地塞米松对哮喘豚鼠肺内、脊神经节及脊髓背角内蛋白激酶C表达的抑制作用

目的探讨地塞米松对哮喘豚鼠肺内、C7～T5脊神经节及对应节段脊髓背角内蛋白激酶C（PKC）表达的抑制作用。方法利用免疫组织化学和Western blotting方法。研究哮喘豚鼠肺内、C7～T5脊神经节及对应节段脊髓背角内PKC的免疫反应变化。结果哮喘组豚鼠肺内、C—L脊神经节及对应节段脊髓背角内PKC平均光密度值明显高于对照组（P〈0．01）,而地塞米松组则明显低于哮喘组（P〈0．01）。结论PKC可能参与哮喘的发病过程,地塞米松抑制哮喘豚鼠PKC的表达可能是其治疗哮喘的作用机制之一。     

哮喘豚鼠脊神经节和结状神经节内的NKA

应用ＡＢＣ免疫组织化学方法，结合图像定量分析，研究了１８只哮喘豚鼠结状神经节和Ｃ７～Ｔ５段脊神经节内神经激肽Ａ（ＮＫＡ）的变化。结果表明，哮喘时结状神经节及Ｃ７～Ｔ，段脊神经节内ＮＫＡ阳性细胞教分别增加了约３０．６％和３５．１％；ＮＫＡ平均密度分别增加了３５．２％和３１．７％，ＮＫＡ灰度值的改变也有极显著性意义（Ｐ＜０．０１）。结果提示一级传入系统的ＮＫＡ可能参与了哮喘发作的病理生理过程，是其发作的重要因素之一     

地塞米松对哮喘豚鼠肺内脏感觉传入部位TrkA表达的抑制作用

为了探讨地塞米松对哮喘豚鼠肺内脏感觉传入系统(C7T5脊神经节及对应的脊髓后角)TrkA表达的影响,我们利用免疫组织化学和Westernblot方法,研究了哮喘豚鼠C7T5脊神经节及对应的脊髓后角TrkA的免疫反应变化。结果显示:哮喘组豚鼠C7T5脊神经节及对应的脊髓后角TrkA表达明显高于对照组(P<0.01),而地塞米松组则明显低于哮喘组(P<0.01)。结果提示TrkA可能参与哮喘的发病过程,地塞米松抑制哮喘豚鼠TrkA的表达可能是其治疗哮喘的作用机制之一。     

NF-κB/IκB信号通路在乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中的表达

目的探讨核转录因子-κB(NF-κB)/IκB在乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBVGN)肾组织中的表达及其在HBVGN发病机制中的可能作用。方法采用免疫组化染色法,检测42例HBVGN、20例原发性膜性肾病及5例正常肾组织中NF-κBp65、IκB-α蛋白的表达。结果NF-κBp65蛋白在HB-VGN组织中的表达,明显高于在原发性膜性肾病(P<0.01)及正常肾组织(P<0.05)中的表达,且细胞核和细胞质中都可检测到NF-κBp65的表达;相反IκB-α在HBVGN组织中的表达低于原发性膜性肾病肾组织(P<0.05)。结论HBVGN肾组织可能有IκB-α蛋白降解及NF-κB核转移。NF-κB/IκB可能参与了肾组织的病理损害过程。     

NF-κB与危重病治疗

核因子 κB (NF κB)为一种参与多种炎症介质基因表达的转录因子。NF κB过度及长时间激活与许多炎性疾病 ,包括脓毒性休克、急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)、缺血及再灌注损伤等有关。为减轻组织和器官损伤 ,NF κB在调控炎症中的重要作用使之成为一个治疗目标。通过基因治疗策略或药物抑制导致NF κB活化中的关键步骤 ,能调控NF κB信号转导。     

核因子κB p65和p50在正常豚鼠耳蜗中的定位表达

目的:研究核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的亚单位p65和p50在正常豚鼠耳蜗中的定位与表达。方法:应用免疫组织化学SP法。结果:NF-κB p65免疫反应活性细胞位于螺旋韧带Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型纤维细胞和根细胞,而螺旋神经节、血管纹和螺旋器均未见染色;NF-κB p50免疫反应活性细胞位于耳蜗螺旋器的内、外毛细胞和支持细胞,此外,螺旋神经节、螺旋韧带和血管纹中也有p50表达,在耳蜗的上述部位中,NF-κB p50免疫染色多位于胞质内,胞核极少。结论:NF-κB p65和p50在正常豚鼠耳蜗的多种细胞中都有表达。     

核转录因子-κB与支气管哮喘的研究进展

近年来,支气管哮喘发病率呈逐年上升趋势,有效控制哮喘的发生对哮喘患者的生活质量至关重要.目前研究认为气道炎症和气道重构是支气管哮喘病理过程的两个重要方面.此过程与多种炎性蛋白的高表达有关,而核转录因子-κB(NF-κB)作为这些炎症蛋白的上游调控因子参与了哮喘的病理发展.由此,特异性的抑制NF-κB信号转导通路为支气管哮喘的治疗开辟了一条新的途径.     

NF-κB在急性胰腺炎中的研究进展

NF-κB(转录因子核因子-κB)是一类主要参与机体炎性分子表达调控的转录分子，在急性胰腺炎中，其表达也受到很大的影响，苓主要对近几年NF-κB在急性胰腺炎中的研究作一综述。     

NF-κB在某些心血管疾病中的作用

核因子-κB(NF-κB)作为一种重要的转录因子在通常情况下对心肌细胞起保护作用,但在不同的刺激下,NF-κB表现出的作用不尽相同。NF-κB参与心血管疾病病理过程的多个环节,包括细胞生存、增殖和分化,调节细胞对各种刺激的反应,如低氧、压力和缺血等。NF-κB在众多心血管疾病如动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤、缺血预处理、心肌肥大和心力衰竭等的发生和发展中发挥重要作用。     

雷公藤抑制哮喘豚鼠模型IL-5、GM-CSF 表达以及核因子-κB的作用

目的 探讨雷公藤对哮喘豚鼠模型IL－5、GM－CSF表达的影响及其机制。方法 采用卵蛋白（OA）致敏复制哮喘豚鼠模型,用原位杂交（ISH）就雷公藤甲素（TP）对其肺组织和外周血单个核细胞（PBMC）IL－5、GM－CSF mRNA表达的影响进行检测。并通过凝胶电泳迁移试验（EMSA）检测TP对伴刀豆蛋白（ConA)或佛波脂（PMA）刺激的人T细胞核因子－κB（NF-κB）的DNA结合活性的影响。结果 哮喘豚鼠肺组织和PBMC IL－5、GM－CSF mRNA表达显著高于正常组（P＜0．01）和TP处理组（P＜0．05或0．01）。ConA或PMA刺激可使T细胞NF－κB的DNA结合活性增强,活性增强的NF－κB为多克隆抗体P65和P50的异源二聚体,TP可以降低该NF－κB的DNA结合活性。结论 雷公藤通过抑制NF－κB的DNA结合活性,进而抑制IL－5、GM－CSF mRNA的转录,可能是其治疗哮喘的机制之一。     

转录因子NF-κB在内毒素休克中的作用

目的探讨内毒素休克大鼠组织炎性介质的表达特征及其和核转录因子NFκB(nuclearfactorkappaB)的关系。方法应用免疫组织化学技术检测脂多糖(lippolysaccharice,LPS)内毒素休克大鼠肝肾组织转录因子NFκB、炎性介质ICAM1、VCAM1、iNOS的表达。结果LPS内毒素休克大鼠肝肾组织转录因子NFκBp65,炎性介质ICAM1、VCAM1、iNOS阳性细胞率高于正常对照组;炎性介质ICAM-1、VCAM-1、iNOS阳性细胞率与NF-κBp65阳性细胞率成正相关。用吡咯烷二硫氨基甲酸(pyrrolidinedithiocarbmate,PDTC)抑制转录因子NFκB的内毒素休克大鼠炎性介质ICAM1、VCAM1、iNOS阳性细胞率低于LPS组。结论核转录因子NFκB在LPS引起的大鼠内毒素休克炎性介质的表达中起调节作用。     

NF-κB在大鼠CsA肾毒性中的作用

目的探讨NF-κB在环孢素A(CsA)肾毒性中的作用及与TGFβ-1、caspase-3和细胞凋亡的关系。方法Wist-ar雄性大鼠64只随机分成4组:溶剂对照组,二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)组,CsA组,CsA PDTC组。动物每日皮下注射CsA15mg/kg,或溶剂、PDTC各100mg/kg。4周后取肾脏,检测血BUN、Cr、尿NAG酶和尿常规。HE、TUNEL、免疫组化观察。结果光镜下观察到明显的CsA慢性肾损伤。CsA组较其他组血BUN、Cr,尿NAG酶显著增高,尿常规有蛋白尿,尿比重降低;而CsA PDTC组与对照组比较无差异。TUNEL检测到CsA组细胞凋亡及免疫组化检测有NF-κB、TGF-β1和caspase-3的表达。PDTC阻断NF-κB后,TGF-β1和caspase-3表达显著减弱。CsA PDTC组与对照组比较无明显变化。结论CsA可致肾细胞凋亡。阻断NF-κB后凋亡明显减少,肾损伤减轻。提示CsA肾毒性与NF-κB的激活有关。     

哮喘豚鼠初级传入神经元ERK的表达及NGF的调节作用

目的　探讨细胞外信号调节蛋白激酶 (ERK)在哮喘豚鼠初级传入神经元 (C7 T5脊神经节 )的表达及神经生长因子 (NGF)对ERK的调节作用。方法　利用免疫组织化学结合显微图像分析 ,研究哮喘豚鼠C7 T5脊神经节活化的ERK免疫反应变化。结果　与对照组相比 ,哮喘组豚鼠活化ERK免疫反应在C7 T5脊神经节神经元核内明显上调 (P <0 .0 1) ,其阳性细胞比率明显高于对照组。Anti NGF组豚鼠活化ERK免疫反应在C7 T5脊神经节神经元的核中明显低于哮喘组 (P <0 .0 1)。结论　C7 T5脊神经节神经元活化的ERK可能参与哮喘的发病过程 ,NGF可上调哮喘豚鼠C7 T5脊神经节神经元活化的ERK表达     

大鼠硅肺纤维化中NF-κB和MMP-9的表达

目的 研究核转录因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达在硅肺纤维化发生发展中的作用。方法 应用免疫组化SP法观察NF-κB和MMP-9在大鼠硅肺组织中的表达。结果 对照组支气管上皮细胞、肺巨噬细胞和肺间质细胞均可表达NF-κB和MMP-9，肺泡上皮细胞和血管内皮细胞未见表达。实验组的支气管上皮细胞、肺巨噬细胞、间质细胞和肺泡上皮细胞NF-κB、MMP-9表达均明显增加。在实验的每一个时间点，肺巨噬细胞、肺间质细胞中NF-κB和MMP-9的半定量表达基本同步，呈明显正相关。支气管上皮细胞NF-κB在1～28d均呈持续高水平表达，但MMP-9在14d后开始减少；肺泡上皮细胞NF-κB在114d呈较高水平表达，以后下降，而MMP-9仅于第3～7天时有阳性表达。结论 矽尘作用下肺内多种细胞NF-κB和MMP-9表达增加，并可能通过NF-κB介导调控MMP-9表达而影响硅肺的发生发展。     

siRNA对小鼠血管内皮细胞NF-κB p65表达的抑制作用

探索RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术在抑制血管内皮细胞激活中的应用前景.利用阳离子脂质体LipofectamineTM000作为转染试剂将化学合成的小鼠NF-κB p65的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人小鼠EOMA细胞,RT-PCR测定细胞内NF-κB p65 mRNA表达,Westem blot检测细胞内NF-κB p65蛋白水平.同时观察siRNA对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的NF-κB激活的抑制作用.结果显示在转染siRNA后的第24小时,细胞内NF-κB p65mRNA水平降低,蛋白表达量明显减少,而在第48小时、72小时细胞内NF-κB p65蛋白已经无法测出;在TNF-α刺激后,转染siRNA的细胞组内NF-κB p65的表达也明显受到抑制.说明RNAi技术可以抑制NF-κB p65的表达,为进一步研究血管内皮细胞的保护提供了有效的方法.     

rhGH对Jurkat细胞中NF-κB活性的影响

目的:探讨重组人生长激素(rhGH)对Jurkat细胞核因子-κB(NF-κB)信号通路活化的影响.方法:(1)将含荧光素酶报告基因的质粒pNF-κB-luc转染入T淋巴细胞系-Jurkat E6-1细胞中,在培养液中加入梯度浓度rhGH.(2)用梯度浓度rhGH直接刺激Jurkat细胞,然后用RT-PCR方法检测IκBα、IKK1 mRNA表达情况.结果:各浓度rhGH对转染pNF-κB-luc的Jurkat细胞中荧光素酶表达有促进作用,而对IκBα、IKK1 mRNA表达无显著影响.结论:rhGH对PHA活化的T细胞NF-κB的活化有促进作用,而对与NF-κB活化相关的IκBα和IKK1的mRNA表达无显著影响.     

哮喘小鼠中核因子-κB对Th2型细胞因子分泌的影响

支气管哮喘表现为Th/Th2型细胞免疫应答的平衡失调、Th1型细胞的免疫应答下调、Th2型细胞因子(如IL-4、IL5等)过度表达.     

紫菀酮对卵清蛋白诱导哮喘幼鼠的NF-κB通路及氧化应激水平的影响

为探讨紫菀酮对卵清蛋白(ovalbumin, OVA)诱导哮喘幼鼠的作用及相关机制,将幼鼠随机分成正常对照组、哮喘模型组、紫菀酮组和地塞米松组。除正常对照组外,其余各组采用OVA构建哮喘模型,紫菀酮组按照80 mg/kg的剂量灌胃给药,地塞米松组雾化吸入剂量为10.5 mg/kg。收集小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)进行细胞分类计数,原位末端转移酶标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling, TUNEL)染色观察肺组织中细胞凋亡损伤,生化法检测血清及肺组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)和一氧化氮(nitric oxide, NO)水平,流式细胞术检测肺组织活性氧类(reactive oxygen species, ROS)含量,Western blotting检测肺组织中NF-κB及其磷酸化蛋白的表达水平。结果显示,OVA刺激后...