高效毛细管电泳分离和测定注射用盐酸吉西他滨中有关物质

目的:建立高效毛细管电泳法分离盐酸吉西他滨差向异构体以及胞嘧啶,测定注射用盐酸吉西他滨的杂质盐酸吉西他滨α异构体及胞嘧啶含量。方法:采用熔融石英毛细管:总长60 cm,检测端38cm,内径50 μm;以pH 3.5的0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液为运行缓冲液,运行电压为21 kV,柱温:25℃,检测波长为275 nm,真空进样5 s。结果:胞嘧啶及盐酸吉西他滨α异构体和β异构体分离完全,线性范围分别为7.0—140μg·mL-1(r=0.9994),5.0-100μg·mL-1(r=0.9996),5.8—117μg·mL-1(r=0.9996),n=5;精密度(RSD)分别为1.7％,1.9％,2.1％(n=5),最低检测浓度分别为0.5,1.0,1.2μg·mL～1。结论:方法快速、简便且准确,可用于盐酸吉西他滨的杂质盐酸吉西他滨α异构体及胞嘧啶含量的测定。     

HPLC法检查盐酸多塞平有关物质

目的建立高效液相色谱法检查盐酸多塞平原料药有关物质的方法。方法采用C18柱。以含0．1％三乙胺的0．2mol·L^-1。磷酸二氢钠溶液（用2mol·L^-1磷酸调节pH值至2．5）-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为lmL·min^-1检测波长为254nm,进样量20μL．柱温50℃。结果该方法能分离盐酸多塞平及其相关杂质,并能检出极性小的中间体和杂质。盐酸多塞平最小检出量为0．2μg·mL^-1。结论本法简便、准确、灵敏度高、重现性好,能更全面准备的控制杂质,可用于盐酸多塞平有关物质检查。     

提高舒胸胶囊质量标准的研究

摘要目的：建立盐酸吉西他滨注射液的细菌内毒素检验方法。方法：按照《中国药典》2010年版二部附录细菌内毒素检查法试验和结果判断。结果：盐酸吉西他滨注射液对鲎试剂与内毒素反应不产生干扰的最大浓度为2．5mg·mL－1,当限值设定为0．05EU·mg-1时．使用标示灵敏度为0．125EU·mL－1或灵敏度更高的鲎试剂均可对其进行细菌内毒素检查。结论：建立其细菌内毒素检查法是可行的,可用于其质量控制。     

索拉菲尼联合吉西他滨序贯作用于肺癌细胞株A549的协同效应

目的观察索拉菲尼单药以及联合吉西他滨不同顺序给药对KRAS基因突变的非小细胞肺癌A549细胞的效应及其机制。方法索拉菲尼和吉西他滨单药以及不同序贯给药作用于A549细胞株。MTT法检测增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期变化;蛋白质印迹法检测p-ERK及Bcl-2的变化。结果索拉菲尼和吉西他滨作用于A549细胞72 h的IC50值分别为(5.91±0.22)μmol.L-1,(10.38±0.80)nmol.L-1;且先用吉西他滨后用索拉菲尼有明显的协同效应。索拉菲尼和吉西他滨分别将A549细胞阻滞于G0/G1期和S期;且先用吉西他滨后用索拉菲尼组的p-ERK及Bcl-2下降最明显。结论索拉菲尼能抑制A549细胞的生长,且先吉西他滨后索拉菲尼的序贯方式能产生明显的协同效应。     

吉西他滨联合卡铂治疗老年晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的 观察吉西他滨联合卡铂治疗老年晚期非小细胞肺癌的临床疗效及安全性.方法 110例老年晚期非小细胞肺癌患者按意愿分成吉西他滨组和长春瑞滨组.吉西他滨组:吉西他滨1 000 mg/m2,静脉滴注(第1天,第8天),卡铂剂量按药物曲线下面积为5,第1天给药;长春瑞滨组:长春瑞滨25 mg/m2,静脉滴注(第1天,第8天),顺铂80 mg/m2分3 d静脉滴注.21 d为一个周期,观察两组治疗效果及安全性.结果 吉西他滨组和长春瑞滨组的总有效率分别为75.0%和72.0%(P>0.05);中位生存期、缓解持续时间、1年生存率比较,两组间差异无统计学意义(P>0.05);不良反应发生率吉西他滨组明显低于长春瑞滨组(均P<0.05)结论吉西他滨联合卡铂治疗晚期老年非小细胞肺癌安全、有效.     

反相高效液相色谱法测定大鼠脏器组织中吉西他滨的含量

目的建立反相高效液相色谱法用于测定大鼠胰腺、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、心脏、腹直肌组织中吉西他滨的含量。方法采用phenomenex色谱柱，5-溴尿嘧啶为内标，流动相为乙腈-0．1％三氟乙酸溶液（3：97，V／V），流速1．0mL·min^-1，检测波长268am，柱温45℃。组织样品经甲醇-乙腈（1：9，V／V）蛋白沉淀处理后，55℃恒温水浴中氮气吹干，经流动相溶解后进样，进样量50μL。结果大鼠各脏器组织中吉西他滨在浓度1～100mg·L^-1内线性关系良好，方法回收率为93％～104％，提取回收率〉70％，日内、日间RSD均〈6％。结论本方法操作简单，重现性好，可用于大鼠多种组织中吉西他滨的含量测定。     

HPLC法测定盐酸吉西他滨的有关物质

目的改进盐酸吉西他滨有关物质的测定方法。方法采用迪马C8(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,梯度洗脱检查,流速为1.0mL·min-1,检测波长275nm。结果在0.005～2.402μg/mL范围线性关系良好,相关系数r>0.999(n=5),重复性试验的RSD<0.0005%(n=6)。结论本方法简单、准确、重现性好,可用于盐酸吉西他滨的有关物质检查。     

HPLC法同时测定三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量

目的：建立HPLC法同时测定三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱含量。方法：色谱柱为Kromasil C18柱（250mm×4．6mm,5μm）;流动相为乙腈-0．1％磷酸（45：55,含1g·L^-1十二烷基磺酸钠）;检测波长为265nm;流速为L0mL·min^-1;柱温为室温。结果：黄芩苷在0．08600—4．320P,g、盐酸小檗碱在0．1020—1．533μg范围内,其质量与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0．9998和0．9999。市售三黄片中,平均每片含黄芩苷0．4900—20．53mg、盐酸小檗碱2．81—5．12mg。结论：该法操作简便,可同时测定三黄片中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量;不同厂家黄芩苷的含量差异较大,应加强对黄芩浸膏的投料监督。     

RRM1表达水平与晚期非小细胞肺癌含吉西他滨化疗方案疗效的研究

目的探讨RRM1基因表达与晚期tN,细胞肺癌含吉西他滨化疗方案疗效的关系。方法有40例接受含吉西他滨方案化疗晚期非小细胞肺癌患者人组,采用分支DNA-液相芯片技术检测RRM1mRNA表达的水平,预测吉西他滨在晚期肺癌中的化疗疗效。结果RRM1低表达者23例f57．5％）,高表达者17例（42．5％）,低表达与高表达患者的化疗有效率、疾病进展时间分别为78．2％、12．4个月和35．2％、8．2个月,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论RRM1基因表达水平可作为预测晚期非小细胞肺癌对含吉西他滨化疗方案的指标之一。     

榄香烯协同吉西他滨杀伤胰腺癌细胞的实验研究

目的 研究榄香烯对胰腺癌Bxpc-3细胞株吉西他滨化疗敏感性的影响.方法 MTT法检测不同浓度榄香烯与吉西他滨联用或单处理后胰腺癌细胞Bxpc-3的增殖率;采用等效线图解法观察联合用药是否具有协同效应;Annexin V/PI双染色法分析细胞凋亡的变化.结果 与吉西他滨单独处理48h（IC50=0.31±0.04μg·mL-1）相比,榄香烯与吉西他滨联合处理可显著降低吉西他滨的IC50（IC50=0.063±0.01μg·mL-1）,且联合用药具有协同效应.流式细胞技术也证实榄香烯协同吉西他滨对人胰腺癌Bxpc-3细胞的早期凋亡显示出明显的时间和剂量依赖关系.结论 榄香烯与吉西他滨联合用药对人胰腺癌Bxpc-3细胞可产生协同杀伤作用,并可增强吉西他滨诱导肿瘤细胞凋亡的作用.     

健康志愿者盐酸奥洛他定分散片的生物等效性研究

目的评价2种盐酸奥洛他定制剂在健康人体的生物等效性。方法采用随机、双周期、自身交叉的试验设计。24例健康男性志愿者单次口服试验制剂（盐酸奥洛他定分散片）或参比制剂（盐酸奥洛他定片）10mg,血浆样品采用高效液相色谱－串联质谱法（HPLC-MS／MS）测定,计算两者的主要药物动力学参数,进行生物等效性评价。结果奥洛他定血药浓度在0．25-500μg·L^-1与峰面积线性关系良好（R=0．9990）,最低定量浓度为0．25μg·L^-1,日内及日间RSD〈15％;服用试验制剂或参比制剂后血浆中奥洛他定的％。分别为（129．56±31．74）和（125．91±37．01）μg·L^-1;tmax分别为（0．68±0．29）和（0．88±0．72）h;t1／2分别为（7．46±3．62）和（6．82±3．33）h;AUC0－∞分别为（451．84±78．47）和（434．28±92．77）μg·L^-1;AUC0-∞分别（449．69±77．84）和（430．68±92．81）μg·h·L^-1;试验制剂的相对生物利用度R0-tn、R0-∞分别为（107．51±27．34）％和（107．06±27．10）％。结论试验制剂和参比制剂具有生物等效性。     

HPLC-MS法测定甲磺酸多拉司琼原料药中有关物质和异构体含量

目的:建立甲磺酸多拉司琼原料药中有关物质和异构体含量测定的方法。方法:采用高效液相色谱-质谱法测定3批甲磺酸多拉司琼原料药中的有关物质和异构体含量。色谱柱为shim-packVP-ODS;流动相A为0.01mol·L-1甲酸铵溶液(用三乙胺调m节inp-H1;至检7测.0)波-乙长腈为(29150∶5n)m,。流质动谱相条B件为采0.0用1电mo喷l.雾L-电1甲离酸源铵(E溶S液I)(、正用离三子乙检胺测调节模式pH。至结7果.0):-有乙效腈(分2离7∶了73)甲,磺梯酸度多洗拉脱司,流琼速与为有1关.0物mL质.及异构体(R>1.5),甲磺酸多拉司琼的最低检测限为0.5ng,3批样品中单个杂质含量≤0.05%,总杂质含量<0.1%,异构体未检出。结论:本方法准确、专属性好,适用于甲磺酸多拉司琼原料药中有关物质和异构体的检测。     

健康志愿者恩替卡韦分散片的生物等效性研究

目的评价2种恩替卡韦制剂在健康人体的生物等效性。方法采用随机、双周期、自身交叉的试验设计。24例健康男性志愿者单次口服试验制剂(恩替卡韦分散片)或参比制剂(恩替卡韦片)1 mg,血浆样品采用HPLC-MS/MS法测定,计算两者的主要药物动力学参数,进行生物等效性评价。结果恩替卡韦血药浓度在0.05²0 mg·L-1与峰面积线性关系良好(r2=0.999 8),最低定量浓度为0.05μg·m L-1,批内及批间精密度RSD<15%;服用试验制剂或参比制剂后血浆中恩替卡韦的Cmax分别为(10.51±3.11)和(10.25±2.98)μg·L-1;tmax分别为(0.63±0.21)和(0.62±0.40)h;t1/2分别为(62.35±30.26)和(60.48±26.54)h;AUC020 mg·L-1与峰面积线性关系良好(r2=0.999 8),最低定量浓度为0.05μg·m L-1,批内及批间精密度RSD<15%;服用试验制剂或参比制剂后血浆中恩替卡韦的Cmax分别为(10.51±3.11)和(10.25±2.98)μg·L-1;tmax分别为(0.63±0.21)和(0.62±0.40)h;t1/2分别为(62.35±30.26)和(60.48±26.54)h;AUC0^∞分别为(35.22±9.50)和(34.61±7.90)μg·h·L-1;AUC0∞分别为(35.22±9.50)和(34.61±7.90)μg·h·L-1;AUC0^tn分别(28.91±6.63)和(28.58±5.73)μg·h·L-1;试验制剂的相对生物利用度F0tn分别(28.91±6.63)和(28.58±5.73)μg·h·L-1;试验制剂的相对生物利用度F0^tn、F0tn、F0^∞分别为(101.25±12.02)%和(102.99±20.40)%。结论试验制剂和参比制剂具有生物等效性。     

高效液相色谱法测定复方盐酸氨基葡糖硫酸软骨素片中硫酸软骨素的含量

目的 建立高效液相色谱法测定复方盐酸氨基葡萄糖硫酸软骨素片中硫酸软骨素的含量.方法 采用nucleosil 100-5SB（强阴离子交换硅胶,（5 μm 4.6 mm×250 mm）柱分离,以pH 3.5的水为流动相A,以pH 3.5的2 mol·L-1氯化钠溶液为流动相B,进行梯度洗脱.检测波长232 nm流速为1.0 mL·min-1,进样量为20 mL.结果 硫酸软骨素B、硫酸软骨素C和硫酸软骨素A的相邻之间分离度分别为24.32和2.37,线性范围为2.5125～20.1 g·L-1 （r=0.999 5,A=712.59C＋137.64）;平均回收率为103.06%,RSD为2.71%.结论 该方法简便,重复性好,结果可靠,可做为复方盐酸氨基硫酸软骨素片质量控制方法之一.     

LC-MS／MS法测定盐酸二甲双胍犬血浆浓度及3种盐酸二甲双胍制剂在犬体内的药动学分析

目的建立用于测定犬血浆中盐酸二甲双胍浓度的LC-MS／MS方法,比较3种盐酸二甲双胍制剂在Beagle犬体内药动学参数之间的差别。方法6只Beagle犬,单剂量三周期分别口服3个剂型药物,按规定时间点取血样,血浆样品经乙腈沉淀蛋白,取上清液直接进行LC-MS／MS测定,以Zorbax SB—C18（150mm×2．1mm,5μm）为色谱柱,V（乙腈）：V（0．1％甲酸水溶液）=40：60为流动相,流速0．3mL·min^-1,柱温30℃,检测波长233nm,并计算主要药动学参数。结果盐酸二甲双胍质量浓度在0．05-5mg·L^-1内线性关系良好,回归方程为：Y=0．6868x-0．0222（r=0．9995）,平均回收率为103．2％;盐酸二甲双胍普通片、盐酸二甲双胍缓释片和盐酸二甲双胍胃滞留片的主要药动学参数AUC0→t分别为（97．01±5．36）、（134．6±10．2）、（204．0±19．2）mg·h·L^-1,tmax分别为（2．612±1．35）、（5．869±0．95）、（7．105±1．33）h。结论将盐酸二甲双胍制成胃滞留缓释片可显著提高生物利用度;用LC-MS／MS法测定犬血中盐酸二甲双胍浓度,方法简单、快捷、灵敏、准确,适用于临床药动学及药效学的研究。     

氨溴特罗颗粒剂中氨溴索的生物等效性评价

目的建立LC-MS／MS法测定氨溴索血药浓度,研究口服氨溴特罗颗粒剂与氨溴特罗口服液中氨溴索在人体内的生物等效性。方法采用双周期随机交叉试验设计,研究了18名健康男性受试者单剂量口服氨溴特罗颗粒（受试制剂）与氨溴特罗口服液（参比制剂）的药动学。采用LC-MS／MS法测定血浆中氨溴索的浓度。评价两制剂中氨溴索在人体内的生物等效性。结果单次给予受试制剂或参比制剂（含盐酸氨溴索60nag）后氨溴索的主要药物动力学参数分别为：G。为（183．86±108．22）、（216．68±198．50）μg·L^-1;tmax为（2．1±0．8）、（2．2±1．0）h;AUC0-96为（2274．13±1159．02）、（2016．97±928．48）μg·L^-1;AUC0-∞为（2307．42±1203．33）、（2056．64±961．25）μg·h·L^-1;t1/2为（14．4±4．6）、（17．2±6．9）h。与参比制剂相比,受试制剂的相对生物利用度为（111．3±18．0）％。结论受试制剂与参比制剂中氨溴索的主要药动学参数之间无明显差异,非参数检验未发现两制剂的tmax有显著性差异。双单侧t检验结果表明两制剂为生物等效制剂。     

HPLC法同时测定宣木瓜中五种有机酸和原儿茶酸的含量

目的建立同时测定宣木瓜药材中五种有机酸(莽草酸、苹果酸、柠檬酸、绿原酸、咖啡酸)和原儿茶酸的含量测定方法。方法采用HPLC法,Phenomenex luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A:0.5%磷酸二氢铵溶液(磷酸调节pH值至2.40);流动相B:乙腈进行梯度洗脱;检测波长:214 nm;流速:1.0 mL·min-1;进样量:10μL;柱温:30℃。结果莽草酸、苹果酸、柠檬酸、绿原酸、咖啡酸五种有机酸和原儿茶酸的线性范围分别为:0.049 5～0.371 g·L-1(r=1.000 0),0.066 3～0.358g·L-1(r=0.988 9),0.067 5～0.352 g·L-1(r=0.995 7),0.009 9～0.080 2 g·L-1(r=0.991 0),0.008 81～0.062 2 g·L-1(r=0.992 1),0.010 1～0.090 2 g·L-1(r=0.993 3),平均加样回收率分别为:97.2%(RSD=2.0%)、99.6%(RSD=4.1%)、101.0%(RSD=1.6%)、98.4%(RSD=2.3%)、99.5%(RSD=2.1%)、101.0%(RSD=1.4%)。结论该实验建立了同时测定木瓜中五种有机酸和原儿茶酸的HPLC检测方法,操作简便,可靠,灵敏度较高,具有较好的重复性和稳定性,可用于宣木瓜药材的质量控制。     

HPLC法测定盐酸多沙普仑注射液中盐酸多沙普仑的含量

目的应用HPLC法测定盐酸多沙普仑注射液中盐酸多沙普仑的含量。方法色谱柱为依利特KromasilC18（5μm,4．6mm×250mm）,流动相为0．82g·L^-1醋酸钠溶液（用冰醋酸调pH值为4．5）-乙腈=71b：30,流速为1．0ml·min^-1,检测波长为214nm,柱温为室温。结果盐酸多沙普仑在12．87～90．12mg·L“范围内,浓度与峰面积线性关系良好（r=0．9997）;平均回收率为98．96％,RSD=0．44％（n=9）。精密度实验RSD分别为0．85％（n=6）。结论该方法测定结果准确、灵敏、可靠。     

泌感片的薄层鉴别和盐酸小檗碱的含量测定

目的应用薄层色谱法对黄柏、甘草、柴胡、续断进行鉴别和高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含量。方法采用薄层色谱鉴别黄柏、甘草、柴胡、续断及高效液相色谱测定盐酸小檗碱含量,Shim—pack—C18柱（5μm,250mm×4．6mm）,乙腈0．05mol·L^-1-磷酸二氢钠溶液（28：72）为流动相,检测波长347nm。结果薄层斑点清晰,含量测定线性范围为9．95～99．5mg·L^-1;r=1．0000,回收率为99．42％,RSD=1．21％。结论薄层色谱可用于黄柏、甘草、柴胡、续断的定性鉴别,且高效液相色谱法测定泌感片中盐酸小檗碱的含量具有操作简便、结果准确、灵敏的特点,可用于该制剂的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定黄芩及其制剂中4种黄酮的含量

目的建立反相高效液相色谱法同时测定黄芩药材及其制剂中黄芩苷（1）、汉黄芩苷（2）、黄芩素（3）和汉黄芩素（4）的含量。方法采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;以乙腈-0.15%三氟乙酸水为流动相,梯度洗脱;流速：1.0 ml·min^-1;检测波长：280 nm;柱温：室温。结果已测定的4种黄酮在以下浓度范围内呈现良好的线性：（1）0.51～164 mg·L^-1（r=0.9999）,（2）0.33～104 mg·L^-1（r=0.9998）,（3）0.24～76 mg·L^-1（r=0.999 8）,（4）0.31～100mg·L^-1（r=0.9999）。平均回收率（n=3）分别为：（1）98.47%（RSD=1.35%）,（2）100.73%（RSD=0.57%）,（3）101%（RSD=2.63%）,（4）100.77%（RSD=0.27%）。结论该方法简便,准确,灵敏,结果可靠,可用于黄芩药材及其制剂的质量控制。