银杏叶提取物对细胞色素P450酶CYP1A2实验研究

目的　研究银杏叶提取物对大鼠细胞色素P450酶CYP1A2活性的影响。方法　银杏叶提取物10, 100mg·kg-1 2个剂量,分别经1, 5, 10天灌胃处理大鼠,以未经处理者为对照组,测定CYP1A2的酶活性。同剂量灌胃处理10天后,再单次灌胃盐酸普萘洛尔10mg·kg-1,测定普萘洛尔和N-去异丙基普萘洛尔在大鼠体内的血药浓度。结果　银杏叶提取物处理后,大鼠肝微粒体的CYP1A2酶活性显著升高,且能显著降低普萘洛尔在大鼠体内的AUC和Cmax,使N-去异丙基普萘洛尔的AUC和Cmax显著升高。结论　银杏叶提取物能显著诱导大鼠CYP1A2的酶活性,并显著影响普萘洛尔及其代谢物在大鼠体内的血药浓度。故银杏叶提取物可能影响与之同时服用、经CYP1A2代谢的药物临床疗效。     

体外细胞色素P450同工酶对银杏叶水提取物抗血小板聚集作用的影响

目的应用体外肝细胞模型研究中草药银杏叶提取物的代谢途径,即细胞色素P450酶(CYP450)药物代谢酶系对银杏叶拮抗血小板聚集效应的影响。方法制备人超低温冷冻肝细胞,通过与银杏叶提取物预孵育,评估肝脏CYP450药物代谢酶系(CYP1A2、CYP286、CYP2C19、CYP2E1、CYP3A4)对银杏叶水提取物拮抗血小板活化因子(PAF)激活的血小板聚集作用。富含血小板血清(PRP)和少含血小板血清(PPP)与不同质量浓度(25、50、100、200和1000μg·L~(-1))PAF孵育,建立PAF激活血小板聚集的体外模型。银杏叶水提物与人超低温冷冻复苏肝细胞预孵育后,与PRP和PAF培养,观察银杏叶水提物的体外效应(抗PFA血小板聚集激活作用)是否受人肝细胞代谢的影响。CYP450药物代谢酶的特定抑制物伊曲康唑(CYP3A4)、α-萘黄酮(CYP1A2)、奥芬那君(CYP286)、奥美拉唑(CYP2C19)、4-甲基吡唑(CYP2E1)与人肝细胞预孵育后、与银杏叶水提物和PRP和PAF孵育,评估银杏叶水提物的体外效应与何种CYP450药物代谢同工酶有关。结果PAF激活血小板聚集作用遵循米-曼氏动力学方程,其K_m为98μ·L~(-1)。银杏叶水提物抑制PAF的血小板聚集激活作用,其半数抑制剂量为33μg·L~(-1)。人肝细胞与银杏叶水提物预孵育后,其体外效应(抗PAF血小板聚集激活作用)增强30%,差异有统计学意义(P<0.05)。人肝细胞与细胞色素CYP450同工酶CYP286、CYP2C19、CYP2E1、CYP3A4抑制剂预孵育后,银杏叶水提物的体外效应不受影响。人肝细胞与CYP1A2抑制剂预孵育后,人肝细胞对银杏叶水提物体外效应的增强作用基本消失,差异有统计学意义(P<0.05)。结论银杏叶水提物在体外能抑制PAF的血小板聚集作用,人肝细胞能显著增强这一体外效应,CYP450药物代谢酶CYP1A2可能参与银杏叶的这一体外效应的代谢活化。     

肠道细胞色素P450和P-糖蛋白对口服药物生物利用度的影响

目的综述肠道细胞色素P450和P-糖蛋白(P-gp)对口服药物生物利用度的影响,包括CYP450、Pgp的作用及CYP与Pgp的联合作用。方法收集、阅读并分析近十年来关于肠道细胞CYP450和Pgp影响口服药物生物利用度的文献。结果 CYP450和Pgp在胃肠道均具有高表达,且两者的底物具有显著的重叠性,所以肠道细胞CYP450对已吸收药物的生物转化作用和肠道细胞中Pgp对已吸收药物的主动外排作用是影响口服药物生物利用度的重要因素。结论肠道细胞CYP450和Pgp对药物的口服生物利用度具有重要影响。     

质子泵抑制剂代谢中细胞色素P-450的作用

质子泵抑制剂（PPI）特异性地作用于H＋·K＋－ATP酶，在胃酸分泌最终步骤中抑制质子泵的功能。PPI被公认为是治疗酸相关性疾病（如消化性溃疡、胃食管反流性疾病（GERD）．Zolling—Eillson综合征等）的最有效药物。对照试验证实：与H２受体拮抗剂相比，PP１可以更好地抑制胃酸分泌、止痛和促进消化性溃疡愈合。PPI在肝脏被充分地生物转化，它们在肝脏中不同程度地被各种细胞色素P－４５０（CYP）同功酶代谢。根据基因多态性表达产物又可将这些酶进一步分为不同亚型。参与PPI代谢的主要同功酶为CYP２C１９和CYP３A４。CYP…     

吸烟人群细胞色素P4501A1和谷胱甘肽-S-转移酶M1的基因型

采用分子流行病学的方法 ,研究吸烟人群细胞色素 P450 1 A1基因 (CYP1 A1 )和谷胱甘肽 - S-转移酶 M1基因 (GST M1 )的多态性特征 .吸烟人群与同性别及同年龄 (年龄 <2周岁 )健康人群一对一配对 .提取血液基因组 DNA. PCR扩增 CYP 1 A1Exon7位点片段和 GST M1部分片段 .限制性酶切片段长度多态性 (RELP)分析 P450 1 A1片段和GST M1片段多态性特点 .结果显示吸烟组人群中CYP 1 A1 Exon 7Val/Val型 (mm型 )人群数增高 ,并有统计学差异 .吸烟组人群中 :GST M1缺失人群数略有升高 ;CYP1 A1 wm型人群数略有升高 ;CYP 1 A1 wm型 +mm型人群数略有升高 ,但这些变化均无统计学意义     

吸烟人群细胞色素P4501A1和谷胱甘肽-S-转移酶M1的基因型

采用分子流行病学的方法,研究吸烟人群细胞色素P450 1A1基因(CYP 1A1)和谷胱甘肽-S-转移酶M1基因（GST M1）的多态性特征.吸烟人群与同性别及同年龄（年龄<2周岁）健康人群一对一配对. 提取血液基因组DNA. PCR扩增CYP 1A1 Exon 7位点片段和GST M1部分片段. 限制性酶切片段长度多态性（RELP）分析P450 1A1片段和GST M1片段多态性特点. 结果显示吸烟组人群中CYP 1A1 Exon 7 Val/Val型（mm型）人群数增高,并有统计学差异. 吸烟组人群中：GST M1缺失人群数略有升高;CYP 1A1 wm型人群数略有升高;CYP 1A1 wm型＋mm型人群数略有升高,但这些变化均无统计学意义.     

银杏叶提取物对CYP酶的影响及与其他药物的相互作用

综述了近年来银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract)与其他药物相互作用的研究进展。研究表明银杏叶提取物在大鼠体内和人体内外对CYP酶的影响不一致。人体内银杏叶提取物对药物代谢酶CYP 2C19和CYP 2E1有诱导作用,分别增强了美芬妥因、奥美拉唑和氯唑沙宗的代谢。银杏叶提取物通过降低血中超氧化物歧化酶水平而发挥抗氧化作用,提高了抗精神病药物的疗效。银杏叶提取物还可能与阿司匹林、华法林和曲唑酮等发生药效学方面的相互作用,在临床应用中要引起重视。因此,需要进一步在人体内研究银杏叶提取物与其他药物的相互作用。     

对氨基二苯醚类似物抑制细胞色素P-450的定量构效关系

测定了一组对氨基二苯醚类似物延长小鼠戊巴比妥睡眠时间和体外抑制未经处理的小鼠肝微粒体催化氧化对硝基茴香醚脱甲基的活性。用逐步多元回归分析法导出了这些类似物体内和体外抑制细胞色素P-450(P-450)的活性与量化指数的定量构效关系(QSAR)。结果表明:对氨基二苯醚类似物体内和体外抑制P-450的活性均与最低未占据分子轨道能级(E_LUMO)、氨基氮原子的亲核超离域度(S_N(N))和醚氧原子的亲核超离域度(S_N(O))相关。这些类似物的代谢中间体(MI)与P-450形成P-450代谢中间体络合物(P-450-MI)可能是它们能够抑制P-450的主要原因。     

银杏叶提取物与阿托伐他汀联合应用对大鼠CYP450蛋白水平的影响

目的观察银杏叶提取物与阿托伐他汀联合应用对大鼠CYP450蛋白水平的影响。方法将24只SD大鼠随机分为生理盐水(NS)组、阿托伐他汀(AV-T)组、银杏叶提取物(GBE)组、GBE联合AV-T组,每组6只。NS组用生理盐水1 m L/(kg·d)灌胃,AV-T组1 mg/(kg·d)AV-T灌胃,GBE组50 mg/(kg·d)GBE灌胃,GBE联合AV-T组GBE 50 mg/(kg·d)联合AV-T 1 mg/(kg·d)灌胃。6周后,取大鼠肝脏,制备肝微粒体,CO-还原差示光谱法检测肝微粒体CYP450酶含量;Western blot检测肝脏组织中CYP3A4和CYP2C9蛋白的表达。结果与NS组及AV-T组相比,GBE组、GBE+AV-T组CYP450酶含量明显升高(P<0.01)。与NS组及AV-T组相比,GBE组、GBE+AV-T组CYP3A4的表达显著降低(P<0.01,P<0.05);GBE组、GBE+AV-T组CYP2C9的表达显著上升(P均<0.01)。结论 GBE与AV-T联合应用后,使大鼠肝微粒体CYP450含量增高,且影响CYP3A4和CYP2C9的蛋白表达,由此可能会影响AV-T的疗效。     

酒精性肝损伤大鼠细胞色素P450 CYP2E1和细胞色素P450 CYP3A的代谢活性

目的观察酒精性肝损伤对大鼠细胞色素P450CYP3A(CYP3A)和细胞色素P450CYP2E1(CYP2E1)代谢活性的影响。方法采用ig给予白酒制备大鼠酒精性肝损伤模型,检测血清中谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性,采用HE染色法光镜下观测酒精对肝脏损伤程度。大鼠ip给予CYP3A探针药物咪达唑仑10mg·kg-1或ig给予CYP2E1探针药物氯唑沙宗50mg·kg-1后,采用高效液相色谱法测定不同时间点大鼠血浆中咪达唑仑和氯唑沙宗的血药浓度,并应用3P87软件计算其药代动力学参数,以考察CYP2E1和CYP3A的代谢活性的变化。大鼠ig给予氯唑沙宗80mg·kg-1后,热板方法测定大鼠添足次数和添足反射潜伏期。结果酒精性肝损伤可致大鼠肝小叶结构不清,肝索排列紊乱,肝细胞体积增大,呈弥漫性中度水变性,肝窦受压,大部分肝细胞胞浆内见大小不等的脂肪空泡;与正常对照组相比,酒精性肝损伤组大鼠GPT和GOT活性分别增加了16.0%和20.0%(P<0.05,P<0.01)。酒精性肝损伤致大鼠CYP2E1对探针药物氯唑沙宗的代谢活性增强,AUC,t1/2和cmax分别降低了38.0%,30.5%和35.0%(P<0.05);酒精肝损伤组大鼠氯唑沙宗镇痛效果明显降低;酒精性肝损伤致大鼠CYP3A对探针药物咪达唑仑的代谢活性增强,AUC,t1/2和cmax分别降低了122.6%,54.9%和56.9%(P<0.01,P<0.05)。结论酒精性肝损伤可使大鼠CYP2E1和CYP3A代谢活性增强。     

烟雾暴露对孕大鼠肝脏和胎盘细胞色素P450同工酶表达的影响

目的研究烟雾暴露对孕大鼠肝脏和胎盘细胞色素P450(CYP)同工酶表达的影响,探讨孕期烟雾暴露的毒理学意义。方法7只Wistar雌大鼠和14只孕大鼠分为正常未孕组、正常受孕组和吸烟受孕组。从妊娠d9起,吸烟组孕大鼠在特制的半封闭动物饲养箱中熏烟,每日3次(8:00am,12:00am,4:00pm),每次持续15~20min。孕d21剖腹取母体肝脏和胎盘,提取RNA,RT-PCR技术测定CYP同工酶表达的变化。结果与正常未孕组相比,正常受孕大鼠肝脏CYP1A1,1B1,2B1/2,2E1,3A1mRNA的表达分别为75.1%(P<0.05),117.2%(P<0.01),131.6%,130.5%和85.1%(P<0.05);与正常受孕组相比,吸烟孕大鼠肝脏CYP1A1,1B1,2B1/2,2E1,3A1mRNA表达分别为128.9%(P<0.05),96.4%,127.7%,101.8%及175.5%(P<0.05);同时胎盘CYP1A1,1B1,2B1/2及2E1mRNA表达分别为127.1%(P<0.05),116.5%,90.1%及150.2%(P<0.01)。结论孕期烟雾暴露可影响孕大鼠肝脏和胎盘中一些与外源物代谢密切相关的CYP同工酶表达。     

中国人肝微粒体中细胞色素P450酶含量和活性的个体间差异(英文)

目的:比较不同中国人肝微粒体中几种重要细胞色素P450(CYP)的酶含量和活性。方法:运用West-ern斑点分析和光密度扫描,对17个汉族、17个壮族和8个苗族受试者肝微粒体中的细胞色素P4501A2(CYP1A2)、2C9及3A4进行定量;非那西丁、甲磺丁脲、异喹胍和奥美拉唑分别用于体外测量CYP1A2、2C9、2D6及3A4的活性。结果:CYP1A2、2C9及3A4的含量和活性具有很大的个体间变异,另外CYP2D6的活性在各样本间也有很大差异;CYP3A4(32％)是中国人肝微粒体中含量最丰富的CYP,CYP2C9(19％)和CYP1A2(16％)的含量也很可观;除了CYP1A2的含量和活性具有一定的种族和性别差异外,未发现其它CYP具有种族和性别差异;CYP1A2、2C9和3A4的酶蛋白含量分别和它们的活性具有很好的相关性。结论:我们的结果为在中国人中进行药物代谢研究提供了非常有价值的信息。     

复方银杏叶制剂对酒精性肝损伤的防护作用及机制

目的观察银杏叶制剂(CGB)对酒精性肝损伤的防护作用。方法白酒-玉米油混悬液ig给予大鼠造肝损伤模型,连续10周,造模同时分别ig给予银杏叶提取物(GBE)0.8 g·kg-1,CGB 2.4,0.8和0.4 g·kg-1或联苯双酯0.15 g·kg-1。取血测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)。并观察肝组织病理及肝细胞线粒体超微结构变化。采用"cocktail"探针药物法测定大鼠ig给予CGB前后血浆中相应的CYP2E1和CYP3A4酶探针氯唑沙宗和氨苯砜的血药浓度,并计算药代动力学参数。通过药代动力学参数的变化,评价CGB对CYP2E1和CYP3A4酶活性的影响。结果连续ig给予乙醇后,大鼠血清转氨酶显著高于正常对照组(P<0.01),与模型组比较,CGB 0.8和2.4 g·kg-1组ALT和AST显著降低(P<0.05);CGB 0.8和2.4 g·kg-1组肝匀浆MDA显著降低、GSH和SOD明显升高(P<0.05)。ig给予CGB前,模型组大鼠氯唑沙宗和氨苯砜的AUC0-24,cmax均较正常对照组显著降低(P<0.05);CGB可使正常大鼠血浆氯唑沙宗和氨苯砜AUC0-24下降(P<0.05),使模型组大鼠血浆氯唑沙宗和氨苯砜的AUC0-24和cmax显著升高(P<0.05)。结论 CGB对酒精性肝损伤有防护作用,其机制与氧化应激干预相关。     

地非三唑对大鼠肝细胞细胞色素P450 CYP1A1/2的诱导作用

目的 试从mRNA表达水平阐明地非三唑对鼠肝微粒体中细胞色素P450 CYP1A1/2的诱导机制。方法 给SD大鼠腹腔注射地非三唑，采用Trizol法提取大鼠肝脏RNA,用RT-PCR测定经地非三唑处理1, 2及4 d的鼠肝中细胞色素P450 CYP1A1, CYP1A2 mRNA的表达水平。结果 地非三唑处理不同时间的鼠肝细胞中细胞色素P450 CYP1A1, CYP1A2 mRNA的表达水平比空白对照组明显增加，空白对照组CYP1A1吸光度比值为0.270±0.040, 诱导1, 2及4 d的吸光度比值分别为0.343±0.055, 0.417±0.045及0.603±0.083；空白对照组的CYP1A2吸光度比值为0.613±0.189, 而诱导1，2及4 d的吸光度比值分别为1.510±0.226, 3.057±0.518及4.120±0.458。随着诱导时间的增加，细胞色素P450 CYP1A1及CYP1A2 mRNA的表达也逐步增加，诱导时间与表达水平之间存在一定的线性关系,相关系数分别为0.9984和0.9563。结论 地非三唑对细胞色素P450 CYP1A1/2 mRNA表达具有诱导作用。