老年大鼠肺泡Ⅱ大型细胞细胞外基质成分和基底膜厚度的变化

目的：探讨老年大鼠肺泡Ⅱ型细胞细胞外基质成分和基底膜厚度的变化。方法：用免疫细胞化学和图像分析技术幼年（１～２个月）、中年（８～９个月）和老年（２５～２８个月）大鼠肺泡Ⅱ型细胞层粘连蛋白和纤维连接蛋白的变化及肺泡Ⅱ型细胞基底膜的厚度。结果：老年大鼠肺泡Ⅱ型细胞层粘连蛋白减少，纤维边接蛋白增多，基底膜增存。结论：老年大鼠肺泡Ⅱ型细胞细胞外基质的发生改变，可能导致肺泡修复能力的异常。     

支气管哮喘患者支气管细胞外基质变化的研究

目的：以小支气管平滑肌厚度、粘膜网状基底膜厚度作为气道重塑指标，观察支气管哮喘患者支气管细胞外基质变化；了解哮喘患者血清、支气管肺泡灌洗液中细胞外基质相关因子的变化。方法：对12例哮喘患者和10例非哮喘对照者经纤支镜支气管粘膜活检，测量支气管平滑肌、粘膜网状基底膜厚度，测定血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞外基质相关因子：转化生长因子βl(TGFβ1)、γ干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)、白介素5(IL-5)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的含量。用t检验比较两组小支气管平滑肌及粘膜网状基底膜厚度以及上述细胞因子含量。结果：哮喘患者小支气管平滑肌厚度、粘膜网状基底膜厚度明显高于对照组，差异有显著性。哮喘患者血清和BALF中TGFβl、IL-4、IL-5、PCⅢ含量明显高于对照组，IFN-γ含量明显低于对照组，差异均有显著性。结论：哮喘患者小支气管平滑肌厚度、粘膜网状基底膜厚度均存在不同程度增厚，血清和BALF中某些细胞外基质相关因子存在显著变化，可能存在Thl／Th2失衡。     

不同龄大鼠肺泡Ⅱ型细胞表面活性物质的变化

目的 探讨衰老对肺泡Ⅱ型细胞合成表面活性物质代谢的影响。方法 利用形态计量和Northern杂交方法比较了幼(1～2月龄)、中(9～10月龄)和老年(25～28月龄)大鼠肺泡Ⅱ型细胞内板层体数及肺组织内肺泡表面活性物质相关蛋白(SP)A、B和C基因的表达。结果 老年鼠肺泡Ⅱ型细胞内板层体数为12.20±4.99个/细胞,高于幼年鼠的11.25±3.29个/细胞(P<0.01),但低于中年鼠的13.37±4.55个/细胞(P<0.05)。肺组织中SP-A、SP-B和SP-C基因的表达各年龄组之间则无差别。结论 肺泡Ⅱ型细胞对表面活性物质代谢的年龄相关性变化能力可能是代偿性分泌增加而达到的新的动态平衡的结果,并不是老化时肺功能下降的原因。     

肾络通药物血清对血管紧张素诱导体外大鼠系膜细胞ECM分泌和CTGF mRNA表达的影响

目的 探讨肾络通药物血清对大鼠系膜细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用及对结缔组织生长因子(CTGF)的影响.方法 以体外培养大鼠肾小球系膜细胞及血清药理学方法 为基础,采用酶联免疫吸附试验检测细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅡ)的含量;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测结缔组织生长因子mRNA的表达.结果 细胞外基质纤维连接蛋白、Ⅳ型胶原的含量与结缔组织生长因子mRNA的表达呈正相关关系,肾络通对其均有抑制作用.结论 肾络通能够减少细胞外基质的积聚,抑制结缔组织生长因子的分泌与表达,此作用是其防治肾小球硬化的可能机制之一.     

蚕蚀性角膜溃疡中Ⅲ型胶原层粘连蛋白与纤维连接蛋白的表达

目的比较蚕蚀性角膜溃疡与正常角膜中Ⅲ型胶原、层粘连蛋白及纤维连接蛋白的定位与含量.方法应用间接免疫荧光技术检测蚕蚀性角膜溃疡与正常角膜中Ⅲ型胶原、层粘连蛋白、纤维连接蛋白的分布.阳性结果应用图像分析系统进行定量分析.结果Ⅲ型胶原在正常角膜中无表达,在蚕蚀性角膜溃疡中分布在基质溃疡处.层粘连蛋白在正常角膜基底膜微量表达,在蚕蚀性角膜溃疡基底膜和Bowman's膜表达增多.纤维连接蛋白在正常角膜基底膜呈连续线状分布,在蚕蚀性角膜溃疡上皮层及基质溃疡处有表达,而在基底膜未见表达.结论蚕蚀性角膜溃疡上皮基底膜在其发病机制中可能发挥作用,需要进一步深入研究.     

细胞外基质对哮喘大鼠气道平滑肌细胞PI3Kp85表达的影响

目的:研究细胞外基质(ECM)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)磷脂酰肌醇-3-激酶p85(PI3Kp85)表达的影响。方法:卵白蛋白(OVA)致敏法复制大鼠哮喘模型,将培养后的大鼠叶支气管ASMCs分别种植在涂覆有纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原及层粘蛋白的培养瓶中培养,Western blot检测各组ASMCs中PI3Kp85蛋白表达,Real-time PCR检测其mRNA。另取12只正常大鼠做对照。结果:哮喘纤维连接蛋白组、层粘蛋白组、Ⅰ型胶原蛋白组ASMCs中PI3Kp85 mRNA的表达分别是(7.63±0.61)、(9.73±0.68)、(16.22±0.88),均明显高于对照组(5.93±0.75)(P<0.01);蛋白表达情况与mRNA趋势一致。结论:纤维连接蛋白、Ⅰ型胶原及层粘蛋白可以上调哮喘大鼠气道平滑肌细胞中PI3Kp85表达。     

糖尿病大鼠肺病理改变及同期肾脏病理变化对比

目的:观察糖尿病(DM)大鼠肺组织改变及与同期肾脏变化的关系.方法:链脲菌素腹腔注射制作糖尿病大鼠模型,4周后胶原、网状纤维染色及透射电镜方法观察糖尿病大鼠肺组织基底膜病理改变,同期观察肾脏改变.结果:DM大鼠4周后肺组织病理改变为毛细血管基底膜及Ⅱ型肺泡上皮细胞基底膜不同程度的增厚及肺间质胶原成分等细胞外基质的增多,与同期糖尿病肾脏病变相平行.结论:DM大鼠4周后肺组织与糖尿病肾病相似,主要表现为微血管病变.     

EGCG对肾小球系膜细胞MMP-9和细胞外基质合成的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对脂多糖（LPS）诱导的肾小球系膜细胞（GMCs）基质金属蛋白酶系统和细胞外基质合成的影响。方法以大鼠GMCs为实验对象,分为正常对照组、LPS组、LPS＋EGCG组。CCK细胞计数法检测EGCG作用下大鼠GMCs的OD值,酶联免疫吸附实验（ELISA）检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及抑制物金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）蛋白表达,并检测细胞外基质成分纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原（ColⅣ）及层粘连蛋白（LN）的含量。结果LPS诱导TIMP-1蛋白和细胞外基质合成增加,与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）,EGCG能抑制升高TIMP-1蛋白表达和细胞外基质合成。而各组MMP-9蛋白表达变化不明显。结论EGCG可抑制LPS诱导的大鼠GMCs增殖和细胞外基质的合成,为EGCG的肾脏保护作用提供理论依据。     

实验性器官硬化细胞外基质及间质效应细胞的研究

为探讨肝纤维化的细胞生物学机制,上海医科大学病理学教研室张月娥等,应用免疫组化技术对大鼠实验性肝纤维化过程中细胞外基质的变化进行了观察。 结果表明:实验早期(1～4周)肝细胞坏死、崩解处,扩张增厚的血窦壁及附近基质内有大量抗纤维联接蛋白沉积。约第4周时形成细胞外基质的抗纤维联接蛋白间隔,分隔小叶;实验中期(6～10周)     

Ⅳ型胶原、层粘连蛋白、纤维连接蛋白在喉鳞癌中的表达

目的:探讨细胞外基质的变化与喉癌组织恶性度及发生局部淋巴结转移之间的关系.方法:采用免疫组织化学方法检测Ⅳ型胶原、层粘连蛋白、纤维连接蛋白在喉癌中的表达.结果:3者在喉癌中的表达具有一致性;在高分化喉癌中表达多完整,在低分化肿瘤中缺失率明显增加;且随肿瘤浸润程度的加重,3者表达的缺失也逐渐加重,经统计学检验,差异显著(P＜0.05);同时在淋巴结转移组与未转移组之间,3种蛋白表达程度亦呈现显著性差异(P＜0.01).结论:细胞外基质中的基底膜与喉癌的细胞分化程度及浸润能力密切相关;活检病理中的基底膜表达可以作为预测喉癌是否发生颈淋巴结转移的参考指标.     

免疫学

叭刃月13三个细胞外基质成分任人那泡分布的免佼组织化学观察/肖娜…//生殖医学杂志一1995,4(2)一80一83 本文作者为进一步揭示细胞外基质(ECM)一与卵巢功能的关系,ECM对卵泡发育局部发挥既独特又协同作用提供依据,应用ABC免疫组织化学方法,观察了ECM的主成分IV型胶原、纤维粘连蛋白和层枯连蛋白在人卵泡的分布。结果发现: .80.IV型胶原分布在泡膜细胞和分隔顺粒细胞、泡膜细胞的基膜上.纤维粘连蛋白分布在卯泡颗粒细胞和泡膜细胞,而层粘连蛋白则分布在基膜以及基膜两侧的颖粒细胞和泡膜细胞。这3个细胞外基质成分分布规律不同。提示…     

用cDNA表达阵谱分析大鼠骨髓基质干细胞诱导分化软骨细胞过程中细胞外基质基因表达

目的：从基因水平了解转化生长因子-β(TGF—β)和地塞米松(DEX)在诱导大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化过程中细胞外基质(ECM)作用的分子机制。方法：应用TGF—β和DEX诱导大鼠BMSCs到软骨细胞系，从分化的软骨细胞中提取、纯化mRNA，逆转录合成cDNA，荧光标记后与大鼠BioStarR-20型芯片杂交，扫描后筛选出差异表达的ECM基因。结果：在2242个基因中，共发现与ECM相关的差异表达基因15条，其中8条差异表达明显，包括前胶原XⅡα1和前胶原Ⅱα1基因各1条，蛋白多糖aggrecan 1、核心蛋白聚糖和biglycan基因各1条，粘连糖蛋白及相关基因纤维连接蛋白1、fibromodulin和Chondromodulin-1(ChM-1)各1条。结论：TGF—β和DEX可有效诱导大鼠BMSCs到软骨细胞系的分化培养，其作用机制涉及到多个ECM基因。     

肾疏宁对系膜增生性肾炎模型大鼠肾小球细胞外基质的抑制作用

目的:验证中药肾疏宁对大鼠系膜增生性肾炎细胞外基质聚集的防治作用。方法:复制大鼠系膜增生性肾炎模型,观察肾疏宁对细胞外基质中纤维连接蛋白(FN)、四型胶原(ColⅣ)聚积的影响并以苯那普利为对照。结果:肾疏宁能明显减少细胞外基质中FN、ColⅣ聚积。结论:肾疏宁防治系膜增生性肾炎的作用可能与抑制系膜基质聚积有关。     

转化生长因子-β及IV型胶原酶在非瘤性病变中发病机理的研究进展

近年来大量研究表明 ,细胞外基质 (extracellularmatrix)在维持正常细胞的形态及组织结构、控制细胞的迁移、增殖、分化、代谢和功能中起着非常重要的作用。基底膜 (basementmembrane)是一种以IV型胶原为主要成分 ,并由层粘连蛋白 ,纤维粘连蛋白和接触蛋白等共同组成的网状膜结     

层黏连蛋白及其受体与急性肺损伤

层粘连蛋白(LN)又称Ⅳ型胶原基质,是细胞外基质中一种非胶原糖蛋白,存在于多种组织的基底膜.现有资料表明,LN是细胞与基质黏着的介质,而LN与细胞的黏着是通过层粘连蛋白受体完成的[1-2].     

细胞外基质与肿瘤转移关系的研究进展

<正>肿瘤转移是一个复杂的过程,有不同调节机制涉及许多过程,其中细胞外基质与肿瘤转移关系极为密切。目前已证实细胞外基质是阻止肿瘤转移的一道屏障,在肿瘤浸润转移过程中,肿瘤细胞与周围的外基质之间发生了一系列的动态变化,这一过程中有金属蛋白酶(如MMP2,MMP9),组织蛋白酶,纤维蛋白酶等释放,有Ⅳ型胶原、层粘连蛋白、明胶蛋白、纤维连接蛋白以及其他外基质成分的合成与降解,以及胶原酶抑制剂TIMP-1、TIMP-2、粘附分子等参与和调节,同时还有肿瘤细胞     

富含半胱氨酸酸性分泌型糖蛋白2.1肽段对体外培养人系膜细胞超微结构及其分泌细胞外基质的影响

目的:观察富含半胱氨酸酸性分泌型糖蛋白(SPARC)2.1肽段对体外培养人肾小球系膜细胞(HMC)超微结构及其分泌细胞外基质的影响.方法:50 μg/ml SPARC2.1肽段作用48 h、96 h后,倒置显微镜下观察HMC形态变化,透射电镜观察其超微结构,以正常培养的HMC作空白对照组.荧光定量RT-PCR法检测空白对照组和50 μg/ml SPARC2.1肽段作用96 h后HMC分泌细胞外基质[Ⅰ型和Ⅳ型胶原(ColⅠ、ColⅣ)、层粘连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)]相关基因mRNA表达的变化;ELISA法比较两组HMC培养上清中细胞外基质(ColⅠ、ColⅣ、LN、FN)的蛋白含量.结果:空白对照组HMC无明显变化;50 μg/ml SPARC2.1肽段作用48 h电镜可见少数HMC发生凋亡早期改变;96 h可见较多细胞发生典型凋亡改变,电镜下可见典型的凋亡小体.与空白对照组相比,SPARC2.1肽段作用96 h后,HMC的ColⅠ、ColⅣ、FN mRNA和蛋白含量显著下调(P＜0.01,P＜0.05),LN mRNA及其蛋白含量无明显变化.结论:SPARC2.1肽段可在体外诱导HMC细胞的凋亡,超微结构可见典型凋亡小体,并抑制其分泌细胞外基质.     

肺泡Ⅱ型细胞的分离培养及年龄对其增殖的作用

目的：建立肺泡Ⅱ型细胞的分离培养方法，研究年龄对其增殖的影响。方法：应用梯度离心和贴壁培养分离大鼠肺泡Ⅱ型细胞，比较幼年、中年和老年大鼠培养肺泡Ⅱ型细胞的增殖能力。结果：证明该分离方法最终每只鼠可收获（１．１±０．６）×１０７个细胞，细胞活力９４．１％，肺泡Ⅱ型细胞纯度为（９１．６±２．４）％。肺泡Ⅱ型细胞的增殖能力均呈现幼年组＞中年组＞老年组的变化。结论：成功地建立肺泡Ⅱ型细胞的分离培养方法。老年大鼠肺泡Ⅱ型细胞增殖能力下降。     

细胞外基质对离体大鼠睾丸支持细胞的影响

本实验利用组成细胞外基质的两种糖蛋白──纤维粘连蛋白和层粘连蛋白，以及来源于肝、肺组织的两种生物基质，在体外研究了细胞外基质对大鼠支持细胞的贴壁和铺展及形态的影响。结果证明两种糖蛋白均能促进支持细胞的贴壁和铺展。来源于肺组织的生物基质能在体外保留体内支持细胞的柱状细胞形态，而来自肝组织的生物基质则没有这种特性。     

益气化瘀法对大鼠系膜细胞增殖及细胞外基质分泌的影响

目的:观察益气化瘀法对大鼠系膜细胞(GMCs)增殖及细胞外基质分泌的影响.方法:用MTT法检测细胞增生,ELISA法检测转化生长因子β-1(TGF-β1)和细胞外基质Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN).结果:黄芪组、水蛭组和黄芪 水蛭组均可降低血清TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的含量;其中以黄芪 水蛭组最明显,水蛭组次之,均强于黄芪组.结论:益气化瘀法可以抑制系膜细胞增殖及细胞外基质分泌.