顺铂联合唑来膦酸对肺癌A549细胞增殖的影响及其机制

目的 观察顺铂联合唑来膦酸对肺癌A-549细胞增殖的影响并探讨其作用机制.方法 以噻唑蓝(MTT)比色法观察顺铂联合唑来膦酸对A549细胞增殖的影响,以Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测DNA损伤检查点蛋白调节因子1(MDC1)mRNA的表达.结果 顺铂联合唑来膦酸对A549细胞增殖的抑制率(39.16±4.94)％高于顺铂(16.87±2.50)％、唑来膦酸(19.66±4.57)％;联合用药诱导A549细胞的凋亡率(32.30±0.50)％较顺铂(23.90±2.46)％、唑来膦酸(18.87±3.04)％上升;联合用药后A549细胞MDC1 mRNA的相对表达水平(0.134 ±0.037)较顺铂(0.356±0.033)、唑来膦酸(0.208 ±0.040)下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 顺铂、唑来膦酸可抑制肺癌A549细胞的增殖,诱导其凋亡;顺铂联合唑来膦酸抑制A549细胞的增殖具有协同作用;其协同作用可能与下调MDCl mRNA表达有关.     

青藤碱对肺癌A549细胞增殖的抑制作用

目的：研究青藤碱对肺癌A549细胞增殖的影响及其机制。方法：以不同浓度青藤碱分别处理体外培养的A549细胞,采用MTT法检测24h、48h、72h后A549细胞的增殖状态,流式细胞仪测定细胞凋亡;细胞免疫组化检测Cox-2蛋白表达量。结果：以0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、2.5、5.0、10.0mmol/L青藤碱作用于A549细胞后,细胞增殖明显受到抑制,呈时间和剂量依赖性。青藤碱处理组细胞早期凋亡率较对照组升高,呈时间和剂量依赖性;Cox-2蛋白表达明显抑制。结论：青藤碱在体外能有效抑制肺癌细胞增殖。     

黄芩苷体外对人肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的 探讨黄岑苷对人肺腺癌A549细胞株增殖影响的分子机制.方法 体外培养人肺腺癌细胞株A549,加入0.000、0.625、1.250、2.500、5.000、10.000 mg/L黄芩苷,分别孵育24、48、72 h,噻唑蓝(MTT)法检测药物对A549细胞的抑制率;1.22 mg/L黄芩苷孵育A549细胞24 h后,收集细胞,逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)测定增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白 1(Cyclin D1) 、p21 mRNA的表达水平;Western blot法检测PCNA、Cyclin D1、p21蛋白表达水平.结果 MTT结果显示黄芩苷对人肺腺癌A549细胞株增殖具有明显的抑制作用.1.22 mg/L黄芩苷作用细胞24 h后,与对照组(0.68±0.16、0.48±0.05、0.27±0.06)比较,PCNA mRNA表达(0.22±0.03)、Cvclin D1 mRNA表达(0.08±0.02)显著下降(P＜0.01),p21 mRNA表达(0.47±0.07)显著升高(P＜0 01) 与对照组(1.75±0.05,1.59 ±0.24,0.59±0.02)比较,黄芩苷组PCNA蛋白表达(0.34±0.02)、Cvclin D1蛋白表达(0.50±0.02)显著下降(P＜0.01),p21蛋白表达(1.39±0.05)显著升高(P＜0.01).结论 黄芩苷可通过下调PCNA、Cyclin D1表达,上调p21表达,发挥其抑制A549肺腺癌细胞增殖的作用.     

青蒿琥酯诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的研究

近年来的研究结果显示青蒿素及其衍生物除了具有抗疟作用以外,对人类多种肿瘤细胞在体外有杀伤或抑制作用。为了探讨青蒿素的衍生物之一青蒿琥酯对人肺腺癌的作用机制,我们进行了青蒿琥酯诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的研究。     

吗啡联合顺铂对人肺腺癌细胞A549侵袭和迁移的影响

目的评价吗啡对顺铂治疗人肺腺癌细胞A549侵袭和迁移的影响。方法人肺腺癌细胞A549接种于培养板培养24h,随机分为五组:对照组(CON组)、顺铂组(CIS组)、0.3μg/ml吗啡+顺铂组(MT1组)、3μg/ml吗啡+顺铂组(MT2组)、30μg/ml吗啡+顺铂组(MT3组),顺铂浓度均为4μg/ml。加入相应浓度的药物后,采用Transwell法检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Ezrin蛋白和Fascin蛋白的表达。结果与CON组比较,其余四组肿瘤细胞侵袭和迁移能力明显降低,MT3组和CIS组MMP-2、MMP-9、Ezrin和Fascin表达明显下调(P0.05)。与CIS组比较,MT1、MT2和MT3组肿瘤细胞侵袭和迁移能力增强,MT3组MMP-2、MMP-9、Ezrin和Fascin表达明显上调(P0.05)。结论吗啡可剂量依赖性减弱顺铂对人肺腺癌细胞A549侵袭和迁移能力,MMP-2、MMP-9、Ezrin和Fascin表达上调是其可能机制之一。     

曲马多联合顺铂对人肺腺癌细胞A549侵袭和迁移的影响

目的评价曲马多联合顺铂对人肺腺癌细胞A549侵袭和迁移的影响。方法人肺腺癌细胞A549接种于培养板培养24h,随机分为五组:对照组(CON组),顺铂组(CIS组),3μg/ml曲马多+顺铂组(TT1组),30μg/ml曲马多+顺铂组(TT2组)和300μg/ml曲马多+顺铂组(TT3组),顺铂浓度均为4μg/ml。各组分别加入药物孵育48h后即刻,采用Transwell法检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、Ezrin蛋白和Fascin蛋白的表达。结果与CON组比较,其余四组肿瘤细胞侵袭和迁移能力明显降低(P0.05),TT3组MMP-2、MMP-9、Ezrin和Fascin蛋白表达明显下调(P0.05)。与CIS组比较,TT1组、TT2组和TT3组肿瘤细胞侵袭和迁移能力明显降低(P0.05),TT3组MMP-2、MMP-9、Ezrin和Fascin蛋白表达明显下调(P0.05)。结论曲马多剂量依赖性地增强顺铂对人肺腺癌细胞A549的侵袭和迁移的抑制作用,MMP-2、MMP-9、Ezrin和Fascin表达下调可能是其机制之一。     

不同浓度七氟醚对人肺腺癌A549细胞Survivin蛋白表达的影响

目的 评价不同浓度七氟醚对人肺腺癌A549细胞Survivin蛋白表达的影响.方法 人肺腺癌A549细胞接种于培养板培养24 h,采用随机数字表法,将人肺腺癌A549细胞随机分为4组:对照组(C组)、1.7%七氟醚组(S1组)、3.4%七氟醚组(S2组)和5.1%七氟醚组(S3组),每组18孔.S1-3组人肺腺癌A549细胞分别经1.7%、3.4%、5.1%七氟醚孵育2、4、6 h,C组通入95%O2-5%CO2混合气体2 L/min,每个时点随机取6孔,继续培养48 h,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测经七氟醚孵育4 h的人肺腺癌A549细胞Survivin蛋白表达水平.结果 C组、S1～3组入肺腺癌A549细胞增殖抑制率和凋亡率依次升高,Survivin蛋白表达依次下调(P<0.05).结论 七氟醚可通过下调Survivin蛋白表达抑制人肺腺癌A549细胞增殖和促进凋亡,其效应呈浓度依赖性.

Abstract：

Objective To investigate the effects of different concentrations of sevoflurane on Survivin expression in human adenocarcinoma cell line A549. Methods A549 cells were obtained from Shanghai Cell Biology Medical Research Institute, Chinese Academy of Sciences and inoculated in 96 well culture plate. After being cultured for 24 h, the cells were randomly divided into 4 groups: Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ groups exposed to 95 % O2 -5 %CO2,1.7%, 3.4% and 5.1% sevoflurane respectively. A549 cells were exposed to sevoflurane for 2, 4 and 6 h respectively and then cultured for another 48 h in Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ groups. Proliferation of A549 cells were measured by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay, and apoptosis was detected with flow cytometer at 48 h after 2, 4 and 6 h sevoflurane exposure. The expression of Survivin in A549 cells was determined by Western blot analysis at 48h after 4 h sevoflurane exposure. Results The rate of proliferation inhibition and percentage of apoptotic cells were significantly higher while the expression of Survivin was significantly lower in a concentration-dependent manner in Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ groups as compared with group Ⅰ . Conclusion Sevoflurane can inhibit proliferation and induce apoptosis of A549 cells by inhibition of Survivin expression.     

不同浓度七氟醚对人肺腺癌A549细胞Survivin蛋白表达的影响

Objective To investigate the effects of different concentrations of sevoflurane on Survivin expression in human adenocarcinoma cell line A549. Methods A549 cells were obtained from Shanghai Cell Biology Medical Research Institute, Chinese Academy of Sciences and inoculated in 96 well culture plate. After being cultured for 24 h, the cells were randomly divided into 4 groups: Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ groups exposed to 95 % O2 -5 %CO2,1.7%, 3.4% and 5.1% sevoflurane respectively. A549 cells were exposed to sevoflurane for 2, 4 and 6 h respectively and then cultured for another 48 h in Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ groups. Proliferation of A549 cells were measured by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay, and apoptosis was detected with flow cytometer at 48 h after 2, 4 and 6 h sevoflurane exposure. The expression of Survivin in A549 cells was determined by Western blot analysis at 48h after 4 h sevoflurane exposure. Results The rate of proliferation inhibition and percentage of apoptotic cells were significantly higher while the expression of Survivin was significantly lower in a concentration-dependent manner in Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ groups as compared with group Ⅰ . Conclusion Sevoflurane can inhibit proliferation and induce apoptosis of A549 cells by inhibition of Survivin expression.     

不同浓度七氟醚对人肺腺癌A549细胞Survivin蛋白表达的影响

Objective To investigate the effects of different concentrations of sevoflurane on Survivin expression in human adenocarcinoma cell line A549. Methods A549 cells were obtained from Shanghai Cell Biology Medical Research Institute, Chinese Academy of Sciences and inoculated in 96 well culture plate. After being cultured for 24 h, the cells were randomly divided into 4 groups: Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ groups exposed to 95 % O2 -5 %CO2,1.7%, 3.4% and 5.1% sevoflurane respectively. A549 cells were exposed to sevoflurane for 2, 4 and 6 h respectively and then cultured for another 48 h in Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ groups. Proliferation of A549 cells were measured by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay, and apoptosis was detected with flow cytometer at 48 h after 2, 4 and 6 h sevoflurane exposure. The expression of Survivin in A549 cells was determined by Western blot analysis at 48h after 4 h sevoflurane exposure. Results The rate of proliferation inhibition and percentage of apoptotic cells were significantly higher while the expression of Survivin was significantly lower in a concentration-dependent manner in Ⅱ , Ⅲ and Ⅳ groups as compared with group Ⅰ . Conclusion Sevoflurane can inhibit proliferation and induce apoptosis of A549 cells by inhibition of Survivin expression.     

9-顺-维A酸对肺鳞癌细胞株A2细胞周期、凋亡及相关基因表达的影响

目的 探讨9-顺-维 A酸(9-cis RA)对肺鳞癌细胞株A2细胞周期影响和诱导凋亡作用并检测细胞周期相关基因 Cyclin D1、Rb的表达,探讨9-cis RA的抗癌作用机制。方法 体外培养 A2细胞,随机分为两组,实验组加入 9-cis RA使其终浓度为 5μmol/L,对照组加入二甲亚砜使其终浓度为 0.1％,两个组别均按 0、12、24、36、48、72 h共 6个时相培养,用流式细胞仪技术分别检测肿瘤细胞G0/G1期比率、S期比率及凋亡发生率,同时检测Cyclin D1、Rb基因表达率,作对比研究。结果 9-cis RA作用于肺癌细胞 A2后 G0/G1期细胞比率增高,S期细胞比率下降。9-cis RA作用于 A2细胞后凋亡发生率明显升高,Rb基因表达增强,Cyclin D1基因表达受抑制,在 48 h时药物作用达最高峰。凋亡发生率与Rb基因表达呈正相关(r=0.647,p<0.05),与Cyclin D1基因表达呈负相关(r=-0.723,P<0.05)。结论 9-cis RA可能通过激活 Rb基因表达和抑制 Cyclin D1基因表达途径使肺癌细胞明显阻滞在 G0/G1期,抑制肺癌细胞增殖。9-cis RA可明显诱导肺癌细胞调亡,Rb和Cycin D1基因同样在其中发挥着重要作用。     

异氟醚和七氟醚对人肺腺癌A549细胞迁移及细胞分裂周期蛋白42、成束蛋白表达的影响

目的 观察异氟醚和七氟醚对人肺腺癌A549细胞迁移及细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)和成束蛋白( Fascin)表达的影响.方法 人肺腺癌A549细胞接种于培养板,培养24 h后,按随机数字表法分为3组(每组6例):对照组(C组)、2.3％异氟醚组(Iso组)、3.4％七氟醚组(Sev组).Iso组和Sev组的A549细胞分别暴露于2.3％异氟醚或3.4％七氟醚2、4、6h.C组不接受异氟醚或七氟醚处理.3组处理结束后,继续培养24 h.于24 h时,采用Transwell法检测各组A549细胞处理2、4、6h后的迁移细胞数目,蛋白印迹法检测各组A549细胞处理4h的Cdc42和Fascin表达水平.结果 与C组和Iso组比较,Sev组的迁移细胞数目降低[(102±21)、(97±19)、(105±30)、(104±27)、(92±20)、(90±18) vs(81±16)、(65±11)、(42±9)](P＜0.05)；与C组和Iso组比较,Sev组的Cdc42表达下调[(75±l6)％,(79±13)％vs(31±7)％](P＜0.05)；与C组和Iso组比较,Sev组的Fascin表达下调[(71±13)％、(77±18)％vs(40±8)％](P＜0.05).结论 七氟醚能抑制人肺腺癌A549细胞的迁移,该效应可能与抑制Cdc42和Fascin表达有关.异氟醚无抑制A549细胞迁移的效应.     

Flavopiridol对尤文肉瘤SK-N-MC细胞增殖的抑制作用

目的探讨细胞周期蛋白激酶抑制剂（flavopiridol）在体内外抑制尤文肉瘤细胞增殖的作用及其机制。方法以不同浓度的flavopiridol作用于培养的SK-N-MC细胞,用噻唑蓝法（MTT）检测细胞增殖,流式细胞分析仪测定细胞周期。采用DNA凝胶电泳检测法,观察flavopiridol诱导细胞凋亡的情况;蛋白质电泳观察Bcl-2及Mcl-1表达变化;建立SK-N-MC细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,腹腔内给药,观察肿瘤生长情况;肿瘤标本石蜡包埋切片,免疫组织化学原位末端标记法（TUNEL）检测flavopiridol在体内对肿瘤细胞的凋亡诱导情况。结果（1）Flavopiridol对人尤文肉瘤细胞增殖有抑制作用,时间越长、浓度越高,抑制作用越强。（2）Flavopiridol可改变尤文肉瘤细胞周期,随药物浓度增加Sub-G1期百分比逐渐上升。尤文肉瘤细胞经flavopiridol中、高浓度给药后,DNA凝胶电泳可见典型的梯状带。（3）Flavopiridol给药前后,Bcl-2蛋白表达无变化,而Mcl-1蛋白表达明显下降。（4）TUNEL染色结果显示实验组阳性细胞比例上升,与对照组比较差异有统计学意义。结论Flavopiridol能在体内外抑制尤文肉瘤细胞的增殖,其机制主要是阻滞细胞周期的G1/S期,诱导细胞凋亡。     

茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH的抑制增殖及诱导凋亡作用

目的 观察茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH的抑制增殖及诱导凋亡作用,并比较茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用强度差异.方法 1～10mmol/L茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸分别处理SK-N-SH细胞后,MTT法检测细胞生长活性;克隆形成实验检测细胞增殖能力;PI单染法流式细胞术检测细胞周期;AO/EB荧光染色法、Hoechst 33258荧光染色法、AnnexinⅤ-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡.结果 各浓度茉莉素作用后,SK-N-SH细胞呈时间、浓度依赖性生长抑制,其中茉莉酸甲酯作用最强,1～10mmol/L茉莉酸甲酯作用24 h后,细胞生长抑制率为(22.74～88.67)%,IC50为1.44mmol/L;2.5mmol/L茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用后,细胞克隆形成能力分别降低87.00%、78.66%、39.00%,细胞周期示S期细胞比率显著增高,G0/G1期细胞比率下降,部分细胞发生典型的凋亡形态学改变;1.5～2.5mmol/L茉莉酸甲酯作用后,细胞凋亡率为(23.77～36.43)%.结论 茉莉素能通过减弱瘤细胞增殖、诱导细胞周期阻滞和凋亡等机制抑制人神经母细胞瘤细胞株的生长活性.     

细胞增殖对DNA损伤敏感度的影响

目的 观察细胞增殖状态对DNA损伤敏感度的影响.方法 相同时间和强度的紫外线(uV)作用于过以及未经过植物m凝素(PHA)刺激的外周血淋巴细胞(PBLs),荧光标记的磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)抗体特异性标记细胞核内DNA双链断裂(DSBs)处的,y-H2AX,然后用流式细胞仪定量检测并分析DNA损伤,用Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡.结果 经PHA刺激PBLs细胞进人增殖状态,UV可引起DNA双链断裂,增殖期的PBLs细胞DNA损伤程度明显大于静止期PBLs细胞.结论 受到相同打击后,处于增殖期的淋巴细胞DNA损伤较静止期更为明显.     

法舒地尔对前列腺癌PC3细胞增殖与凋亡的影响

目的 观察法舒地尔对人前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 不同浓度法舒地尔、顺铂及两药联合干预PC3细胞,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot法检测Rock Ⅰ、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达情况.结果 与对照组相比,法舒地尔、顺铂单独或联合作用PC3细胞均可抑制细胞增殖,两药联合后抑制效果更显著;法舒地尔、顺铂联合用药可明显增强PC3细胞的凋亡;凋亡相关蛋白Bcl-2表达下调,Caspase-3表达上调,法舒地尔可明显下调Rock Ⅰ蛋白表达.结论 法舒地尔可促进PC3细胞凋亡,其作用机制可能与法舒地尔抑制Rho激酶的表达有关.     

苦碟子注射液对Lewis肺癌的抑制作用

目的 探讨苦碟子注射液(KDI)对Lewis肺癌体内外的抑制作用及其机制.方法 12.5～400.0g/L KDI分别作用Lewis肺癌细胞后,噻唑蓝(MTT)比色法检测KDI体外对Lewis肺癌细胞的抑制作用.用C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,观察不同浓度KDI的抗癌作用,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡及细胞周期.结果 KDI能显著抑制Lewis肺癌细胞的增殖,并呈剂量效应.低、中、高剂量组对Lewis肺癌的抑瘤率分别为21.64%、36.43%、46.68%,均明显高于生理盐水组(P＜0.01);流式细胞仪检测发现,KDI低、中、高剂量组G0/G1期细胞数分别为(68.10±3.43)%、(80.06±5.48)%和(78.36±6.68)%,S期细胞比例分别为(30.98±1.99)%、(17.48±6.36)%和(17.05±6.35)%,KDI能够使Lewis肺癌细胞阻滞于G0/G1,凋亡率分别为8.96%、17.40%、10.34%,均显著高于生理盐水组(P＜0.05).结论 在体内外,KDI对Lewis肺癌均有明显的抑制作用,可能与其诱导细胞凋亡并使细胞周期阻滞于G0/G1期有关.     

TFu对肝门部胆管癌细胞系FRH-0201增殖和凋亡的影响

目的探讨N3-邻甲苯甲酰基-氟尿嘧啶(N3-toluyl-FlulorouractilTFu)对FRH-0201细胞的生物学效应及其作用机制,为胆管癌临床化疗提供参考。方法光学显微镜、荧光显微镜观察FRH-0201细胞在TFu作用后形态学变化;集落形成实验检测TFu对FRH-0201细胞的增殖抑制作用;琼脂糖凝胶电泳检测DNALadder观察细胞的凋亡;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡并与5-Fu进行比较;MTT试验比较TFu与5-Fu等常用化疗药物对FRH-0201细胞抑制率。结果TFu能体外抑制FRH-0201细胞的增殖,其作用在0.016~4mmol/L范围内具有浓度依赖性及时间依赖性,同浓度比较抑制率高于5-Fu;流式细胞仪检测可见随作用时间延长,TFu及5-Fu组G1细胞期增多,S期细胞减少,细胞增殖被阻滞在G1期;细胞凋亡检测可见,随作用时间延长,TFu及5-Fu组较对照组细胞凋亡率增加,同时相TFu组凋亡率高于5-Fu组;化疗敏感性比较,TFu抑制FRH-0201细胞增殖作用不及阿霉素和顺铂,但明显优于5-Fu及泰素,联合用药阿霉素、顺铂和TFu联合对FRH-0201细胞抑制率最高,达79.02%,优于阿霉素、顺铂、5-Fu联合。结论TFu可明显抑制胆管癌细胞株FRH-0201细胞的增殖,该抑制作用可能通过阻滞细胞周期并进一步诱导细胞凋亡机制发生,同摩尔浓度TFu较5-Fu对FRH-0201细胞抑制作用强,TFu可作为胆管癌联合化疗的新药。     

Synergistic neuroprotective effects of hyperbaric oxygen and methylprednisolone following contusive spinal cord injury in rat

ObjectiveRecent studies revealed the neuroprotective effects of hyperbaric oxygen (HBO) on spinal cord injury (SCI). Meanwhile, the use of methylprednisolone (MP) is one of the current protocols with limited effects in SCI patients. Accordingly, the aim of the present study was to investigate the effect of combined HBO and MP treatment on SCI.DesignThe present study was conducted on five groups of rats each as follows: Sham group (underwent laminectomy alone at T9 level vertebra); SCI group (underwent moderate contusive SCI); MP group (underwent SCI and received MP); HBO group (underwent SCI and received HBO); HBO + MP group (underwent SCI and simultaneously received MP and HBO). Blood serum and Spinal cord tissue samples were taken 48 h after SCI for analysis of serum ferric reducing antioxidant power (FRAP) and tissue malodialdehyde (MDA) levels as well as immunohistochemistry of caspase-3 and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α). Neurological function was evaluated by the Basso–Beattie–Bresnehan (BBB) locomotion scores until the end of experiments. Additionally, histopathology was assessed at the end of the study.SettingMazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran.ResultsCombination therapy with HBO and MP in the HBO + MP group significantly decreased MDA as well as increased FRAP levels compared to other treatment groups. Meanwhile, attenuated TNF-α and Caspase-3 expression could be significantly detected in the HBO + MP group. At the end of treatment, the neurological outcome was significantly improved and the extent of injured spinal tissue was also significantly reduced in the HBO + MP compared to other treatment groups.ConclusionThe results suggest that combined therapy with MP and HBO has synergistic effects on SCI treatment.     

二氢青蒿素对胃癌细胞株SGC7901增殖的影响

目的 观察二氢青蒿素(DHA)对胃癌细胞株SGC7901增殖的影响及作用机制.方法 SGC7901细胞分为DHA组和对照组,DHA组分别加入浓度为6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 μmol/LDHA的培养基,对照组加入等体积含0.1％ DMSO的培养基.不同浓度DHA处理SGC7901细胞24、48和72 h后,MTT法检测细胞的增殖情况.不同浓度DHA处理SGC7901细胞24h后,流式细胞仪测定细胞周期的分布;100 μmol/L DHA处理细胞24h后,采用Western blot法测定细胞周期蛋白A(Cyclin A)、Cyclin D1、Cyclin E、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和P16蛋白的表达水平;免疫共沉淀检查CDK4与Cyclin D1和P16之间的相互作用.采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析.结果 6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 μmol/L DHA分别处理SGC7901细胞24、48和72 h,均明显抑制细胞增殖(F =78.66,235.37,93.75,P＜0.05);与对照组比较,不同浓度DHA组G0/G1期细胞比例均明显上升(F=18.42,P＜0.05);100.00 μmol/L DHA处理细胞24h,Cyclin D1和CDK4蛋白的相对表达量分别为0.17±0.05、0.24±0.06,较对照组的0.67±0.15、0.64 ±0.18明显下降(t=7.746,5.164,P＜0.05);DHA组Cyclin E蛋白的相对表达量为0.35 ±0.06,较对照组的0.42±0.06也有下降,但差异无统计学意义(t=2.021,P＞0.05);DHA组和对照组Cyclin A蛋白的相对表达量分别为0.38 ± 0.08和0.35 ±0.09,两组比较,差异无统计学意义(t=1.266,P＞0.05);与对照组P16蛋白相对表达量(0.29±0.07)比较,DHA组P16蛋白相对表达量(0.54±0.12)显著升高(t=4.408,P＜0.05).免疫共沉淀结果示DHA处理SGC7901细胞后,CDK4与Cyclin D1结合减少,与P16结合增加.结论 DHA将SGC7901细胞周期阻滞于G0/G1期,其主要机制可能与下调Cyclin D1和CDK4表达、上调P16表达,抑制Cyclin D1与CDK4的结合,促进P16与CDK4的结合有关.