乳腺癌转移相关基因表达蛋白组织微阵列的初步研究

目的:通过MMP2、P27Kipl、纤维连接蛋白(fibronectin)、MDM2、P21WAF1免疫组化染色,分析上述不同蛋白在乳腺癌组织中的表达,探讨乳腺癌转移相关分子生物学机制.方法:收集具有淋巴结转移的乳腺癌病例100例,制作成组织芯片,进行MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1免疫组化染色,根据染色指数(staining index,阳性细胞百分数×染色强度)对乳腺癌原发灶和转移灶进行统计学处理,分析上述不同指标在乳腺癌转移中的作用.结果:100例乳腺癌标本中,转移灶MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1的表达均高于原发灶肿瘤组织的表达,其中转移灶MMP2、P27Kipl、fibronectin、P21WAF1的表达与原发灶的差别具有统计学意义,P＜0.05.结论:MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1表达相关基因可能参与乳腺癌转移,肿瘤细胞表达MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1蛋白增加,可能更易于其转移和浸润.从另外一个侧面说明:在乳腺癌演进的过程中,肿瘤细胞获得侵袭能力可能不是由单个基因进行调控的,而是多个基因相互协调作用的结果.     

不同转移能力乳腺癌细胞株的差异表达蛋白研究

背景与目的:肿瘤转移相关蛋白在肿瘤细胞转移过程中具有重要作用,本研究在建立高转移潜能乳腺癌细胞株LM-MCF-7的基础上,筛选乳腺癌细胞转移相关蛋白并探讨其功能。方法:应用蛋白质组学和免疫印迹等方法比较和筛选来源相同但具有不同转移能力的乳腺癌细胞株(MCF-7/LM-MCF-7)的蛋白质表达差异。将克隆有存活蛋白(survivin)的真核表达载体pcDNA3-Sur转染至MCF-7细胞,通过“伤口愈合”实验检测存活蛋白对乳腺癌细胞迁移的影响。结果:应用蛋白质组学技术获得8个有意义的蛋白质,分别有参与细胞骨架构成、物质代谢、细胞凋亡、蛋白折叠和蛋白质相互作用等功能。应用免疫印迹方法发现,在MCF-7细胞中nm23、p27表达水平较高,在LM-MCF-7中存活蛋白、肌球蛋白轻链激酶(myosinlightchainkinase,MLCK)和Bcl-2表达水平较高。“伤口愈合”实验显示,存活蛋白过表达可明显增强MCF-7细胞的迁移能力。结论:不同转移能力的乳腺癌细胞株中存在与乳腺癌转移相关的蛋白质,存活蛋白与乳腺癌转移有密切的关系。     

锌指蛋白对乳腺癌转移作用的研究进展

 乳腺癌转移的分子机制目前尚不完全清楚。近年研究发现锌指蛋白在肿瘤形成、生长以及转移中起着重要作用,现对锌指蛋白在乳腺癌转移过程中的作用进行综述。     

乳腺癌转移相关机制

乳腺癌在女性中有着高发病率和死亡率.虽然目前针对乳腺癌有了多种治疗方法,但是乳腺癌的转移仍是一个棘手的医学问题.目前,乳腺癌相关转移机制主要涉及上皮-间质转化、细胞外基质的溶解、循环肿瘤细胞或播散性肿瘤细胞、肿瘤血管和肿瘤微环境等.乳腺癌相关转移机制的明确对预测和治疗乳腺癌转移有一定的指导意义.     

复发转移乳腺癌组织中BCRP和MRP1的表达及其临床意义

目的:探讨BCRP和MRP1在复发转移乳腺癌组织中的表达与乳腺癌的侵袭、复发及转移的关系.方法:采用免疫组化SABC法,检测BCRP和MRP1在局部复发的乳腺癌灶、有复发转移组的原发灶和无复发转移的原发灶中的蛋白表达情况.结果:1)BCRP在局部复发组中的表达显著高于复发转移组(P=0.001),BCRP和MRP1在复发转移组中的表达均明显高于无复发转移组(P=0.04,P=0.003).2)BCRP在复发灶组的表达明显高于原发灶组的表达(P=0.002),MRP1在两组的表达差异无统计学意义,P=0.59.3)BCRP与ER(r=0.389,P＜0.01)、PR(r=0.215,P＜0.05)、HER-2(r=0.339,P＜0.05)呈正相关,MRP1与淋巴结转移(r=0.207,P＜0.05)呈正相关,而与其他各项病理特征均无相关性.结论:BCRP在复发转移的乳腺组织中表达增强,其表达与雌激素及其受体和HER-2呈正相关.MRP1在复发转移的乳腺癌组织中高表达,且与淋巴结转移明显相关,可能与原发性耐药相关,提示肿瘤的恶化程度.     

乳腺癌复发转移与基因表达的相关性研究

目的:研究BCL2L2、CCNA1、CD44、CTSD和MAP2K7基因表达与乳腺癌复发转移特性的关系.方法:81例乳腺癌患者术后5年随访期内出现复发者为研究组(41例)和未复发仍存活者为对照组(40例).提取所有病例石蜡包埋组织的RNA,质量鉴定后,应用实时定量RT-PCR芯片技术平行检测BCL2L2、CCNA1、CD44、CTSD和MAP2K7基因的表达,分析各基因表达差异与乳腺癌复发转移之间的关系.结果:CCNA1、CD44和MAP2K7基因在复发病例中均高表达(57.5%、66.7%和58.5%),而BCL2L2和CTSD基因在复发组中低表达(56.1%和53.7%),BCL2L2、CCNA1、CD44、CTSD和MAP2K7基因表达水平在复发与未复发组间差异均有统计学意义,P均<0.05.BCL2L2和CTSD基因是乳腺癌复发转移的危险因素.CCNA1、CD44和MAP2K7基因对乳腺癌复发转移是保护因素.结论:实时定量RT-PCR芯片技术能快速、准确地检测肿瘤相关特性基因AR、CCND1和ESR2的表达.乳腺癌术后BCL2L2、CCNA1、CD44、CTSD和MAP2K7基因的差异表达分析可做为预防和控制该病复发的新线索.     

乳腺癌中Fhit蛋白的低表达与转移的关系

背景与目的：脆性三联组氨酸（Fragile histidine triad,FHIT)基因为一种候选的肿瘤抑制基因,横跨大多数人类基因组的共同脆性位点FRA3B,FHIT基因的改变见于多种类型特别是上皮起源的人类类型肿瘤,并与已知的致癌物质作用有关,本研究目的为探讨乳腺癌中脆性三联组氨酸FHIT基因蛋白Fhit表达状况及其与临床病理指标的关系。方法：采用兔抗人Fhit蛋白抗体和枸椽酸－微波－链酶卵白素－过氧化物酶（Streptavidin-HRP,SP）免疫组化方法检测66例福尔马林固定,石蜡包埋的乳腺癌,其中6例为导管内癌,60例为浸润性导管癌的标本中Fhit表达状况并分析其与癌组织侵犯及淋巴结转移的关系。结果：癌组织Fhit表达强度较癌旁非癌乳腺组织低者为38例（57．6％）,其中22例为阴性（22．0％）,较癌旁非癌乳腺组织高者为18例（27．3％）,与癌旁非癌乳腺相等者为10例（15．2％）,伴局部或腋下淋巴结转移的乳腺浸润性导管癌Fhit蛋白表达低者阳性率为83．3％（20／24）,无淋巴结转移的浸润性导管癌为50．0％（18／36）,导管内癌为0／6,已伴淋巴结转移癌组83．3％（20／24）与未转移癌组42．9％（18／42）比较,差异有显著性（P＜0．01）,浸润性导管癌中已伴淋巴结转移癌组与未转移癌组比较,差异有非常显著性（P＜0．01）,结论：乳腺癌Fhit表达可能与癌组织侵犯及淋巴结转移相关,提示Fhit低表达可能对乳腺癌的演化和进展具有重要作用并可能成为一个新的预后指标。     

人乳腺癌MRP基因表达与临床病理参数的关系

目的：研究多药耐受相关蛋白基因（MRP）在人乳腺癌中的表达与临床病理参数的关系。方法：采用免疫组化技术检测62例初发乳腺癌组织标本MRP表达,13例癌旁正常乳腺组织和8例乳腺良性肿瘤组织作为对照,结果：三种组织阳性率分别为：．乳腺癌72．6％,癌旁正常乳腺组织23．1％,乳腺良性肿瘤18．2％,癌组织与其它两种组织相比,差异具有显著性（P＜0．05）,乳腺癌组织MRP表达水平与提示乳腺癌疾病发展和预后的临床病理参数,如年龄,原发灶大小,淋巴结转移数,病理学类型和组织学分级无关（P＞0．05）,结论：多药耐表型是与乳腺癌恶性表型同时发生的一种内在本质特征,其表达程度不受疾病发展的影响,S－P免疫组织化学方法检测临床乳腺标本具有灵敏度高,相对定量,结果可靠的优点。     

PTEN蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨抑癌基因PTEN在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用SABC免疫组织化学方法，检测了62例乳腺癌、15例癌旁及12例正常乳腺组织中PTEN蛋白表达水平，结合临床病理指标进性分析。结果 乳腺癌组PTEN蛋白阳性表达率（56．5％）显著低于癌旁组（86．7％）和正常组（100．0％），P均〈0．05；癌旁组（86．7％）低于正常组（100．0％），P〉0．05。伴有淋巴结转移的乳腺癌中PTEN蛋白阳性表达率（32．1％）显著低于无淋巴结转移乳腺癌（61．8％），P〈0．05；浸润性癌PTEN蛋白阳性表达率（44．4％）显著低于早期浸润性癌（75．0％），P〈0．05；PTEN蛋白表达与肿瘤大小、PTNM分期无关，P〉0．05。结论 PTEN蛋白在乳腺癌的发生、发展、侵袭转移中可能起着重要作用。PTEN蛋白表达水平可以作为判定乳腺癌病理生物学行为的客观指标。     

胃癌活检标本癌转移相关基因表达与淋巴结转移的预测

目的：检测活检标本中10项癌转移相关基因的表达与淋巴结转移的关系，探讨它们在预测胃癌淋巴结转移中的应用价值。方法：采用免疫组化S-P法，检测44例胃镜活检胃癌粘膜CD44V6、E-cadherin、VEGF、EGFR、p53、nm23-H1、Fas、FasL、Cath-B、Cath-D的表达情况，分析其与胃癌淋巴结转移的相关性。结果：VEGF和EGFR与胃癌淋巴结转移呈正相关，Fas与胃癌淋巴结转移呈负相关。VEGF( )EGFR( )、VEGF( )E-cadherin(-)、VEGF( )Fas(-)及EGFR( )Fas(-)等4对两两组合显示与胃癌淋巴结转移有关。3个因素预测胃癌淋巴结转移的敏感性和特异性偏低，4对两两组合可提高预测胃癌淋巴结转移的特异性，但敏感性明显降低。结论：检测活检标本癌转移相关基因的表达在预测胃癌淋巴结转移的临床实际应用意义不大。     

Bone Metastasis in Advanced Breast Cancer: Analysis of Gene Expression Microarray

Background

Approximately 30% to 40% of breast cancer recurrences involve bone metastasis (BM). Certain genes have been linked to BM; however, none have been able to predict bone involvement. In this study, we analyzed gene expression profiles in advanced breast cancer patients to elucidate genes that can be used to predict BM.

Expression of EMSY,a Novel BRCA2-link Protein,is Associated with Lymph Node Metastasis and Increased Tumor Size in Breast Carcinomas

Background: The EMSY gene encodes a BRCA2-binding partner protein that represses the DNA repairfunction of BRCA2 in non-hereditary breast cancer. Although amplification of EMSY gene has been proposed tohave prognostic value in breast cancer, no data have been available concerning EMSY tissue expression patternsand its associations with clinicopathological features. Materials and Methods: In the current study, we examinedthe expression and localization pattern of EMSY protein by immunohistochemistry and assessed its prognosticvalue in a well-characterized series of 116 unselected breast carcinomas with a mean follow up of 47 monthsusing tissue microarray technique. Results: Immunohistochemical expression of EMSY protein was detected in76% of primary breast tumors, localized in nuclear (18%), cytoplasmic (35%) or both cytoplasmic and nuclearsites (23%). Univariate analysis revealed a significant positive association between EMSY expression and lymphnode metastasis (p value=0.045) and larger tumor size (p value=0.027), as well as a non-significant relation withincreased risk of recurrence (p value=0.088), whereas no association with patients’ survival (log rank test, pvalue=0.482), tumor grade or type was observed. Conclusions: Herein, we demonstrated for the first time theimmunostaining pattern of EMSY protein in breast tumors. Our data imply that EMSY protein may have impacton clinicipathological parameters and could be considered as a potential target for breast cancer treatment.     

葡萄膜黑色素瘤血管生成拟态及其意义

肿瘤需要机体血液供应来满足生长需要和进行播散。关于肿瘤的血液供应，目前国内外的研究热点集中在肿瘤组织血管生成的研究，大家公认的肿瘤组织血液供应来自于机体的血管进入肿瘤内形成新血管而产生的血液循环。1999年美国Iowa’s大学的Maniotis等证明在人眼葡萄膜黑色素瘤存在一种     

Artemin在乳腺癌中的表达及意义

[目的]评价Artemin蛋白在乳腺癌组织中的表达及其意义。[方法]应用免疫组织化学方法检测159例乳腺癌组织Artemin表达情况,分析其与乳腺癌临床病理特征和预后间的关系。[结果]乳腺癌组织中Artemin阳性率为65.4%（104/159）,高于乳腺良性病变组织中的Artemin阳性率（35.7%,5/14）（χ2=4.868,P=0.027）。Artemin表达与乳腺癌TNM分期和Her-2过表达呈正相关（P=0.032,P=0.001）。Artemin蛋白阳性患者5年生存率为47.4%,而Artemin蛋白阴性患者5年生存率为70.5%,差异有统计学意义（P=0.021）。[结论 ]乳腺癌组织中Artemin的表达状况与乳腺癌侵袭转移有密切关系。     

KAI1基因在乳腺癌中的表达及意义

[目的]探讨KAI1基因在人乳腺癌中的表达及意义。[方法]应用免疫组织化学S鄄P法检测87例乳腺癌及30例癌旁正常乳腺组织中的KAI1表达情况。[结果]乳腺癌组织中KAI1阳性率显著低于癌旁正常乳腺组织(P<0.01)。KAI1阳性率在淋巴结转移组和未转移组中分别为34.0%和58.8%,在浸润组和非浸润组中分别为35.9%和77.8%,差异均具有显著性(P<0.05)。[结论]KAI1基因在乳腺癌中表达降低,且与乳腺癌浸润和转移有关。     

DMBT1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

[目的]探讨脑恶性肿瘤缺失基因1（DMBTI）在乳腺癌组织中的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学方法检测73例乳腺癌组织及距其癌组织边缘2cm以上镜下未见癌浸润的正常组织中DMBT1蛋白的表达情况。[结果]免疫组织化学结果表明,DMBT1蛋白在乳腺癌组织及正常乳腺组织中的表达阳性率分别为35．6％、70．9％,差异有统计学意义（P〈0．05）。DMBT1蛋白表达与T分期、分化程度、淋巴结转移以及临床分期有关（P〈0．05）。Kap1an—Meier生存分析提示,DMBT1表达阳性的乳腺癌患者5年总生存率明显高于表达阴性者,两者比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。[结论]乳腺癌组织中DMBT1蛋白表达降低,且与乳腺癌T分期、分化程度、淋巴结转移、临床分期及患者预后有关。     

p27蛋白在乳腺癌中的表达及预后关系

目的 :探讨p2 7蛋白在乳腺癌中的表达及其与预后的关系。方法 :采用免疫组化方法检测 60例乳腺癌组织p2 7蛋白的表达 ,分析与临床病理学特征的关系。结果 :p2 7在乳腺癌中的高表达率为61 67% (37 60 ) ,低表达率为 38.33% (2 3 60 )。p2 7低表达与乳腺癌肿瘤直径、分期、淋巴结转移、远处转移、预后差相关。结论 :p2 7蛋白的检测对鉴定无淋巴结转移但预后较差的乳腺癌患者 ,指导术后辅助治疗具有一定的意义     

组织微阵

组织微阵技术可以把多达1000种不同的肿瘤排列在同一个蜡块上，通过它可以在同一时间对数千种分子标记物进行DNA，RNA和蛋白水平的原位分析。与传统的技术相比，组织微阵技术在不破坏原先组织的情况下对分子的分析速度加快100倍。而且它能对实体组织进行研究，构建和分析可以自动化。目前为止组织微阵技术大都应用在癌症的研究中。     

乳腺癌组织Ezrin表达及其与临床病理特征关系的研究

目的:研究Ezrin表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测117例浸润性乳腺癌和41例乳腺良性增生中,Ezrin、ER、PR、c-erbB-2、MMP-2及MMP-9的表达。结果:Ezrin在91.89%(34/37)的乳腺良性增生中表达于导管腔缘上皮顶膜,在细胞质内无表达;在76.99%(87/113)的乳腺癌组织中,Ezrin表现为细胞质中弥散表达,未见顶膜表达,两者差异有统计学意义,P=0.000。在乳腺癌组织中,Ezrin表达与肿瘤最大直径、TNM分期、淋巴结转移以及基质细胞中MMP-2和MMP-9的表达呈正相关,P值分别为0.016、0.002、0.036、0.007和0.002;而与年龄、组织学分级、ER、PR、c-erbB-2、肿瘤细胞中MMP-2及MMP-9表达无明显相关性。结论:Ezrin在乳腺良恶性病变中有明显不同的亚细胞定位,其表达情况对乳腺病变性质的判断具有重要价值。高表达Ezrin的乳腺癌具有更高的侵袭性和淋巴结转移能力,在乳腺癌组织中检测Ezrin的表达能为患者的预后和淋巴结转移风险评估提供重要参考。