单克隆抗体亲和层析法纯化人白细胞干扰素的研究

本文报道了一种单克隆抗体亲和层析纯化人白细胞干扰素的方法。采用本所研制的α－干扰素单克隆抗体亲和层析柱进行了人白细胞干扰素大规模纯化研究，结果表明，其活性回收率平均达１０６．９％，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ银染法鉴定，白细胞干扰素的大多数活性成分均被吸附和回收，所得的干扰素蛋白成分主要位于分子量１５，０００－２３，０００的干扰素生区域，产品的纯度大大提高；ＥＬＩＳＡ夹心法测定鼠源ＩｇＧ含量小于２０ｎｇ／剂     

抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的研制及鉴定

应用淋巴细胞杂交瘤技术,以纯化的原核表达产物His-ChIFN-γ作为免疫原,以纯化的GST-ChIFN-γ作为检测原,制备抗鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)mAb;采用ELISA、Dot-ELISA和ECL法鉴定单克隆抗体(mAb)的生物学特性。获得4株可稳定分泌抗ChIFN-γmAb的杂交瘤细胞株1G10、2C3、3E5、3E3,其腹水ELISA效价为2×104~8.2×105;Ig亚类分别为IgG1、IgG1、IgG1和IgG2a。Dot-ELISA和ECL试验结果均表明:4株mAb只与表达ChIFN-γ的重组大肠杆菌反应,而与未表达ChIFN-γ的菌株不反应,表明4株mAb均特异性针对ChIFN-γ。鸡脾脏淋巴细胞经PMA刺激后,经固定、破膜,用mAb 2C3标记,利用流式细胞术可成功地检测到表达ChIFN-γ的T淋巴细胞。mAb为家禽的免疫检测、免疫细胞功能分析和免疫调节等研究提供依据。     

国产人α干扰素单克隆抗体在纯化基因重组人α^—2…

采用本所研制的人α－干扰素单克隆抗体，进行中试规模纯化制备基因重组人α２ｂ－干扰素，各项指标均达到卫生部有关生物制品的要求，证明该单抗适用于基因重组人α２ｂ干扰的纯化。     

猪α干扰素基因的表达及其单克隆抗体的制备与鉴定

将猪IFN-α(poIFN-α)成熟蛋白基因克隆于pET-28a载体中,转染大肠杆菌,并进行诱导表达.经SDS-PAGE检测,融合表达的蛋白poIFN-α大小约27ku.收获融合表达的poIFN-α,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA方法对融合细胞进行检测,结果获得了1株能稳定分泌抗poIFN-α蛋白抗体的杂交瘤细胞株,命名为2H12株.Western-blotting结果及单克隆抗体亚型鉴定结果表明,单抗与重组蛋白发生特异性反应,单抗为IgG1亚型,且轻链为κ链.     

抗肿瘤单克隆抗体药物的研究进展

通过淋巴细胞杂交瘤技术或基因工程技术制备单克隆抗体药物,已经成为生物制药领域的一个重要方面,特别是对抗肿瘤单克隆抗体药物的研究已获得了重要进展。多年来,许多研究证实了抗肿瘤单克隆抗体药物的作用,为其应用于肿瘤治疗提供了重要依据。文章就抗肿瘤单克隆抗体药物的种类、制备、应用及存在问题进行了综述,并对其应用前景进行了展望。     

一株分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞的鉴定

[目的]应用杂交瘤技术获得稳定分泌抗猪γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。[方法]先将原核表达产物His—PoIFN一γ免疫BALB／c小鼠4次,然后进行细胞融合,再以纯化的GST—PoIFN一1作为包被抗原,用间接ELISA筛选阳性杂交瘤无性系,最终获得能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对其进行问接ELISA和Westernblot检测。[结果]试验获得l株能稳定分泌抗猪IFN一1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,被命名为B3株,经间接ELISA和Westernblot检测,该株分泌的抗体能与融合蛋白His—PoIFN一γ和GST—PoIFN一γ发生特异性反应,而与其他表达鸡γ-干扰素、His和GST蛋白等的重组质粒均不发生反应。B3株分泌的抗体小鼠腹水的ELISA效价达到1：160000,抗体亚型为IgG1型,且轻链为κ链。[结论]该研究为建立猪γ-干扰素检测方法,研究机体的免疫状态及免疫机制提供了技术基础。     

干扰素研究进展

干扰素是一种由体细胞合成和分泌的生物活性蛋白,自1957年被发现后,一直是细胞因子基础和临床研究的前沿.概述了干扰素的概念及分子结构,类型及来源,生物学特性,功能及作用机制,剂型及临床应用.     

兽药单克隆抗体研究进展

综述了兽药单克隆抗体的制备、种类和在兽药残留检测中的应用前景。     

抗牛IFN-γ单克隆抗体的制备与鉴定

试验以纯化的rHis-BoIFN-γ蛋白为免疫原免疫4～6周龄BALB/c鼠,3次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用纯化的rGST-BoIFN-γ作为检测抗原,以间接ELISA和有限稀释法进行筛选,并初步鉴定其生物学特性。结果表明,试验共获得4株能稳定分泌抗rBoIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。抗体亚类均为IgM,轻链为κ链;其中腹水效价2株均达到5×104以上;通过Western blot结果表明,4株单抗均可特异性的结合rGST-BoIFN-γ蛋白,而不与GST标签蛋白反应。间接ELISA试验证明,4株单抗只与rBoIFN-γ反应,而不与GST蛋白和rGoIFN-α、rGoIFN-γ、rBoIFN-α等细胞因子发生交叉反应。通过间接免疫荧光显示,4株单抗均与真核细胞BHK21表达的rBoIFN-γ反应产生强荧光反应,证明了单抗能够与接近天然的BoIFN-γ反应,证实了单抗的特异性。阻断ELISA检测结果表明,3D10株单抗能够与牛外周血诱导产生的天然干扰素发生反应,证实了该单抗具有实际的应用价值。     

兽用干扰素的研究进展

IFN是细胞和机体受到病毒感染,或者受核酸、细菌内毒素、促细胞分裂素等作用后,由受体细胞分泌的一种广谱抗病毒糖蛋白,具有种属特异性、作用广谱性及无害性等生物学性质。IFN不仅有免疫活性,而且还是体内一种递质和激素样物质,具有抗病毒繁殖、抗细胞分裂增殖及调节机体免疫三大基本功能。主要针对IFN的产生、信号转导路径、作用机制以及研究进展进行综述。     

干扰素对新城疫灭活苗抗体滴度的影响

[目的]探讨干扰素对新城疫(ND)灭活苗抗体滴度的影响。[方法]将20只20日龄雏鸡随机分成A、B、C和D(CK)组,每组5只。分别皮下注射新城疫灭活疫苗0.5 ml/羽,同时给雏鸡注射高(4单位)、中(2单位)和低(1单位)剂量的干扰素,对照组不加,检测雏鸡新城疫病毒抗体滴度。[结果]结果表明,免疫7d后,高、中和低剂量组抗体水平一致,并开始上升,3组剂量组之间无明显差异;14 d后中剂量组水平稍高,与其他3组均差异显著,呈现一定的剂量差异;21 d后3组都升高,但中剂量组抗体水平最高,对照组与其他3组均有显著差异;在免疫28 d后4个组的抗体水平均下降,但中剂量组抗体水平仍最高。[结论]干扰素可提高新城疫抗体滴度,以中剂量添加效果最好。     

抗IBDV VP2单克隆抗体制备及其免疫学鉴定

采用不连续蔗糖密度梯度离心法纯化的鸡传染性法氏囊病病毒弱毒Gt株,并与Tj强毒株共同免疫BALB/c小鼠.利用淋巴细胞杂交瘤技术,取其脾细胞与SP2/0 骨髓瘤细胞进行融合, 经过3次筛选克隆, 获得8株具有分泌抗IBDV抗体的杂交瘤细胞系,并对8株单抗进行了分子生物学及免疫学方面的鉴定.间接ELISA显示获得的8株单抗只与IBDV有特异性的反应,Western-blotting表明,部分单抗能够特异地与Sf9细胞表达的VP2蛋白反应;中和试验表明8株单抗均具有中和活性,而且有3株中和效价在26以上.研究推测,8株单抗中有2株针对的表位为构象依赖性,其余6株单抗所针对的为线性中和性表位.     

生物表面活性剂的特性及其在环境污染治理中的应用

简要介绍了生物表面活性剂的特性,重点综述了生物表面活性剂在环境污染治理中的应用,最后提出了生物表面活性剂在环境治理中的发展前景。     

β干扰素及其研究进展

β干扰素是一种重要的I型干扰素,它是由成纤维细胞和白细胞所分泌的一种糖蛋白,在固有免疫和适应性免疫中起着重要的作用。文中从β干扰素的分子组成、生物学功能及其作用机制和商品化情况等方面,阐述了β干扰素的研究进展。     

我国异尖线虫病研究进展

异尖线虫病呈世界性分布,已成为重要的食源性人兽共患寄生虫病,严重威胁人类的健康,是我国禁止入境的二类寄生虫病。综述了异尖线虫病的病原学、生活史、地理分布、发病机制和临床症状,重点概括了国内海鱼体内异尖属线虫的感染、种类分布和国内尚未出现病例报道的原因,进一步强调异尖线虫病的防控对中国水产养殖业乃至全世界的重要性,并对今后的研究前景进行展望,以期为防控异尖线虫病奠定基础。     

Advances in Research and Development of the Botanical fungicide

概述了目前植物源杀菌剂植物资源、有效成分、构效关系、作用机理的研究现状。总体来讲,在具有抗菌活性植物资源筛选方面已经做了大量工作,但大多停留在植物初提物;有效成分的分离纯化、构效关系及作用机理的研究较少有待进一步深入。     

烤烟成熟度的研究进展

对烟叶成熟过程中的物理、化学变化和烟叶成熟采收标准、采收方法进行了综述,阐述了烟叶成熟度与烟叶质量的关系,并对成熟度的研究方向进行了展望。     

独行菜属植物的研究进展

对独行菜属植物的资源研究与利用情况进行了总体概述,重点总结独行菜属植物化学成分与耐逆生理生化机制研究的进展,并提出了今后一段时间对独行菜属植物资源研究与利用的思考。