乙型肝炎患者肝组织中Fas及Fas配体的表达

为探讨乙型肝炎肝组织中Ｆａｓ及Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）表达和分布的相互关系，采用免疫组织化学技术，以兔抗－Ｆａｓ及兔抗－ＦａｓＬ多克隆抗体，对６０例急性轻型肝炎、慢性活动性肝炎及活动性肝硬化患者石蜡包埋肝组织中的Ｆａｓ及ＦａｓＬ进行了检测。Ｆａｓ及ＦａｓＬ的检出率分别为７６．７％（４６／６０）及７０．０％（４２／６０），Ｆａｓ于肝细胞胞浆内表达，ＦａｓＬ多在肝组织中浸润的淋巴细胞胞浆内表达（３４／４２，８０．９％），也见于肝细胞胞浆中（２５／４２，５９．５％）。ＦａｓＬ阳性淋巴细胞主要分布于汇管区，肝小叶内很少见，ＦａｓＬ阳性肝细胞的分布类同Ｆａｓ阳性肝细胞；在急性轻型肝炎，阳性细胞多在小叶内弥散分布，在慢性活动性肝炎和活动性肝硬化则更多集聚于碎屑样坏死灶和假小叶的周边。免疫组化双标记染色显示，Ｆａｓ及ＦａｓＬ可在同一或不同肝细胞胞浆内表达，但多分布于同一区域。本研究在正常肝组织中未查见ＦａｓＬ的表达，提示在病理状态下，肝细胞才出现ＦａｓＬ的表达。Ｆａｓ及ＦａｓＬ在肝组织中的分布表明，Ｆａｓ－ＦａｓＬ系统在乙型病毒性肝炎肝细胞损伤中起着重要的作用。     

Fas及其配体诱导非酒精性脂肪性肝炎肝细胞凋亡

脂肪肝的发病日趋增多，在常规行肝穿刺活检患者中1．2％～9％患有非酒精性脂肪性肝炎（NASH），15％～50％的肝硬化与NASH有关。目前，NASH的发病机制尚不清楚。有研究报道NASH肝组织中肝细胞凋亡突出，但关于肝细胞凋亡在NASH发病中的作用及其调节机制有待研究。因此，我们采用高脂、胆碱一甲硫氨酸缺乏饮食（high fat，methionine and choline deficient diet，MCD）方法建立小鼠NASH模型，以探讨凋亡相关基因Fas及其配体（FasL）在NASH中与细胞凋亡及病情进展的关系。     

38例急性乙型病毒性肝炎组织中Fas抗原和Fas配体的表？…

目的：探讨Ｆａｓ－ＦａｓＬ系统在急性病毒性肝炎发病中的作用。方法：采用免疫组织化学技术，结果：３８例急性乙型肝炎肝组织中的Ｆａｓ和ＦａｓＬ表达的检出率分别为５５．３％和６６．５％，Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达强度与患者的年龄，性别和血清Ａ，Ａ／Ｇ和ＰＴＡ无关，而与血清ＡＬＴ和ＴＢＩＬ水平有关，较重型（伴桥样坏死）的急性乙型肝炎其Ｆａｓ表达比轻型急性乙型肝炎要强，结论：由ＣＴＬ－Ｆａｓ－ＦａｓＬ系统介导的     

38例急性乙型病毒性肝炎肝组织中Fas抗原和Fas配体的表达研究

目的:探讨Fas-FasL系统在急性病毒性肝炎发病中的作用.方法:采用免疫组织化学技术.结果:38例急性乙型肝炎肝组织中的Fas和FasL表达的检出率分别为55.3%和66.5%;Fas和FasL的表达强度与患者的年龄、性别和血清A、A/G和PTA无关,而与血清ALT和TBIL水平有关.较重型(伴桥样坏死)的急性乙型肝炎其Fas和FasL表达比轻型急性乙型肝炎要强.结论:由CTL-Fas-FasL系统介导的肝细胞凋亡在急性乙型肝炎的发病中起了较重要的作用.     

氟美松对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Fas/Fas配体表达的影响

近来的研究表明,氟美松不仅可以抑制肿瘤坏死因子(ＴＮＦ)α等前炎症细胞因子的表达,而且还可以抑制肺泡上皮细胞凋亡及Ｆａｓ/Ｆａｓ配体(ＦａｓＬ)的表达[1]。本实验通过观察氟美松对急性肺损伤(ＡＬＩ)大鼠肺组织细胞凋亡及Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达的影响,探讨其在全身炎症反应及ＡＬＩ中的作用机制及意义。一、材料与方法1.模型复制与分组:雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠78只,体重150～250ｇ。大鼠经1%戊巴比妥钠麻醉后,随机分成3组:(1)ＡＬＩ组:静脉注射脂多糖(ＬＰＳ)5ｍｇ/ｋｇ,注射ＬＰＳ后1、2、4、6、12和24小时活杀。(2)氟美松治疗组:在注射…     

酒精性肝纤维化中主要信号转导通路的研究

在酒精性肝病的进展过程中,乙醇在体内代谢通过多个环节诱导肝星状细胞(HSC)活化增殖,导致肝纤维化的发生,这个过程是向酒精性肝硬化进展的病理阶段,早期具有可逆转的特点。了解参与HSC活化增殖的相关细胞因子介导的信号转导通路可为逆转酒精性肝纤维化提供有效的靶向。目前研究较多的信号途径包括TGF-β/Smads通路、Wnt/β-catenin通路和NF-κB通路等。     

白细胞介素-10对肝星状细胞增殖及表达Fas/Fas配体的影响

研究拟通过观察外源性血小板衍生生长因子(PDGF)和白细胞介素-10(IL-10)干预后肝星状细胞(HSC)增殖及凋亡相关基因Fas/FasL表达的变化,进一步探讨PDGF致纤维化和IL-10抗肝纤维化的机制。     

Fas/FasL系统表达与结直肠癌的研究进展

细胞凋亡是指在一定生理和病理情况下,机体为维护内环境的稳定而发生的主动性细胞死亡过程,即程序性死亡.由死亡受体与其配体相互作用是引起细胞凋亡的主要途径之一,其中Fas/FasL系统是被认为最主要的介导细胞凋亡的信号转导途径.大肠癌是严重威胁人类健康的常见恶性肿瘤之一,大肠癌的发生、发展与细胞凋亡的调节失衡有关.本文就Fas/ FasL系统表达与结直肠癌发生发展的关系及相关方面研究作一综述.     

异烟肼诱导HepG2细胞损伤及其Fas/Fas配体的表达

目的 通过建立异烟肼致HepG2细胞坏死或凋亡模型,观察HepG2细胞Fas/Fas配体(FasL)的表达.方法 以HepG2细胞为模型,分别用含1、2、4、6、8 mg/mL异烟肼的细胞培养液,空白对照组加入新鲜培养液,培养24 h后观察各组细胞形态,膜联蛋白(Annexin)V和碘化丙啶染色,流式细胞仪检测HepG2细胞的坏死和凋亡情况以及其Fas/FasL的表达.数据采用单因素方差分析,各不同浓度药物组与空白对照组的比较采用Dunnett t检验.结果 随异烟肼浓度的增加(4、6、8 mg/mL),HepG2细胞出现逐渐增多的坏死和凋亡,总死亡率分别为(32.1±7.5)％、(34.9±8.1)％和(38.2±9.4)％,与正常对照组的(7.2±1.5)％相比,差异有统计学意义(t=4.62、5.14、5.75,均P＜0.01);Fas的表达也随之增加,异烟肼2、4、6和8 mg/mL浓度组Fas表达率分别为(8.7±2.2)％、(11.5±2.8)％、(12.3±3.0)％和(10.6±2.9)％,与正常对照组的(3.1±0.8)％比较,差异有统计学意义(t=2.97,P＜0.05;t=4.46,P＜0.01;t=4.88,P＜0.01;t=3.98,P＜0.05).异烟肼4、6、8 mg/mL浓度组FasL表达率分别为(16.2±3.5)％、(21.7±4.8)％、(18.7±4.9)％,与正常对照组的(7.4±1.4)％相比,差异有统计学意义(t=3.11,P＜0.01;t=5.06,P＜0.01;t=3.99,P＜0.05).异烟肼浓度为8 mg/mL时,HepG2细胞的死亡增加,主要以坏死为主,凋亡发生率未再增加.结论 异烟肼可以诱导HepG2细胞变性、坏死和凋亡,这种凋亡的发生可能与异烟肼诱导肝细胞表达Fas/FasL增多有关.     

锌对砷中毒小鼠肝脏Fas和FasL表达影响的实验研究

目的 探讨砷对小鼠肝脏Fas、FasL表达的影响及锌的拈抗作用.方法 选用健康昆明种小鼠60只,按体质量分成5组:阴性对照组(不给砷也不给锌),单纯给砷组(55 mg/L NaAsO2溶液),砷+低锌组、砷+中锌组、砷+高锌组均给55 mg/L NaAsO2溶液,并分别给20、40、80 mg/L ZnSO4溶液.经口连续灌胃(按体质量灌胃量为0.02 ml/g.1次/d)6周,待实验结束后处死小鼠,采用免疫组化法测定小鼠肝脏巾凋亡因子Fas、FasL表达.结果 干预组随着给锌量的增加,肝脏Fas、FasL的表达率逐渐降低.低、中锌+砷组的Fas的表达率[83.33%(10/12)、50%(6/12)]、FasL表达率[66.67%(8/12)、41.67%(5/12)]与阴性对照组Fas[8.33%(1/12)]、FasL[0.00%(0/12)]表达率比较,差异有统计学意义(P均<0.05);中、高锌+砷组的Fas的表达率[50%(6/12)、25%(3/12)]与阳性对照组[8.33%(1/12)]比较,差异有统计学意义(P均<0.01),中、高锌+砷组的FasL的表达率[41.67%(5/12)、16.67%(2/12)]与阳性对照组[91.67%(11/12)]比较,差异有统计学意义(P均<0.05).结论 砷可使小鼠肝脏Fas、FasL的表达率增高,促进肝脏的凋亡,锌可拮抗砷对细胞凋亡的作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of arsenic on liver Fas/FasL expression in mice and to observe the antagonize effect of zinc. Methods Sixty health Kunming mice were divided into five groups according to their body mass: negative control group(no arsenic and no zinc), arsenic group(55 mg/L NaAsO2 solution), low dose zinc intervention group(55 mg/L NaAsO2 solution and 20 mg/L ZnSO4 solution), middle dose zinc intervention group (55 mg/L NaAsO2 solution and 40 mg/L ZnSO4 solution), and high dose zinc intervention group (55 mg/LNaAsO2 solution and 80 mg/L ZnSO4 solution). Everyday the solution was given by oral gavage at a dose of 0.02 ml/g body weight for six weeks. The expression of Fas/FasL in mice liver was examined by immunohistochemistry.Results With the amount of zinc increasing, the expression of both Fas and FasL in mice liver decreased gradually. The expression rates of Fas[83.33%(10/12), 50%(6/12)] and FasL[66.67%(8/12), 41.67%(5/12)]in low dose zinc intervention group and middle dose zinc intervention group, respectively, were different from the expression rate of Fas[8.33%(1/12)] and FasL[0.00%(0/12)] in the negative control group(all P < 0.05). The Fas expression rate of middle dose zinc intervention group[50%(6/12)] and the high dose zinc intervention group [25%(3/12)] was compared with the arsenic group[8.33%(1/12)], and the difference was statistically significant (all P < 0.01 ). The FasL expression rate of the middle dose zinc intervention group [41.67% (5/12 )] and the high dose zinc intervention group[16.67%(2/12)] was compared with positive control group[91.67%(11/12)], and the difference was statistically significant (all P < 0.05). Conclusions Arsenic can increase the expression of Fas and FasL in mice liver, and promote apoptosis in liver, zinc may antagonize the effect of arsenic.     

Fas/FasL途径在柔红霉素诱导HL-60及U937细胞凋亡中作用的研究

目的；研究柔红霉素（DNR）诱导白血病细胞凋亡的机制，进一步探讨Fas/FasL 途径在DNR诱导白血病细胞凋亡中的作用。并评价sFAsL与DNR联用的致凋亡效应。方法：将DNR作用于白血病细胞系HL－60，K562，U937细胞，并用流式细胞术（FCM）检测其Fas抗原表达的改变。sFasL,DNR诱导白血病细胞凋亡，以抗Fas单抗（IgG1)阻断Fas/FasL 途径，借助原位末端标记法（TUNEL）和FCM检测白血病细胞凋亡率。结果：DNR处理HL－60，K562，U937细胞18h后，Fas表达阳性率无明显变化（P＞0．05），与sFasL联合作用后显示出协同效应，。IgG1不能阻断DNA致白血病细胞凋亡的作用，但可阻断sFasL致白血病细胞凋亡的作用。结果：DNR致白血病细胞株U937，HL－60凋亡的作用不依赖于Fas/FasL 途径，但sFasL与DNR联合应用可协同增强抗肿瘤效应。     

大鼠酒精性肝纤维化肝非实质细胞蛋白质组学研究

目的本文研究酒精对肝非实质细胞蛋白质表达的影响,以探讨酒精性肝纤维化的发病机制。方法大鼠酒精灌胃导致其发生肝纤维化。采用James染色法检测大鼠肝脏的病理学变化,通过Percoll密度梯度离心富集肝非实质细胞,再通过二维凝胶电泳(2DE)分离非实质细胞的蛋白质,经考马斯亮蓝(G250)染色,采用液相色谱串联质谱鉴定差异表达的蛋白质,并对部分差异蛋白质采用实时定量RT-PCR和免疫印迹的方法进行验证。对于2DE胶上的蛋白质点,采用两样本t检验的方法,对于RT-PCR分析,采用Mann-Whitney U检验进行统计分析。结果建立了酒精性肝纤维化大鼠模型,通过Percoll密度梯度离心纯化的非实质细胞中淋巴细胞、Kupffer细胞和内皮细胞分别富集了1.5、3.2和3.7倍。采用二维凝胶电泳法检测到了800多个蛋白质点,检测到具有2倍以上的差异蛋白质有26个,采用LC-MS法鉴定了21个非冗余蛋白质,对其中7个蛋白质的RT-PCR分析发现:ANXA3、CES3、ATPA和NDUFV2的mRNA水平和蛋白质组研究结果一致。结论本研究鉴定了一批与酒精性肝纤维化相关的蛋白质,可能为了解酒精性肝纤维化发病机制提供一些新线索。     

实验性肺纤维化细胞凋亡及Fas/FasL基因变化

目的　检测肺纤维化时细胞凋亡及Fas/FasL基因的变化,探讨细胞凋亡和基因变化在肺间质纤维化中的意义。方法　将 40只大鼠分为肺纤维化组及正常对照组,每组 20只,应用末端原位杂交(TUNEL)、原位杂交、免疫组化技术检测博莱霉素致肺间质纤维化大鼠肺组织细胞凋亡、Fas/FasLmRNA水平及蛋白表达的变化。结果　肺纤维化组大鼠肺组织中细胞凋亡指数为 55.3±12.2,对照组为 4 7±1 0,两组比较差异有统计学意义(t=13.06,P<0 .01),Fas及FasLmRNA肺纤维化组为(175.8±21.6, 5.2±1.6),正常对照组为 (26.6±1.9, 0.5±0.4),两组比较差异有统计学意义 (t分别为 21.7, 8.79;P均<0.01),肺纤维化组Fas、FasL蛋白表达分别为 956±96, 285±76,正常对照组分别为 491±96, 100±18,两组比较差异有统计学意义 (t=5.03, 12.81;P<0.01)。结论　肺间质纤维化时肺组织细胞凋亡上调,Fas/FasL基因上调蛋白表达增强,在肺纤维化发生、发展中起到重要的作用。     

酒精性肝纤维化的血清标志物研究进展

酒精性肝纤维化是由于长期过量摄入酒精使肝细胞发生炎症及坏死等改变,导致纤维结缔组织在肝内过度沉积而引发的一系列病理改变。实验室指标有助于助鉴别酒精性肝病,再进一步联合肝纤维化检验方法可诊断酒精性肝纤维化。其中肝纤维化诊断的"金标准"仍然是肝活组织检查,但因为其有创性,临床实践中开展受限。因此具有诊断价值的血清新型分子标志物近来不断被发现,且取得了较大突破;同时以综合多项临床生化指标、影像学为基础的肝纤维化非创伤性诊断预测模型对肝纤维化的诊疗也带来了新的希望。综述了近年来用血清标志物对酒精性肝纤维化非侵入诊断进行预测评估的研究进展。     

Increased liver stiffness in alcoholic liver disease:Differentiating fibrosis from steatohepatitis

AIM:To test if inflammation also interferes with liver stiffness (LS) assessment in alcoholic liver disease (ALD) and to provide a clinical algorithm for reliable fibrosis assessment in ALD by FibroScan (FS).METHODS:We first performed sequential LS analysis before and after normalization of serum transaminases in a learning cohort of 50 patients with ALD admitted for alcohol detoxification. LS decreased in almost all patients within a mean observation interval of 5.3 d. Six patients (12%) would have been m...     

狼疮肾炎患者循环单核细胞表达Fas和血浆可溶性Fas Ligand水平的研究

目的 探讨狼疮肾炎（LN）病人单核细胞凋亡加速的机制。方法 对17例LN病人进行观察,以15名正常人为对照。采用流式细胞仪检测单核细胞Fas和FasLigand(FasL)的表达;酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆中可溶性FasLigand(sFasL）的水平;单核细胞与重组人FasL共孵育,磺化丙啶染色、流式细胞仪检测单核细胞凋亡,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察单核细胞体外存活率。结果 LN病人单核细胞Fas的表达较正常人明显上调（P＜0．05）;处于狼疮活动期的LN病人与狼疮静止期的LN病人之间单核细胞Fas的表达差异无显著性（P＞0．05）;处于狼疮活动期的LN病人与狼疮静止期的LN病人之间单核细胞Fas的表达差异无显著性（P＞0．05）。正常人和LN病人的单核细胞表面均未检测出FasL的表达。正常人血浆中未能检测出sFasL,但LN病人血浆存在有sFasL;sFasL的水平在狼疮活动期和静止期的LN病人之间差异无显著性（P＞0．05）;单核细胞与重组人FasL在体外共同培养2h后,LN病人单核细胞的凋亡较正常人明显增高（P＜0．05）,单核细胞与重组人FasL在体外共同培养6h后,LN病人单核细胞的存活率较正常人明显低下（P＜0．05）。结论 LN病人单核细胞表面功能在Fas表达上调,血浆中存在sFasL,这可能是LN病人单核细胞凋亡加速的原因之一。     

血清纤维化指标对肝纤维化诊断价值的研究

目的评价血清纤维化指标透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原（CⅣ）、Ⅲ型前胶原肽（PⅢP）、层黏连蛋白（LN）对肝纤维化诊断的价值.方法对确诊的慢性乙型肝炎患者50例和健康人18例,测定血清纤维化指标水平,并进行肝组织纤维化分期.根据受试者工作特征曲线判别4项指标对于肝纤维化分期的诊断价值.结果血清HA、CⅣ、PⅢP和肝脏组织炎症分级呈较弱正相关（r分别为0.430、0.382和0.300,P＜0.05）.血清HA、CⅣ与肝脏组织纤维化分期呈中度正相关（r分别为0.614、0.708,P＜0.05）.血清HA、CⅣ水平随肝纤维化的进展程度而升高.血清HA诊断早期肝硬化（S4）的受试者工作特征曲线下面积（AUC）大于血清CⅣ、PⅢP和LN（AUC=0.967比0.932、0.659、0.403）.血清CⅣ诊断肝纤维化（S1～S4）的AUC大于血清HA、PⅢP和LN（AUC=0.853比0.680、0.536、0.487）.血清LN对于肝组织分级或分期均无统计学意义.联合HA＋CⅣ检测比单一指标有更高的特异度.结论血清纤维化指标对肝纤维化进程有一定的预测意义,但不能对肝纤维化精确分期,因此不能取代肝组织病理活检.联合多项指标检测可在一定程度上提高检测效率.寻找新的血清标志物和联合其他标志物是肝纤维化无创性研究的趋势所在.     

尿毒症病人循环单核细胞Fas的表达及血浆FasL水平

目的：慢性肾功能衰竭（肾衰）病人单核细胞功能低下与其凋亡加速有关,兹拟进一步探讨尿毒症病人单核细胞凋亡加速的机制。方法：对7例尿毒症未透析病人和18例液透析（血透）病人进行观察,以15例正常人为对照。采用流式细胞仪检测单核细胞Fas和Fas配基（Fas ligand,FasL）的表达;以ELISA法测定血浆中可溶性FasL（sFasL)的水平。在体外将单核细胞与重组人FasL共同孵育,抽提DNA后用碘化丙啶染色、流式细胞仪检测单核细胞凋亡率,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察单核细胞存活率。结果：尿毒症未透析病人和血透病人单核细胞Fas的表达较正常人明显上调（P＜0.05）;血透病人的Fas表达水平高于非透析病人（P＜0.05）。正常人和尿毒症病人的单核细胞表面均未检测出FasL表达。正常人血浆中未能检测出sFasL,但尿毒症病人血浆中存在有sFasL;sFasL的水平在尿毒症未透析病人和血透病人之间、血透病人透前与透后之间、以及采用聚砜膜和纤维素膜透析器进行透析的两者之间差异均无显著性（P＞0.05）。单核细胞与重组人FasL在体外共同培养2h后,血透病人单核细胞的凋亡率较正常人明显增高,而其存活率则较正常人明显低下。结论：尿毒症病人单核细胞表面功能Fas表达上调,血浆中存在sFasL,这可能是慢性肾衰病人单核细胞凋亡的原因之一。