地高辛单克隆抗体的研究——Ⅱ.特异性单克隆抗体对地高辛抑制家兔红细胞膜Na~+,K~+-ATP酶活性的拮抗作用

为探讨特异性抗体解除洋地黄毒性作用的机制,应用由淋巴细胞杂交瘤技术制备的高亲和力抗地高辛特异性MAb,研究了特异性抗体对地高辛抑制家兔红细胞(RRBC)膜Na~+,K~+-ATP酶活性的拮抗作用。实验结果表明,特异性MAb FD8可高效拮抗地高辛引起的Na~+,K~+-ATP酶活性抑制。10~(4·26)稀释的FD8 MAb腹水在试管内可使4ng/ml地高辛引起的酶活性抑制恢复达50％。给地高辛中毒动物静脉注射FD8 MAb腹水后,RBC膜Na~+,K~+-ATP酶活性抑制迅速恢复,RBC内Na~+、K~+离子浓度异常也得到恢复。本研究从受体水平证实了特异性MAb解除地高辛毒性的作用机制。     

精氨酸加压素对慢性肾衰大鼠心功能及其心肌细胞钠-钾-ATP酶活力的影响

用SD大鼠制作慢性肾衰(CRF)动物模型,观察其血浆与心肌精氨酸加压素(AVP)含量的变化;CRF大鼠静脉分别注射AVP及其抗血清,观察其对平均动脉压、左心室压峰值和心肌细胞钠-钾-ATP酶(Na~+,K~+-ATP酶)活力的影响。结果表明,CRF~+大鼠血浆及心肌AVP含量与血肌酐水平同步增高;静脉注射AVP标准品,可使心肌Na~+,K~+-ATP酶活力明显降低,并加重心功能指标的异常变化;而给予AVP抗血清,则可改善心功能,对心肌有明显的保护作用。提示ATP含量异常增高所引起的Na~+,K~+-ATP酶泵转运动力学损害,可能参与CRF时心功能不全的病理过程。     

内毒素对兔骨骼肌细胞外液容积、钠钾离子及其Na~(+)-K~(+)-ATP酶活性的影响

本实验以氚水和Na_2~(35)SO_4为标记物,观察了内毒素对兔骨骼肌细胞外液容积(ECV)、Na~+、K~+含量以及(Na~+-K~+)-ATP酶活性的影响。实验结果显示,动物静注内毒素(0.5mg/kg)后10小时骨骼肌ECV、Na~+、K~+含量和(Na~+-K~+)-ATP酶活性均无显著变化;但血K~+浓度自内毒素注射后3小时即有显著下降。     

钠离子和洋地黄的心脏作用

多年来,已形成一个系统的假设来解释洋地黄甙如何与Na~ /K~ -ATP转运酶相互作用而增加心肌收缩力。在讨论细胞内Na~ 的增加如何刺激强心甙与Na~ 泵的进一步结合,减少泵的储备能力量,从而增强药物作用时,扩充了这种假设。假设中有缺陷的环节仍是Na~ -Ca~(2 )交换机制的确切作用。阐明这一环节,在发展更安全的强心药物的战略中是重要的。     

强心甙对羊心脏浦肯野纤维钠泵活动的抑制作用

强心甙在心功能不全及心律失常的药物治疗中占有极重要的位置。已有实验证明,强心甙可与细胞膜Na.KATP酶结合并抑制其活性。本工作在羊心脏浦肯野纤维标本上,用离子选择电极监测细胞内Na~ 活度(aNa)及K~     

γ-氨基丁酸受体的性质与功能

γ-氨基丁酸(GABA)是哺乳动物中枢神经系统的主要抑制性神经递质。GABA能系统的功能紊乱可导致许多神经、精神系统的疾病。因此,近年来围绕着GABA受体的生化、药理及其功能开展了大量的研究工作。本文主要就七十年代以来有关GABA受体性质及功能方面的研究进展作一简单介绍。GABA受体的性质早期的放射性标记GABA结合实验集中于依赖Na~+的结合系统。1974年,Zukin等人发现中枢神经系统中除了依赖Na~+的~3H-GABA结合部位外,还有一高亲和力的     

钙对心肌ATP酶的损害及镁的保护作用

本工作在大鼠心肌肌膜观察到,Mg~(2+)为心肌Na~+-K~+-ATP酶激活所不可缺少的因素,当Mg~(2+)浓度在0～6mM时,Na~+-K~+-ATP酶及Mg~(2+)-ATP酶活性与其密切相关;当超过8 mM时,ATP酶总活性不变,但Na~+-K~+-ATP酶/Mg~(2+)-ATP酶之比值增高。高浓度Ca~(2+)对于Na~+-K~+-ATP酶及Mg~(2+)-ATP酶均具有抑制作用,而提高Mg~(2+)浓度可部分地拮抗高Ca~(2+)的损伤作用。     

大鼠肝细胞泌乳素受体的研究

本文以~(125)I-oPRL为放射催标记配体,利用受体放射分析法,对哺乳期大鼠肝细胞泌乳素受体进行了研究。结果表明。大鼠肝细胞泌乳素受体与泌乳素的结合具有高度特异性和可饱和性,而且受反应时间和pH值大小的影响;这种结合并非简单的双分子反应,大鼠肝细胞泌乳素受体很可能存在两种亲和力高低不同的结合位点(Kd_1=3.20×10~(10)M,Kd_2=1.26×10~(-8)M)或负协同调节。本研究为将来深入开展泌乳素对肝脏机能调节机制的探讨打下了基础。     

大鼠肾远端小管Na^＋—K^＋—腺苷三磷酸酶的光镜和电镜技术

Na~+-K~+-腺苷三磷酸酶(Na~+-K~+-ATP酶),在肾重吸收Na~+的过程中起着重要的作用,具有维持细胞内Na~+与细胞外K~+按比例进行交换的作用,它在肾中分布不均,研究该酶在肾小管中分布情况对了解肾Na~+重吸收功能及病理变化有一定的意义.本实验将Mayakara等人的柠檬酸铅法,稍加改变,应用对硝基苯酚磷酸(P--nitrophenylphosphate Na salt P-NPP钠盐)作底物,可获同样效果,灵敏度高,结果可靠.     

血浆脂质对红细胞膜Na~ -K~ -ATP酶活性的影响

Na~ -K~ -ATP酶广泛地存在于细胞质膜中,它对维持细胞内低Na~ 、高K~ 浓度以及正常的细胞生理功能起着重要作用。在高血压、肥胖等病理情况下,红细胞(RBC)Na~ -K~ -ATP酶活性降低。高胆固醇(Ch)环境对其有抑制作用,但国外主要是在体外进行研究,机体内的研究则很少。国内尚未见这方面     

前胡丙素对自发性及肾性高血压大鼠心肌组织ATP酶活性及酶促动力学参数的影响

目的：观察前胡丙素(Prc-C)对自发性高血 压大鼠(SHR)及肾性高血压大鼠(RHR)心肌细胞膜Na+，K+ -ATP酶及线粒体Na+，K+ -ATP酶、Ca2+ -ATP酶及M g2+-ATP酶活性及酶促动力学参数的影响。方法：采用光电比色法 测定ATP酶活性,并通过测定不同ATP浓度时的ATP酶活力,根据Lineweaven-Burk公式作图并 经加权线性回归法拟合直线,进而推算酶促反应动力学参数Km及Vmax。结果:〖 HTSS〗SHR及RHR心肌Na+，K+ -ATP酶及Ca2+ -ATP酶活性下降,最大反应速度(Vma x )降低。酶促动力学研究发现ATP酶反应速率常数(Km)在SHR增大,在RHR无显著性改变；Pra -C长期给药可加强酶活力,升高酶Vmax 而不影响Km。结论：SHR及RHR心 肌ATP酶变化存在差异，RHR心肌ATP酶活力的下降主要因为心肌组织ATP酶含量减少,而非酶 与底物ATP的亲和力变化；而SHR 心肌ATP酶活力的下降由于心肌组织ATP酶含量减少及酶与 底物ATP的亲和力下降两方面原因。前胡丙素长期用药可增加单位重量心肌组织ATP酶含量,但不影响酶与底物ATP的亲和力。     

豚鼠输精管的适应性超敏和Na~+/K~+泵:α2亚单位下降的时间过程

已知适应性超敏与膜去极,Na~+/K~+-ATP酶活性降低,〔~3H〕哇巴因结合位点减少有关,并符合相同的时间过程。预备试验已证明适应性超敏与Na~+/K~+泵减少有关。本工作着重测定泵蛋白α2亚单位,     

知母皂甙元是Na~ 、K~ -ATP酶的抑制剂

中药知母属清热泻火药,适用于阴虚内热病人,但其作用机理一直未明。近代生化学认为Na~ 、K~ -ATP酶是基础代谢下产生热能的最主要的酶。因此中医的阴虚内热可能是Na~ 、K~ -ATP酶活性过高的一种表现。     

川芎嗪对心血管系统作用的实验研究

实验探讨川芎嗪(TMP)对大鼠整体血流动力学和离体心脏及血管的作用。TMP给药7周后(7×10~(-5)M/kg/日)导致大鼠血压上升、心率加快、左心室内压、左心室内压变化最大速率和后半体血流增加而红细胞微粘度下降。急性脉注入TMP(3×10~(-5)M/0.2ml)引起血压短暂下降,在血压回升过程中伴有类似慢性给药大鼠的血流动力学变化,说明NMP的升压作用是由于外周阻力的降低不及心脏功能增加强烈所致。但TMP对离体心脏则有负性变时变力作用,与整体反应比较提示神经系统在此可能具有重要作用。在大鼠主动脉肌条TMP能激活高K~+去极化收缩,但抑制去甲肾上腺素(NE)引起的收缩反应,对血管紧张素Ⅱ(AⅡ)诱发的收缩无明显影响。TMP对大鼠肠系膜动脉由高K~+引起的收缩无明显影响,对NE和AⅡ引起的收缩则有明显的抑制作用。     

生姜透皮帖对运动病大鼠脑内酶学变化的作用

目的:建立运动病模型,观察生姜透皮帖对运动病大鼠脑组织几种生化指标的变化,并探讨其对运动病产生治疗作用的机制.方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分5组,每组8只,每天按实验方法刺激,实验第4天刺激结束后取大脑和小脑皮质、脑干前庭区.采用组织化学定位方法和图像定量分析方法,检测各组大鼠3部位脑组织中碱性磷酸酶(ALP)、 K~+-Na~+-ATP酶及细胞色素氧化酶(CCO)活性.结果:运动病大鼠3部位脑组织中ALP活性显著升高、Na~+-K~+-ATP酶及CCO活性明显减低.使用生姜透皮帖后运动病大鼠3部位脑组织中ALP活性显著减低、Na~+-K~+-ATP酶及CCO活性明显升高.结论:生姜透皮帖可能使脑血管紧张度降低,改善脑血流的分布,增加脑血流,调整脑细胞内CCO、 ALP、 Na~+-K~+-ATP酶的活性,增强脑细胞的兴奋性,从而保持中枢神经系统的兴奋性,起到抗运动病的作用.     

早孕绒毛、晚孕胎儿附属物ELDS的RIA

内源性类洋地黄物质(Endogenousdigitalis like substances,EDLS)是存在于人和哺乳动物体内的一种具有强大的强心、利尿和收缩血管作用的物质。它与外源性洋地黄一样,可以抑制Na~+—K~+—ATP酶,竞争性抑制~3H—哇巴因与受体结合,可与某些强心甙抗体产生交叉反应,在免疫学方面显示出类似洋地黄的抗原特性,因此可用RIA方法检测。EDLS主要存在于人和哺乳动物的下丘脑、心脏、肾上腺等组织,对机体内环境恒定的维持起重要作用。文献报告,妊娠妇女外周血EDLS浓度显著升高,脐血EDLS浓度显著高于产妇外周血,产妇外周血EDLS浓度在产后24小时迅速下降,推测妊娠后增加的EDLS可能来自胎     

D_(1A)多巴胺受体与Na~+/K~+-ATP酶的活性

多巴胺可抑制肾单位中如近曲小管和皮质部收集管的Na~+/K~+-ATP酶的活性。已发现的多巴胺受体至少有5种,其中D_(1A)和D_(1B)(D_5)被证明是与腺苷酸环化酶激活相联系的D_1受体亚型。选择性作用     

PCPA对不同月龄大鼠额叶皮层线粒体超微结构、膜电位和ATP酶的影响

目的探讨对氯苯丙氨酸(PCPA)对不同月龄大鼠额叶皮层线粒体形态和功能的影响。方法取3～9月龄大鼠进行造模,分别观察PCPA腹腔注射3 d后额叶皮层线粒体形态功能的改变;采用超活染色观察线粒体的数目和活性,透射电镜观察线粒体超微结构变化,同时采用荧光探针JC-1检测线粒体膜电位改变和WST-1法测定线粒体ATP酶含量。结果①与正常组相比,各月龄大鼠经连续注射PCPA 3 d后,其额叶皮层线粒体的数量明显减少;同时在各月龄正常大鼠中,其额叶皮层线粒体的数量随大鼠月龄的增加而呈现出先增加后减少的趋势。②各月龄大鼠注射PCPA 3 d后,额叶皮层线粒体出现肿胀、嵴断裂甚至空泡化,其中以6月龄最为明显。③各月龄大鼠造模后额叶皮层线粒体的膜电位与造模前相比均显著下降;各月龄正常组大鼠线粒体膜电位随着月龄的增加出现先增加后下降的趋势,且6月龄正常组大鼠与其他月龄正常组大鼠相比均有统计学意义(P0.05);各月龄模型组大鼠也相应地出现上述变化。④随着月龄的增加,各月龄正常组大鼠和模型组大鼠额叶皮层线粒体Na~+-K~+-ATP和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶含量均出现先增加后减少的趋势,且6月龄与其他月龄相比也具有统计学意义(P0.05)。结论①3～9月龄大鼠连续注射PCPA 3天后其额叶皮层线粒体超微结构、膜电位、Na~+-K~+-ATP和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶含量改变以6月龄为最;②PCPA致大鼠失眠可能与额叶皮层线粒体超微结构改变、膜电位和Na~+-K~+-ATP和Ca~(2+)`-Mg~(2+)-ATP酶含量下降有关。     

口服知母皂甙元对Na~ 、K~ -ATP酶的作用

本实验用不同剂量的知母皂甙元喂养大白鼠,观察它对整体动物四种脏器(肝、肾、小肠粘膜及脑组织)中Na~ 、K~ -ATP酶的作用。实验分为1.正常组2.甲状腺素组(T_4)3.(甲状腺素)T_4加知母皂甙元10毫克组,4.T_4加知母皂甙元20毫克组,     

羟基氨酮强心作用机制的进一步研究

前巳报道羟苯氨酮(BAK_3)及其衍生物具有较强的强心和扩血管作用,且有不增加心率的优点, BAK_3在有效浓度范围内不抑制Na~+K~+-ATP和磷酸二酯酶(PDE),显著提高心肌收缩蛋白对Ca~(2+)的敏感性,提示增强收缩蛋白对Ca~(2+)的敏感性,可能是其强心作用的主要机制,可能为一种非甙和非PDE抑制剂的新型强心药物——钙增敏剂(Calcium Sensitiger).