酶联免疫法与乳及乳制品中抗生素残留的检测

对酶联免疫检测技术(ELISA)做了介绍,并对该技术在乳及乳制品抗生素残留检测的应用进行了评述.阐述了该项技术在乳及乳制品抗生素残留检测中的应用前景.     

奶制品中抗生素的检测

介绍奶制品中抗生素残留危害性并分析比较了两种抗生素检测方法。     

化学发光酶联免疫法检测苏丹红Ⅰ

为检测食品中苏丹红Ⅰ残留,建立间接竞争化学发光酶联免疫分析（chemi luminescent enzymeimmunoassay,CLEIA）法。通过优化包被抗原中本抗原与载体物质的量比、包被抗原质量浓度、抗体稀释比例,建立竞争抑制曲线。线性范围为0.156～5 ng/mL,最低检测限为0.078 9 ng/mL,IC50为0.679 ng/mL。CLEIA回收率为75.08%～112.18%,变异系数为8.89%～15.61%;通过与酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法进行比较,在相同抗原抗体质量浓度条件下,CLEIA法测定的IC50较ELISA方法降低30%,具有较高的灵敏度。     

酶联免疫方法在牛肉加热终点温度检测中的应用

为保证肉类及肉制品的卫生安全,各国要求加热到一定的加热终点温度。研究通过免疫新西兰白兔获得加热终点温度指示蛋白乳酸脱氢酶的抗体,并建立了牛肌肉加热终点温度酶联免疫检测方法。     

沙丁胺醇直接酶联免疫快速检测的方法

沙丁胺醇与瘦肉精同属于禁用的饲料添加剂,可以在动物体内大量残留,人体过量摄入会引起中毒反应。为了建立沙丁胺醇的快速检测方法,从硫酸沙丁胺醇出发制备了半抗原沙丁胺醇丁二酸衍生物,用混合酸酐法将半抗原与载体蛋白-钥孔嘁血蓝蛋白(KLH)偶联作为免疫抗原制备了沙丁胺醇的多克隆抗体,建立了沙丁胺醇直接竞争酶联免疫检测方法,该方法抗体最佳包被抗体量为1μg/孔,酶标抗原稀释比例为1∶16000,掩蔽剂采用脱脂奶粉。所建立的方法具有很高的灵敏度和特异性I,C50为0.90ng/mLI,C15达到了0.05ng/mL,远低于国家残留限量标准,与沙丁胺醇的结构类似物基本没有交叉反应。     

酶联免疫法检测呕吐毒素的方法研究

目的:利用抗呕吐毒素的特异性单克隆抗体和包被抗原,建立间接竞争酶联免疫法(ELISA)来检测谷物及其制品中呕吐毒素含量。方法:通过方阵滴定实验确定呕吐毒素最佳抗体浓度和最佳包被抗原浓度,应用酶联免疫测试盒对谷物及其制品中的呕吐毒素进行定量检测的方法学评价,来确立该方法的各项技术指标。结果:方法的最低检测浓度10μg/L;平均RSD为5.8%;回收率平均值为104%;用该方法研制的测试盒在4℃环境下可稳定6个月以上;检测时间小于2h;结论:该方法简便、安全、灵敏度高、重复性好、特异性强、能定性和定量检测谷物及其制品中的呕吐毒素含量。     

应用酶联免疫技术建立鲜乳中β-内酰胺酶间接检测方法

建立酶联免疫间接快速测定鲜乳中β-内酰胺酶的方法。方法 应用氨苄青霉素抗体,人工制备氨苄青霉素和辣根过氧化物酶的结合物Amp-HRP,建立氨苄青霉素酶联免疫检测方法。应用该方法分别检测样品反应管和阴性对照管中氨苄青霉素,通过比较两者OD₄₅₀值,间接判断样品中是否含有β-内酰胺酶。结果 成功建立了酶联免疫间接快速测定鲜乳中β-内酰胺酶的方法,检测灵敏度可达0.0005IU/ml。结论 该方法检测结果准确可靠,可广泛应用于鲜乳中β-内酰胺酶的检测。     

酶联免疫法检测猪肉中呋喃唑酮代谢物残留

通过检测猪肉中呋喃唑酮代谢物的残留以评价试剂盒的性能,采用酶联免疫法对猪肉中的呋喃唑酮代谢物残留量进行测定。结果表明:该方法的线性检测范围为0.025～2.025μg/L,最低检测限为0.1μg/kg,样本添加回收率为78.2%～100.3%,变异系数为4.7%～10.3%,与呋喃唑酮的交叉反应率为16.3%,与其他药物的交叉反应率均小于1%,且对实际样本的检测结果与液相色谱-串联质谱法基本一致。该法灵敏准确、重复性好、特异性高,适用于猪肉中呋喃唑酮代谢物残留的检测。     

酶联免疫分析在调味料安全质量检测中的应用

酶联免疫分析是一种基于特异抗原抗体的反应、具有灵敏、简便而且成本低廉的免疫分析技术.本文对这种技术进行概述,详细评述该技术在调味料污染物检测中的应用,包括微生物污染以其生物毒素残留,违禁有机化合物污染和食品过敏原残留等;同时阐述了该技术在调味料质量安全监控的应用前景.     

酶联免疫法与液相质谱联用法检测牛乳中三聚氰胺的比较

对牛乳中三聚氰胺含量的2种检测方法进行了比较,结果表明,酶免疫法灵敏度高,检测时间短,特异性强,操作方便,适合初筛。液相质谱联用法准确,回收率平均值在80％-110％之间,适合确证、定量。     

酶联免疫技术在食品安全检测中的应用

文章介绍了酶联免疫技术(ELISA)的原理和方法,从生物毒素、药物残留、致病微生物、重金属污染和食品的品质等方面评述了其在食品安全检测中的应用。并对其在食品安全检测中的广阔应用前景进行了展望。     

过氧化氢对原料乳抗生素快速检测方法的影响

为探讨过氧化氢对三种快速检测原料乳中抗生素方法的影响,将过氧化氢按系列浓度溶解于原料乳中,进行试验。结果显示,当过氧化氢浓度达到30mg/L以上时,会使微生物培养法产生假阳性结果;当过氧化氢浓度为300mg/L以下时,对酶联免疫法和竞争性受体-配体免疫胶体金法的检测结果不会造成影响。     

酶联免疫法检测保健食品中透明质酸的含量

首次利用酶联免疫法测定保健食品中的透明质酸含量。用透明质酸标准品进行了线性实验,该方法在0.37～90ng/mL范围内线性良好。测定某保健食品中透明质酸含量时,对关键步骤如抗原抗体反应的孵育时间和洗板时间做了比较优化。对该保健食品进行透明质酸的加标回收实验,结果表明四个不同梯度加标量的回收率分别为86.87%、111.57%、91.60%和96.59%。对该方法的精密度和中间精密度等做了实验,结果分别为3.33%和2.48%。与Bitter-Muir方法进行比较,Bitter-Muir法在测定该保健产品中的透明质酸含量时存在很大的干扰,而使用ELISA测定的结果与产品标示含量接近。从以上结果表明,此法具有特异性强、灵敏度高、准确、稳定的特点,值得在保健品行业进一步推广。     

酶联免疫技术及其在食品检测中的应用

说明了酶联免疫检测技术(ELISA)的原理、方法，主要论述了其在食品检测领域的应用，进行毒素、农药残留、食品微生物及其它微量元素的检测。     

基于单克隆抗体的食品中乳酸链球菌素酶联免疫方法

建立了乳酸链球菌素的酶联免疫检测方法。以乳酸链球菌素A偶联牛血清白蛋白作为抗原制备了单克隆抗体,该抗体能等同识别乳酸链球菌素A和Z,对其他多肽类抗生素无交叉反应。所建立的乳酸链球菌素检测方法 IC_(50)为0.49μg/mL,线性范围为0.05μg/mL~5.4μg/mL(y=-0.12ln(x)+0.385,R~2=0.98)。该方法适用于热加工样品的检测,前处理简单,整个检测过程仅需60min,为乳酸链球菌素速测提供了有力的技术手段。     

ELISA方法在检测牛乳抗生素残留中的应用

介绍酶联免疫分析法(EUSA)的原理,酶联免疫分析法在牛奶中抗生素残留检测中应用的技术要点和存在问题,并对酶联免疫分析法在食品抗生素残留检测中的应用前景作了展望.     

酶联免疫法快速检测大闸蟹中二噁英污染物的研究

目的建立大闸蟹中二噁英的酶联免疫(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测方法。方法优化加速溶剂萃取条件,净化过程及前处理方法。样品取可食部分冷冻干燥,经加速溶剂萃取方法提取,酸性硅胶处理,过复合硅胶柱、活性碳小柱配合加压设备加速净化,酶联免疫试剂盒检测。结果二噁英标准品在3.2、25.0、50.0、100.0 pg/5 g干重毒性当量(World health organisation-toxic equivalent, WHO-TEQ)值添加水平的回收率为68.2%～123.1%,相对标准偏差小于30%(n=6),线性相关性(r2)一般大于0.98。样品检测值均低于1.5 WHO-TEQ pg/g湿重的欧盟标准。结论该方法方便、快速、成本低,适用于大闸蟹中二噁英基础定量检测。     

鳗鱼中恩诺沙星残留量的酶联免疫检测方法

运用酶联免疫分析方法测定鳗鱼中恩诺沙星残留。测试曲线线性范围为0.3～10μg/kg,最低检测限为3μg/kg。向样品中分别添加25、50、100μg/kg 3个浓度水平的恩诺沙星, 平均回收率分别为74.5%、76.6%和66.5%,批内变异系数为7.62%～14.31%,批间变异系数为6.03%～7.00%,灵敏度达到0.3μg/kg。特异性试验结果表明与喹诺酮类中的其它药物以及其它类抗生素均无交叉反应。     

酶联免疫法检测克伦特罗残留量的质量控制

对酶联免疫法检测克伦特罗残留量的质量控制方法进行了探讨.应用酶联免疫法检测克伦特罗残留量可从克伦特罗试剂盒的检测下限、校正曲线的线性检验、精密度验证、以及添加克伦特罗标准品做回收率试验等方面来进行质量控制.结果表明,本方法的样品检测下限(定性检出)为0.03ng/mL,定量检测下限为0.1ng/mL;克伦特罗标准校正曲线Y=-0.1884X 0.4159在0.1～8.1ng/mL范围内具有良好的线性相关关系,相关系数为-0.9913;克伦特罗标准液的浓度分别为0.1、0.3、0.9、2.7、8.1ng/mL时,变异系数分别为3.7%、5.3%、9.7%、9.2%、8.7%,在3.7%～9.7%的范围内;当克伦特罗标准品添加水平分别为0.5、1.0ng/mL时,平均回收率分别为84%、90%,在80%～100%的范围内.上述指标均符合残留分析质量控制的要求.     

酶联免疫法检测6种中草药中亚胺硫磷的残留

建立中草药中亚胺硫磷残留量的直接竞争ELISA检测方法。6种中草药(金银花、枸杞、大青叶、人参、板蓝根、元胡)中添加亚胺硫磷标准品,样品经过简单的前处理后,应用已建立的ELISA进行检测,回收率在58%～121%之间。方法检测限为0.005 mg/kg,其中枸杞和人参中检测限为0.25 mg/kg,其它4种中草药中检测限为1 mg/kg。与仪器方法比较的相关系数R2=0.990 4。