“原络通经”针法对SAMP8小鼠病理形态学及NMDAR表达的影响

目的：观察“原络通经”针法对SAMP8小鼠海马CA-1区病理形态学及NMDAR表达的影响,探讨“原络通经”针法治疗阿尔茨海默病(AD)的潜在作用机制。方法：将30只SAMP8雄性8月龄小鼠随机分为SAMP8空白对照组、SAMP8+“原络通经”针法治疗组以及SAMP8+百会穴针刺组,将10只SAMR1小鼠作为SAMR1正常对照组。其中SAMP8+“原络通经”针法治疗组选择丰隆穴、太白穴、关元穴及百会穴针刺,SAMP8+百会穴针刺组选择百会穴针刺。SAMP8+“原络通经”针法治疗组以及SAMP8+百会穴针刺组均针刺1次/d,共干预30 d,每7 d休息1次。比较4组小鼠的学习记忆能力、海马CA-1区病理损伤程度以及NMDAR表达水平。结果：HE染色结果提示,SAMP8对照组出现核皱缩及空泡,相比于SAMP8对照组,SAMP8+“原络通经”针法治疗组和SAMP8+百会穴针刺组在干预后改善明显,未见严重的病理损伤。Western Blot检测结果提示,相比于SAMP8对照组,SAMP8+“原络通经”针法治疗组和SAMP8+百会穴针刺组的NMDAR表达水平显著降低。结论：“原络通经”针法可以改善...     

补肾活血针刺法对阿尔茨海默病模型小鼠海马脑红蛋白表达的影响

目的探讨补肾活血针刺法对阿尔茨海默病模型快速老化小鼠P8(SAMP8)学习记忆能力的影响及作用机制。方法将20只5月龄雄性SAMP8小鼠随机分为针刺治疗组、模型对照组各10只,另设5月龄雄性抗快速老化小鼠(SAMR1)10只作为正常对照组。针刺治疗组予以补肾活血针刺法干预,选穴百会、血海、肾俞、膈俞,采用捻转补泻手法。模型对照组及正常对照组未予特殊处理。干预4周后,取各组小鼠海马组织,采用免疫组化法检测脑红蛋白(Ngb)的表达情况。结果模型对照组小鼠海马组织Ngb的表达水平较正常对照组减弱(P<0.01);与模型对照组相比,针刺治疗组小鼠海马组织Ngb的表达水平明显升高(P<0.01)。结论补肾活血针刺干预能够明显增强SAMP8小鼠海马组织Ngb的表达,这可能是其改善SAMP8小鼠学习记忆能力的潜在分子机制之一。     

电针对SAMP8小鼠皮质及海马突触素和突触后致密物-95表达的影响

目的 观察电针对SAMP8小鼠皮质及海马突触素(SYN)和突触后致密物-95(PSD-95)表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的介入时机.方法 SAMP8小鼠48只随机分为模型组、3月龄电针组、6月龄电针组和9月龄电针组,每组12只,选取同龄正常老化SAMR1小鼠12只为对照组.电针组电针"百会""大椎""肾俞",频...     

针刺调控NLRC5抑制NF-κB通路减轻SAMP8小鼠脑内神经炎症反应的研究

[目的]观察针刺调控NLRC5抑制核转录因子-κB(NF-κB)通路减轻SAMP8脑内神经炎症反应的作用.[方法]将7月龄雄性快速老化鼠SAMP8及其同源正常对照小鼠SAMR1分为SAMR1组、SAMP8组和SAMP8针刺组.针刺组予以针刺治疗,采用"调神益智"针法进行治疗,取穴为水沟、内关和三阴交;针刺每日1次,持续...     

“补肾活血”针刺法对老年性痴呆模型SAMP8小鼠学习记忆能力和脑组织AChE活性的影响

目的观察“补肾活血”针刺法对老年痴呆模型SAMP8小鼠学习记忆能力和脑组织AChE活性的影响。方法选取8月龄SAMP8小鼠20只,随机分为针刺组10只,SAMP8空白对照组10只,另选取10只8月龄的SAMR1小鼠为SAMR1对照组。疗程结束后评定疗效,测各组小鼠的学习记忆能力及脑组织中AchE含量。结果与SAMR1组比较,SAMP8空白对照组小鼠在隐蔽平台试验中表现出明显的学习记忆障碍,逃避潜伏期显著延长（P〈0．05）,针刺组逃避潜伏期较SAMP8空白对照组显著缩短（P〈0．05）;探索试验巾针刺组原平台象限的停留时间和穿越原平台次数明显多于SAMP8空白对照组（P〈0．05）,与SAMR1对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;针刺组针刺后脑组织AChE活性较SAMP8空白对照组显著性降低（P〈0．05）,与SAMR1对照组比较差异无统计学差异（P〉0．05）。结论“补肾活血”针刺法能有效提高AD小鼠学习记忆能力,这种作用可能是通过抑制脑组织AChE活性实现的。     

二苯乙烯苷对SAMP8小鼠学习记忆能力的改善作用

目的:探讨二苯乙烯苷(TSG)对老年痴呆模型SAMP8鼠学习记忆能力的影响。方法:6月龄SAMP8鼠50只,随机均分为SAMP8空白组,阳性药石杉碱甲对照组,高、中、低TSG组;6月龄SAMR1鼠10只为正常对照组。各组分别灌胃相应药物45d后,采用Morris水迷宫方法,以逃避潜伏期、原平台象限停留时间等指标观察其行为学改变。结果:SAMR1组和TSG组在试验中逃避潜伏期明显短于SAMP8空白组(P<0.05)。平台象限的停留时间和穿越原平台次数在探索试验中明显多于SAMP8空白组(P<0.05)。可视平台试验结果各组无差异。结论:TSG能提高SAMP8鼠的学习记忆能力。     

脑还丹对快速老化小鼠学习记忆能力的影响

目的 观察脑还丹对快速老化( SAMP/8)小鼠学习记忆能力的影响.方法 用6月龄雄性SAMP/8小鼠随机等分为脑还丹高、低剂量组和模型组,6月龄正常老化(SAMR/1)小鼠为正常对照组.给药8周后,运用Morris水迷宫方法测试各组小鼠的定位航行和空间探索能力.结果 SAMP/8小鼠的学习记忆能力明显低于同月龄SAMR/1小鼠,表现为逃避潜伏期从第2天起显著延长,原平台象限停留时间缩短.给予脑还丹8周治疗,SAMP/8小鼠逃避潜伏期明显缩短(P＜0.001～0.05).原平台象限停留时间明显延长(P＜0.001～0.05),且有一定的量效关系(P＜0.05).结论 脑还丹能显著改善SAMP/8小鼠方向辨别的学习能力及记忆巩固、再现能力.     

针刺对痴呆小鼠大脑神经元超微结构的影响

[目的]研究三焦针法对痴呆小鼠皮质和海马CA1区神经元线粒体结构的影响。[方法]选取雄性SAMP8小鼠30只(随机分成模型组、非穴组、穴位组)和10只SAMR1小鼠(正常对照组)。持续治疗30日后,采用电子显微镜对小鼠大脑皮质顶叶和海马CA1区进行观察。[结果]R1组皮质顶叶和海马CA1区超微结构正常;SAMP8模型组小鼠神经元部分线粒体肿大、部分变性、部分脂肪化和坏死;SAMP8三焦针刺组线粒体肿大减少,少数线粒体变性,脂肪化和坏死;非经穴针刺组线粒体少数介于两者之间。[结论]三焦针法能有效改善SAMP8小鼠大脑皮质和海马CA1区神经原线粒体病理性损伤。     

补肾活血针刺法对SAMP8小鼠学习记忆能力及海马内源性神经干细胞增殖的影响

目的观察补肾活血针刺法对阿尔茨海默病(AD)模型SAMP8小鼠行为学及海马内源性神经干细胞增殖的影响。方法将18只7月龄雄性SAMP8小鼠作为AD模型,随机分为针刺组、非穴组和模型组,另取同月龄雄性SAMR1小鼠6只作为正常组。针刺组小鼠选取"肾俞""百会""血海""膈俞"进行针刺干预,非穴组小鼠取双侧肋下固定非穴点进行针刺,模型组和正常组小鼠予相同程度捉抓刺激,连续干预8周。采用水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,免疫组化检测海马Brd U阳性细胞数。结果与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P0.05),停留在原平台象限时间明显缩短(P0.05),Brd U阳性细胞数明显减少(P0.05);与模型组、非穴组比较,针刺组小鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.05),停留在原平台象限时间明显延长(P0.05),Brd U阳性细胞数明显增加(P0.05)。结论补肾活血针刺法可能通过诱导海马内源性神经干细胞的增殖,改善AD模型SAMP8小鼠的学习记忆能力。     

针刺对SAMP8小鼠海马GLUT3、MCT2、MCT4表达的影响

目的:观察针刺对SAMP8小鼠学习记忆能力和海马组织能量底物转运蛋白GLUT3、MCT2、MCT4表达的影响,探讨针刺促进学习记忆能力的能量底物转运机制。方法:13只SAMP8小鼠随机分为模型组和针刺组,7只同月龄SAMR1小鼠作为对照。针刺组选择"百会"穴、"涌泉"穴进行针刺,1次/天,5次1疗程,共治疗8个疗程。采用Morris水迷宫对学习记忆能力进行评价,Western Blot检测小鼠海马组织GLUT3、MCT2、MCT4蛋白表达水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长(P0. 01),穿越平台次数减少(P0. 05);与模型组相比,针刺组小鼠第1~2天逃避潜伏期改变无统计学差异(P0. 05),第3、4、5天逃避潜伏期缩短(P0. 05),穿越平台次数增加(P0. 05)。与对照组相比,模型组小鼠海马组织GLUT3、MCT2蛋白表达显著下降(P0. 01),MCT4蛋白表达下降(P0. 05);与模型组相比,针刺组小鼠海马组织GLUT3、MCT2蛋白表达显著升高(P0. 01),MCT4蛋白表达变化不具有统计学意义(P0. 05)。结论:针刺可以提升SAMP8小鼠学习记忆能力,对海马组织能量底物转运蛋白GLUT3、MCT2具有提高作用。     

针刺捻转补泻手法对自发性高血压大鼠小脑GABA、Glu表达的影响

目的通过观察针刺捻转补泻手法对自发性高血压大鼠(SHR)小脑组织中γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)含量表达的影响,探讨其对SHR大鼠小脑的保护机制,为捻转补泻降压效应差异提供客观依据。方法雄性SHR大鼠24只随机分为捻转补法组、捻转泻法组、电针组、模型组,每组6只。6只Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作为空白组。空白组和模型组每天进行与各针刺组相同的抓捉固定刺激,其余各针刺组分别采用相应治疗手法针刺双侧“太冲穴”,每日上午治疗1次。用无创血压仪测量各组大鼠尾动脉收缩压,第1、4、7、11、14日测量并记录。针刺处理14 d后,分别取大鼠小脑组织,采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测小脑组织中GABA、Glu的含量并进行统计学分析。结果1)模型组大鼠收缩压与空白组相比显著升高(P<0.01);与模型组比较,3个针刺组均能明显降低SHR大鼠血压(P<0.01),且捻转泻法组血压降低最显著,与模型组及其他治疗组相比差异显著(P<0.01);捻转补法组与电针组比较无统计学意义(P>0.05)。2)与空白组比较,模型组小脑组织中GABA含量明显降低(P<0.01),Glu含量明显升高(P<0.01);捻转泻法组小脑组织中GABA含量较模型组、捻转补法组和电针组明显升高(P<0.05或P<0.01),Glu含量较模型组、捻转补法组和电针组明显降低(P<0.05或P<0.01);捻转补法组与电针组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论SHR大鼠小脑组织中GABA含量的降低与Glu含量的升高可能是高血压形成的中枢机制之一,对“太冲穴”施以针刺捻转补泻手法可有效降低血压,使GABA含量升高、Glu含量降低,小脑中GABA、Glu参与了针刺捻转补泻手法对SHR的血压调节过程,且不同针刺手法调节作用差异显著,捻转泻法效果最显著。     

快速老化痴呆小鼠海马、皮层p130表达的增龄变化及针刺的影响

目的:观察针刺对快速老化痴呆小鼠(SAMP10,简称P10)脑中p130表达的影响,探讨针刺治疗痴呆的可能机制。方法:随机将P10分为对照组、针刺组、非穴组,同源正常老化小鼠(SAMR1,简称R1)为正常对照。针刺组采用"益气调血,扶本培元"针法(简称"气血"针法),选穴"膻中"中脘"气海"、双侧"足三里"、双侧"血海"。"血海"用捻转泻法,余穴施捻转补法,每穴30s,每天1次,第7天暂停,连续13d。运用western blotting技术,观察2、4、6、8、10、12月龄P10海马和皮层中p130表达的增龄变化,以及"气血"针法对8月龄P10海马和皮层p130表达的影响。结果:①p130表达在正常老化R1海马和皮层均随增龄呈平稳上升趋势,6月龄后与2月龄存在明显差异(P<0.05,0.01)。P10则呈波动下降趋势,海马中4月龄后表达即下降,6月龄达谷值(P<0.01),6至8月龄回升,8月龄低于2月龄水平(P<0.05),8至12月龄又下降;皮层中2至4月龄下降,4月龄后开始上升,至6月龄达峰值(P<0.01),6至8月龄下降至低谷,8至12月龄又上升,但仍停留在较低水平。②与8月龄R1相比,p130在P10海马和皮层表达分别呈上调与下调。"气血"针法具有腧穴特异性,可良性调节皮层的蛋白表达,使之接近R1水平。结论:p130表达在R1与P10同脑区间随增龄存在差异,且p130的波动期与报道的P10生物学特征出现的时间段接近。"气血"针法可良性调节8月龄P10皮层p130的表达。     

Effect of acupuncture on the endoplasmic reticulum stress IRE1-CHOP pathway and the expression levels of Bax and Bcl-2 protein as well as genes in pancreatic tissue of rats with diabetes mellitus

Objective

To explore the effect of acupuncture on the endoplasmic reticulum stress IRE 1-CHOP signal pathway and the expression levels of related apoptosis genes in pancreatic tissue of rats with STZ-induced diabetes mellitus.

早期针刺对颅脑损伤大鼠神经功能和Cleaved Caspases-3的影响

目的观察针刺对颅脑损伤(TBI)大鼠脑组织Cleaved Caspases-3表达、脑组织病理形态和运动、感觉等神经功能的影响。方法将40只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组,各10只。模型组和针刺组应用PCI3000打击器撞击硬脑膜制备TBI模型;假手术组仅开颅暴露硬脑膜,不进行打击;空白组不做处理。造模后即对针刺组进行针刺治疗,每日1次,干预7 d。在治疗第2、4、7天应用改良神经功能评分(mNSS)和Rotarod test检测大鼠运动、感觉等神经功能损伤程度。第7天治疗结束后利用HE染色法观察脑组织病理形态改变,Western blotting法检测脑组织Cleaved Caspases-3蛋白表达。结果治疗第2、4、7天时与假手术组相比,模型组mNSS评分明显升高(均P <0.01),Rotarod test评分显著下降(P <0.01,P <0.01,P <0.05)。治疗第4、7天时,与模型组相比,电针组大鼠mNSS评分降低(均P <0.05),Rotarod test评分升高(P <0.05或P <0.01)。HE染色显示针刺组可观察到正常神经元,组织疏松和紊乱轻于模型组,整体情况好于模型组。模型组大鼠Cleaved Caspases-3蛋白表达量显著高于假手术组(P <0.01),针刺组表达量低于模型组(P <0.01)。结论针刺可以通过抑制脑组织内Cleaved Caspases-3的表达,减轻细胞凋亡达到修复脑组织和保护神经功能的疗效。     

基于纤溶酶途径介导的软骨细胞外基质损伤机制研究温针灸治疗膝骨性关节炎的作用机理

目的通过观察温针灸干预后膝骨性关节炎(KOA)兔关节软骨尿激酶型纤溶酶原激活物(u PA)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)因子表达的变化,探索温针灸治疗KOA的作用机制。方法将40只新西兰兔随机分为空白组、模型组、温针灸组、u PA抑制剂组,每组10只,采用右后肢石膏管型固定法制备KOA模型,空白组不予处理,模型组每天于兔架上固定15 min,温针灸组予以温针灸治疗,u PA抑制组每两日于关节腔注射u PA抑制剂稀释液1 m L/kg,干预结束后取兔关节软骨行TUNEL、RT-PCR、Western blot检测。结果 TUNEL细胞凋亡检测发现:较空白组,模型组软骨细胞凋亡率明显增高,差异有统计学意义(P <0. 05);较模型组,温针灸组及u PA抑制剂组软骨细胞凋亡率明显下降,差异有统计学意义(P <0. 05)。RT-PCR检测结果发现:较空白组,模型组软骨中u PA、MMP-1、MMP-13 mRNA表达明显升高,差异有统计学意义(P <0. 05);较模型组,温针灸组u PA、MMP-1、MMP-13 mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P <0. 05);u PA抑制剂组软骨中u PA、MMP-1、MMP-13 mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P <0. 05);Western blot检测发现:较空白组,模型组软骨中u PA、MMP-1、MMP-13蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P <0. 05);较模型组,温针灸组u PA、MMP-1、MMP-13蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P <0. 05) u PA抑制剂组软骨中u PA、MMP-1、MMP-13蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P <0. 05);相关性分析显示u PA与MMP-1、MMP-13均由相关关系。结论 (1)温针灸可抑制软骨细胞的过度凋亡;(2)温针灸可有效抑制软骨细胞中u PA、MMP-1、MMP-13的表达,且可通过抑制u PA的生成进而阻断MMP-1、MMP-13的活化,发挥保护关节软骨最终达到治疗KOA的作用。     

酸甘生津方及其拆方对干燥综合征小鼠血清IgG含量及颌下腺BAFF表达的影响

目的观察酸甘生津方及其拆方对干燥综合征(SS)模型小鼠血清IgG含量及颌下腺BAFF表达的影响。方法将60只BALB/C小鼠随机分为全方组、养阴组、活血组、解毒组、模型组及空白组,除空白组外其余各组小鼠均采用同种小鼠颌下腺接种方法造模。造模第3周起,分别予以酸甘生津方全方及其拆方制剂灌胃,模型组及空白组给予等量蒸馏水灌胃。干预2周后观察各组小鼠血清IgG含量及颌下腺组织BAFF表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠血清IgG含量、BAFF表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,各药物组小鼠血清IgG含量、BAFF表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.01)。各药物组之间比较,小鼠血清IgG含量差异无统计学意义(P>0.05)。与全方组比较,3个拆方组BAFF表达水平差异有统计学意义(P<0.01);与解毒组比较,养阴组与活血组BAFF表达差异有统计学意义(P<0.01);养阴组与活血组之间比较,BAFF表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论酸甘生津方及其拆方均能有效降低SS疾病模型小鼠血清IgG含量,显著抑制SS模型小鼠颌下腺组织BAFF过度表达,全方组效果最佳,这可能是其有效治疗SS的作用机制之一。     

升气壮阳汤超声雾化法对变应性鼻炎小鼠的作用研究

目的探讨升气壮阳汤超声雾化法对变应性鼻炎小鼠的干预作用及可能作用机制。方法选取SPF级BALB/c小鼠40只,随机取10只作为空白组,其余小鼠采用卵清蛋白+氢氧化铝免疫辅助剂构建变应性鼻炎小鼠模型,将成模小鼠随机分为模型组、氯雷他定组、升气壮阳汤组,每组10只。氯雷他定组给予氯雷他定药液灌胃,升气壮阳汤组给予升气壮阳汤超声雾化,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,均连续干预28 d。记录各组小鼠造模前及干预第7,14,28天鼻部症状评分,干预结束后检测各组小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、组胺、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-10(IL-10)、γ-干扰素(IFN-γ)水平,实时荧光定量PCR法检测各组小鼠鼻黏膜组织中GATA3、T-bet、Tim1、Tim3 mRNA表达量。结果干预第7,14,28天,模型组鼻部症状评分均明显高于空白组(P均<0.05),氯雷他定组和升气壮阳汤组均明显低于模型组(P均<0.05)。模型组血清IgE、组胺、IL-4、IL-5、IL-10水平及鼻黏膜组织中GAT3、Tim1、Tim3 mRNA表达量均明显高于空白组(P均<0.05),血清IL-2、IFN-γ水平及鼻黏膜组织中T-bet mRNA表达量均明显低于空白组(P均<0.05);氯雷他定组和升气壮阳汤组血清IgE、组胺、IL-4、IL-5、IL-10水平及鼻黏膜组织中GAT3、Tim1、Tim3 mRNA表达量均明显低于模型组(P均<0.05),血清IL-2、IFN-γ水平及鼻黏膜组织中T-bet mRNA表达量均明显高于模型组(P均<0.05)。结论升气壮阳汤超声雾化可减轻变应性鼻炎小鼠的症状,其作用机制可能与降低炎症因子表达,调控Th1/Th2动态平衡有关。     

补肾活血方防治阿尔茨海默病的机制研究

目的观察补肾活血方对快速老化SAMP8小鼠行为学及海马内GFAP、Iba1表达的影响,分析该方防治阿尔茨海默病的作用机制。方法7月龄的SAMP8雄性小鼠随机分为模型组、中药组和西药对照组,同月龄的SAMR1小鼠作为正常对照组。中药组给予6 g/kg补肾活血方灌胃,西药组给予3 mg/kg的盐酸多奈哌齐灌胃,正常组和模型组小鼠给予同体积的生理盐水灌胃。连续灌胃4周后采用水迷宫、免疫组织化学法和western blot法观察小鼠行为学、海马内GFAP、Iba1的表达。结果与正常老化SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠学习记忆能力明显下降,海马组织GFAP、Iba1的表达增多(P<0.05);与模型组相比,给予补肾活血方和盐酸多奈哌齐西药干预后,SAMP8小鼠学习记忆能力有所改善,海马组织内GFAP、Iba1的表达减少(P<0.05);中药组和西药对照组SAMP8小鼠相比,学习记忆、海马组织GFAP、Iba1的表达无统计学意义(P>0.05)。结论补肾活血方通过减少SAMP8快速老化小鼠海马组织GFAP、Iba1的表达,抑制星形胶质细胞及小胶质细胞种胶质细胞介导的慢性炎症反应,从而改善SAMP8小鼠的学习记忆能力,对阿尔兹海默病起治疗作用。