增强DNA疫苗的免疫

核酸免疫指通过接种 DNA(虽然使用线性 PCR片段 ,但通常是环状质粒 )或 RNA诱导产生对其编码蛋白的免疫应答。核酸疫苗是疫苗领域较新的成员 ,目前还没有允许用于人医或兽医。然而 ,实验研究表明以质粒 DNA为基础的核酸疫苗可在人体内引起免疫应答 ,而且已有几例临床实验正在验证这种方法。这种方法具有许多优点 ,它不仅非常灵活 ,而且可针对许多动物模型产生保护性免疫 ,前景是非常乐观的。但是 ,还有许多方面有待提高 ,核酸疫苗一般不能引起与传统疫苗一样强的应答 ,因此 ,许多实验室都在研究以增强这种很有前途的疫苗的免疫原性。D…     

提高DNA疫苗免疫效果研究进展

<正>DNA疫苗本质上是质粒,包括真核表达载体和整合到载体上的表达特定基因的序列。DNA疫苗通过特定的递送方式进入宿主细胞核,载体携带的特定抗原基因发生转录,m RNA随即至细胞浆,翻译成抗原蛋白。不同于传统的蛋白或多肽疫苗,DNA疫苗免疫宿主后,所表达的抗原(蛋白或多肽)能够在基质细胞(如肌肉细胞)和树突状细胞中表达,这些抗原经过处理,激活B淋巴细胞,诱导产生抗体,发挥体液免疫应答效应;抗原     

提高DNA疫苗免疫效力的策略

DNA疫苗以其独特优点而倍受青睐，但免疫效力较低制约着其广泛应用。本文从佐刺的使用、优化表达载体．优化抗原基因等方面综述了提高DNA疫苗免疫效力的策略，并对DNA疫苗前景进行了展望。     

诱导免疫的基因—DNA疫苗

作为一种全新的疫苗，ＤＮＡ疫苗具有多方面的优越性，可同时诱导细胞免疫和体液免疫，其本身具有佐剂效应，也可通过其他途径优化免疫应答，本文综述了ＤＮＡ疫苗的优点、接种方式、引起免疫应答的类型以及优化途径；同时也探讨了目前需要解决的问题及其应用情况。     

炭疽DNA疫苗免疫保护效果良好

美国遭受炭疽病菌攻击引起了美国甚至于全世界对这种病菌的恐慌和警觉。疫苗免疫是预防感染的有效手段。最近美国Ohio大学的研究人员证明 ,单独用 DNA疫苗免疫即能保护小鼠抵抗致死量炭疽毒素的攻击。 Ohio大学的研究人员将炭疽菌保护性抗原 (PA)基因 (编码第 175～ 76 0氨基酸的区域 )和致死因子 (L F)基因 (编码第 10～ 2 5 4氨基酸的区域 )分别插入表达质粒 p CI中 ,构建了 2种 DNA疫苗质粒。将质粒用直径 1μm的金粒子包裹后 ,用基因枪分别单独免疫小鼠和将 2种质粒 1∶ 1混合免疫小鼠 (免疫 3次 ,每次间隔 2周 ) ,在最后 1次免疫…     

增强DNA疫苗免疫效果的研究进展

随着DNA重组技术的发展和应用,DNA疫苗、病毒和细菌活载体疫苗等基因工程疫苗的研制日益成为医学领域的一大研究热点。DNA疫苗在许多方面优于传统的灭活苗和减毒苗,但其免疫效果的稳定性和确实性方面尚存不足。影响DNA疫苗免疫效果的因素很多,国内外的许多研究者在这方面作了大量有意义的工作。目前,多数研究者主要通过目的基因的选择、促进外源基因在体内表达、改善疫苗导入方式以及辅以免疫刺激序列和免疫佐剂等方面来提高DNA疫苗的免疫效果。如果DNA疫苗在免疫效果方面能得到大幅度的提高,则它进入临床使用大有前途。     

双链DNA可增强基因疫苗免疫作用

近日,英国《自然》杂志刊登的日本大阪大学研究人员的一篇报告指出,基因疫苗增强免疫系统的关键是能够激活白细胞的双链脱氧核糖核酸（DNA）,而与之前认为的碱基序列无关。     

DNA疫苗的特性及免疫机理研究

DNA疫苗已成为疫苗研究领域的热点,被称为疫苗的第3次革命。本文介绍了DNA疫苗的特点并分析了DNA疫苗的免疫机理,为改进和提高DNA疫苗的免疫效果提供一些理论依据。     

禽用DNA疫苗免疫效果增强的策略

对于人和动物的传染病来说,DNA疫苗免疫是一种很有希望的免疫方式。经过25年的发展,已经上市的核酸疫苗仍屈指可数。禽用核酸疫苗一直是禽类疫苗的研究热点,文中描述提高核酸疫苗免疫效果的方式：接种途径,疫苗剂量及首免时间,增加宿主细胞对质粒的摄入,添加免疫增强分子,优化质粒骨架和密码子,疫苗抗原的选择,异源性的首免-加强免疫策略。     

纹身法免疫增强DNA疫苗免疫效果的评价

为评价不同DNA免疫方法(皮内穿刺、肌肉注射)对DNA疫苗免疫效果的影响,将自行构建的表达传染性喉气管炎病毒gJ基因的真核表达载体pCDNA3.1-gJ和表达新城疫病毒F基因的真核表达载体pVAX1-F通过普通注射器裸DNA肌肉注射和纹身器皮下裸DNA纹身法投递,分别免疫BALB/c小鼠和SPF鸡,三免后2周用NDV强毒株进行攻毒.采集免疫后小鼠和鸡的血清,ELISA法检测抗体水平,并计算鸡攻毒后保护率,来评价这2种免疫途径的免疫效果.结果表明,纹身法皮下投递诱导的特异性免疫应答抗体水平显著高于DNA肌肉注射的抗体水平,而且通过纹身法投递质粒二免后产生的抗体水平显著高于肌肉注射三免后的抗体水平.此外,通过纹身法投递50μg质粒产生的抗体水平高于同一时期通过肌肉注射100 μg质粒产生的抗体水平}攻毒试验表明,和肌肉注射免疫相比,纹身法皮肤免疫的免疫保护效果更佳.以上结果表明,纹身法皮下投递DNA疫苗,能诱导产生更强大的免疫应答,而且还是一种经济实用的方法,它将满足实验室条件下产生更快更强大免疫应答的需要,也为今后DNA疫苗免疫方法和途径研究提供新的思路.     

禽流感DNA疫苗和转移因子联合免疫效果研究

为研究禽流感DNA疫苗和转移因子联合免疫的免疫增强效果,试验用DH5α工程菌增殖的重组质粒pCAGGoptiHA5和转移因子联合免疫SPF鸡(转移因子采用口服和注射两种方式进行协同免疫),免疫后不同时间监测各组免疫鸡只的免疫器官指数、血清HI抗体水平变化情况。结果表明:联合免疫试验组抗体水平显著高于DNA疫苗单独免疫组,联合免疫组鸡只的法氏囊、胸腺和脾脏免疫器官指数均显著增加(P0.05),但转移因子的口服和注射两种免疫方式之间差异不显著(P0.05)。说明禽流感DNA疫苗和转移因子联合免疫协同作用显著。     

限时喂养对DNA疫苗免疫效果的影响

目的：近年来,限时喂养被广泛关注,在成功构建H1N1流感病毒血凝素(HA)的重组质粒pcDNA3.1(+)-HA的基础上,将其作为DNA疫苗注射BALB/c小鼠,比较限时喂养对小鼠免疫效果的影响。方法：将DNA疫苗按照25 μg剂量肌肉注射小鼠,并对其进行限时喂养,2周后加强免疫,免疫2周后通过红细胞凝集抑制试验、脾细胞刺激试验,观察小鼠体液及细胞免疫的变化。结果：经验证,限时喂养在一定程度上可以增强小鼠免疫功能。     

疫苗免疫

在家禽机体机能处于良好状态的情况下，疫苗免疫家禽后其有效率可达到80％或更高，但由于家禽的品种、遗传因素、营养状况、环境因素、疫苗质量、母源抗体、机体状态等原因，也会有一定差异。我国使用的H5N2灭活疫苗对鸡的免疫效果很好，但对鸭等水禽的免疫效果还有待评估。目前，我     

新孢子虫P0基因DNA疫苗免疫沙鼠诱导的免疫应答

为了筛选得到免疫效果较理想的核酸疫苗,采用pVAXⅠ为真核表达载体,新孢子虫P0基因为目的基因,构建了重组质粒pVAXⅠ-NcP0。用重组质粒免疫成年沙鼠60只,剂量为100μg/只,每隔14 d免疫1次,共免3次,首免后每周尾静脉采血1次,三免后第2周,每组处死7只沙鼠,无菌取脾。采用间接荧光抗体试验检测沙鼠血清抗体效价,流式细胞仪检测脾T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+数量。结果:Cp-M佐剂组、pVAXⅠ-NcP0组的抗体效价均高于pVAXⅠ空载体组和对照组,其中Cp-M组效价最高;脾T淋巴细胞亚群数量测定发现,疫苗Cp-M佐剂组、pVAXⅠ-NcP0组的CD4+细胞含量均高于pVAXⅠ空载体组和对照组,Cp-M组、pVAXⅠ-NcP0组与pVAXⅠ空载体组和对照组均差异极显著(P<0.01),Cp-M组、pVAXⅠ-NcP0组的CD8+细胞含量均高于pVAXⅠ空载体组和对照组,Cp-M佐剂组与pVAXⅠ空载体组和对照组差异显著(P<0.05)。表明DNA疫苗pVAXⅠ-NcP0既能较好地刺激细胞免疫又能产生一定的体液免疫反应,可作为候选核酸疫苗进行下一步本体动物免疫试验研究。     

日本血吸虫DNA疫苗对黄牛的田间免疫试验

用VRSj28、VRSj23和VRSj28 VRSj23对黄牛免疫后，在日本血吸虫病流行区云南省洱源县进行日本血吸虫田间自然攻击54d，免疫牛的减成虫率为33．0％－44．0％（P＜0．05），粪便和肝组织的减卵率较高，特异性IgG在首次免疫后显著增高。提示，用此类疫苗对牛进行大规模免疫预防，可减少人群感染的机会。     

基于GapC基因链球菌DNA疫苗构建及其免疫效果

应用PCR方法扩增出链球菌GapC基因后,克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,经PCR和双酶切鉴定后,将重组质粒pcDNA3.1-GapC转染Vero细胞,观察目的基因表达情况,并免疫小鼠检测其血清抗体水平和攻毒保护效果,结果重组质粒pcDNA3.1-GapC经PCR和双酶切后,均可得到与预期大小(1011 bp和5...     

DNA疫苗研究进展

DNA疫苗的出现是疫苗历史上的重大事件,被誉为疫苗研究的第三次革命。DNA疫苗能够诱发体液和细胞介导的免疫应答。本文就DNA疫苗的研究历史,作用机理,在临床应用及其安全性做一概述。     

DNA疫苗简介

<正>DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗,即将外源基因克隆到真核表达载体上,然后将重组的质粒直接注射到动物体内,使外源基因在活体内表达、产生抗原、激活机体免疫系统,引起免疫反应。这些质粒来源于可编码病毒抗原的DNA。疫苗中包含的DNA是通过大肠杆菌发酵过程得到。在接种的过程中,质粒在注射位点被细胞(例如皮肤或者肌肉中的树状突细胞)吸收,从而使编码病毒抗原的基因被转录。     

DNA疫苗研究进展

核酸疫苗作为第3代新型疫苗,其制作简单、经济安全、易于贮存运输等优点已日益引起广泛重视。复制型或称“自杀性”DNA 疫苗是基于常规的DNA疫苗和自主复制型RNA疫苗而发展起来的一种新型疫苗,具备高度的安全稳定性和对外源基因的高效表达。作者简述了常规DNA疫苗的发展过程和复制型DNA疫苗的研究进展。