喉鳞状细胞癌与端粒酶亚单位表达

目的 检测喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）相关组织中端粒酶亚单位（端粒酶逆转录酶、端粒酶相关蛋白1和端粒酶RNA组分hTR）mRNA的表达,研究不同的端粒酶亚单位的表达与喉鳞癌发生的关系。方法 对34例喉鳞癌病例,采用逆转录聚合酶链（RT-PCR）技术检测上述三种端粒酶亚单位在喉癌组织、对应的癌旁组织和转移淋巴结中的mRNA表达。结果 喉癌组织、对应癌旁组织和转移淋巴结中端粒酶逆转录酶mRNA的阳性率分别为88．2％（30／34）、5．9％（2／34）和90．0％（9／10）,三种组织的阳性率间存在显著性差异（P〈0．05）,喉癌组织和转移淋巴结组织的阳性率显著高于癌旁组织（P〈0．05）。端粒酶相关蛋白1和端粒酶RNA组分mRNA在喉癌组织、对应癌旁组织和转移淋巴结中的阳性率均为100％。结论 本研究结果提示端粒酶依赖途径是喉鳞癌发生的方式之一。与端粒酶相关蛋白1和端粒酶RNA组分比较,端粒酶逆转录酶表达的上调在端粒酶依赖途径的喉鳞癌的发生中占有更重要的地位。     

Jab1在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨Jab1在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达及其与LSCC临床病理和预后的关系。方法: 采用免疫组化SP法检测23例正常喉黏膜(NLT)和72例LSCC组织中Jab1的表达。结果: 在54.17%的LSCC中Jab1呈现过表达,并且与临床分期和淋巴结转移呈显著正相关,与患者的总生存率呈负相关(P<0.05)。结论: Jab1可能通过调节p27kip1蛋白的降解而参与LSCC的发生、发展, Jab1可以作为LSCC的一个预后指标。     

葡萄糖转运蛋白1在人喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:观察葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)在人喉鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理学的关系.方法:应用免疫组织化学的方法以及RT-PCR法检测57例喉鳞状细胞癌患者的肿瘤组织、癌旁喉组织以及远离肿瘤的正常喉组织中GLUT1的蛋白和mRNA的表达,并结合喉癌患者的临床病理特征进行分析.结果:①免疫组织化学:GLUT1在喉癌组织中的表达高于癌旁喉组织和正常喉组织(P<0.01);在低分化喉癌中的表达高于高分化喉癌(P<0.05);Ⅲ期+Ⅳ期喉癌较Ⅰ期+Ⅱ期喉癌有高表达GLUT1的趋势(P<0.01);有淋巴转移的喉癌的表达高于无淋巴转移者(P<0.05);在直径≥3 cm的肿瘤中的表达高于直径＜3cm者(P<0.05).②RT-PCR结果:GLUT1在喉癌组织中的表达高于癌旁喉组织和正常喉组织(P<0.01);在低分化喉癌中的表达高于中分化和高分化喉癌(P<0.05);Ⅲ期+Ⅳ期喉癌较Ⅰ期+Ⅱ期喉癌有高表达GLUT1的趋势(P<0.05);有淋巴转移的喉癌的表达高于无淋巴转移者(P<0.05);在直径≥3 cm的肿瘤中的表达高于直径＜3 cm者(P<0.05).结论:GLUT1与喉癌发生、发展、分化、淋巴转移和转归等密切相关,可以作为喉癌的诊断、治疗和预后指标之一.     

基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4在喉鳞状细胞癌组织中的表达

目的 检测基质细胞衍生因子-1（stromal cell derived factor-1,SDF-1）及其受体CXCR4 ( CXC chemokine receptor 4 ) 在喉鳞状细胞癌（简称鳞癌）中的表达情况,并分析两者与喉鳞癌临床病理特征的关系,探讨SDF-1/CXCR4在喉鳞癌发生发展中的作用。方法　采用实时荧光定量PCR及免疫组织化学法检测40例喉鳞癌组织和25例癌旁组织中SDF-1和CXCR4的表达情况。结果　①SDF-1、CXCR4 mRNA在喉鳞癌组织中的表达量（0.079±0.018、0.161±0.0 41）,高于在癌旁组织（0.0 21±0 . 0 05、0.035±0.007）中的表达量。SDF-1 mRNA的表达与淋巴结转移有关,CXCR4 mRNA的表达与肿瘤病理分级、临床分期和淋巴结转移有关。②免疫组化结果显示,SDF-1和CXCR4蛋白在喉鳞癌组织中的阳性表达率分别为52.5%和57.5%,高于对照组的20.0%和28.0%。SDF-1蛋白的表达与肿瘤临床分期和淋巴结转移有关,CXCR4蛋白的表达与肿瘤病理分级、临床分期和淋巴结转移有关。结论　SDF-1/CXCR4生物学轴在喉鳞癌的发生发展及转移过程中起促进作用。     

BUB1在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）组织中BUB1蛋白的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学EliVision二步法检测55例LSCC组织和30例癌旁正常黏膜组织中BUB1蛋白的表达,并分析其与LSCC临床病理特征的关系。结果：BUB1蛋白在LSCC组织中的阳性表达率为50．9％（28／55）,低于癌旁正常黏膜组织83．3%（25／30）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;BUBl蛋白的表达与LSCC分化程度及淋巴结转移有相关性（均P〈0．05）,而与患者性别、年龄、吸烟、肿瘤原发部位、T分期及临床分期无相关性（均P〉0．05）。结论：BUBl蛋白的低表达与LSCC的发生、发展有关,BUB1可能作为预测LSCC转移及预后的生物学指标之一。     

FoxM1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:研究FoxM1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法:运用免疫组织化学方法检测89例喉鳞状细胞癌组织、89例癌旁组织及20例喉乳头状瘤组织中FoxM1蛋白的表达情况,分析其与喉鳞状细胞癌临床病理参数的关系。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测20例喉鳞状细胞癌、20例喉乳头状瘤组织以及20例癌旁组织中FoxM1mRNA表达情况。结果:FoxM1mRNA和蛋白表达的阳性率在喉鳞状细胞癌、喉乳头状瘤及癌旁组织中逐渐降低,其差异有统计学意义(P<0.05)。FoxM1蛋白的表达随组织分化程度增高而降低(P<0.05);随T分期增高而增加(P<0.05);有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.05),随临床分期的增加而表达增加(P<0.05)。FoxM1表达率与患者年龄、性别、癌原发部位无相关性(P>0.05)。结论:FoxM1蛋白在喉鳞状细胞癌组织中表达的上调可能与喉鳞状细胞癌的发生及浸润转移有关。     

在喉鳞状细胞癌中的表达

目的:研究癌基因STK15在喉鳞状细胞癌中的表达，探讨STK15与喉鳞状细胞癌的相关性。方法：应用SP免疫组织化学法检测40例喉鳞状细胞癌及30例声带息肉中STK15的蛋白表达。结果：STK15在喉鳞状细胞癌和声带息肉中的阳性率分别为67.5%（27/40）、33.3%（10/30），二者之间差异有统计学意义（P＜0.05）。STK15蛋白表达与喉鳞状细胞癌的TNM分期及淋巴结转移有关（P＜0.05），与喉鳞状细胞癌病理学分级、原发部位及患者的性别、年龄无关（P＞0.05）,且STK15蛋白阳性表达强度与喉鳞癌患者的TNM分期有关（P＜0.05）。结论：STK15在喉鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用，可能成为喉鳞状细胞癌基因治疗的新靶点。     

Beclin1在喉鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨自噬相关基因Beclin1在喉鳞状细胞癌(简称喉癌)中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测Beclin1蛋白在50例喉癌组织、45例癌旁组织、10例喉乳头状瘤及16例声带息肉组织中的表达情况,RT-PCR方法检测41喉癌组织、41癌旁组织和11例声带息肉组织中Beclin1 mRNA...     

蛋白激酶CK2α特异性小干扰RNA对喉癌细胞生长的抑制作用

目的探讨蛋白激酶CK2α特异性小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）对人喉癌细胞系Hep-2增殖和凋亡的影响。方法构建蛋白激酶CK2α特异性siRNA表达质粒psiRNA-hHlneo-CK2及非特异性表达质粒psiRNA-hH1 neo-cont，分别用脂质体转染法转染Hep-2细胞。采用逆转录聚合酶链反应、Western Blot技术检测转染后蛋白激酶CK2αmRNA和蛋白表达，采用四甲基偶氮唑蓝法检测转染后Hep-2细胞的增殖情况，流式细胞术检测转染后对Hep-2细胞凋亡的影响。结果转染psiRNA-hH1 neo-CK2载体后，Hep-2细胞蛋白激酶CK2α mRNA和蛋白表达均较非特异干扰组和空白组明显下降（P〈0．05），Hep-2细胞生长缓慢（P〈0．05），其细胞周期出现明显亚二倍体峰（P〈0．05）。结论蛋白激酶CK2α特异性siRNA表达载体可以下调Hep-2细胞蛋白激酶CK2α的表达，抑制细胞增殖并诱导其凋亡。     

Stathmin基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察stathmin基因和蛋白质在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨stathmin基因与喉鳞癌生物学行为的关系及临床意义,进一步认识喉鳞癌发生和发展的分子机制.方法选取2005年3月至2006年4月的38例喉鳞癌患者,术中从肿瘤中心部位取癌组织(实验组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取癌旁正常组织(对照组).应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析38例患者的喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin基因mRNA的表达水平,冰冻切片免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin蛋白的表达情况.结果 RT-PCR结果显示,stathmin基因mRNA在38例喉癌患者的喉癌组织和癌旁正常组织均呈阳性表达;经半定量分析,stathmin mRNA在喉癌组织中的表达水平明显高于在癌旁正常组织的表达水平(t=9.655,P＜0.05).免疫组织化学发现,stathmin蛋白在26例(26/38,68.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在13例(13/38,34.2%)患者的癌旁正常组织呈弱阳性表达;stathmin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于在癌旁正常组织的阳性表达率(x2=8.901,P＜0.05).同时发现,stathmin mRNA的表达水平和stathmin蛋白的阳性表达率在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例组(t=6.284,x2=5.810,P＜0.05),有颈部淋巴转移组明显高于无转移组(t=9.350,x2=6.923,P＜0.05).结论 stathmin基因和蛋白在喉鳞癌中的表达明显高于癌旁正常组织,在中晚期喉鳞癌中的表达明显高于早期喉鳞癌,并且与颈淋巴转移有关.stathmin基因与喉鳞癌的发生和发展均有密切关系,并可能与喉癌的预后有关.     

整合素β1和粘着斑激酶在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:研究黏附分子整合素β1、粘着斑激酶(FAK)在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达及临床意义。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学SABC法,检测48例LSCC标本癌组织及其癌旁组织和20例声带息肉组织中整合素β1、FAK的表达情况。结果:LSCC中整合素β1和FAK蛋白及mRNA表达水平均高于癌旁组织和声带息肉组织,差异有统计学意义(P<0.05);LSCC中整合素β1和FAK蛋白及mRNA在有颈淋巴结转移组织中的表达明显高于无颈淋巴结转移组织,差异有统计学意义(P<0.05);在T3～T4期组织中的表达明显高于T1～T2期,差异有统计学意义(P<0.05);但与病理分级相比较其差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:整合素β1和FAK在T3～T4期和有淋巴结转移的癌组织中表达明显升高,可能与喉癌的浸润、转移密切相关。     

整合素β1和整合素连接激酶在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:研究黏附分子整合素β1、整合素连接激酶(ILK)在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达及临床意义.方法:应用用RT-PCR和免疫组织化学SABC法,检测43例LSCC标本癌组织及其癌旁组织和18例声带息肉中整合素β1、ILK的表达情况.结果:LSCC中整合素β1和ILK蛋白质及mRNA表达水平均高于癌旁组织和声带息肉.差异有统计学意义(P<0.05);LSCC中整合素β1和ILK蛋白质和mRNA在有淋巴结转移组中的表达明显高于无淋巴结转移组织,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在T<,3>～T<,4>期组织中的表达明显高于T<,1>～T<,2>期,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);但与病理分级相比较其差异均无统计学意义(均P>0.05).结论;整合素β1和ILK在T<,3>～T<,4>期和有淋巴结转移的癌组织中表达明显升高,它们可能与喉癌的浸润、转移密切相关.     

复发喉鳞状细胞癌相关基因表达谱研究

目的：筛选与复发喉鳞状细胞癌相关的基因。方法：用包含18000个cDNA的基因芯片法检测2例复发喉鳞状细胞癌标本的癌组织及喉正常黏膜组织mRNA表达谱，通过对比分析寻找与复发喉鳞状细胞癌相关的基因。结果：①重复且相差3倍以上差异表达基因共218个，其中喉癌组织表达上调的基因137个，表达下调的基因81个；②表达相差10倍以上的基因4个，分别为U02570、AW863712、AA523939和NM_014381。结论：复发喉鳞状细胞癌的发生是一个多基因表达失调的过程，可能主要与GTP酶活化蛋白及DNA错配修复有关。     

热休克蛋白27与NF-κBp65在喉鳞状细胞癌中的基因表达及临床意义

目的研究热休克蛋白27（heat shock protein27,HSP27）及核因子NF-κBp65（NF-κBp65）在喉癌及癌旁组织中基因表达水平,并探讨两者与喉癌临床病理因素的相关性。方法采用RT-PCR方法分别检测HSP27 mRNA和NF-κBp65 mRNA在喉癌组织及癌旁组织中的表达水平,并统计两者与喉癌不同临床病理因素的关系。结果 HSP27 mRNA和NF-κBp65 mRNA分别在喉癌组织中的表达高于癌旁组织,两基因与喉癌不同病理分型有相关性,与临床分期及有无淋巴结转移无关,且NF-κBp65 mRNA和HSP27 mRNA在喉癌中呈负相关性（r=-0.4367,P〈0.05）。结论 HSP27 mRNA和NF-κBp65mRNA表达水平随喉癌恶性程度的增高HSP27 mRNA表达量逐渐下降,而NF-κBp65 mRNA表达量逐渐升高,推测HSP27在人喉癌中可能负性调节NF-κB信号传导通路,HSP27有望成为喉鳞癌基因治疗新的作用靶点。