荷叶离褶伞可溶性多糖提取工艺研究

对荷叶离褶伞（Lyophyllum decastes Sing）可溶性多糖的提取工艺进行了研究,通过正交设计和方差分析确定了多糖的最佳提取条件。结果表明:时间和温度对荷叶离褶伞多糖的提取影响较大,其最佳工艺为温度85℃、pH9.0、料液比1∶15、提取时间1.5h,用苯酚-硫酸法测定最佳提取工艺条件下固形物中多糖含量为65.52%。      

荷叶离褶伞可溶性多糖提取工艺研究

对荷叶离褶伞(Lyophyllum decastes Sing)可溶性多糖的提取工艺进行了研究,通过正交设计和方差分析确定了多糖的最佳提取条件。结果表明:时间和温度对荷叶离褶伞多糖的提取影响较大,其最佳工艺为温度85℃、pH9.0、料液比1∶15、提取时间1.5h,用苯酚-硫酸法测定最佳提取工艺条件下固形物中多糖含量为65.52%。     

富硒荷叶离褶伞菌丝体中硒多糖提取工艺的优化及红外光谱分析

以20 L生物罐发酵培养的富硒荷叶离褶伞菌丝体为原料,优化菌丝体中硒多糖的提取工艺并通过红外光谱对水溶性硒多糖的结构进行分析。通过单因素试验和Box-Behnken试验设计方法得到硒多糖的最佳提取工艺条件:提取时间为50 min、提取温度83℃、料液比1∶130(g∶m L)、提取次数2次。测得多糖提取率为44.62%,较预测值增加0.02%,此时多糖中硒含量达到31.9μg/g。将纯化后的硒多糖进行红外光谱分析,富硒未改变水溶性硒多糖的主体结构,但吡喃环的吸收峰发生了改变,说明在荷叶离褶伞菌丝体富硒培养过程中,硒参与了硒多糖的合成。     

荷叶离褶伞菌丝体富硒条件的研究

为获得荷叶离褶伞富硒菌丝体,以菌丝体干重和富硒率为评价指标,研究灭菌条件、培养时间、硒添加量和硒添加时间对荷叶离褶伞菌丝体生长及其富硒效果的影响。采用L9(34)正交实验优化荷叶离褶伞菌丝体富硒条件,结果表明当灭菌条件为115℃、20min,于发酵至第5d在发酵液中加入4μg/mLNa2SeO3,待发酵至13d时,菌丝体干重量和富硒量分别为0.8232g/100mL和0.7040mg/g,由此确定上述条件为荷叶离褶伞菌丝体的最优富硒发酵条件。      

荷叶离褶伞多糖提取工艺优化及抗氧化活性研究

本研究以荷叶离褶伞多糖为对象,采用单因素与响应面法对多糖提取温度、提取时间、液料比、次数进行优化,进一步研究了荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性。结果表明:在提取温度为89 ℃,时间为3 h,液料比为30:1 (mL/g),提取2次时,荷叶离褶伞多糖得率为5.35%±0.12%,与预测值相近。荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性与多糖浓度在0~1.0 mg/mL范围内呈现剂量依赖关系,多糖浓度在1.0 mg/mL时,DPPH和ABTS自由基清除率分别达到45.87%±2.12%和76.49%±1.56%。荷叶离褶伞多糖对DPPH和ABTS自由基半抑制浓度IC₅₀分别为1.40、0.44 mg/mL,说明荷叶离褶伞多糖具有较好的抗氧化能力。     

荷叶离褶伞发酵液制作保健饮料的工艺研究

为降低生产成本、提高荷叶离褶伞产品的附加值,以黄豆、玉米粉为主要原料,分别经中性蛋白酶与α-淀粉酶液化,然后将荷叶离褶伞菌接种于以豆浆、玉米汁为天然培养基的原料发酵培养,得到荷叶离褶伞豆浆玉米汁发酵液。以此发酵液为主要配料进行保健饮料研制,优化得到荷叶离褶伞饮料配方为发酵液40％、柠檬酸0．12％、羧甲基纤维素钠0．02％、白砂糖4％,在饮料中添加l％蜂蜜可增加饮料香气。各组合之间的感官质量得分差异显著,不同组合间有明显的交互作用。     

荷叶离褶伞多糖的提取工艺及其抑菌作用的研究

在单因素试验的基础上,通过3因素3水平正交试验优化了荷叶离褶伞菌丝体和发酵液中多糖的提取工艺。利用圆纸片法对荷叶离褶伞多糖进行了抑菌性实验,结果表明荷叶离褶伞多糖提取物对细菌和真菌都有抑制作用,其中对四叠球菌和黑曲霉的抑制作用最强,最小抑菌浓度均为1.094ug/ml。该研究以期为荷叶离褶伞在更多领域的合理开发和利用提供参考。     

荷叶离褶伞菌丝体深层发酵及胞内外多糖含量的变化

研究了发酵时间对荷叶离褶伞菌丝体深层发酵及胞内外多糖含量的动态变化.结果表明,在25℃恒温、连续发酵13d期间,荷叶离褶伞菌丝生物量和胞内多糖含量在前11d内均与发酵时间呈极显著(p＜0.01)的正相关,并在第11d时分别达到最大值11.96mg/mL和1.58mg/mL,分别是发酵前的约7倍和12倍;胞外多糖和还原糖含量分别在前3d和12d内与培养时间呈极显著(p＜0.01)的负相关,且分别在第3d和12d时下降到最低值0.046mg/mL和0.132mg/mL,分别是发酵前的约4%和16%.这些结果说明,11d的发酵时间对荷叶离褶伞菌丝体生长及胞内多糖积累最为合适.     

祁连山荷叶离褶伞菌丝体LML的分离纯化及其凝血活性检测

以荷叶离褶伞菌丝体为材料,利用DEAE-Sepharose F.F.色谱和SephadexG-100色谱技术,分离获得新的LMLLML。根据凝胶过滤色谱和SDS-PAGE电泳结果,确定LML是中性糖含量为10.36%、分子量约为48.2ku单亚基糖蛋白。凝血活性检测结果表明,LML对兔血红细胞具有凝聚活性,这种活性在LML浓度为500μg/mL、温度为20⁷0℃、pH3¹0的条件下稳定;其凝血活性可被葡萄糖（最小浓度为25mmol/L）和麦芽糖（最小浓度为12.5mmol/L）所抑制;当LML浓度≥250μg/mL时,其凝血活性不受Ca2+、Mg2+和Zn2+的影响。      

荷叶离褶伞中试发酵条件与培养基优化研究

在荷叶离褶伞菌丝体摇瓶发酵条件研究结果的基础上,采用均匀设计,在200L发酵罐中,对荷叶离褶伞中试发酵条件与培养基配方进行了优化研究,结果表明荷叶离褶伞菌丝体中试发酵的最佳条件为搅拌转速160r/min、罐压0.2MPa、通气量80L/h、pH值为6.5、温度20℃、接种量10%;最佳培养基配方为玉米面5%、大豆0.5%、ZnSO4 0.025%、MgSO4 0.05%、KH2PO4 0.05%。发酵至第8d菌丝体生物量达到最大(10.578g/L),第9d胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)产量最大(1.212g/L)。     

诱变选育高产多糖荷叶离褶伞新菌株

以荷叶离褶伞ZY48-1为出发菌株,通过原生质体紫外诱变,筛选高产多糖菌株。结果表明,原生质体制备再生的最佳条件为:0.6mol/L蔗糖稳渗剂、1%溶壁酶+0.5%蜗牛酶混合酶液、菌龄72h、30℃酶解2.5h,原生质体得率为5.76×105个/mg,原生质体再生率为7.81%;筛选到突变菌株ZY481-1,多糖含量643.1961mg/g,较出发菌株高出31.05%。经10次传代,多糖含量保持稳定。      

野生灰离褶伞菌丝体液体发酵工艺研究

用液体培养法研究了培养基和培养条件对灰离褶伞菌丝体生长的影响。结果表明,菌丝体生长的最适碳源为可溶性淀粉,最适氮源为蛋白胨,最佳C/N比为20∶1,pH为6.0～7.0;装液量为80mL/200mL三角瓶,接种量为7.0%,转速为160r/min,培养时间为6d,最适培养温度为28～30℃。液体培养的最佳营养条件为:可溶性淀粉3.0%、K2HPO40.30%、MgSO40.10%,pH6.5,在此条件下,菌丝体的产量达到0.6314g/100mL。      

野生灰离褶伞菌丝体液体发酵工艺研究

用液体培养法研究了培养基和培养条件对灰离褶伞菌丝体生长的影响。结果表明,菌丝体生长的最适碳源为可溶性淀粉,最适氮源为蛋白胨,最佳C/N比为20∶1,pH为6.0～7.0;装液量为80mL/200mL三角瓶,接种量为7.0%,转速为160r/min,培养时间为6d,最适培养温度为28～30℃。液体培养的最佳营养条件为:可溶性淀粉3.0%、K2HPO40.30%、MgSO40.10%,pH6.5,在此条件下,菌丝体的产量达到0.6314g/100mL。     

榆干离褶伞菌丝体中溶栓酶的分离纯化

采用离子交换层析、凝胶过滤层析及快速蛋白液相色谱等蛋白质分离纯化技术,从榆干离褶伞菌丝体中分离纯化了一种溶栓酶。实验结果表明,其分子量约为50ku,比活性为750.6Unit/mg,活性得率为12.5%。榆干离褶伞很有潜力成为治疗血栓的新的药物来源。     

荷叶中荷叶碱及原花青素提取工艺优化

目的:优选荷叶中荷叶碱、原花青素提取工艺。方法:采用正交实验设计,以原花青素、荷叶碱的提取率为指标,考察磷酸浓度、提取时间、料液比等因素对提取率的影响,优选最佳工艺参数。结果:以0.3%(V/V)磷酸为提取溶剂,料液比为1∶25(g/L),提取时间1.5h,提取2次,原花青素的提取率为89.2%,荷叶碱的提取率为69.9%。结论:采用酸水法提取荷叶中荷叶碱、原花青素,具有提取效率高、工艺简便、成本低等特点,适合于工业化大生产应用。      

硒化荷叶离褶伞菌丝体的鉴定及生物活性

对荷叶离褶伞菌丝体硒化后的产物进行研究分析及抗氧化活性测定,旨在寻找新型富硒抗氧化新材料,并为其工业化生产提供参考资料。研究结果表明,硒化荷叶离褶伞菌丝体是一种平均分子量为9.43 kDa的高分子多糖,是一种活性物质,其中组成物质主要有蔗糖、甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖和木糖,摩尔比为5.30︰1.55︰2.14︰0.29︰0.63,硒含量为3.21 pg/g。硒化荷叶离褶伞菌丝体具有明显的抗氧化活性,对癌细胞有很强的抑制作用。研究显示,双氧水阴离子自由基、羟自由基、ABTS和DPPH自由基随浓度的增加而增加,当浓度达到6 mg/mL时,硒化荷叶离褶伞菌丝体的清除活性接近VC。凋亡减少较少的亚G1峰含量表明硒化荷叶离褶伞菌丝体具有减轻双氧水对PC-12细胞氧化损伤的作用。这些结果表明硒化荷叶离褶伞菌丝体具有很强的抗氧化能力。硒化荷叶离褶伞菌丝体可以预防氧化损伤,可作为有机硒膳食补充功能食品。     

榆干离褶伞发酵液体外抗氧化性能研究

目的:研究榆干离褶伞发酵液的体外抗氧化作用。方法:利用比色法测定榆干离褶伞发酵液对羟基自由基.OH、H2O2、二苯基苦味酰基苯肼(DPPH)的清除能力和红细胞自氧化溶血的影响以及H2O2诱导的肝损伤组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)的含量。结果:榆干离褶伞发酵液具有清除.OH、H2O2和DPPH自由基能力,降低红细胞溶血率,提高肝组织SOD、GSH-Px、CAT活性并抑制肝组织MDA的生成。结论:榆干离褶伞发酵液具有体外抗氧化作用。     

美藤果蛋白的提取工艺及氨基酸组成分析

以美藤果蛋白提取率为考察指标,在单因素实验的基础上,采用正交实验优化了碱溶酸沉法制备美藤果蛋白的工艺条件,并分析了美藤果蛋白的氨基酸组成。结果表明,美藤果蛋白的最优提取工艺条件为∶料液比1∶30,碱提时间2 h,碱提温度70℃,碱提pH 9.0。在最优条件下,美藤果蛋白提取率为83.91%。美藤果蛋白的氨基酸组成种类齐全,必需氨基酸含量较高,是一类较优质的植物蛋白质资源。     

黄伞菌丝体多糖提取工艺及免疫调节作用研究

在单因素试验基础上运用正交试验方法确定了黄伞菌丝体多糖最佳提取工艺,即菌丝体粉碎粒径为80目、加水量1∶15、提取时间2.5 h、提取温度80℃、提取1次,醇析多糖时使用无水乙醇、3.5倍于多糖溶液、醇析12 h;同时研究了黄伞菌丝体多糖在体外刺激小鼠脾淋巴细胞增殖作用,结果表明黄伞菌丝体多糖可以促进淋巴细胞增殖,具有体外调节免疫作用。     

榆干离褶伞发酵液的溶栓与降血脂作用

研究了榆干离褶伞(Lyophyllum ulmarium,L.u)发酵液的体外溶栓作用和降血脂作用。将血凝块与L.u发酵液37℃恒温孵育,测定血凝块溶解时间;观察给予L.u发酵液后对小鼠体内出、凝血时间的影响;采用高脂血症动物模型,观察L.u发酵液对血脂水平的影响。结果显示,L.u发酵液明显延长凝血时间及出血时间,明显降低高脂血症小鼠总甘油三酯和总胆固醇含量。可以证明,L.u发酵液具有溶栓作用,其机制可能与其抗凝作用和降血脂作用有关。