注射用丹参总酚酸(冻干)对人CYP450酶和P-糖蛋白体外抑制作用及对大鼠CYP1A2和CYP3A体内诱导作用(英文)

目的探讨注射用丹参总酚酸(冻干)(SLI)对人CYP450酶和P-糖蛋白体外抑制作用以及对大鼠CYP1A2和CYP3A体内诱导作用。方法①应用P450-GloTMCYP450检测试剂盒,通过化学发光法测定SLI和经典抑制剂对细胞色素P4501A2(CYP1A2),CYP2D6,CYP3A4,CYP2C19和CYP2C9的IC50值,通过比较SLI和经典抑制剂对相应细胞色素P450亚型的IC50值来判断SLI对人CYP450酶的体外抑制作用。②Wistar大鼠分别iv给予SLI 3,10和30 mg·kg-1和诱导剂苯巴比妥钠20 mg·kg-1,采用探针底物法,通过比较代谢产物的生成速率来评价SLI对大鼠CYP1A2和CYP3A的诱导作用。③应用ATP酶检测试剂盒,通过化学发光法测定ATP酶活性来评价SLI是否为P-gp的底物或抑制剂。结果①CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6和CYP3A4抑制剂的IC50与SLI对其的IC50进行比较(CYP1A2:0.12μmol·L-1vs 840μmol·L-1;CYP2C9:3.362μmol·L-1vs 704μmol·L-1;CYP2C19:3.236μmol·L-1vs 306μmol·L-1;CYP2D6:0.117μmol·L-1vs 2660μmol·L-1;CYP3A4:0.078μmol·L-1vs 1780μmol·L-1)。②与空白对照组(86.4±6.3)nmol·g-1.min-1相比,SLI 3,10和30 mg·kg-1组CYP1A2活性分别为83.4±6.6,82.5±4.0和(83.4±6.6)nmol·g-1.min-1。与空白对照组(16.1±0.9)nmol·g-1.min-1比较,SLI 3,10和30 mg·kg-1组CYP3A活性分别为15.7±0.6,15.9±0.7和(15.9±1.0)nmol·g-1.min-1,无显著性差异。③以临床血药浓度为依据设计的一系列浓度的SLI 0.0002,0.0006,0.002,0.006,0.017,0.052,0.156和0.468 g.L-1的ATP酶活性分别与空白对照组进行比较(5.8,5.3,5.8,5.5,5.8,5.2,,5.8,5.3,vs 5.75μmol·g-1.min-1),无显著性差异。结论SLI临床给药剂量既不能体外抑制人CYP1A2,CYP2D6,CYP3A4,CYP2C19和CYP2C9酶活性,也不能诱导大鼠CYP1A2和CYP3A,同时也不是P-gp的体外抑制剂或底物。     

CCK-8对大鼠肺间质巨噬细胞cAMP-PKA信号通路的激活作用

目的探讨八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠肺间质巨噬细胞(PIMs)cAMP-PKA信号通路的激活作用。方法分离纯化大鼠PIMs,采用放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,放射激酶法测定PKA活性,受体拮抗剂的IC50值由对数-几率单位法求得。结果正常对照组大鼠静息状态下PIMscAMP含量和PKA活性分别为(2.04±0.13)nmol·g-1和(118.3±11.2)nmol·min-1·g-1。低浓度CCK-8[(10-12～10-10)mol·L-1]对细胞内cAMP含量和PKA活性没有影响(与正常对照组比较:P>0.05);高浓度CCK-8[(10-9～10-5)mol.L-1]可明显提高细胞内cAMP含量和PKA活性(与正常对照组比较:P<0.05)。10mg·L-1脂多糖(LPS)刺激大鼠PIMs,可明提高细胞内cAMP含量和PKA活性,分别为(5.15±0.12)nmol·g-1和(188.6±13.5)nmol·min-1·g-1。不同浓度的CCK-8与LPS共同孵育PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性的变化趋势与CCK-8作用于静息状态下大鼠PIMs的变化趋势完全相同。CCK受体拮抗剂丙谷胺、CR-1409、CR-2945可呈剂量依赖性地抑制CCK导致的cAMP含量的升高,它们的IC50值分别为(0.5×10-6、4.1×10-6、7.2×10-4)mol·L-1。丙谷胺、CR-1409、CR-2945也可明显减弱CCK-8所导致的PKA活性的升高;其中,丙谷胺的抑制作用最强,CR-1409次之,CR-2945的抑制作用最小。结论CCK-8可剂量依赖性地激活静息状态和LPS诱导的大鼠PIMscAMP-PKA信号转导途径,这可能是CCK抗炎作用的分子机制之一。CCK激活cAMP-PKA通路是通过CCK受体来实现的,且CCK-AR的作用比CCK-BR的作用更为明显。     

奥扎格雷钠对大鼠CYP2D6亚型酶的影响

目的通过奥扎格雷钠的大鼠体内、外实验,观察奥扎格雷钠对大鼠CYP2D6亚型酶的影响。方法对照组和奥扎格雷钠诱导组大鼠分别经口给予生理盐水和奥扎格雷钠1wk,HPLC法测定大鼠尿样及肝微粒体中CYP2D6的探针药物右美沙芬的代谢率,观察奥扎格雷钠对CYP2D6活性的影响。结果①大鼠给予奥扎格雷钠(37mg·kg-1),其尿样中右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0·01);②奥扎格雷钠诱导组大鼠肝微粒体中加入右美沙芬(0·324mmol·L-1),其右美沙芬的代谢率明显高于对照组(P<0·01);③奥扎格雷钠与CYP2D6特异性抑制剂西米替丁可明显降低右美沙芬的代谢率(P<0·01),并且奥扎格雷钠组其右美沙芬的代谢率低于西米替丁组(P<0·05);④奥扎格雷钠IC50=26·5μmol·L-1,西咪替丁IC50=86·3μmol·L-1,奥扎格雷钠诱导组肝微粒体Km=0·67mmol·L-1,Vmax=2·13nmol·min-1·g-1protein;对照组肝微粒体Km=0·29mmol·L-1,Vmax=0·91nmol·min-1·g-1protein;⑤体内和体外相应实验数据具有很好的相关性(r=0·9811)。结论奥扎格雷钠可诱导CYP2D6酶的活性。     

降钙素基因相关肽对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响(英文)

目的　研究降钙素基因相关肽 (CGRP)对体外培养的糖尿病大鼠血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响。方法　用酶标仪和流式细胞仪检测不同浓度CGRP(1 ,1 0 ,1 0 0nmol·L-1 )对糖尿病大鼠VSMC的增殖的影响。结果　CGRP呈浓度和时间依赖性的抑制糖尿病大鼠VSMC增殖 ,格列本脲 (1 μmol·L-1 )部分阻断CGRP(1 0nmol·L-1 )对培养的糖尿病组VSMC的抗增殖作用 ,使其对VSMC的抑制率由(49 .3± 1 .2 ) %减至 (35 .6± 1 .1 ) % ,吡那地尔 (1μmol·L-1 )可增强其抗增殖作用 ,使其对VSMC的抑制率由 (49.3± 1 .2 ) %增至 (58.3± 3 .9) %。CGRP(1 0nmol·L-1 )可使停留于G0 /G1 细胞增多 ,进入S期和G2 /M期的细胞数目减少 ,吡那地尔 (1 μmol·L-1 )能增强其作用。结论　CGRP对糖尿病大鼠VSMC具有显著的抗增殖作用 ,使处于G0 /G1 期细胞增多 ,S和G2 /M期细胞减少。     

罗通定在人、比格犬和大鼠肝微粒体代谢转化的体外比较研究

目的体外研究罗通定(rotundine,RTD)在大鼠、比格犬和人肝微粒体中酶代谢动力学及代谢产物差异。方法优化3个种属肝微粒体与RTD反应体系,应用LC-MS测定RTD在3种肝微粒体中的体外代谢消除,应用LC-MS/MS分析比较RTD在3种肝微粒体中代谢产物种类和生成量的差异,计算并比较相应的活性值。结果RTD在人肝微粒体中代谢转化最慢,其相应的动力学参数为Km=2.67μmol·L-1、Vmax=0.095μmol·L-1·min-1、T21=298±18.0min、CLint=14.6±0.91ml·min-1·kg-1;大鼠中相应的动力学参数为Km=3.24μmol·L-1、Vmax=0.122μmol·L-1·min-1、T12=71.0±2.30min、CLint=87.5±2.79ml·min-1·kg-1;比格犬中相应的动力学参数为Km=5.31μmol·L-1、Vmax=0.228μmol·L-1·min-1、T21=62.3±0.647min、CLint=139±1.43ml·min-1·kg-1。RTD在3个种属肝微粒体中均代谢产生4个O-去甲基后的羟基化同分异构体产物,但4个产物的相对生成百分比在不同种属肝微粒体中有一定差异。结论罗通定在体外人、大鼠和比格犬肝微粒体中主要的I相代谢途径相同,但是酶代谢动力学性质及代谢产物的生成量存在着一定的差异。     

溶血磷脂酰胆碱刺激脑微血管平滑肌细胞增殖的细胞内信号转导途径

通过测定 [3 H]胸腺嘧啶核苷 ( [3 H]Td R)参入和结晶紫染色法测定平滑肌细胞增殖 ,研究了溶血磷脂酰胆碱 ( LPC)刺激牛脑微血管平滑肌细胞( BCMSMC)增殖的细胞内信号转导途径 .结果显示 ,LPC能浓度依赖性 ( 1 nmol· L-1- 1 0μmol·L-1)诱导 BCMSMC摄取 [3 H]Td R,在 LPC的浓度为 1 0μmol· L-1时作用达最大 ,cpm由 366± 1 42升至 1 761± 2 96( P<0 .0 1 ) ;LPC亦能浓度依赖性( 1 nmol· L-1- 1 0μmol· L-1)诱导 BCMSMC增殖 ,在 LPC浓度为 1 μmol· L-1时促增殖作用达坪值 ,A595nm由 0 .0 60± 0 .0 0 9增至 0 .1 0 0± 0 .0 1 5( P<0 .0 1 ) .丝裂原激活蛋白激酶 ( MAPK)特异性抑制剂 PD980 59( 2 - 50 μmol· L-1) ,血小板衍生生长因子受体抑制剂酪氨酸磷酸化抑制剂 AG 1 2 96( 2 -50 μmol· L-1)以及蛋白质酪氨酸激酶抑制剂除莠霉素 A( 2 - 1 0μmol· L-1)能浓度依赖性地抑制LPC的上述作用 .表明 LPC能促进 BCMSMC增殖 ,其细胞内信号转导与 MAPK途径有关 .     

金丝桃苷对新生大鼠神经细胞缺氧/再给氧损伤的保护作用及其机制

目的探讨金丝桃苷(hyperin,Hyp)对新生大鼠脑细胞缺氧/再给氧损伤的保护作用及其机制。方法将分离的新生大鼠脑细胞缺氧30min或缺氧30min后再给氧40min造成细胞缺氧或再给氧损伤模型,测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)水平的变化,用Fura2-AM方法测定脑细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化。结果脑细胞缺氧时,细胞培养上清液中LDH从(62.0±13.0)U·L-1(Sham组)增高到(116.0±16.6)U·L-1(Control组,P<0.01),再给氧时,LDH和MDA分别从(45.6±9.2)U·L-1和(9.1±0.9)μmol·L-1(Sham组)增高到(106.0±17.4)U·L-1和(16.4±2.7)μmol·L-1(Control组,P<0.01)。Hyp在1.0～16.0μmol·L-1范围内,明显地抑制缺氧及再给氧损伤诱导的上述LDH和NO增高,并呈一定的浓度依赖性。1.0～16.0μmol·L-1的Hyp不仅可明显地抑制缺氧诱导的细胞培养上清液中NO和脑细胞内[Ca2+]i的增高(P<0.05或P<0.01),也可明显地抑制再给氧时NO和脑细胞内[Ca2+]i的升高(P<0.05或P<0.01),16.0μmol·L-1的Hyp可将再给氧时NO和[Ca2+]i分别从(34.4±6.3)μmol·L-1和(640±94)nmol·L-1(Control组)降至(25.0±5.1)μmol·L-1(P<0.05)和(331±56)nmol·L-1(P<0.01)。结论Hyp对神经细胞缺氧/再给氧损伤保护作用可能与抑制NO的释放、钙超载及自由基脂质过氧化有关。     

氯沙坦对肾缺血再灌注大鼠肾组织超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的 :探讨氯沙坦干预急性肾缺血再灌注损伤的保护机制。方法 :实验大鼠分正常组、假手术组、缺血再灌注模型组、氯沙坦组 (预先喂服氯沙坦 )。检测各组在急性肾缺血 1h、再灌注 1h和 2 4h肾组织匀浆中超氧化物歧化酶 (SOD)活力与丙二醛 (MDA )含量变化。结果 :模型组和氯沙坦组MDA含量与正常组和假手术组比较均显著增高 (P<0 .0 1) ;氯沙坦组在再灌注 1h和 2 4h ,MDA含量(7.7± 1.0 )nmol·mg- 1pro和 (9.2± 0 .5 )nmol·mg- 1pro较模型组 (9.5± 0 .4 )nmol·mg- 1pro和(11.9± 0 .9)nmol·mg- 1pro明显降低 (P <0 .0 5 )。模型组与正常组和假手术组比较SOD活力明显降低 (P <0 .0 5 ) ;氯沙坦组在缺血 1h ,再灌注 1h和2 4h ,SOD活力分别为 (81.3± 1.6 )NU·mg- 1pro ,(79± 4 )NU·mg- 1pro和 (48± 4 )NU·mg- 1pro)较模型组 (6 8± 8)NU·mg- 1pro ,(48± 11)NU·mg- 1pro和 (18± 4 )NU·mg- 1pro明显增高 (P <0 .0 5 )。结论 :氯沙坦能减轻急性肾缺血再灌注时氧自由基引起的损伤     

槲皮素单硫酸酯钠对 HL-60细胞生长的影响(英文)

通过观察槲皮素单硫酸酯钠 (SQMS)对 HL-60细胞毒作用 ,细胞周期变化 ,胞内 Ca2 +浓度([Ca2 +]i)变化及蛋白激酶 CK2活性的变化研究SQMS对 HL- 60细胞生长的影响 .发现 SQMS(2 0- 1 2 0μmol· L-1)可浓度依赖性抑制 HL- 60细胞的生长 ,阻断 HL- 60细胞于 G0 /G1期 ;SQMS(1 0 0μmol· L-1)可使 [Ca2 +]i 由 (1 0 5± 9) nmol·L-1上升到 (2 0 1± 1 3) nmol· L-1;低浓度 SQMS(0 .55-8.8μmol· L-1)可显著抑制从 HL- 60细胞中纯化的蛋白激酶 CK2的活性 .结果提示 ,SQMS可抑制HL- 60细胞生长 ,其机理可能与抑制 HL- 60细胞中蛋白激酶 CK2的活性 ,提高细胞 [Ca2 +]i 及促进细胞分化有关 .     

重组人尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶2B7三个功能性突变体的构建、表达及活性比较

目的构建人尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶(UGT)2B7重组酶的3个功能性突变体UGT2B7*71S(A71S,211G>T),UGT2B7*2(H268Y,802C>T)和UGT2B7*5(D398N,1192G>A),以进一步研究该酶野生型和其突变体在对底物作用过程中的功能差异。方法应用细菌/杆状病毒系统,将构建的pFastBac-UGT2B7*71S,pFastBac-UGT2B7*2和pFastBac-UGT2B7*5重组质粒转化E.coli DH10Bac大肠杆菌,通过转座作用获得各自的重组粘粒(bac-mid),然后将其转染草地夜蛾(Sf)9细胞后,产生重组杆状病毒。这些病毒再感染Sf9细胞,即可获得野生型UGT2B7*1及其突变体的重组酶。野生型及突变体酶的活性以7-羟基-4-三氟甲基香豆素(7-HFC)为底物,用荧光法测定并分析比较。结果利用杆状病毒/昆虫细胞系统,成功地构建人UGT2B7重组酶的3个功能性突变体。UGT2B7*1对7-HFC的Km值为(0.331±0.018)mmol·L-1,Vmax值为(2.14±0.04)μmol·min-1·g-1蛋白;UGT2B7*71S对7-HFC的Km值为(0.260±0.026)mmol·L-1,Vmax值为(1.36±0.05)μmol·min-1·g-1蛋白;UGT2B7*2对7-HFC的Km值为(0.53±0.06)mmol·L-1,Vmax值为(9.5±0.5)μmol·min-1·g-1蛋白;UGT2B7*5对7-HFC的Km值为(0.59±0.05)mmol·L-1,Vmax值为(7.52±0.28)μmol·min-1·g-1蛋白。结论应用细菌/杆状病毒系统,成功构建了UGT2B7的3个功能性突变体,这些突变体可进一步用于对其他底物的代谢活性比较。     

Role of polyamines in myocardial ischemia/reperfusion injury and their interactions with nitric oxide

Polyamines (putrescine, spermidine, and spermine) are present in all higher eukaryotic cells and are essential for cell growth, differentiation and apoptosis. Sharing common precursor with polyamines, nitric oxide (NO) is associated with myocardial ischemia/reperfusion injury by the generation of peroxynitrite. Although polyamines have been implicated in tissue ischemia injury, their metabolism and interactions with NO in myocardial ischemia/reperfusion injury have not been fully understood. In our experiment, when Langendorff perfused rat hearts were subjected to 40 min ischemia without reperfusion, both ornithine decarboxylase (ODC) and Spermidine/spermine N(1)-acetyltransferase (SSAT) activities were up-regulated and putrescine accumulated. While after reperfusion, ODC activity decreased and SSAT activity increased, resulting in putrescine accumulation and decreased spermidine and spermine. Meanwhile NO content was increased. In addition, sodium nitroprusside (SNP, a NO donor) decreased ODC activity in cardiac tissue homogenate but increased SSAT activity in a dose-dependent manner. Pre-treatment of isolated heart with N(omega)-nitro-L-arginine methyl ester hydrochloride (L-NAME, an inhibitor of NO synthase) increased ODC activity. Exogenous spermine (1 mM) administration prior to ischemia prevented spermine decrease, reduced cardiac myocyte necrosis and apoptosis, and promoted the recovery of cardiac function after ischemia/reperfusion. These results suggest that acute heart ischemia activates myocardial polyamine stress response characterized by increased ODC and SSAT activities and accumulation of putrescine. Ischemia/reperfusion disturbs polyamine metabolism, and the loss of spermine might be associated with NO increase and thereby influences myocardial cell viability. Exogenous spermine may protect the hearts from myocardial ischemia/reperfusion injury.     

氨甲酰胆碱对人子宫平滑肌细胞内钙的影响

目的检测氨甲酰胆碱（ＣＣｈ）对人未妊娠峡部子宫平滑肌细胞（ＣＭＣ）内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）及生物合成１,４,５ 三磷酸肌醇（ＩＰ３）的影响,探讨Ｍ受体激动剂升高人子宫平滑肌［Ｃａ２＋］ｉ作用与影响膜肌醇磷酯代谢的关系。方法应用荧光分光光度计检测［Ｃａ２＋］ｉ水平;应用同位素放射免疫分析法检测ＩＰ３水平。结果基础状态下ＣＭＣ［Ｃａ２＋］ｉ为（１７８±２１）ｎｍｏｌ·Ｌ－１,１、１０和１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＣＣｈ使［Ｃａ２＋］ｉ升高分别为（２４４±３１）、（３２６±３９）和（４３７±６１）ｎｍｏｌ·Ｌ－１,呈剂量依赖性;细胞外无钙时ＣＣｈ升高［Ｃａ２＋］ｉ作用被减弱;１０μｍｏｌ·Ｌ－１阿托品（Ａｔｒ）可阻断ＣＣｈ升高［Ｃａ２＋］ｉ的作用。基础状态下ＣＭＣ内ＩＰ３水平为（８１５±８６）ｎｍｏｌ·ｇ－１Ｐｒｏ。１,１０和１００μｍｏｌ·Ｌ－１的ＣＣｈ可诱导ＩＰ３水平升高,其峰值是在ＣＣｈ孵育５ｍｉｎ时,此时升高的ＩＰ３水平分别为（１０７±１５）,（１３５±３１）和（１４８±２９）ｎｍｏｌ·ｇ－１Ｐｒｏ。１０μｍｏｌ·Ｌ－１Ａｔｒ可显著抑制ＣＣｈ促ＩＰ３生成作用。结论ＣＣｈ通过激动Ｍ受体使ＣＭＣ的［Ｃ?     

水杨酸镁对胎鼠脑细胞内钙的影响

目的　观察水杨酸镁对脑细胞内钙的影响 ,探讨其中枢神经系统的钙拮抗作用。方法　应用新一代钙离子指示剂Fura 2 /AM技术 ,用双波长荧光分光光度计测定细胞内钙浓度。结果　在不同外钙条件下 (外钙 0 ,0 0 1,0 1,1 0 ,1 3mmol·L-1)细胞内静息钙浓度分别 41± 5 ,5 9± 6 ,84 7± 2 5 ,10 4± 7,(12 6± 5 )nmol·L-1(各组n =8)。水杨酸镁0 2mmol·L-1对静息细胞内钙无显著影响 (P >0 0 5 )。但水杨酸镁 (0 0 5～ 0 4mmol·L-1)可以剂量依赖性抑制高钾及L 谷氨酸诱发的细胞内钙增高。其IC50 分别为 0 32 3mmol·L-1(95 %CI为 0 12 2～ 0 85 4mmol·L-1)和 0 12 4mmol·L-1(95 %CI为 0 0 73～ 0 2 10mmol·L-1)。结论　水杨酸镁通过抑制电压依从性及受体操纵型的钙通道 ,对中枢神经系统具有较强的钙拮抗作用。     

预适应减轻大鼠下肢缺血再灌注后的心肺损伤

目的 :观察预适应 (缺血及腺苷 )对大鼠下肢缺血再灌注后心、肺损伤的保护作用。方法 :雄性SD大鼠随机分为手术组 (Ⅰ ) ,缺血预适应组 (Ⅱ ) ,腺苷预适应组 (Ⅲ ) ,假手术组 (Ⅳ )。测定再灌注后的平均动脉压。终点取心、肺组织行测定心肌ATP酶 ,心、肺组织丙二醛 (MDA)及伊文氏兰含量。结果 :组Ⅰ ,Ⅲ再灌注后平均动脉压分别为 (8.1± 1.9)kPa ,(9.2± 2 .4 )kPa ,均显著低于组Ⅱ ,Ⅳ (P <0 .0 5 )。组Ⅰ心肌Ca2 + ATP酶活力为 (5 .0 2± 0 .2 1)U·mg- 1,低于余 3组 (P <0 .0 5 )。组Ⅰ心、肺组织MDA含量和肺伊文氏兰含量显著高于余 3组。结论 :预适应能改善大鼠下肢缺血再灌注后心、肺组织和功能损伤     

Demonstration of 3,4-dihydroxy(14C)benzoic acid and (14C)vanillic acid after administration of (14C)noradrenaline in the rat

Rats were injected with 40 μCi (±)-[1-³H]noradrenaline and 10 μCi ±-[1-¹⁴C]noradrenaline. Three fractions with a decreased ³H:¹⁴C ratio were isolated from the urine by a combined alumina adsorption-ethyl acetate extraction procedure. Two of the fractions were identified as [¹⁴C]vanillic acid and 3,4-dihydroxy[¹⁴C]benzoic acid, respectively. Vanillic acid represented between 1.5 and 3.0% of the total [¹⁴C]activity excreted within 24 h and the contribution of dihydroxybenzoic acid was 0·2-0·5%. The third fraction with a decreased ³H: ¹⁴C ratio has not been identified and represented about 2% of the total [¹⁴C]activity excreted within 24 h. After monoamine oxidase blockade with 100 mg/kg of iproniazid, the excretion of vanillic acid, 3,4-dihydroxybenzoic acid and the unknown fraction was greatly diminished. The probability that these three substances represent those metabolites arising simultaneously with the formation of tritium water from (±)-[1-³H]noradrenaline is discussed.     

L-甲状腺素引起肥厚心肌细胞膜上~(125)I多非替利结合点的改变

目的　研究致死性心律失常病理模型中IKr通道的变化。方法　用I12 5标记选择性IKr阻断剂多非替利 (dofetilide)进行受体结合实验 ,观察L 甲状腺素引起的心脏重构病变模型中心肌细胞膜上IKr的变化。结果　正常心肌细胞膜上与IKr通道相关的多非替利高亲和性结合点的Bmax为 34 7nmol·g-1(n =5 ) ,在L 甲状腺素引起的肥大心肌细胞膜上多非替利的高亲和性结合点Bmax为 18 1nmol·g-1(n =6 )。应用钙拮抗剂维拉帕米 (n =5 )和IKr阻断剂多非替利 (n =5 )介入后 ,Bmax分别为 37 8nmol·g-1和 2 2 3nmol·g-1。结论　在L 甲状腺素引起的心脏肥大病变模型中IKr通道蛋白质密度下调 ,用药物介入可以使IKr通道上调 ,钙拮抗剂维拉帕米的上调作用比选择性IKr阻断剂多非替利更强     

肺动脉高压模型大鼠肺动脉平滑肌细胞内钙的改变

目的分析肺动脉高压时肺动脉平滑肌细胞Ryanod-ine受体[Ca2+]i释放功能的改变。方法腹腔注射野百合碱建立大鼠肺动脉高压模型,原代培养肺动脉平滑肌细胞,Fura-2/AM负载培养细胞,荧光测钙技术测量Ryanodine受体激动剂对[Ca2+]i变化的影响。结果10nmol.L-1Ry-anodine使对照组[Ca2+]i平均增加(93.31±12.41)nmol.L-1,使PAH组[Ca2+]i平均增加(141.71±13.59)nmol.L-1。两组样本[Ca2+]i增加的数值差异有显著性(P<0.01);10mmol.L-1Caffine使对照组[Ca2+]i平均增加(149.02±13.02)nmol.L-1,使PAH大鼠PASMC的[Ca2+]i平均增加(191.2±21.26)nmol.L-1,两组样本[Ca2+]i数值的变化差异有显著性(P<0.01)。结论肺动脉高压大鼠原代培养的肺动脉平滑肌细胞对Ryanodine受体激动剂的敏感性增强,提示肺动脉高压时Ryanodine受体释放[Ca2+]i的功能发生了异常改变。