瓜蒌皮多酚纯化工艺及抗氧化活性

以瓜蒌皮为研究对象,采用大孔吸附树脂法纯化瓜蒌皮中的多酚类化合物,对纯化工艺参数进行筛选,对纯化产物的抗氧化活性进行检测。结果表明:AB–8大孔吸附树脂对瓜蒌皮多酚具有良好的吸附和解吸性能,最佳吸附工艺参数为提取液中多酚质量浓度0.60 mg/mL,料液pH值3.0,上样流速2 BV/h,上样体积4 BV;最佳洗脱工艺参数为洗脱液乙醇的体积分数60%,体积6 BV,洗脱流速2 BV/h;纯化后产品中多酚的含量达49.52%,较纯化前提高57倍;瓜蒌皮多酚纯化前后对DPPH+自由基清除作用的IC50分别为2.01mg/mL和0.53mg/mL,对ABTS+自由基清除作用的IC50分别为0.62 mg/mL和0.13 mg/mL,纯化后抗氧化活性增强了4～5倍。     

肥城桃多酚氧化酶的部分纯化及其特性

经（ＮＨ４）２ＳＯ４分级沉淀、透析等步骤，使肥城桃多酚氧化酶部分纯化，纯化倍数为５．１１倍。该酶对邻苯二酚、焦Ｐｅｉ酚和ＤＬ－二羟基苯丙氨酸显示活性，其中焦Ｐｅｉ酚是最佳底物。这种多酚氧化酶的最适ＰＨ值为６．８，在３５℃下放置３０ｍｉｎ基活性不会降低。     

桉叶提取物抑制黄嘌呤氧化酶活性成分的分离纯化及其动力学研究

为了对尾巨桉属广林9号品种桉叶提取物进行体外抑制黄嘌呤氧化酶（XOD）活性研究,并对其主要活性成分进行分离纯化、结构鉴定及抑制动力学研究。采用高效液相色谱法（HPLC）检测酶反应生成尿酸的量,以甲醇-K2HPO4缓冲液(50mmol/L,pH值7.5)(5：95)为流动相,检测波长为290nm,测定了桉叶的不同溶剂提取物及其萃取组分对XOD活性的抑制作用,确定了最佳提取条件,并采用Diaion HP-20大孔树脂、反相硅胶柱层析法和制备液相色谱仪进行分离纯化。确定桉叶中最高活性单体为鞣花酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷酸和五没食子酰葡萄糖,测得其IC50分别为22.51、32.96、31.75 μg/mL曰并通过酶抑制动力学试验比较了他们的抑制类型和Ki值,得出鞣花酸的Ki值最小、为1.048μg/mL,可知其抑制黄嘌呤氧化酶活性效果在3种活性单体中最优。     

大孔树脂纯化苋菜多酚的工艺研究

通过吸附与解吸附试验探讨大孔树脂纯化苋菜多酚的工艺参数。结果表明D-101树脂适合苋菜多酚的纯化,吸附平衡时间为180 min,解吸附平衡时间为100 min。最适吸附质量浓度为0.2 mg/mL,pH=2,洗脱剂乙醇浓度为60%,流速为2 mL/min,洗脱体积为75 mL。此条件下吸附率及解吸率分别为32.92%和97.26%。该纯化工艺简便,适合大规模纯化苋菜多酚。     

甜茶总多酚的纯化及其抗氧化活性

为提高甜茶的综合利用价值,从提取甜茶甙废液中回收甜茶多酚并采用大孔树脂纯化的方法研究甜茶总多酚的纯化工艺条件;采用紫外分光光度法对甜茶多酚含量及其抗氧化活性进行测定。结果表明:所筛选的HPD826树脂为甜茶总多酚纯化的最佳树脂;当上样液的浓度为3.65mg/mL、上柱液体积为50mL、流速为1BV/h时,吸附率为94.25%,用30%的乙醇解吸后其甜茶总多酚的纯度可达56.68%;纯化过的甜茶总多酚对·OH和DPPH·自由基均有较好的清除作用,其IC50值分别为517.9μg/mL和45.9μg/mL。     

鸭梨果肉多酚氧化酶的活性研究与纯化

对鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.)果肉多酚氧化酶的活性进行研究并对其进行纯化。以鸭梨果肉为试材,采用邻苯二酚为底物测定氧化产物的方法,就pH值、温度、热稳定性、抑制剂、不同成熟期及果肉不同部位等因素对PPO活性的影响进行了研究;酶粗提液经30%硫酸铵沉淀去杂和80%饱和度硫酸铵析出、Sephadex G200柱层析及HiPrepTM16/10 QXL离子柱层析等步骤进行了纯化,经SDS-PAGE进行了验证。结果表明:鸭梨果肉中的PPO最适pH值为6.4;最适温度为25℃;20～25℃时热稳定性较高;不同成熟期的活性不同;34 mmol/L的NaCl为较好的抑制剂;果肉近果心处活性最高,中部活性最低。经纯化,获得均一的PPO,分子量约43 kD。为鸭梨果肉PPO的性质研究以及控制梨果PPO酶促褐变提供了依据。     

桑尺蠖多酚氧化酶的分离纯化

多酚氧化酶是昆虫初生新表皮硬化过程中的关键酶。为了研究桑尺蠖(Phthonandria atrineata)多酚氧化酶的功能与性质,探讨了桑尺蠖多酚氧化酶的分离纯化方法。以桑尺蠖五龄幼虫为材料,用磷酸盐缓冲液提取多酚氧化酶粗提液,再经80%饱和度硫酸铵沉淀、透析及SephadexG-100凝胶过滤进一步分离纯化,得到了部分纯化的多酚氧化酶,其酶纯化倍数为6.28倍,酶得率为3.34%,酶比活力为812.8 U/mg。     

乌贼墨中多酚氧化酶的分离及纯化

用pH7.2磷酸提取缓冲液从乌贼墨汁澡提取多酚氧化酶，提取的粗酶液经30%-80%饱和度硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-SepharoseCL-6B柱层析和SephadexG-150柱层析后，得到纯化的多酚氧化酶，纯化们数为10.78，纯化后的酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳，分别采用银染色和多酚氧化酶活性染色均显示一条电泳带。     

乌贼墨中多酚氧化酶的分离及纯化

用pH7.2磷酸提取缓冲液从乌贼墨汁澡提取多酚氧化酶，提取的粗酶液经30%-80%饱和度硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-SepharoseCL-6B柱层析和SephadexG-150柱层析后，得到纯化的多酚氧化酶，纯化们数为10.78，纯化后的酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳，分别采用银染色和多酚氧化酶活性染色均显示一条电泳带。     

桑尺蠖多酚氧化酶的纯化及其部分生物化学性质

经硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-100凝胶过滤等步骤,使桑尺蠖Phthonandria atrineata （Butler）多酚氧化酶纯化,纯化倍数为6．28倍．该酶对焦性没食子酸、邻苯二酚和L-多巴的Km值分别为9．64mmol／L、6．82mmol／L和4．30mmol／L．这种多酚氧化酶在pH=7．0,37℃时活性最高．利用多种氧化酶抑制剂对该酶活性的抑制结果表明,所用抑制剂对其均有不同程度的抑制作用．此外,该酶对EDTA和金属离子比较敏感．     

香蕉李单株优选研究

采用群众报种预选、现场初选和室内鉴定分析的方法对香蕉李(Prunus salicina Lindl.)进行单株选优，初步筛选出东七二号、东七三号、石门一号及石门二号等4个优良单株，其产量和果实品质明显优于普通植株品种．     

李花芽形态分化的研究

从外部形态、内部组织和营养物质的动态变化等方面对李花芽分化进行了综合研究,结果表明：李花芽形态分化的过程可划分为：未分化期、花原基分化期、萼片原基分化期、花瓣原基分化期、雄蕊和雌蕊原基分化期及雄蕊和雌蕊结构分化期等6期;细胞分裂快、合成作用旺盛的原基中,蛋白质含量高,淀粉粒则分布在原分生组织衍生的组织内。     

中国李基因组DNA提取方法的优化

3种常用的植物基因组DNA提取方法在中国李上的实验，结果表明：改良陈大明法提取的DNA纯度高，产率高。为满足植物样品较少时提取DNA的需要，将该法进一步优化的结果表明，不使用液氮研磨而是在低温条件下将组织捣碎的微量法同样提取出了产率高、纯度高的DNA，完全满足RAPD扩增的需要。裂解缓冲液中NaCl的浓度以1．1mol／L提取DNA的产率最高，且DNA的质量与其他浓度之间没有明显差异。     

李子的养生价值浅谈

在广泛文献检索基础上,对李子种属、成分、养生保健价值,代表性膳食及使用注意事项等进行概述,为全民养生保健提供科学资料。     

柰基因组DNA的提取与纯化

以榇嫩芽为材料．对Dellaporta等用CTAB制备植物基因组DNA的方法进行改良，结果表明，加入质量分数ω=10％PVPP与材料充分研磨，将提取缓冲液的β-巯基乙醇体积分数降低为1％，能有效地去除材料中的多酚类物质；用氯仿／异戊醇(24：1)抽提裂解液2次所获得的上相．加入1／10体积的65℃的NaCl／CTAB溶液混匀，再用氯仿／异戊醇(24：1)连续抽提2次，并在DNA粗提液中加入适量高浓度NaCl和无水乙醇沉淀DNA，可以有效地去除多糖的干扰．获得比较纯净的DNA样品；PCR特异性扩增的结果表明，以改良法的DNA为模板可获得PPO基因保守区约600～800bp特异条带．且扩增条带较亮、无引物二聚体出现。     

柰嫩芽总RNA的提取与纯化

以嫩芽为材料，对Trizol法进行改进提取总RNA，试验结果表明，加入10％PVPP与材料共研磨，并在Trizol提取液中加入1％β-巯基乙醇，可以完全排除酚类物质、色素等杂质的干扰；采用在匀浆液中加入终浓度为20％乙醇沉淀多糖、在裂解液抽提的上相中加入终浓度为3mol／L LiCl沉淀RNA、在RNA的粗提液中加入适量的3mol／LNaAc(pH5．2)和低浓度的无水乙醇沉淀多糖等方法相结合，可以有效地去除多糖的干扰，获得纯净、完整的RNA样品，用它为模板进行RT-PCR反应，获得PPO基因保守区约600～800bp的cDNA条带；而单独采用在匀浆液中加入终浓度为20％乙醇沉淀多糖的方法，不能将样品中的多糖去除干净，这些残留的多糖会抑制逆转录酶的活性，导致逆转录反应的失败。     

李花药花粉的发育和组织化学研究

李药壁发育为双子叶型,分泌型绒毡层;成熟的药室内壁有明显的纤维状加厚;小孢子母细胞以同时型的胞质分裂形成四分体,四分体呈四面体型排列;成熟的花粉粒为2!细胞型。孢原细胞、造孢细胞、花粉母细胞以及绒毡层细胞内均含丰富的蛋白质,但无淀粉粒。药室内壁和中层细胞内则含有大量的淀粉粒,而蛋白质的含量却很少。随着花药的进一步发育,芽鳞片、萼片和花瓣中的淀粉粒相应依次减少。蛋白质、淀粉粒的分布和含量与细胞的分裂活动以及物质合成等生理活动状态有关。     

酸樱桃中原花青素的分离与纯化

以NKA树脂为吸附剂,对酸樱桃(Prunus cerasus)中原花青素的分离纯化进行了研究。通过单因素试验分析确定了原花青素分离纯化的最佳工艺条件为,上样浓度7 mg/L,上样流速1.0 mL/min,用体积分数为95%的乙醇溶液作为洗脱剂,以1.0 mL/min流速进行洗脱。经树脂纯化后的原花青素通过HPLC/ESI-MS分析确定其主要含两种组分,分别为原花青素-3-葡萄糖苷和(-)-表儿茶素没食子酸酯。     

"海湾红宝石"李茎段离体培养研究

以3年生"海湾红宝石"李茎段为试材,从初代培养(激素浓度和基本培养基的筛选)、继代培养(激素选择)、生根培养(激素及间苯三酚作用)等方面进行研究,初步建立"海湾红宝石"李离体培养体系。结果表明:初代培养适宜的培养基为:WPM IBA 0.05~0.1 mg/L BA 0.5~1.0 mg/L 葡萄糖30 g/L 琼脂5 g/L Vc1.0 g/L;继代培养基为WPM IBA 0.05~0.1 mg/L BA 0.2 mg/L KT 0.3 mg/L 葡萄糖30 g/L 琼脂5 g/L Vc 1.0 g/L CH 1.0 g/L;生根培养基为:1/2MS IBA 0.2~0.5 mg/L 蔗糖15 g/L 间苯三酚20~40mg/L。