溶脲脲原体与人精子共同抗原的研究

为探溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)引起不育机理。本文对Uu 与人精子共同抗原性作初步研究材料与方法一、材料4株Uu 从不育男性精淤液中分离,血清2型和     

与人精子抗原交叉的大肠埃希菌506株Mr36000蛋白的提取 …

以ＳＤＳ和超声波处理大量培养的Ｅ．ｃｏｌｉ５０６株制备全菌蛋白。首先采用（ＮＨ４）２ＳＯ４分段盐分析Ｍｒ３６０００蛋白进行初步纯化。     

与人精子抗原交叉的大肠埃希菌506株M_r36000蛋白的提取与纯化

以ＳＤＳ和超声波处理大量培养的Ｅ．ｃｏｌｉ５０６株制备全菌蛋白。首先采用（ＮＨ４）２ＳＯ４分段盐析对Ｍｒ３６０００蛋白进行初步纯化。发现与人精子交叉抗原的Ｍｒ３６０００蛋白位于６０％８０％和８０％９０％两个饱和硫酸铵盐析段中，并经与兔抗人精子抗体（ＲＡＨＳＡｂ）进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹得以证实。将上述含Ｍｒ３６０００蛋白的盐析物合并，进行ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００柱层析，获得较纯的Ｍｒ３６０００蛋白，并对Ｍｒ３６０００纯化蛋白的特性进行了研究。用ＳＤＳＰＡＧＥ法测出纯化蛋白的Ｍｒ为３６０００；用Ｒｏｔｏｆｏｒ制备型等电聚焦电泳测定Ｍｒ３６０００蛋白的等电点为３８。     

精子抗原与免疫避孕

在分子水平上阐明精子的结构与功能的关系,是当前生殖生物学研究中一个十分引人注目的领域,其中精子抗原的研究就是重要内容之一。精子本身含有许多不同的抗原,这些抗原有些是精子固有的,有些则可能是附属分泌物所包被的。在众多的抗原中,究竟哪些抗原在不育中起主要作用?Menge等的研究证明:成熟的精子是导致免疫不育的重要抗原。为了寻找特异于精子,并在受精过程中起重要作用的抗原,人们进行了广泛的研究。     

抗大肠杆菌_(506)株36kD蛋白单抗的制备及其在人精子上的免疫定位

用纯化的36kD蛋白免疫Balb/c小鼠。取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0以PEG进行细胞融合,融合率为86％。采用ELISA筛选出杂交瘤细胞阳性孔。经过4～7次有限稀释克隆化,共获得7株能稳定分泌36kD相应MCAb的杂交瘤细胞。将杂交瘤细胞分别注射小鼠腹腔,测定腹水McAb的效价为1:5×10~3～1:1×10~5,抗体亚型均为IgG1。用荧光显微镜观察,结果发现EC2作用的人精子头颈部出现明显荧光反应,提示共同抗原存在于人精子头颈部。这些结果有助于进一步探讨细菌感染引起男性不育的机制以及研制细菌避孕疫苗等工作。     

51kD精子抗原的抗体对精子的影响

作者报道抗51kD精子抗原的抗体对精子的凝集作用、制动作用、细胞毒作用,对精子穿透高度的影响,以及其相应抗原在精子上的定位。结果发现,该抗体可引起精子头-头凝集,其相应抗原定位在精子重要功能区──顶体后区。提示此抗体与不育关系密切。     

人精子膜抗原的制备及其在人精子抗体检测中的应用

精子表面的抗原与受精和胚胎的早期发育有密切关系，其中部分抗原能引起机体产生相应的抗体，从而影响到精子的受精功能和胚胎的发育，导致免疫性不育。因此对人类精子膜抗原的研究有助于从蛋白质水平来揭示受精的过程和不育的机制，为不育特别是免疫性不育的治疗及免疫避孕开辟一条新途径。因为精子膜比较坚固，难以破碎和溶解，不易得到较高浓度的精子膜抗原。而且即使精子膜被破碎溶解后，往往有许多种抗原成分混在一起，为了提取一种成分，常需反复分离。目前常用的是先用物理或化学方法溶解精子膜，再用分段分离的方法纯化各种抗原，如Hinsch、Diekman等所用方法。为了减少反复分离的麻烦，我室摸索了提取精子膜抗原的方法并对其进行了分析，现报道如下。     

不孕症患者精子核抗原相关抗体的测定和意义

用胃蛋白酶消化精子头部的膜和尾部,使核裸露,用于建立ELISA法检测不孕症患者血清和精浆中精子核抗原相关抗体(AsnAb),阳性率分别为28.9％和35.6％,均显著高于正常生育夫妇(P<0.001)。AsnAb既可与抗精子膜抗原的抗体同时存在,也可单独存在。同时检测这两种抗体,有助于提高不孕症免疫诊断的总体水平。