganism yielded 139.2 and 140.7U lipase/g of dry substrate in 48 h of fermentation, in alkaline and acidic conditions, respectively. Different behavior was observed when the enzyme extract was evaluated in neutral conditions, which yielded 180.0U lipase/g in 72 h. A new promising lipase producer strain was testedon soybean meal with different supplements. The strain produced a lipase with high activities by solid state fermentation of soybean meal supplemented with urea and soybean oil.     

全营养流加对谷氨酸棒杆菌发酵产L-异亮氨酸的影响

在谷氨酸棒杆菌发酵产L-异亮氨酸的过程中,发酵后期菌体活力变弱,副产物增多,是限制L-异亮氨酸产业化的主要因素.研究通过3个阶段全营养流加策略探究最适发酵条件.首先,为解决L-异亮氨酸发酵中后期菌种活力下降的问题,实验通过利用发酵中后期全营养培养基流加策略,使得L-异亮氨酸达到了33.0 g/L.其次,为了解决初始发酵...     

表面活性剂偶联原位萃取发酵对阿维拉霉素产量的影响

以本实验室筛选获得的绿色产色链霉菌(Streptomyces viridochromogenes)SVT-12为发酵工艺探讨的出发菌株,根据阿维拉霉素为细胞内产物的原理,通过向培养基中添加大孔树脂X-5和表面活性剂叶温-80,尝试通过大孔树脂吸附发酵液中的阿维拉霉素,利用表面活性剂改变细胞膜的通透性,降低阿维拉霉素代谢合成的负反馈抑制作用,提高抗生素发酵产量.结果表明,培养基中添加大孔树脂X-5和0.25%的叶温-80时可显著提高抗生素的发酵产量.     

不同营养元素对紫色红曲霉液态发酵产酯化酶的影响初探

以紫色红曲霉（Monascus purpureus）FBKL3.0018为研究对象,发酵产酯化酶的酶活力为考察指标,初步探究了维生素、氨基 酸及其他营养元素等对紫色红曲霉FBKL3.0018产酯化酶的影响。 结果表明,在发酵培养基中分别添加0.20%维生素B2、0.3% L-谷氨酸、 0.7% D-半乳糖对菌株产酯化酶的能力较好,其中添加0.7% D-半乳糖对产酯化酶起显著促进作用,酯化酶酶活最大值为919.12 U/mL, 而蔗糖对酯化酶酶产量影响最小,但对红曲霉生物量产量起积极作用,最大生物量为68.94 mg/mL。 结果显示,酯化酶酶活与相应的 生物量积累量不呈正相关。