鸦胆子油乳对人肺癌A549细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的：研究鸦胆子油乳对人肺癌A549细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表达的影响。方法：以健康人外周血单个核细胞（peripheral polymorphonuclear neutrophil，PMN）为正常对照，分别用不同剂量的鸦胆子油乳（0．5，1．25，2．5，5g·L^-1）与人肺癌A549细胞共育48h，采用定量sandwich酶免疫技术和RT—PCR法分别测定PMN细胞和A549细胞培养上清液VEGF分泌和细胞内VEGFmRNA的表达，未加药组采用等量RPMI1640培养液。结果：A549细胞上清液VEGF分泌量较外周血单个核细胞显著上升（120．73VS21．21，P〈0．05），2.5g·L^-1鸦胆子油乳作用48h能使A549细胞VEGF分泌显著减少（20．30vs120．73，P〈0．05）。A549细胞VEGFmRNA表达较骨髓单个核细胞也显著七升（0．9573VS0．4649，P〈0．05），鸦胆子油乳（0．5，1．25，2．5g·L^-1）作用48h对A549细胞VEGFmRNA表达无显著影响，5g·L^-1鸦胆子油乳可显著降低A549细胞VEGF、mRNA表达（0．4682VS0．9573，P〈0．05）。结论：鸦胆子油乳能降低A549细胞VEGF的分泌和表达，该作用可能足其抗肿瘤的作用机制之一。     

鸦胆子油乳对肺癌 A549 细胞凋亡及血管内皮生长因子分泌的影响

 目的 观察鸦胆子油对肺癌 A549 细胞凋亡和血管内皮生长因子分泌的影响,以探讨其治疗肺癌的作用机制。 方法 用不同浓度鸦胆子油乳（ 0.5 , 1.25 , 2.5 , 3.75 g·L^-1 ）与 A549 细胞共育不同时间（ 6 , 24 , 48 h ）,采用流式细胞仪（ Annexin V 双标法、 DNA 含量测定和 凋亡细胞 DNA 片段原位末端检测等方法）检测凋亡细胞百分比,采用定量 Sandwich 酶免疫技术（ ELISA ）观察细胞血管内皮生长因子（ VEGF ）分泌量。 结果 3 种检测方法均表明, 中、高浓度鸦胆子油乳（ 2.5 , 3.75 g·L^-1 ）作用 6 h 以上,具有显著的诱导 A549 细胞凋亡的作用。 Annexin V 双标法和 DNA 凝胶电泳结果表明, 1.25 g·L^-1 的鸦胆子油乳作用 24 ~ 48 h ,也能诱导 A549 细胞凋亡。 2.5 g · L^-1 鸦胆子油乳作用 48 h 能使 A549 细胞分泌 VEGF 显著减少。 结论 鸦胆子油乳通过诱导肿瘤细胞凋亡,减少肿瘤细胞分泌 VEGF 发挥其治疗肺癌的作用。     

鸦胆子油对大鼠增生型子宫内膜血管内皮生长因子表达的影响

目的观察不同浓度鸦胆子油对大鼠增生型子宫内膜血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及意义,探讨鸦胆子油治疗功能失调性子宫出血的分子生物学机制。方法建立大鼠增生型子宫内膜模型,设正常对照组(A)、模型对照组(B)、鸦胆子油宫腔注射低(C)中(D)高(E)剂量组并进行相应处理,用药结束后进行免疫组化法检测各组VEGF的表达及意义。结果各组VEGF表达情况:A组阳性表达,B组强阳性表达,C组弱阳性表达,D组腺体结构不清,E组无腺体结构。A组与B组有显著性差异(P<0.05),B组与C组之间及A组与C组之间有极显著差异(P均<0.01)。结论雌激素促使去卵巢大鼠子宫内膜增厚、腺体增生、子宫内膜腺上皮细胞VEGF表达增强。鸦胆子油靶向作用大鼠增殖型子宫内膜,破坏腺上皮细胞组织结构,影响其分泌VEGF,致腺上皮细胞VEGF表达降低,进而影响内膜血管形成。     

鸦胆子油乳联合siRNA-ERCC1对肺腺癌 A549/DDP细胞的耐药逆转作用

目的:探讨靶向切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的小干扰RNA片段(small interfering RNA,siRNA)和鸦胆子油乳联合应用逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的效果。方法:设计并合成针对ERCC1基因对应序列的siRNA,采用转染试剂Lipofectamine 2000转染人肺腺癌耐药细胞A549/DDP;将实验组细胞分为:空白对照组、鸦胆子油处理组、siRNA处理组及鸦胆子油联合siRNA处理组,利用RT-PCR检测ERCC1 mRNA和Western blot检测ERCC1蛋白质的表达;MTT法检测A549/DDP细胞对顺铂的耐药逆转效果。结果:siRNA、鸦胆子油、鸦胆子油和siRNA联合应用均能降低ERCC1 mRNA和蛋白质的表达,对顺铂的敏感性明显恢复,耐药倍数分别降至9.72,8.89,7.59,6.83,鸦胆子油和siRNA联合应用效果明显提高(P<0.05)。结论:siRNA、鸦胆子油能有效地逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的多药耐药,鸦胆子油和siRNA联合应用效果明显加强。     

鸦胆子油乳诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的 :研究鸦胆子油乳诱导HL-60细胞凋亡的作用。方法 :鸦胆子油乳 1∶100 ,1∶40 ,1∶20(V/V)分别处理HL-60细胞 6h ,琼脂糖凝胶电泳法 ,流式细胞仪法 ,荧光显微镜法 ,电镜分别观察药物诱导HL 60细胞凋亡的作用。结果 :鸦胆子油乳 1∶40组产生明显DNA梯状条带 ;流式细胞仪检测药物浓度为 1∶40 ,1∶20组的凋亡细胞百分率分别为 86.8%和97% ;鸦胆子油乳 1∶40组在荧光显微镜呈现明显凋亡细胞特征 ;药物浓度为 1∶40 ,1∶20组的细胞经电镜观察呈现明显凋亡细胞特征。结论 :鸦胆子油乳 1∶20和 1∶40组有明显的诱导HL-60细胞凋亡的作用。     

鸦胆子油乳联合放化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌临床观察

目的:观察鸦胆子油乳联合同步放化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的近期疗效、1、2年生存率及毒副反应。方法:将120例Ⅲ期非小细胞肺癌患者随机分成两组各60例,治疗组采用同步放化疗合鸦胆子油乳注射液治疗,对照组单纯同步放化疗。结果:治疗组1年、2年有效率分别为76.66%、78.34%,与对照组比较,无统计学意义(P0.05)。治疗组1、2年生存率分别为78.33%、65%,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。放射性肺炎、放射性食管炎、骨髓抑制、胃肠道反应方面治疗组与对照组对比均无统计学差异(P0.05)。结论:与单纯放化疗比较,鸦胆子油乳联合同步放化疗治疗近期疗效比较无统计学意义;但可提高Ⅲ期非小细胞肺癌患者1年生存率、2年生存率,且未增加毒副反应。     

鸦胆子油乳脂质纳米粒对A549细胞抑制作用的研究

目的探讨鸦胆子油乳脂质纳米粒对人非小细胞肺癌A549细胞株的抑制、凋亡作用及其机制。方法用MTT法检测设不同浓度实验组(30、60、90、120 mg/L)及不同作用时间(24、48、72 h)药物对细胞的抑制率;用流式细胞仪检测药物浓度60 mg/L作用24、48、72 h后实验组细胞的凋亡率;RTPCR检测Caspase-3 mRNA的表达。结果不同浓度、时间鸦胆子油乳脂质纳米粒对A549细胞增殖的影响:细胞增殖抑制率在一定剂量范围内随浓度的增加而增加,具有剂量依赖性,用相同浓度鸦胆子油乳脂质纳米粒(60 mg/L)干预A549人肺腺癌细胞24、48、72 h,抑制率在一定时间范围内随时间的延长而增加,具有时间依赖性。用相同浓度鸦胆子油乳脂质纳米粒(60 mg/L)干预A549人肺腺癌细胞24、48、72 h凋亡率分别是:48.67%±1.42,64.82%±1.46,68.25%±1.32。RT-PCR结果提示鸦胆子油乳脂质纳米粒上调了Caspase-3 mRNA的表达。结论鸦胆子油乳脂质纳米粒可以抑制人肺腺癌A549细胞增殖和诱导凋亡,并呈时间-剂量关系,其机制可能与上调Caspase-3的表达有关。     

鸦胆子油乳注射液联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌临床研究

目的:观察鸦胆子油乳注射液联合化疗治疗晚期(Ⅲb、Ⅳ期)非小细胞肺癌的疗效及不良反应.方法:72例晚期非小细胞肺癌患者随机分为治疗组(鸦胆子油乳注射液联合化疗组)和对照组(化疗组),对两组的近期疗效、生存质量、体重及不良反应进行比较.结果:两组的ORR、DCR、生存质量评分稳定率和不良反应没有显著性差异(P＞0.05);治疗组体重增加的有效率显著优于对照组(P＜0.05).结论:鸦胆子油乳注射液配合化疗治疗晚期非小细胞肺癌不影响化疗疗效,不增加化疗的毒副反应且具有增加患者体重的作用.     

鸦胆子油乳对人卵巢癌耐药细胞A2780／DDP的耐药逆转作用

目的 研究鸦胆子油乳对人卵巢癌耐药细胞A2780/DDP的耐药逆转作用.方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察顺铂及鸦胆子油乳对A2780/DDP细胞的生长抑制作用.结果 卵巢癌耐药细胞株A2780/DDP对顺铂产牛耐药性,顺铂对A2780/DDP的耐药倍数为5.6倍.经鸦胆子油乳预处理24h后,顺铂对A2780/DDP的耐药倍数显著下降.结论 鸦胆子油乳可逆转卵巢癌耐药细胞A2780/DDP的耐药性.     

鸦胆子油乳注射液联合化疗治疗非小细胞肺癌的临床观察

目的观察鸭胆子油乳注射液配合化疗治疗非小细胞肺癌的疗效。方法将肺癌患者随机分为实验组(CE化疗 鸦胆子油乳注射液)与对照组(CE化疗)。结果实验组疗效优于对照组。结论证实了鸦胆子油乳注射液具有杀伤癌细胞、提高免疫力、与化疗同用增效减毒的作用。     

鸦胆子油乳联合含铂类一线化疗方案治疗非小细胞肺癌的Meta分析

目的:该研究旨在评价鸦胆子油乳(brucea javanica oil emulsion,BJOE)联合含铂类一线化疗药物治疗非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的疗效和安全性。方法:计算机检索Cochrane Library,PubMed,EMBASE,中国生物医学文献数据库,中国期刊全文数据库,中文科技期刊全文数据库,检索时间截止2011年2月,纳入有关鸦胆子油乳联合含铂类一线化疗药物治疗NSCLC的随机对照试验(randomized controlled trials,RCTs),由2名研究员分别独立提取数据和进行文献质量评价,并用RevMan5.1.2软件进行Meta分析。结果:共纳入22篇RCTs,共计病例数为1 512例。Meta分析结果显示,与单纯运用含铂类一线化疗方案相比,联合鸦胆子油乳能明显增加NSCLC患者化疗效果(RR=1.31,95%CI:1.18～1.45,P<0.000 01),提高生活质量(RR=1.78,95%CI:1.51～2.09,P<0.000 01),增强机体免疫力,降低骨髓抑制(OR=0.37,95%CI:0.27～0.51,P<0.000 01)和消化道毒副反应(OR=0.59,95%CI:0.44～0.80,P=0.000 7)。结论:鸦胆子油乳能提高非小细胞肺癌患者的化疗效果,改善生活质量,并降低含铂类化疗药物的毒副作用,值得临床借鉴。     

川芎嗪对大鼠腹腔巨噬细胞表达VEGF和HIF-1α的影响

目的：探讨川芎嗪对脂多糖（LPS）诱导的巨噬细胞分泌血管内皮生长因子（VEGF）和表达缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的影响。 方法: 原代培养大鼠腹腔巨噬细胞,给予脂多糖（LPS）刺激并加入不同浓度的川芎嗪共同培养。ELISA方法检测细胞培养液中VEGF的含量,MTT法观察巨噬细胞增殖情况。western blot检测巨噬细胞HIF-1α的表达。结果: 480,48 μmol·L^-1川芎嗪可抑制LPS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞分泌VEGF,并抑制巨噬细胞表达HIF-1α,但对巨噬细胞增殖没有影响。 结论: 川芎嗪可抑制大鼠腹腔巨噬细胞分泌血管内皮生长因子,其机制与抑制巨噬细胞表达HIF-1α密切相关。这种作用不依赖于抑制巨噬细胞的增殖。     

薏苡仁油对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长及VEGF和bFGF表达的影响

目的研究薏苡仁油(康莱特注射液)体外对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长和血管生长因子的影响,探讨薏苡仁油抗肿瘤作用机制。方法薏苡仁油作用BxPC-3细胞后,经瑞氏染色观察细胞形态,Hoechst 33258荧光染色、DNA梯度电泳观察细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期的变化;ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)的变化。结果薏苡仁油(2 mg/mL,20μL/mL)作用于BxPC-3细胞后,瑞氏染色可见细胞出现典型的凋亡小体,Hoechst33258荧光染色可见BxPC-3细胞出现特征性凋亡变化,琼脂糖电泳观察到明显的细胞凋亡特征性DNA梯形条带;细胞周期阻滞在G0/G1期;细胞上清液中VEGF、bFGF的表达水平明显下调。结论薏苡仁油能影响BxPC-3细胞生长周期,导致细胞周期阻滞,下调VEGF和bFGF的表达水平,可能对抑制胰腺癌细胞的扩散产生一定作用。     

莪术油对人肺腺癌A549细胞中组织蛋白酶D,K表达的影响

目的:探讨莪术油对A549细胞中胶原及组织蛋白酶D,K表达的影响。方法:用不同浓度的莪术油(0,40,80,120 mg.L-1)作用A549细胞,苦味酸天狼猩红染色法观察莪术油对A549细胞层胶原分泌的动态变化;酶法测定细胞中可溶性羟脯氨酸的分泌;Western blot检测Cat D,Cat K的表达情况。结果:莪术油刺激细胞后A549细胞分泌的胶原含量随剂量和作用的时间增加而减少。Cat D,Cat K蛋白的表达随作用时间持续而增强。结论:莪术油减少肺腺癌A549细胞胶原沉积,其机制可能与上调Cat D,Cat K蛋白表达有关。     

川芎嗪调控血管内皮生长因子与抗大鼠佐剂性关节炎的相关性研究

目的:探讨川芎嗪是否可通过调节血管内皮生长因子(VEGF)表达而影响大鼠实验性关节炎的发展.方法:建立大鼠佐剂性关节炎(AIA)模型,灌胃给药川芎嗪,检测大鼠足垫厚度的变化,免疫组化SP法染色CD34检测滑膜微血管密度(MVD),放射免疫法分析大鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,westem blot分析滑膜组织VEGF的表达.结果:与模型组相比较,100 mg·kg~(-1)川芎嗪组大鼠足垫厚度显著减小,血清中TNF-α的含量和滑膜组织VEGF的表达均明显降低.结论:川芎嗪抑制大鼠佐剂性关节炎的发展与抑制病变关节滑膜VEGF的表达密切相关.     

血管内皮生长因子在胎儿生长受限中的表达

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)与胎儿生长受限(FGR)发病的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测30例FGR孕妇(FGR组)和30例正常孕妇(对照组)肘静脉血清、羊水和脐静脉血清中VEGF的表达。结果 FGR组肘静脉血清、羊水和脐静脉血清中VEGF的表达与对照组相比均明显降低,均有显著性差异(P均<0.01)。结论 VEGF水平显著下降可能是FGR发病机制中的一个重要因素。     

子宫内膜异位症患者血管内皮生长因子的测定

目的　探讨子宫内膜异位症 (内异症 )患者腹腔液及血清中血管内皮生长因子(VEGF)在内异症发病中的作用。方法　采用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (ELISA) ,检测 35例内异症患者 (Ⅰ期和Ⅱ期 16例 ,Ⅲ期和Ⅳ期 19例 )和 2 0例非内异症患者 (对照组 )腹腔液及血清中VEGF的含量 ,分析VEGF浓度及其与内异症分期R -AFS的相关性。结果　内异症患者腹腔液及血清中VEGF的浓度明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,2组腹腔液VEGF含量均高于同组的血清含量 (P <0 .0 5 ) ;Ⅲ期和Ⅳ期内异症患者腹腔液及血清VEGF含量明显高于Ⅰ期和Ⅱ期患者 (P <0 .0 1) ,其中增生期患者又明显高于分泌期患者 (P <0 .0 5 ) ;而内异症患者R -AFS分期与腹腔液及血清VEGF含量无明显相关 ,腹腔液与血清VEGF含量无相关。结论　内异症患者腹腔液中VEGF升高是腹腔微环境改变导致内异症的原因。