自来水及水源水有机提取物类雌激素活性研究

为了检测自来水及水源水有机提取物的类雌激素活性 ,应用环境雌激素基因重组酵母、细胞增殖和子宫增重等三项短期生物学实验进行测定。结果发现 :水样有机提取物在相当于原水量 50ml时两项体外实验均检出雌激素活性 ,原水量 2 50ml时细胞增殖效应达到最大 ,以后随原水量增大细胞增殖效应逐步减弱。原水量 12 50ml时酵母菌β -半乳糖苷酶活性最强 ,以后随原水量增大 β -半乳糖苷酶活性逐步减弱。水厂水源水有机提取物低、中剂量组受试小鼠子宫湿重增加 ,与对照组比较有统计学意义 ,高剂量组湿重减少。提示水源水有机提取物具有类雌激素活性。采用这三项实验组成的生物学检测程序具有一定的灵敏度 ,且较快速、方便。     

镉雌激素样作用的实验研究

目的 评价镉的雌激素样效应。方法 从体外和体内两个水平,观察不同浓度的氯化镉对MCF－7人乳腺癌细胞生长和去卵巢SD大鼠子宫的诱导增生作用。结果 10^-6mol/L的氯化镉使MCF－7细胞增殖达最大,为对照的3．92倍,并且其诱导增殖作用被纯抗雌激素ICI 182,780完全阻断。镉的相对增殖效率为雌二醇的65％,相对增殖能力为雌二醇的1／1000。每天0．1、0．5及2．5mg/kg连续3d腹腔注射氯化镉能明显促进去卵巢大鼠子宫的增生,并且具有剂量－效应关系。结论 镉能够模拟雌二醇诱导MCF－7细胞增殖及大鼠子宫增重。镉具有雌激素样效应。     

南四湖水样有机提取物致癌危险性研究

应用小鼠骨髓微核试验染色体畸变分析、ＳＨＥ恶性转化试验及ＳＯＳ／Ｕｍｕ显色反应研究南四湖水样有机提取物的致突变性。结果表明。沙堤、薛排沟和下航道的水样有机提取物均有不同程度的致突变性，有致染色体断裂作用，高剂量组和阳性对照组均可见ＳＨＥ细胞的恶性转化，对ＤＮＡ具有直接损伤作用和细胞毒性。因此，可以认为南四湖已受到遗传毒性物质污染，具有致癌危险性。     

污水处理传统工艺与新工艺出水中有机提取物的雌激素样作用比较

目的评价污水处理厂传统处理工艺和新技术处理工艺出水中有机提取物的雌激素样活性,比较两种处理工艺对微量有机污染物的去除效果。方法采用树脂吸附固相萃取富集水样中的微量有机污染物,利用重组基因酵母试验和小鼠子宫增重实验检测水样中有机提取物的雌激素样活性大小。结果重组基因酵母检测中,在原水样中微量有机污染物浓缩1000倍条件下,新技术出水有机提取物处理的酵母表现出β-半乳糖苷酶活性,而三级出水、二级出水和进水都为500倍,相同条件下的β-半乳糖苷酶活性,新技术出水组三级出水组二级出水组进水组。小鼠子宫增重实验中,仅进水有机提取物油溶液原液组和阴性对照组之间具有显著性差异(P0.05),其他各水样组之间皆无显著性差异。结论郑州市城市污水经处理后雌激素样活性显著下降,但仍对环境具有潜在危害;新技术对污水中微量有机污染物的去除效果明显好于传统技术。     

水厂水源水及出厂水有机提取物的遗传毒性

为评价枣庄某地区生活饮用水和水源水中有机提取物(organic extract substance,OES)的遗传毒性,于2011年10月采集该地区某水厂的水源水及出厂水水样,并提取OES.将48只健康10周龄清洁级雄性昆明小鼠随机分为5组,分为阴性对照( 5％ DMSO)组及0.2、1 L/ml水源水和出厂水OES染毒组,采用灌胃方式进行染毒;并设阳性对照[10 mg/ml环磷酰胺(CP),分别于实验第40、42天采用腹腔注射方式染毒]组,每组8只.染毒容量为10ml/kg,每天1次,连续染毒6周.采用胞质分裂阻滞微核试验和慧星试验分别检测染色体和DNA的损伤情况.结果显示,与阴性对照组和相同水样低剂量组比较,1 L/ml水源水和出厂水OES染毒组小鼠外周血淋巴细胞的双核细胞率和核分裂指数均较低(P＜0.05);DNA的尾长、头尾光密度比及Olive尾矩均较高(P＜0.05);而小鼠外周血淋巴细胞的微核率仅略有增高(P＞0.05),未见显著性差异.提示水源水和饮用水中OES皆具有一定的致DNA损伤能力,并抑制细胞分裂,未发现引起明显的染色体损伤.     

自来水及水源水有机提取物对巨噬细胞的损伤作用

目的 探讨城市供水有机提取物对巨噬细胞的影响。方法 小鼠腹腔巨噬细胞染毒有机提取物后,应用MTT实验,乳酸脱氢酶泄漏实验及形态学观察等方法进行检测。结果 某水厂的水源水及出厂水在所选的各浓度均引起巨噬细胞的损伤,并有明显的剂量－反应关系;在相同浓度下,出厂水的有机提取物引起细胞的损伤程度大于源水。拟建水源水只在高剂量下引起巨噬细胞损伤。结论 无论源水或出厂水,尽管有机污染物的组成成分不同,但均含有损伤巨噬细胞的物质。有机提取物对巨噬细胞 的毒性作用 与其潜在致癌作用有关。     

再生水有机提取物雌激素效应研究

目的 研究天津市某再生水厂各处理单元水体的雌激素效应。方法 采用反相C-18固相萃取柱提取各处理单元水样中目标物质,采用人乳腺癌细胞(MCF-7细胞)增殖试验和基因重组酵母试验检测水样有机提取物的雌激素效应。结果 2项试验中各处理单元水样有机提取物均表现出雌激素效应,且在一定范围内,呈现出明显的剂量．效应关系。二级出水、混凝后出水、连续膜过滤后出水和O3处理后出水均在相当于原水1．00ml的浓度水平时表现出对MCF-7细胞最强的增殖效应,最大相对增殖效应依次为33．87％,19．49％,20．42％和16．24％。而且上述水样有机提取物均在相当于原水20ml的浓度水平时具有最高β-半乳糖苷酶活力(8．15,7．50,6．07和5．33)。结论 天津市某再生水厂现有处理单元对水体雌激素效应具有有限的去除作用,但最终出水仍具有一定的雌激素效应。     

松花江水源水中有机提取物诱导MCF-7细胞增殖的研究

目的了解松花江水源水环境内分泌干扰素的污染状况,从而为松花江水体污染的防治提供科学的依据。方法于2008年3月,采集以松花江为水源水的某市水厂原水水样,采用GDX-102大孔树脂对水样中的有机物进行提取浓缩,分别以相当于原水量125、500、2000、8000和16000ml/ml浓度与MCF-7细胞共培养,采用MTT法、细胞集落形成法、紫外分光光度计法观察其对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖作用。结果随着有机提取物浓度的升高,MCF-7细胞增殖效应呈先升高后下降的趋势;当有机提取物浓度相当于原水量2000ml/ml时,MCF-7细胞的增殖活性达到最高。结论松花江水源水有机提取物能明显促进体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞的生长,显示出雌激素活性。     

大豆异黄酮的雌激素样作用研究

目的探索大豆异黄酮经口摄入内分泌干扰毒性以及剂量-反应关系;通过和染料木素比较探索大豆异黄酮雌激素样作用的主要活性成分。方法采用子宫增重试验,分别经口灌胃给与0.1、0.2、0.5、1.5g/kg的大豆异黄酮和0.05、0.10、0.25、0.75g/kg染料木素,以及3.0μg/kg的雌二醇、水和油对照,连续3天。实验结束称量子宫的湿重和干重,对卵巢、子宫和阴道进行组织病理学检查,并且对相应剂量2种受试物的效应进行比较。结果大豆异黄酮和染料木素均诱导子宫重量明显增加,子宫和阴道的组织病理学明显增生,并有剂量-反应关系。染料木素组和含有等量染料木素的大豆异黄酮组的雌激素作用无差异。结论在子宫增重试验中,染料木素是大豆异黄酮的主要活性成分;经口摄入SIF对未成年青春期前的雌性大鼠产生内分泌干扰毒性,并有剂量-反应关系。     

某市饮用水有机提取物对小鼠肝细胞DNA损伤的研究

目的研究某市生活饮用水有机提取物对小鼠肝原代细胞所致的DNA损伤作用。方法采用小鼠肝原代细胞彗星试验分别对某市南郊水厂的水源水、出厂水、自来水的有机提取物的致突变性进行检测。结果该市水源水、出厂水和自来水对小鼠肝原代细胞均产生了不同程度的DNA损伤作用,但出厂水和自来水引起肝细胞DNA损伤作用的阈值更低(在本研究为100m1)。结论该市生活饮用水的水源水和氯化消毒后饮用水都受到不同程度的有机致突变物的污染,氯化消毒后饮用水比水源水的致突变性更强,可能是由氯化消毒副产物的致突变性所致。     

小鼠肝细胞彗星实验对饮用水氯化消毒副产物诱变性研究

目的 用小鼠肝细胞彗星实验检测生活饮用水氯化消毒前后的诱变性。方法 采用彗星实验分别对泸州市南部水厂的水源水、出厂水、自来水的有机浓集物的诱变性进行检测。结果 水源水的有机浓集物的彗星实验在高剂量组(相当于原水样量500ml)才出现阳性，而出厂水、自来水的望星实验在较低剂量组(相当于原水样量100m1)呈阳性反应。结论 水源水和氯化消毒饮用水都能诱导动物细胞DNA损伤，说明水源水和氯化消毒饮用水里存在致突变物质，2者对人类健康都存在潜在的威胁，但经氯化消毒过后的饮用水其消毒产生的氯化副产物比水源水具有更强的致突变性。     

5种多环芳烃化学物的雌激素样作用研究

目的 评价5种多环芳烃化学物的雌激素样作用。方法 采用大鼠子宫增生实验和MCF—7细胞增殖实验。结果 苯并(a)芘、7，12—二甲基苯并蒽和2，3，6，7—二苯并蒽不仅引起大鼠子宫湿重明显增加(P＜0．01，P＜0．05)，而且能明显诱导MCF—7细胞增殖(P＜0．01)。苯并(a)蒽和1，2—苯并菲既不能导致大鼠子宫湿重明显增加(P＞0．05)，也不能诱导MCF—7细胞增殖(P＞0．05)。结论 苯并(a)此、7，12—二甲基苯并蒽和2，3，6，7—二苯并蒽具有明显的雌激素样作用，而苯并(a)蒽和1，2—苯并蒽没有检测到雌激素样作用。     

某鱼塘养殖污水有机提取物的遗传毒性

目的评价养殖污水有机提取物的遗传毒性.方法健康昆明种小鼠,按体重随机分组,每组8只,雌雄各半.以养殖污水有机提取物原液、1/2原液、1/4原液、1/8原液对小鼠染毒,分别相当于25、12.5、6.25、3.125L/kg,以DMSO为阴性对照,环磷酰胺(40 mg/kg)为阳性对照,连续染毒3天.应用小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验、小鼠外周血淋巴细胞彗星试验对养殖污水有机提取物进行遗传毒性检测.结果养殖污水有机提取物原液、1/2原液组小鼠PCE微核率均高于阴性对照组,差别均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);各剂量组小鼠外周血淋巴细胞拖尾率均高于阴性对照组(P＜0.01),原液、1/2原液组彗星平均尾长均高于阴性对照组,差别均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).结论养殖污水中含有机致突变物质,可能对人体健康产生潜在的危害.     

自来水厂不同水处理工艺各单元水有机物致突变性变化规律

目的研究某市三家自来水厂不同水处理工艺各处理单元水中有机物致突变性强弱的变化规律,以此探讨相对科学的水处理工艺。方法于2008年5—6月,采集某市3家自来水厂(A、B、C)各水处理单元出水水样。通过鼠伤寒沙门菌致突变(Ames)试验(设0、0.25、0.50、1.00L/皿4个浓度)检测水样中有机物的致突变性,采用比活性的参数方法比较不同来源水样的致突变性强弱。结果除A自来水厂活性炭过滤水无致突变性外,其他各水处理工艺各单元水中有机物的致突变性均为阳性,致突变类型以直接型致移码突变为主。致移码突变性强弱比较如下,A自来水厂:水源水后加氯消毒水混凝沉淀过滤水出厂水管网末梢水活性炭过滤水;B自来水厂:后加氯消毒水混凝沉淀过滤水水源水出厂水管网末梢水;C自来水厂:出厂水预氯消毒水管网末梢水混凝沉淀过滤水后加氯消毒水水源水。结论在自来水厂水处理工艺中,预臭氧—臭氧—活性炭二次过滤深度处理工艺可有效降低出厂水中有机物的致突变性。     

加氯消毒对水中有机提取物致人胎肝细胞DNA损伤的影响

目的探讨自来水加氯消毒对水中有机提取物致细胞DNA损伤的影响。方法于2007年7月(夏季)和2008年3月(春季)采集以长江为水源的某水厂的水源水、经加氯消毒处理后的出厂水和末梢水,以人胎肝细胞(L-02)为靶细胞,采用单细胞凝胶电泳技术,检测水样有机提取物诱导细胞DNA损伤的效应。水样有机提取物设4个染毒浓度(1.2、6、30、150ml/ml),阳性对照为苯并(a)芘(200μmol/L),溶剂对照为二甲基亚砜(DMSO,10μl/ml)。结果春季水源水、出厂水和末梢水以及夏季出厂水和末梢水水样有机提取物在低、中、高浓度(6、30、150ml/ml)引起的L-02细胞DNA损伤较溶剂对照组明显增加。春夏两季加氯消毒后的出厂水和末梢水有机提取物在低、中、高浓度(6、30、150ml/ml)引起的L-02细胞DNA损伤较水源水明显增强。春季的水样有机提取物对细胞DNA的损伤作用高于夏季。结论水源水、出厂水和末梢水有机提取物均能引起L-02细胞的DNA损伤,氯化消毒增加了水源水的遗传毒性,春季水样的遗传毒性大于夏季。     

DBP、DEHP及其代谢物MBP、MEHP的体内雌激素样活性分析

[目的]探讨环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸-2-乙基己基酯(DEHP)及其代谢产物邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸-单-乙基己基酯(MEHP)的雌激素样活性。[方法]按照经济合作与发展组织(Organization for Economic Gooperation and Development，OECD)推荐的标准试验方法，采用背部皮下注射的方式对出生后18d雌性未成熟大鼠连续给药3d，末次给药24h后处死，观察化学物对大鼠体重、子宫重量、滤纸吸干后子宫重和子宫粘液重量等相关指标的变化。[结果]虽然未观察到DBP、MBP、DEHP及MEHP有明显的促子宫增重作用，但MBP和MEHP对未成熟雌性大鼠的毒性大于DBP和DEHP，40～1000mg／kgMBP和1000mg／kg MEHP可减缓大鼠的体重增长速度，200和1000mg／kg MEHP则可明显降低大鼠子宫的粘液分泌量。[结论]DBP、DEHP及其代谢产物MBP和MEHP均无雌激素样活性，MBP可减缓大鼠体重增长速度，而MEHP则可影响大鼠子宫发育过程和子宫功能。