苏丹红Ⅰ号多克隆抗体的制备与特异性鉴定

采用琥珀酸酐法,分别以BSA、OVA为载体蛋白合成了免疫抗原和包被抗原并通过SDS-PAGE凝胶电泳和紫外扫描法鉴定了合成的抗原为载体蛋白和苏丹红I号的复合物.将合成的免疫抗原用弗氏佐剂乳化后免疫新西兰大白兔,制备出多克隆抗体,经辛酸纯化,间接ELISA法测得有高效价血清抗体;进一步采用琼脂双扩散试验和免疫金试纸法鉴定出血清中含有苏丹红Ⅰ号特异性抗体.     

坛紫菜别藻蓝蛋白的纯化及多克隆抗体的制备

通过液氮研磨、超声波破碎、硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sephadex-A-50柱层析等手段,建立了从坛紫菜叶状体体细胞中快速高效纯化别藻蓝蛋白的技术,并以该蛋白为抗原,通过动物免疫,制备了抗别藻蓝蛋白的多克隆抗体.电泳及Western印迹杂交分析的结果表明,纯化的别藻蓝蛋白已达到电泳纯,A650/A280达到3.5,计算蛋白回收率为70.5%.制备的多克隆抗体特异性强,效价高达1∶100 000.本研究的结果为进一步研究别藻蓝蛋白的功能和进行开发提供了基础材料和有用的工具.     

鲤鱼(Cyprinus Carpio) 促性腺激素基因的克隆、原核表达及多克隆抗体制备

采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从鲤鱼脑垂体获得了两种GtH β亚基的cDNA, 克隆在pMD18-T载体.经测序确证后,将这两个基因克隆到原核表达载体pET -32(a)中,转化E.coli表达菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白的高效表达.利用初步纯化后的抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.应用制备的兔抗血清与抽提的鲤鱼脑垂体的总蛋白分别进行Western-blot及ELISA分析,结果显示获得的多抗能特异识别各自的天然蛋白.该结果为纯化天然GtH蛋白提供了有效的检测手段,为进一步制备GtH单克隆抗体奠定了基础.     

栉孔扇贝的急性病毒性坏死症(AVND)病毒多克隆抗体的制备及ELISA分析

以青岛太平角养殖海区患病栉孔扇贝组织中提纯的急性病毒性坏死症病毒作为抗原，制备出效价较高的多克隆抗体。用酶联免疫吸附分析(ELISA)方法对青岛黄岛等不同养殖海区、不同时间采集的栉孔扇贝材料进行检测，结果表明，7、8月份样品检测结果呈强阳性，检出阳性率为75％～95％，其他时期阳性率较低。     

铜绿微囊藻生物钟蛋白的表达纯化与抗体制备

为了获得融合表达的铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa)生物钟蛋白KaiA、KaiB、KaiC并制备其相应的多克隆抗体,将kaiA、kaiB、kaiC基因分别克隆到原核表达质粒pET-His中.重组质粒pET-His-KaiA,pET-His-KaiB和pET-His-KaiC经酶切和测序鉴定后,分别转化E.coli BL21(DE3)进行融合表达.经SDS-PAGE分析可知,融合表达的KaiA、KaiB和KaiC蛋白表达量可分别达到菌体总蛋白的25%、40%和20%.经亲和层析后融合蛋白KaiA和KaiB的纯度分别达95%和92%,而KaiC经胶回收纯化后纯度也可达93%.将纯化后的三种Kai蛋白作为抗原分别免疫小鼠制备多克隆抗体,经ELISA检测抗体滴度表明,制备的抗KaiA、抗KaiB和抗KaiC的多克隆抗体效价高,分别可达到1:50000、1:60000和1:100000.Western blotting结果表明:获得的多克隆抗体具有较高的效价,抗体能识别相应的Kai蛋白,具有较高的特异性,能用于铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiA、KaiB和KaiC的表达节律检测.     

三聚氰胺纤维的制备、改性及应用研究进展

三聚氰胺纤维是一种阻燃性能良好、价格便宜的新型无卤阻燃纤维,在阻燃织物和高温过滤材料方面有着广阔的应用前景.对三聚氰胺纤维的合成及改性研究作了较详细的描述,并对其应用情况进行了概述,同时展望了今后三聚氰胺纤维在性能改进上的研究趋势及其制备技术上可能的进展.     

磺胺二甲嘧啶人工抗原的合成与鉴定

采用重氮化法将磺胺二甲嘧啶(SM2)与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)交联合成人工抗原SM2-BSA与SM2-OVA,并通过紫外扫描、SDS-PAGE电泳、凝胶层析和红外光谱等方法扫描进一步检测合成效果.紫外扫描检测结果显示,SM2与BSA、OVA偶联成功,SM2-BSA与SM2-OVA的特征波长分别为2762、77 nm;经计算SM2-BSA与SM2-OVA的分子结合比例分别为5.3∶1和18.4∶1;SDS-PAGE电泳迁移率、凝胶层析出峰时间和红外光谱曲线特征均显示SM2与BSA、OVA偶联成功.     

Q139霍乱弧菌LPS基因和O抗原基因在大肠杆菌中的克隆表达及O抗？…

本研究采用构建基因文库的方法，构建了Ｏ１３９霍乱弧菌的粘粒基因组文库及重组粘粒的亚克隆文库。另外构建了质粒基因组文库。从文库中筛选到可以表达Ｏ１３９霍乱弧菌ＬＰＳ和Ｏ抗原的重组克隆，经鉴定重组克隆表达的ＬＰＳ和Ｏ抗原不但具有与Ｏ１３９霍乱弧菌的ＬＰＳ和Ｏ抗原具有相同的反应原性，而且还具有相同的免疫原性。Ｏ抗原基因的部分测序分析表明，Ｏ１３９霍乱弧菌的抗原基因与Ｏ１群霍乱弧菌的Ｏ抗原基因不同源。     

基于二聚人工抗原ELISA检测多残留β_2-受体激动剂

目的:基于二聚人工抗原研制具备多识别特性的广谱抗体,结合酶联免疫吸附技术,为β_2-受体激动剂快速检测提供技术支持。方法:克伦特罗和莱克多巴胺与载体蛋白经重氮化反应形成二聚人工抗原,优化实验条件,制备单克隆抗体,运用酶联免疫吸附技术同时检测苯酚型和苯胺型β_2-受体激动剂。结果:在最佳条件下,克伦特罗、莱克多巴胺、克伦特罗和莱克多巴胺的IC_(50)值分别为0.75 ng/mL、0.77 ng/mL和0.77 ng/mL。该方法检测的回收率为78.00%～117.88%。检测结果与LC-MS/MS具有良好的一致性(R²>95%)。结论:本研究建立的一种简单、快速、高灵敏的测定方法,可用于快速检测猪尿中β_2-受体激动剂药物残留。     

2019新型冠状病毒的抗原抗体检测

2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)入侵人体引起急性呼吸道传染病,命名为2019冠状病毒病(COVID-19)。新冠病毒在全球范围传播对全球公共卫生安全构成了巨大的威胁,新冠病毒的检测对疫病诊断尤为重要。免疫分析技术作为核酸检测的辅助手段,主要用于对疑似病例和与感染者密切接触人员的筛查。免疫诊断技术包括抗体和抗原检测,通过检测感染部位或者血液样本中是否含有病毒本身的蛋白或是由病毒引起免疫反应而产生的抗体来判断是否携带病毒。对目前用于新冠病毒抗原和抗体检测的免疫分析方法着重进行了分析。     

木质素磺酸钠/三聚氰胺甲醛微球泡沫的制备及表征

利用价格低廉的木质素磺酸钠作为添加剂,制备了具有微球结构的木质素磺酸钠/三聚氰胺甲醛（LS/MF）微球泡沫。采用FTIR研究了微球泡沫固化过程中时间的变化,分析其固化过程,并结合理论计算分析了LS与MF的交联反应机制,研究了LS的添加含量对所制备的LS/MF微球泡沫性能的影响,利用SEM分析了LS/MF微球泡沫的微观形貌。研究表明：添加LS制备的泡沫微球尺寸均匀,直径在3 μm左右,并具有二级结构,大的微球表面有大量的200 nm左右的小微球粒子产生;LS含量为15wt%时,所制备的LS/MF微球泡沫的性能最佳,此时LS/MF泡沫的导热系数低至0.0216 W（mK）^-1,比未添加LS的MF泡沫降低了20%。因此,利用LS替代多聚甲醛制备的LS/MF微球泡沫具有更优异的保温性能,且方法简单,成本低廉,具有潜在的应用前景。     

Interfacial recognition of human prostate-specific antigen by immobilized monoclonal antibody: effects of solution conditions and surface chemistry

The specific recognition between monoclonal antibody (anti-human prostate-specific antigen, anti-hPSA) and its antigen (human prostate-specific antigen, hPSA) has promising applications in prostate cancer diagnostics and other biosensor applications. However, because of steric constraints associated with interfacial packing and molecular orientations, the binding efficiency is often very low. In this study, spectroscopic ellipsometry and neutron reflection have been used to investigate how solution pH, salt concentration and surface chemistry affect antibody adsorption and subsequent antigen binding. The adsorbed amount of antibody was found to vary with pH and the maximum adsorption occurred between pH 5 and 6, close to the isoelectric point of the antibody. By contrast, the highest antigen binding efficiency occurred close to the neutral pH. Increasing the ionic strength reduced antibody adsorbed amount at the silica–water interface but had little effect on antigen binding. Further studies of antibody adsorption on hydrophobic C8 (octyltrimethoxysilane) surface and chemical attachment of antibody on (3-mercaptopropyl)trimethoxysilane/4-maleimidobutyric acid N-hydroxysuccinimide ester-modified surface have also been undertaken. It was found that on all surfaces studied, the antibody predominantly adopted the ‘flat on’ orientation, and antigen-binding capabilities were comparable. The results indicate that antibody immobilization via appropriate physical adsorption can replace elaborate interfacial molecular engineering involving complex covalent attachments.     

三聚氰胺氰尿酸盐对锦纶6的抗滴落阻燃改性研究

通过在聚己内酰胺(PA6)切片中加入不同比例的三聚氰胺氰尿酸盐(MCA)或三聚氰胺多聚磷酸盐(MPP)-MCA共混纺丝,改善锦纶6的抗滴落阻燃性.研究发现,加入30%(wt)MCA的PA6仍具有可纺性,且随MCA添加量的增加,极限氧指数(LOI)增加,纤维的物理力学性能下降,阻燃剂的加入使聚合物的热稳定性变差,含有MCA-MPP共混物的纤维阻燃性及物理力学性能均好于单纯含有MCA的纤维.     

山梨醇磷酸酯蜜胺盐的合成

采用非溶剂法经过二步反应合成了膨胀型阻燃剂山梨醇二磷酸酯蜜胺盐(SDM).首先三氯氧磷和山梨醇反应得到山梨醇磷酸酯二磷酰氯(SDD),然后SDD再与蜜胺反应,得到SDM并将其微胶囊化,研究了反应物配比、反应温度、反应时间等因素对产品收率的影响以及微胶囊化SDM的阻燃性能.认为SDD最适宜的合成条件为:nSOR:npoc=1:3,在100℃下反应40 min,SDD的收率为74%;SDM最佳合成条件为:nsdD:nMEL=1:2,反应温度为140℃,反应时间为2 h,SDM收率约为8l%.     

食品接触材料中三聚氰胺单体迁移量的不确定度评定

对BB CEN/TS 13130-27：2005 HPLC法测定食品接触材料中三聚氰胺单体迁移量的不确定度进行了评定。通过建立数学模型,分析和评定了浸泡液体积、标准曲线、浸泡面积、浸泡时间、酸浓度等主要不确定度分量,并计算了测量结果的合成不确定度和扩展不确定度。各不确定度分量中标准溶液的配制和校准曲线拟合对合成不确定度的贡献较大。     

木质素改性三聚氰胺甲醛树脂发泡材料的研究

木质素可以改性三聚氰胺甲醛树脂,尤其是采用含有羧基的木质素改性三聚氰胺甲醛树脂,且在甲醛与三聚氰胺的比值(摩尔比)均为5.0左右时,其反应条件温和,树脂的贮存稳定性比传统的木质素改性三聚氰胺甲醛树脂大大提高。上述树脂均可发泡,且以含有羧基的木质素改性三聚氰胺甲醛树脂的综合性能最好。这对开发新型的生物质泡沫材料提供了依据。     

金标试纸条的三聚氰胺定量检测仪的研制

为了实现对乳制品中三聚氰胺的快速定量检测,研制了一种基于CMOS图像传感器的便携式金标试纸条定量检测仪.依据纳米金颗粒的吸收峰波长及CMOS器件的光谱响应,选择绿光LED作为系统照明光源,通过CMOS采集试纸条反应区域的光强分布得到检测带吸收特征峰曲线.利用特定算法对图像原始数据进行处理,从而有效降低了由于光电、生化和外界因素对系统检测的影响.建立被检测物浓度与检测带曲线特征值的函数关系用以确定样品中目标被测物的浓度.使用该金标检测仪对滴加有三聚氰胺标准样品的金标试纸条进行检测,在质量浓度为10⁵00ng/mL范围内具有良好的线性响应特性,相关系数R2>0.92.对同一金标试纸条各进行10次重复测量,变异系数小于2.5%,说明仪器具有响应快、高灵敏、便携等特点.     

三聚氰胺和腰果壳油改性酚醛树脂的研究

用腰果壳油和三聚氰胺对酚醛树脂进行改性,可用作刹车片中各种基料的胶粘剂。研究了反应物配比、催化剂用量和反应时间等因素对改性树脂性能的影响,确定了最佳配比和生产工艺,并成功的应用于工业生产。