三株社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因分型研究

目的 了解西南地区社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)流行株的基因特征.方法 用葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)多重PCR分型技术、葡萄球菌A蛋白基因(spa)分型技术和多位点测序分型(MLST)技术对3株分离自临床的CA-MRSA(s35301、s29635、s19165)进行基因分型,并检测其杀白细胞毒素(PVL)基因.结果 3株MRSA的mecA基因(147 bp)全部为阳性扩增,还同时扩增出750 bp左右的片段,该产物经测序后证实为SCCmecⅣa型.spa分型:s35301、s29635为t437,s19165为t008.MIJST分型:s35301、s29635为ST59型,s19165为ST8型.s19165、s35301 PVL基因扩增阳性,s29635 PVL基因扩增阴性.结论 西南地区分离到CA-MRSA ST8-t008克隆株及ST59-t437克隆株.应注意控制CA-MRSA感染及传播.     

广州地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子分型及耐药性分析

目的 了解广州地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)分子型别及其对临床常用抗生素的耐药情况,为防控MRSA感染提供依据.方法 收集2010年10月至2011年4月广州地区两家教学医院临床分离的MRSA 142株,应用SCCmec、spa、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)等方法进行分子分型,检测这些菌株对苯唑西林、克林霉素等17种临床常用抗生素的药物敏感性,分析临床MRSA的耐药情况.结果 142株MRSA中121株为医院获得型金葡菌(HA-MRSA),20株为社区获得型金葡菌(CA-MRSA),1株未定型MRSA.这些MRSA可分为16种spa型,8种ST型及13种PFGE型.HA-MR-SA中的ST239-MRSA-Ⅲ-t030、ST239-MRSA-Ⅲ-t037和ST5-MRSA-Ⅱ-t002为主要流行克隆,也发现CA-MRSA中ST59-MR-SA-Ⅳ-t437克隆的流行,且这些流行克隆有特定的耐药谱.结论 广州地区流行的金葡菌仍以HA-MRSA为主,同时也有一定量的CA-MRSA检出和传播,且CA-MRSA的多重药物敏感性已在下降.     

广州地区儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征研究

目的了解广州地区儿童患者分离的社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)临床分离株的分子特征。方法收集2009年—2014年我院分离获得的65株CA-MRSA临床分离株,PCR法检测杀白细胞素(PVL)基因阳性菌株,多位点基因序列类型(MLST)测定MRSA菌株的序列类型,多重PCR法对MRSA菌株进行葡萄球菌mec盒式染色体(SCCmec)分型。结果 65株CA-MRSA分离株中PVL基因阳性31株,阳性率47.69%;MLST分型表明以ST5933.84%(22/65)及ST8823.07%(15/65)为主;SCCmec分型中发现3种类型,分别为SCCmecⅡ32.30%(21/65)、SCCmecⅣ49.23%(32/65)及SCCmecⅤ18.46%(12/65),未存在未能分型菌株。结论广州地区儿童患者分离的CA-MRSA临床分离株的PVL基因阳性率相对较高,SCCmec IV型、V型可形成小范围内的流行,其基因表型存在多种ST分型。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因分型研究

目的明确本地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的基因型别及其分布规律,探讨MR-SA菌株进化及遗传特性。方法收集2009年1月—2012年1月鄂尔多斯中心医院门诊及住院患者非痰标本分离的MRSA菌株61株,应用SCCmec基因分型和葡萄球菌A蛋白基因多态性分析(spa)方法进行基因分型。结果应用SCCmec的方法分离的MRSA以SCCmecⅡ、Ⅲ型为主,分别占50.8%和44.3%;应用spa的方法分离的MRSA以t030和t002为主,分别占39.3%和34.4%。结论本地区分离MRSA以SCCmecⅢ-t030和SCCmecⅡ-t002为主。     

乌鲁木齐地区金黄色葡萄球菌分离株的分子分型与耐药性分析

目的 了解乌鲁木齐地区金黄色葡萄球菌临床分离株的分子特征及其对临床常用抗生素的耐药情况.方法 收集2010年6月至2012年12月期间乌鲁木齐地区一所大型综合医院临床分离的86株金黄色葡萄球菌,在鉴定区分耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococcus aureus,MSSA)的基础上,应用SCCmec分型、spa分型、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、脉冲场凝胶电泳分型(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)、agr分型等葡萄球菌分子分型方法进行分析,检测pvl毒力基因的携带率,检测菌株对苯唑西林、红霉素、四环素等13种临床常用抗生素的耐药性,分析菌株的耐药情况及耐药基因.结果 86株金葡菌中31株为MRSA,55株为MSSA.31株MRSA分为8种spa型和7种ST型,优势流行克隆为ST239-MRSA-Ⅲ-t030 (71％,22/31).55株MSSA分为23种spa型、16种ST型和8个PFGE聚类组,agrⅠ型占56.4％ (31/55).MSSA菌株的pvl毒力基因检出率为49.1％ (27/55),MRSA为38.7％(12/31).药敏结果显示31株MRSA均为多重耐药(multidrug-resistant,MDR)菌株,55株MSSA中有31株为MDR菌株.结论 乌鲁木齐地区流行的MRSA以ST239-MRSA-Ⅲ-t030为主,而MSSA表现出较高遗传多样性,发现有t11413,ST121等新的型别流行.     

胆汁分离携带Panton valentin杀白细胞基因金黄色葡萄球菌流行情况及SCCmec分型

目的 调查消化内科患者胆汁分离携带Panton valentin杀白细胞基因的金黄色葡萄球菌流行情况及SCCmec分型。方法 收集浙江大学医学院附属第一医院2008年7月~2013年7月消化内科患者815名分离的金黄色葡萄球菌75株,采用VITEK 2 COMPACT全自动微生物分析仪分析其药敏结果,采用PCR检测PVL基因,采用多重PCR对所有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec分型。结果 消化内科金黄色葡萄球菌的感染率为9.2%,25例为社区获得性感染,其PVL阳性菌株16例,占64.0%;50例为医院获得性感染,其中PVL阳性菌株11例,占22%。SCC分型显示以SCCmec Ⅲ型为主,占43.3%(13/30),SCCmec Ⅱ型2株,SCCmec Ⅳ型10株,未检出SCCmecⅠ型和Ⅴ型。16株PVL基因阳性MRSA菌株中SCCmec Ⅲ型有9株(56.25%),Ⅳ型有6株(37.5%),另外有1株未成功分型。结论 消化内科胆汁分离的金黄色葡萄球菌PVL基因携带及分子流行情况显示主要以SCCmec Ⅲ型为主,携带PVL基因率较高,存在区域性流行的特点。     

医院获得性感染中出现携带SCCmecⅣ/Ⅴ的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 研究某院临床分离的医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)分型及分子流行病学特征.方法 收集中南大学湘雅医院2012年1月~2012年12月临床分离的71株HA-MRSA,采用多重PCR进行SCCmec分型,PCR检测PVL毒素基因,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性.结果 71株HA-MRSA以SCCmecⅢ型为主,占69.0%(49/71),其次为SCCmecⅣ型、SCCmecⅤ型和SCCmecⅡ型,分别占14.1%(10/71)、4.2%(3/71)和4.2%(3/71),另有6株(8.5%)菌株未能分型.HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA感染者年龄显著低于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA感染者,携带PVL基因阳性率显著高于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA感染者,而两者入院至检出菌株的时间及住院天数均未见明显差异.HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA对左旋氧氟沙星、环丙沙星、利福平、庆大霉素、四环素等的耐药率均显著低于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA(P<0.05).13株HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA菌株在55%的相似度水平形成一个大的组群.按照≥85%的相似度,这些菌株共形成3个PFGE簇以及4个单一菌株的PFGE型.结论 在国内首次发现携带SCCmecⅤ型的HA-MRSA菌株,HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA已有在医疗机构传播的趋势,并成为医院内感染的重要来源.     

痤疮感染金黄色葡萄球菌分子分型及毒力特征

目的：了解痤疮感染金黄色葡萄球菌的分子类型、毒力及耐药特征,为防治金葡菌感染提供依据。方法收集门诊分离自痤疮患者的31株金葡菌菌株,采用PCR方法鉴定MRSA菌,利用spa、SCCmec、MLST等分型方法对MRSA菌进行分子分型,检测pvl等17种毒力基因,同时测定所有细菌对苯唑西林等17种药物的敏感性,分析金葡菌分型特征、毒力特征及耐药情况。结果31例金葡菌中有17株为MRSA菌,所有MRSA菌株可分为3种SCCmec型,4种spa型,3种ST型。14株MSSA菌可分为5种ST型和spa型。所有金葡菌均携带有多种毒力基因,溶血素基因及seg基因携带率最高。结论分离自痤疮金葡菌均携带有多种毒力基因,主要的感染克隆为MRSA-ST239-Ⅲ以及MSSA-ST121,对多种抗生素耐药。     

异质性万古霉素中介的金黄色葡萄球菌的分子特征

摘要：目的了解我院异质性万古霉素中介的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分布及分子学特征。方法对2015年10月至2016年5月我院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,采用菌群分析策略-曲线下面积法(PAP-AUC)筛选异质性万古霉素中介的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;采用多重PCR法对hVISA进行agr、spa、SCC基因分型测定,对PCR产物进行测序确定spa分型。结果分离的79株MRSA经筛选获得9株h VISA;9株hVISA中有7株为agr-Ⅰ型,2株为agr-Ⅲ型;有6种spa克隆型,包括t437(4株),t114(1株)、t2310(1株)、t14062(1株)、t030(1株)、t16472(1株)。SCCmec分型以Ⅳa型为主,占55.56%,其次为Ⅲ型33.33%、Ⅱ型11.11%。结论我院hVISA检出率为11.39%,呈多克隆流行。     

广州市96株血流感染金黄色葡萄球菌的基因分型及耐药性分析

目的 分析血流感染中分离金黄色葡萄球菌的分子分型特征和药物敏感试验结果,为耐药性金黄色葡萄球菌防治提供基础依据。方法 对中山大学附属第一医院2013—2017年血流感染分离的96株金黄色葡萄球菌应用MLST和spa技术进行分子分型,同时进行药物敏感试验分析血流感染中金黄色葡萄球菌对万古霉素、奎奴普丁/达福普汀、利奈唑胺等14种抗生素的药敏特征。结果 96株金黄色葡萄球菌中40株为甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（Methicillin resistant Staphylococcus aureus, MRSA）,其主要型别为ST59-t437型7株（占17.5%）,ST1-t114型4株（占10.0%）,ST239-t030型3株（占7.5%）,ST239-t037、ST45-t116、ST5-t2595和ST7-t091型均为2株（均占5.0%）;56株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（Methicillin susceptible Staphylococcus aureus, MSSA）,其主要型别为ST188-t189型14株（占25.0%）,ST7-t803型3株（占5.4%）,ST188-t2883、ST6-t701、ST30-t338和ST59-t437型均2株（均占3.6%）。spa分型中发现4个新型,分别为t17040、t17041、t17044、t17046。40株MRSA菌株对红霉素和克林霉素耐药率分别为82.9%和51.2%,对万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀耐药率均为0;56株MSSA对所试验抗生素敏感率均较高,对奎奴普丁/达福普汀、万古霉素、利奈唑胺、呋喃妥因、替加环素的敏感率为100.0%,复方新诺明的敏感率为94.5%,对庆大霉素和利福平的敏感率均为96.4%。结论 血流感染中金黄色葡萄球菌分子分型型别较多,应重视金黄色葡萄球菌的感染控制。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌同源性分析及耐药性研究

目的对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行耐药情况和分子流行病学监测,探讨院内MRSA的流行趋势。方法收集我院2009年1月~2011年6月临床标本分离的MRSA菌株60株;采用Microscan WalkAway 40进行菌株鉴定,同时对所有金黄色葡萄球菌进行药物敏感性分析;采用脉冲场凝胶电泳技术对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行分子分型。结果共收集60株MRSA菌株,其中17株被认为是可疑社区获得(CAMRSA),43株被认为是医院获得(HA-MRSA)。所有菌株均对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、呋喃妥因和奎奴普丁/达福普汀敏感,未出现耐药菌株。CA-MRSA与HA-MRSA对左旋氧氟沙星和利福平的敏感性有明显差异。临床分离的MRSA菌株PFGE分型较为分散,共分为13种型别,每种型别的菌株数分别为2~6株不等,未出现大范围的院内流行克隆。结论本院收集的临床分离的MRSA菌株多重耐药性严重,其中CA-MRSA相对HAMRSA敏感性稍高。所有金黄色葡萄球菌未出现糖肽类抗菌药物耐药。MRSA菌株未出现大范围的院内流行株,但仍应加强院内感染流行控制。     

丹参酮与万古霉素联合应用对MRSA的抑制作用

目的探讨丹参酮及其与万古霉素、β-内酰胺类抗菌药物联用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的体外抑制作用。方法从临床送检的标本中鉴定筛选出20株MRSA。采用微量稀释法分别测定丹参酮、万古霉素、苯唑西林、氨苄西林、头孢唑林对MRSA的最低抑菌浓度MIC（minimal inhibitory concentration）。采用试管棋盘稀释法分别测定丹参酮与万古霉素、苯唑西林、氨苄西林、头孢唑林联合使用时对MRSA的MIC，计算联合指数（FIC）。结果丹参酮对MRSA的MIC与对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）即标准株ATCC29213的MIC比较差异无统计学意义。丹参酮与万古霉素在体外联合使用时万古霉素的MIC为（0.23±0．27）μg/ml，与单用万古霉素对MRSA的MIC[（O．71±0．42）μg／ml]比较差异有统计学意义（P〈0．001）。FIC平均为0.75，呈相加作用。上述β-内酰胺类抗菌药物与丹参酮合用的FIC均大于1．0，呈无关作用。结论丹参酮对MRSA有抑制作用。丹参酮与万古霉素联合使用具有相加作用。丹参酮与苯唑西林、氨苄西林、头孢唑林联合使用则呈无关作用。本研究结果提示丹参酮有望成为治疗MR-SA感染的辅助用药，为MRSA感染的患者提供一治疗新思路。     

Antimicrobial resistance and molecular epidemiological characteristics of clinical isolates of Staphylococcus aureus in Changsha area

Background  Increasing prevalence of Staphylococcus aureus (S. aureus), particularly methicillin-resistant S. aureus (MRSA) has been reported in China. In this study, we investigated the drug resistance characteristic, genetic background, and molecular epidemiological characteristic of S. aureus in Changsha.

Methods  Between January 2006 and December 2008, 293 clinical isolates of S. aureus were collected from 11 hospitals in Changsha and identified by the Vitek-2 system. All the isolates were verified as MRSA by PCR amplification of both femA and mecA genes. K-B disk method was used to test drug sensitivity of S. aureus to antibiotics. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) was performed for genotypic and homologous analysis of 115 isolates randomly selected from the original 293 clinical S. aureus isolates.

Results  S. aureus was highly resistant to penicillin, ampicillin, erythromycin, and clindamycin with resistant rates of 96.6%, 96.6%, 77.1%, and 67.2% respectively. All the isolates were susceptible to tecoplanin, vancomycin, and linezolid. MRSA accounted for 64.8% (190/293) of all the S. aureus strains. The 115 S. aureus isolates were clustered into 39 PFGE types by PFGE typing, with 13 predominant patterns (designated types A to M) accounting for 89 isolates. The most prevalent PFGE type was type A (n=56, 48.7%) and 100.0% of type A strains were MRSA. PFGE type A included 13 subtypes, and the most prevalent subtype was subtype A1 (46.4%, 26/56). Strains with PFGE type A were isolated from eight hospitals (8/11), and both subtypes A1 and A4 strains were isolated in a university hospital.

Conclusions  Clinical isolates of S. aureus in Changsha were resistant to multiple traditional antibiotics. There was an outbreak of PFGE type A MRSA in this area and the A1 subtype was the predominant epidemic clone. Dissemination of the same clone was an important reason for the wide spread of MRSA.     

肺结核感染金黄色葡萄球菌的基因分型及耐药研究

目的通过对肺结核患者分离出的金黄色葡萄球菌进行基因谱型和药敏检测研究,了解肺结核并发金黄色葡萄球菌的院内流行状况。方法对,晦床分离出的30株金黄色葡萄球菌进行药敏试验和SCCmec基因盒的多重PCR检测。结果药敏结果显示30株金黄色葡萄球菌对青霉素和甲氧西林的耐药率最高。甲氧西林的耐药率达到62．8％。MecA阳性菌株SCCmec的分型显示均为Ⅱ型或Ⅲ型,且所占比例相近,未见Ⅰ型和Ⅳ型。结论肺结核患者并发金黄色葡萄球菌耐药性普遍,MecA基因介导的MRSA在分离菌株分型以Ⅱ型或Ⅲ型为主。     

引起社区获得性皮肤软组织感染的病原菌分布及主要致病菌的药物敏感性分析

目的了解该地区社区获得性皮肤软组织感染的病原菌分布，以及主要致病菌对抗菌药物的敏感性特征。方法对57例门诊就诊的皮肤软组织感染患者的脓液或创面分泌物进行细菌培养和鉴定，对主要致病菌进行药物敏感性分析。结果从57例皮肤软组织感染患者的标本中检测出51株病原菌，葡萄球菌属是主要致病菌，该菌属仅对青霉素和红霉素表现有较高的耐药性，对常用抗生素的敏感性明显高于医院感染的葡萄球菌；未发现耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌。结论该地区社区获得性皮肤软组织感染的主要病原菌为葡萄球菌，未发现耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌流行。门诊治疗皮肤软组织感染的经验性用药可首选一代头孢菌素或喹诺酮类药物。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MLST 联合SCCmec 基因分型与耐药性分析

目的 了解滨州医学院附属医院MRSA 菌株多位点序列分型（MLST）联合SCCmec 基因型分布 和各种基因型的耐药特征。方法 采用聚合酶链反应（PCR）对MRSA 菌株进行MLST 联合SCCmec 基因分型； 采用WalkWAY96PLUS PC33 药敏板检测MRSA 抗菌药物敏感性。结果 SCCmec 基因分型结果以Ⅲ型为 主（63/67 株，占94.03%），MLST 分型共检测出6 种基因型：ST 88、ST 121、ST 221、ST 82、ST 239 及ST 399， 其中以ST 239（61/67，91.04%）为主，耐药性分析显示SCCmec Ⅲ型MRSA 菌株表现为多重耐药。结论 ST239-MRSA-SCCmec Ⅲ型菌株为鲁北地区MRSA 主要流行菌株，该型菌株对多种抗生素呈多重耐药； MLST 联合SCCmec 基因分型方法是MRSA 遗传背景研究简便快速的方法。     

鄂尔多斯地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型的研究

目的:了解本地区MRSA菌株的分子流行病学特点,明确本地区MRSA的基因型别及其分布规律.方法:收集2009年1月～2011年8月间鄂尔多斯地区门诊及住院患者非痰标本分离的MRSA菌株54株,应用SCCmec方法和spa方法进行基因分型.结果:应用SCCmec基因分型分离的MRSA以SCCmecⅡ、Ⅲ型为主,分别占本次分离的50％和46.4％;应用spa基因分型分离的MRSA以t030和t002为主,占该院分离率的41％和35.1％.结论:本地区分离MRSA以SCCmecⅢ- t030和SCCmecⅡ- t002为主.     

医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染回顾性分析

目的：分析医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染的高危因素、药物敏感率和临床转归,为临床诊治MRSA感染提供依据。方法对临床送检各类标本中分离出的110例次MRSA,按照科室分布、标本种类、药物耐药性及临床疗效等进行回顾性分析。结果医院获得性MRSA主要分布于ICU、神经内科、干部科,感染主要来源于痰液、手术切口分泌物、皮肤创面分泌物,分别占68.2%、11.8%和8.2%,对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类敏感率为0,对氟喹诺酮类、大环内酯类、氨基糖甙类抗生素呈不同程度耐药,对替考拉宁、替加环素、万古霉素、利奈唑胺、呋喃妥因和喹奴/达福普汀敏感率为100%;在ICU 90%以上的MR-SA感染患者为年龄80岁以上、侵入性操作和长期使用广谱抗生素,在非ICU病房则以住院时间长和接受手术者居多。结论 MR-SA感染多发生于有多个基础疾病和高危因素者,临床表现复杂多样,临床上应加强对MRSA的防控,且应根据药敏合理使用抗生素,降低耐药菌株产生的概率。     

低频限制性位点聚合酶链反应研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的暴发流行

目的：探讨院内感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）流行状况,了解流行株耐药状况。方法：用K-B纸片法检测21株院内感染金黄色葡萄球菌耐药状况,建立本实验室低频限制性位点聚合酶链反应（IRS-PCR）分型方法。应用IRS-PCR对21株金黄色葡萄球菌进行基因分型。结果：21株菌经药敏实验分出6个耐药表型a～f,其中a型12株,均为多重耐药的MRSA。21株菌经IRS-PCR分为6个基因型A～F,其中A型12株来自烧伤病房,B、C、D、E、F型来源于重症监护室。结论：MRSA多为多重耐药,交叉感染是MRSA流行的主要原因。IRS-PCR能对金黄色葡萄球菌简易快速可靠分型。