口服生长抑素基因疫苗对小鼠免疫影响的初步研究

目的 研究口服生长抑素(SS)基因疫苗在体内表达HBsAg/SS融合蛋白情况.方法 用SS基因疫苗免疫小鼠,姬姆萨染色观察细菌在体内分布;观察小鼠质量增长情况;应用免疫组化法显示小肠乙肝表面抗原(HBsAg)和SS阳性细胞的分布及数量变化.结果 免疫后16 h空肠细菌数量达到高峰,免疫后4 d脾脏出现细菌;两试验组小鼠体质量较对照组均无显著变化;首次免疫后第3周两试验组小肠内出现HBsAg阳性细胞并维持至第7周;首次免疫后第5、7周两试验组小肠内SS阳性细胞数量比对照组极显著减少(P＜0.01).结论 口服型SS基因疫苗免疫小鼠后可在小肠表达HBsAg/SS融合蛋白,同时SS阳性细胞数量减少,推测该基因疫苗刺激机体表达蛋白后能产生SS抗体.     

交感神经对小鼠小肠T淋巴细胞亚型及其增殖的影响

采用化学阻断剂6-羟多巴胺(6-OHDA)损毁交感神经,研究了交感神经对小鼠小肠局部细胞免疫作用的内在机理。将30只雄性昆明小鼠随机分为2组,一组连续5d腹腔注射6-OHDA,另一组用作对照。采用免疫组织化学染色和细胞培养方法检测两组动物小肠CD4+、CD8+T淋巴细胞数量及肠系膜淋巴结T淋巴细胞体外增殖能力。结果表明,试验组的CD4+T细胞数量比对照组少6.5%～51.5%,十二指肠、空肠段差异极显著(P<0.01);CD8+T细胞数量比对照组增加5.6%～22.7%,十二指肠段差异显著(P<0.01);CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值总体呈下降趋势。肠系膜淋巴结T淋巴细胞转化率降低,在ConA浓度为3μg/ml时比对照组降低了9.2%,差异显著(P<0.05)。以上结果提示:交感神经通过调节小鼠小肠T淋巴细胞增殖以及亚型CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量,影响肠黏膜细胞免疫的调控。     

猪瘟基因疫苗免疫小鼠体液及细胞免疫动态变化研究

目的：探讨猪瘟基因疫苗免疫小鼠后机体产生体液和细胞免疫发生规律，为猪瘟基因疫苗推广应用提供科学依据。方法：应用FACS、MTT法及间接ELISA试验对猪瘟基因疫苗免疫小鼠脾脏及外周血中CD4^ 和CD8^ 淋巴细胞数、淋巴细胞的转化功能及特异的抗猪瘟病毒血清IgG抗体水平等动态变化进行了观察。结果：猪瘟基因疫苗免疫小鼠后脾细胞及外周血淋巴细胞对ConA和LPS均有明显的反应性。CD4^ 和CD8^ 细胞数量在免疫后20天开始反应，32天达到高峰后开始下降。鼠血清特异性猪瘟病毒血清抗体IgG随免疫时间延长而增加。结论：猪瘟基因疫苗免疫动物可诱导机体体液及细胞免疫。     

嗜肺军团菌免疫原蛋白核酸疫苗诱导的小鼠免疫应答及其保护力

目的:研究嗜肺军团菌免疫原蛋白核酸疫苗诱导的小鼠免疫原性以及对LP感染小鼠的保护能力。方法:用嗜肺军团菌免疫原蛋白基因真核表达重组质粒pcDNA3.1-ip作为DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠体内抗原特异性抗体水平、脾淋巴细胞增殖活性、IFNγ-产生水平和CTL特异杀伤活性等指标,以评价疫苗的免疫原性。真核表达重组质粒pcDNA3.1-ipDNA疫苗重复免疫BALB/c小鼠2次,末次免疫2周后,用10倍LD50剂量攻击小鼠,计数小鼠的存活数及小鼠肺中的细菌数,观察感染鼠的肺部病理变化。结果:pcDNA3.1-ip免疫小鼠后诱导产生了特异的体液免疫应答和细胞免疫应答,免疫组的免疫原性和免疫保护性均高于对照组pcDNA3.1( )组(P<0.01)。结论:免疫原蛋白基因可作为嗜肺军团菌核酸疫苗的侯选基因。     

中国株HIV-1 gp120核酸疫苗的实验免疫研究

目的　探讨表达中国株HIV 1gp12 0基因的核酸疫苗在小鼠体内的免疫反应。方法　将表达HIV 1gp12 0的核酸疫苗质粒pVAXP经肌肉注射免疫Balb c小鼠 ,检测免疫小鼠脾CD4 +、CD8+T细胞亚群的数量 ,脾特异性CTL杀伤活性和血清抗体滴度。结果　重组质粒pVAXP免疫组小鼠脾CD4 +、CD8+T细胞亚群的数值均比对照组高 (P <0 .0 5 ) ;免疫组脾特异性CTL杀伤活性与对照组相比差异极显著 (P <0 .0 1) ;血清抗体滴度显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　表达HIV 1gp12 0基因的核酸疫苗质粒pVAXP能诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫。     

阻断交感神经对小鼠小肠黏膜免疫相关细胞的影响

目的研究交感神经对肠道黏膜屏障的调节作用。方法采用常规组织学和免疫组织化学技术,观察经腹腔注射交感神经损毁剂6-羟多巴胺后小鼠小肠上皮内淋巴细胞、杯状细胞、IgA+浆细胞、肥大细胞的数量分布变化。结果注射6-羟多巴胺组小鼠与对照组小鼠相比,小肠各肠段的上皮内淋巴细胞减少了5.6%～33.8%,杯状细胞减少了10.6%～18.5%,两组指标在十二指肠之间和回肠之间差异极显著(P<0.01);肥大细胞增加了15.0%～57.1%,在空肠之间差异极显著(P<0.01);IgA+浆细胞增加了13.9%～61.4%,在十二指肠之间差异显著(P<0.05)。结论交感神经对调节小鼠肠道的免疫学屏障有着重要作用。     

乙肝病毒核心抗原DNA疫苗诱导小鼠抗原特异性CD8+T细胞动态变化和动态分布

目的：研究乙肝病毒核心抗原(HBcAg)DNA疫苗诱导的细胞免疫应答。方法：用表达乙肝病毒核心抗原N端144个氨基酸的重组质粒DNA(简称pHBc144)100ug免疫C57BL／6小鼠，用细胞内细胞因子染色技术检测小鼠体内抗原特异性CD8^ T细胞的动态变化。结果：pHBc144免疫后抗原特异性CD8^ T细胞逐渐增多，在初次免疫的第14天出现第一个免疫应答高峰，此后抗原特异性CD8^ T细胞数量逐渐下降进入免疫记忆期并在1年内维持在稳定水平。加强免疫后在第10天抗原特异性CD8^ T细胞数量达到高峰，约是初次免疫应答高峰的2倍，此后抗原特异性CD8^ T细胞数量逐渐下降，但下降的速度比初次免疫应答减缓。结论：pHBc144DNA疫苗可诱导有效的细胞免疫应答。     

携带肝细胞生长因子基因的减毒沙门氏菌对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨携带肝细胞生长因子基因的减毒沙门氏菌对小鼠免疫功能的影响.方法:分别用3×108cfu 减毒沙门氏菌(Ty)、携带绿色荧光蛋白基因的减毒沙门氏菌(Typl-GFP)、携带肝细胞生长因子基因的减毒沙门氏菌(Typl-HGF)、10% NaHCO3 于第O、14、28 天灌胃免疫小鼠,末次免疫后7天,分别收集各组动物全血及血清,用流式细胞仪检测抗凝全血中CD4+ T、CD8+T 及 IgM、IgGl、lgA 水平,用 ELISA 法检测血清中免疫球蛋白 IgM、IgGl,MTT 法检测脾脏组织中脾淋巴细胞的增殖能力.结果:流式细胞仪检测结果表明,Typl-HGF 组 CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+ 比值与其它三组比较显著降低(P<0.01,P<0.05,P<0.01);其IgM、IgA 与 NaHCO3 对照组相比无统计学意义(P>0.05),但与Ty、Typl-GFP 组相比显著降低(P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.05),而 IgGl 与 NaHCO3 对照组相比显著升高(P<0.01),ELISA 结果与流式细胞仪检测结果基本一致;Typl-HCF 组脾细胞的增殖活性明显低于其它实验组(P<0.05).结论:初步证明口服Typl-HGF 后对小鼠的细胞免疫和体液免疫均有抑制作用.     

猪IL-2真核表达质粒对猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗诱导小鼠细胞免疫增强作用的研究

目的 :研究猪白细胞介素 2真核表达质粒 (pcDNA IL 2 )对猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗 (pcDNA PRRSV ORF5 )诱导BALB/c小鼠产生细胞免疫应答的影响。方法 :用pcDNA IL 2与PRRSVORF5基因疫苗 (pcDNA PRRSV ORF5 )共同免疫BALB/c小鼠 ,以空载质粒pcDNA为阴性对照 ,PBS为空白对照 ;采用流式细胞仪 (FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法 )分别对小鼠外周血中CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞数和淋巴细胞的转化功能进行了检测。结果 :pcDNA IL 2与pcDNA PRRSV ORF5共同免疫小鼠后外周血对ConA有明显的反应性 ,CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞数在免疫后 7天显著超过对照组 ,共同组与单独pcDNA PRRSV ORF5组有显著差异 (P <0 0 1)。结论 :pcDNA PRRSV ORF5免疫小鼠能够诱导其机体产生良好的细胞免疫应答 ,猪pcDNA IL 2能够显著增强pcDNA PRRSV ORF5诱导小鼠细胞免疫的能力。     

基于Ii分子的HCV-NS3内源性靶向基因疫苗的构建及免疫应答研究

目的构建基于Ii分子的HCV内源性靶向基因疫苗并在真核细胞中表达,用构建的基因疫苗免疫BALB/c小鼠,研究免疫后小鼠的体液和细胞免疫应答。方法通过3轮PCR以HCV- NS3的T_H1表位(1248～1261 AA)取代Ii链CLIP片段编码基因,构建基于Ii分子的HCV内源性靶向基因疫苗,并在Cos-7细胞中表达;30只6～8周龄的雌性BALB/c小鼠随机分为5组,用内源性靶向基因疫苗(pHCV-NS3-T_H1)和非靶向疫苗(pHCV-NS3)于股四头肌进行免疫,生理盐水、pCI-neo和pCI-neo-Ii作为研究对照,经过5次免疫后,取外周血对小鼠的体液免疫进行检测,取小鼠脾脏细胞对细胞免疫进行检测。结果内源性靶向基因疫苗在Cos-7细胞中得到高效表达;对BALB/c小鼠的免疫结果显示,只有HCV-NS3免疫组小鼠可以检测到针对NS3的特异性抗体,抗体滴度达到1/1024;pHCV-NS3和pHCV-NS3-T_H1免疫的小鼠都可以检测到CD4~ 细胞的增殖,但pHCV-NS3-T_H1免疫的小鼠CD4~ 细胞的增殖强度要明显大于pHCV-NS3免疫的小鼠(P=0.002);在细胞因子的检测中,只有pHCV-NS3-T_H1免疫组小鼠检测到IFN-γ,浓度达剑33.65 pg/ml;只有HCV-NS3免疫的小鼠产生IL-4,浓度达到4.55 pg/ml。结论基于Ii分子的HCV内源性靶向基因疫苗能够在真核细胞中表达并刺激小鼠产生CD4~ T_H1类型的细胞免疫,为HCV的疫苗开发提供了一个新思路。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.