实时荧光定量RT-PCR检测结直肠癌中外周血端粒酶逆转录酶mRNA的表达及其临床意义

目的:建立外周血端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达量检测的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)系统,检测结直肠癌患者hTERT mRNA的表达并探讨其对结直肠癌微转移的诊断价值.方法:用实时荧光定量RT-PCR技术检测53例结直肠癌患者和21名健康人的外周血标本hTERT mRNA表达情况,分析其表达与肿瘤临床病理特征的关系并应用接受者操作特征曲线(ROC曲线)分析hTERT mRNA检测对结直肠癌的诊断价值.结果:结直肠癌组外周血hTERT mRNA表达水平显著高于正常对照组(t1=7.953,P＜0.05).其表达与肿瘤淋巴结转移、血行转移和TNM分期相关(t'/t=2.334,2.149,2.460,均P＜0.05)hTERT mRNA诊断结直肠癌的ROC曲线下面积0.91,诊断界值为Ct≤32.结论:应用实时荧光定量RT-PCR技术克服了传统PCR只能定性检测而不能定量检测的缺-点:外周血hTERT mRNA可作为诊断结直肠癌微转移的标记物.     

实时荧光定量RT-PCR检测结直肠癌中ERCC1 mRNA的表达及其临床意义

目的传统的影像学检查及肿瘤标志物检测对结直肠癌微转移的诊断价值有限。本研究旨在探讨ERCC1 mRNA在结直肠癌患者外周血中的表达情况及其临床意义。方法用实时定量荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对53例结直肠癌患者和21名健康人的外周血标本进行ERCC1 mRNA检测,分析其表达与肿瘤临床病理特征的关系并应用接受者操作特征曲线(ROC曲线)分析ERCC1 mRNA检测对结直肠癌的诊断价值。结果结直肠癌组外周血ERCC1 mRNA表达水平显著高于正常对照组(P<0.05),其表达与肿瘤淋巴结转移、血行转移和TNM分期相关(P<0.05)。ERCC1 mRNA诊断结直肠癌的ROC曲线下面积0.89,诊断界值为Ct≤32。结论实时定量荧光RT-PCR检测ERCC1 mRNA可以更好地评估结直肠癌血道微转移,有利于判断预后。     

结直肠癌及其癌前病变胃泌素检测的临床意义

目的：探讨胃泌素在大肠癌发生发展中的作用及临床意义。材料和方法：随机选正常人２０例,结直肠炎症患者１１例,息肉患者２３例,结直肠癌患者３２例,用放射免疫方法测定血清胃泌素水平,用免疫组织化学方法测定组织胃泌素,ＰＣＮＡ和ｐ５３蛋白表达水平。     

白细胞介素1α mRNA在结直肠癌中的表达及意义

白细胞介素(IL)-1α是一种多功能细胞因子,主要由活化的巨噬细胞和淋巴细胞合成并分泌,不仅参与炎症反应,而且在肿瘤发生发展中发挥重要作用。体外实验显示,IL-1α在结直肠癌细胞株中明显高表达,可促进肿瘤血管形成,并且与结直肠癌细胞肝转移有关〔1〕。临床实验显示,结直肠癌患者血浆中IL-1α蛋白表达明显升高〔2〕。迄今为止,尚未见结直肠癌中     

结直肠癌组织中CD40mRNA的表达变化及临床意义

目的 观察结直肠癌组织中CD40 mRNA的表达变化,并探讨其临床意义.方法 应用RT-PCR法分别检测30例结直肠癌及其癌旁组织中CD40 mRNA的相对表达量,并分析其表达与结直肠癌患者性别、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期相关性.结果 结直肠癌组织中CD40 mRNA的表达水平显著低于癌旁组织(P＜0.05);结直肠癌组织中CD40 mRNA的表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期相关(P＜0.05),与患者性别、浸润深度及远处转移无关(P＞0.05).结论 结直肠癌组织中CD40mRNA表达显著降低,并与肿瘤的浸润性生长相关;CD40分子可能成为判断结直肠癌预后的有效指标.     

结直肠癌组织HSP60、HSP70和HSP90α mRNA的检测及临床意义

目的检测结直肠癌组织中热休克蛋白HSP60、HSP70、HSP90α的mRNA表达情况,探讨HSPs家族成员在肿瘤发生发展中的意义。方法采用RT-PCR测定结直肠癌及其癌旁组织中HSP60、HSP70、HSP90α的mRNA表达,并作对比分析。结果HSP60、HSP70、HSP90α的mRNA在结直肠癌组织中表达的灰度比值分别为0.989±0.223、0.873±0.217和0.953±0.228,在癌旁组织中表达的灰度比值分别为0.674±0.131、0.526±0.156和0.518±0.154,差异均有统计学意义（P均〈0.05）。结论结直肠癌组织中HSP60、HSP70、HSP90αmRNA高表达,检测上述3种热休克蛋白mRNA的表达对结直肠癌有诊断意义。     

Survivin基因沉默对结直肠癌PTTG mRNA的影响

目的探讨重组载体介导的Survivin小干扰RNA(siRNA)对人结肠癌细胞株Lovo中PTTG mRNA的影响。方法前期成功构建的Survivin特异性siRNA真核表达载体转染结肠癌Lovo细胞后,采用实时荧光定量PCR检测PTTG mRNA的表达水平。结果 Survivin基因沉默后24～72 h,与正常对照组相比,Survivin mRNA表达明显降低(P<0.05);基因沉默24和48 h后,pGenesil-2-Survivin 1组和pGenesil-2-Survivin 2组PT-TG mRNA表达显著低于正常对照组(P<0.05)。结论 Survivin基因沉默后结直肠癌细胞PTTG mRNA表达显著下调,提示Survivin和PTTG可能相互促进共同参与结直肠癌的发生发展。     

人类端粒酶逆转录酶mRNA和蛋白在嗜铬细胞瘤中的表达及其意义

目的研究人类端粒酶逆转录酶（hTERT）在嗜铬细胞瘤中的表达及其作为预测生物学行为标志物的价值。方法采用原位杂交方法测定hTERT mRNA在45例嗜铬细胞瘤和副神经节瘤和9例正常肾上腺髓质中的表达；免疫组织化学方法检测hTERT蛋白的表达水平。结果hTERT mRNA在5例恶性（5／7）和5例可疑恶性（5／7）肿瘤中表达，表达均高于良性肿瘤（3／31），差异有统计学意义（P〈0．01）；hTERT蛋白的表达在良性（3／31）和可疑恶性（6／7）以及恶性（5／7）差异有统计学意义（P〈0．01）；9例正常肾上腺髓质细胞中未发现hTERT mRNA和蛋白的表达；肿瘤组织hTERT蛋白和mRNA的表达存在正相关性（r=0．951，P〈0．01）；hTERT蛋白和mRNA的表达与临床因素，如性别、肿瘤大小和血压无关联。结论hTERT mRNA和蛋白检测对良、恶性嗜铬细胞瘤和副神经节瘤的鉴别诊断有重要临床意义。     

大肠癌组织中端粒酶催化亚单位的表达及临床意义

目的:探讨端粒酶催化亚单位(hTERT)在大肠癌患者中的表达情况及与及临床病理类型、淋巴结转移和复发之间的关系.方法:免疫组化法测定大肠癌组织(n=45)、腺瘤组织(n=16)及正常大肠黏膜(n=10)hTERT表达情况,并将hTERT表达情况与大肠癌临床病理类型、淋巴结转移和肿瘤复发之间的关系进行总结.结果:大肠癌患者癌组织中的hTERT阳性率为77.8%,显著高于腺瘤组(2/16)和正常大肠黏膜组(0/10),有显著性差异(P＜0.05).hTERT表达强度与淋巴结转移呈高度相关性(r=5.2,P＜0.05).大肠癌复发转移平均时间阳性组为34±5 mo,阴性组为20±6 mo,差异有显著性(P＜0.05).结论:hTERT在大肠癌组织中有高表达,hTERT免疫组化检测结果可以作为大肠癌早期诊断和淋巴结转移的一个重要参考指标.     

肝衰竭患者外周血单个核细胞hTERT mRNA水平及其与临床预后的关系

目的探讨肝衰竭患者外周血单个核细胞（PBMCs）中人端粒酶逆转录酶（hTERT） mRNA的变化对预后的评估价值.方法采用实时荧光定量RT-PCR法检测20例正常人和60例肝衰竭患者28天内PBMCs hTERT mRNA水平.结果39例生存患者PBMCs hTERT mRNA水平在入院后依次上调,在入院时、入院后7天、14天、21天和28天分别较正常人升高了2.87、4.27、9.23、23.35和30.50倍,而死亡患者在各时间点依次下降,分别是正常人的3.01、2.08、1.21、0.28和0.06倍;PBMC hTERT mRNA水平对判断预后的ROC曲线下面积在入院时及治疗后7天、14天、21天和28天分别为0.611±0.075、0.676±0.074、0.786±0.065、0.993±0.008和0.998±0.003.结论 PBMCs hTERT mRNA水平可作为肝衰竭患者的预后判断指标,特别是在治疗14天以后.     

肺癌患者外周血单个核细胞hTERT基因表达在诊断中的价值

目的探讨外周血单个核细胞(PBMCs)的人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的表达水平对于肺癌的诊断意义。方法采用RT-PCR定量检测中国医科大学第二临床学院干诊科2002-03~2005-0230例肺癌住院患者及15名正常人外周血单个核细胞的hTERT的基因表达水平。结果肺癌患者和正常对照组的hTERTmRNA的吸光度值分别为0.906±0.112,0.407±0.104。两者比较差异有显著性(P<0.01)。结论定量测定PBMCs的hTERTmRNA的表达水平是诊断肺癌患者的有效方法。     

急性白血病端粒酶活性及端粒酶基因表达的研究

目的 :研究初发急性白血病 (AL)患者骨髓、外周血单个核细胞端粒酶活性及端粒酶逆转录酶基因(hTERT)的表达 ,探讨其临床意义。方法 :采用端粒酶PCR ELISA法检测 2 4例初治AL患者的端粒酶活性 ;采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测hTERT基因mRNA的表达水平。结果 :在 2 4例初发AL患者骨髓、外周血样本中 ,18例 (75 .0 % )表达端粒酶活性 ,其吸光度 (A )均值分别为 0 .5 38± 0 .0 6 2和 0 .4 6 3± 0 .0 5 4 ,而 12例正常人外周血中只有 1例表达端粒酶活性 A 均值为 0 .16± 0 .0 12 ,前二者分别与后者比较差异有极显著性意义 (P <0 .0 1)。在 2 4例AL患者中 ,19例 (79.2 % )表达hTERT基因mRNA。 2 4例AL骨髓样本中 ,17例既有端粒酶活性表达 ,又有hTERT基因mRNA表达 ,端粒酶活性的表达和hTERT基因mRNA的表达具有明显的一致性。结论 :初发AL患者骨髓、外周血细胞端粒酶活性及hTERT基因mRNA表达明显高于正常 ;AL患者细胞端粒酶活化与其hTERT表达密切相关。     

中国结直肠癌癌前病变和癌前状态处理策略专家共识

随着饮食结构持续改变和人口老龄化,结直肠癌不仅已成为我国常见恶性肿瘤之一,且发病率仍不断攀升,疾病负担沉重,严重威胁人民生命健康。尽早发现和处理结直肠癌癌前病变与状态,特别是结直肠腺瘤,有助于降低结直肠癌发病率和死亡率,实现预防关口前移和重心下移。鉴于此,国家消化系统疾病临床医学研究中心（上海）牵头,并联合中华医学会消化内镜学分会等多个学会,组织我国消化、内镜、肿瘤和健康管理等多学科专家共同制定了本共识,内容涵盖结直肠癌癌前病变与状态的定义、预防、筛查与诊断、治疗与随访等多个部分,以期为我国结直肠癌癌前病变和状态的科学管理提供参考。     

端粒酶逆转录酶和c-myc基因在肺癌中表达的研究

目的　研究端粒酶逆转录酶 (hTERT)和c myc基因在肺癌中的表达及其与端粒酶活性的关系。方法　采用端粒重复序列扩增 (TRAP)法对肺癌组织以及癌旁非癌肺组织的端粒酶活性进行测定。用原位逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和免疫组织化学技术分别检测上述组织标本中hTERTmRNA与c myc蛋白表达。结果　端粒酶活性在肺癌组织中阳性率为 73 .2 % (3 0 /4 1) ,在癌旁非癌肺组织为 6.3 % (2 /3 2 ) ,P <0 .0 1。肺癌及癌旁非癌肺组织中hTERTmRNA阳性表达率分别为 78.0 % (3 2 /4 1)和 9.4% (3 /3 2 ) ,P <0 .0 1,c myc蛋白阳性表达率分别为 80 .5 % (3 3 /4 1)和 15 .6% (5 /3 2 ) ,P <0 .0 1。肺癌组织hTERTmRNA表达与端粒酶活性呈显著正相关 (r =0 .70 7,P <0 .0 1) ,同时c myc蛋白与hTERTmRNA表达亦呈明显正相关 (r =0 .60 9,P <0 .0 1)。 结论　hTERTmRNA表达增强不仅参与肺癌的发生 ,而且可能是调节肺癌端粒酶活性的限速步骤。c myc蛋白可能通过激活hTERTmRNA表达而促进肺癌的形成