应用复合荧光标记STR-PCR排除绒毛取材中母体细胞污染

[目的]探讨复合荧光标记STR-PCR鉴别胎儿取材中母体细胞污染的价值。[方法]复合荧光标记STR-PCR检测16个基因座,针对常见STR基因座进行多态性分析,比较52例待鉴定绒毛样品的谱带。[结果] 52例标本中,有46例无母体细胞污染,5例为母体细胞污染,1例是全部为母体细胞。鉴定结果与随访结果一致。[结论]用复合扩增荧光标记STR-PCR方法可准确判断胎儿取材中有无母亲DNA的污染。     

血浆游离DNA的STR分型检测研究

目的：探讨利用血浆中游离DNA进行短串联重复序列（short tandem repeat,STR）分型检测,解决法医学个体识别和亲权鉴定问题的可行性。方法采集36例无关健康个体EDTA-Na2抗凝血样,分离血浆,采用经典酚-氯仿法分别处理血浆和血细胞,对提取的DNA进行15个STR基因座常规PCR扩增和荧光标记复合扩增,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳检测2种STR分型方法进行检测。结果常规PCR扩增银染检测和荧光标记复合扩增毛细管电泳检测两种STR分型方法的结果表明,同一个体的血浆游离DNA和血细胞DNA STR分型一致,且分型效果接近。结论血浆游离DNA可作为一种有效的生物学样本进行STR分型检测,应用于法医个体识别和亲权鉴定。     

西安地区汉族人群13个STR基因座多态性分析

随着DNA分析技术的飞速发展及广泛应用,以多色荧光标记引物复合扩增短串联重复序列STR(short tandem repeat,STR)毛细管电泳及自动荧光扫描检测分析技术为主的STR基因座检测方法正在国内外迅速发展普及,已经广泛应用于个体识别、亲权鉴定。本研究用Profiler Plus和Cofiler两个荧光标记复合扩增系统分析了西安地区汉族人群13个STR基因座频率的遗传多态性分布。     

Identifiler体系在绒毛取样术中取材鉴定的应用

【目的】研究利用Identifiler体系对孕早期绒毛取材进行鉴定，以避免母体DNA的污染影响产前诊断的准确性。【方法】收集15例需行绒毛取样产前诊断的早孕期病人，用Identifiler体系的16基因位点进行检测病人外周血及绒毛DNA，判断绒毛DNA是否存在污染，从而决定是否利用绒毛进行产前基因诊断。【结果】检出2例存在母体DNA污染，于孕中期重新取羊水进行产前基因诊断．13例判断不存在污染的绒毛DNA进行基因诊断．其结果与出生后新生儿的结果完全符合。【结论】Identifiler体系在判断孕早期绒毛取样术取材的污染鉴定方面，有着非常准确的作用，可以考虑采用。     

浙江省汉族人群18-STR基因座的分型资料及其应用

【目的】 建立浙江地区汉族人群18个STR基因座(D8S1179､D21S11､D7S820､CSF1PO､D3S1358､TH01､D13S317､D16S539､D2S1338､D19S433､VWA､TPOX､D18S51､D5S818､FGA､PentaE､PentaD､SE33)的遗传多态性数据资料,并探讨18-STR鉴定分析系统在亲子鉴定､产前诊断等领域的应用｡ 【方法】 对浙江汉族598例无血缘关系个体,采用2组荧光标记STR-PCR复合扩增系统及毛细管电泳基因分型技术,获取18个STR基因座数据资料;在497个亲子鉴定案例中,比较18-STR与15-STR鉴定系统在亲子鉴定和产前诊断中的应用｡ 【结果】 18个STR基因座基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P > 0.05)｡18个STR基因座的杂合度在0.630 ~ 0.942之间,累积个体识别力大于0.9999999999,基因型分布与中国其它地区汉族人群存在差异｡与15-STR鉴定系统相比,18-STR鉴定系统更有利于二联体亲缘关系的认定及可疑突变的判断｡在胎儿亲子鉴定中偶然发现的1例21三体胎儿在D21S11､PentaD两个STR基因座出现了特征性峰型｡ 【结论】 18个STR基因座在浙江汉族人群中呈高度多态性,对法医学亲子关系的认定或排除具有较大价值,部分STR基因座的检测也有助于非整倍染色体的产前诊断｡     

Penta D/Penta E基因座在云南回族群体中基因多态性研究

目的获得2个短串联重复（short tandem repeat，STR）基因座（Penta D、Penta E）在云南回族人群中的基因型及等位片段频率分布，获得相应位点的群体遗传学数据。方法204份EDTA抗凝血样采自云南昆明地区无血缘关系的回族个体，利用荧光标记复合扩增及毛细管电泳自动荧光检测的方法，对该群体样本检测，获得2个STR基因座等位基因的分布频率等群体遗传学数据，并检验它们基因型频率分布是否符合Hardy—Weinberg平衡，计算法医学常用各种概率。结果全部样本的每个STR基因座都获得了清晰的基因型分型结果。2个STR基因座均符合Hardy—Weinberg平衡。结论获得2个STR基因底的基因型分型结果，适用于法医学亲权鉴定和个人识别，为人类群体遗传学研究提供了2个STR基因座的云南回族群体数据。     

DYS19,DYS391和DYS439基因座多态性研究

目的 :研究Y 染色体STR基因座在法医学实践中的应用价值 ,对 118名河南汉族男性无关个体的DYS19,DYS3 91,DYS43 9Y STR基因座多态性进行调查。方法 :应用荧光标记引物多重PCR技术和毛细管电泳技术。结果 :DYS19,DYS3 91,DYS43 9三个Y STR基因座分别检出 6,4,3个等位基因 ,三个基因座的基因多样性 (genediversity ,GD)分别为 0 72 17,0 475 4,0 5 780。 118名无关个体中发现 2 8种单倍型 ,其单倍型GD为 0 93 42。结论 :应用荧光标记Y STR复合扩增检验技术在实际检案中具有良好效果。     

一个新荧光标记复合扩增体系的建立及其法医学应用

目的建立扩增片段小于250bp的STR基因座D11S4951、D7S3062、GATA168F06、D10S1426的荧光标记复合扩增体系并进行法医学实用性研究。方法利用荧光标记引物和传统的复合扩增方法,建立一个新的、使用ABI-310毛细管电泳仪进行荧光标记复合PCR扩增的复合扩增体系,对该体系的灵敏度和准确度、基因座的种属特异性,组织同一性及可重复性进行研究,并使用该系统对西南地区人群进行遗传学特征调查。结果成功建立了由D11S4951、D7S3062、GATA168F06和D10S1426四个STR基因座组成的荧光标记复合扩增体系。本体系条件易于优化,成本低廉,效率较高,法医学应用性好。结论可以应用于个人识别和亲子鉴定,成为中国地区法医物证实践的良好补充。     

Prader-Willi综合征分子分型诊断方法的初步研究

【目的】探讨Prader—Willi综合征（PWS）的短串联重复序列（STR）连锁分析诊断方法，为遗传咨询提供相关信息。【方法】对一例临床疑似病例经甲基化特异性PCR（MS—PCR）确诊为PWS后．应用15号染色体特定区域的STR进行家系连锁分析，探讨其在PWS分子缺陷类型诊断方面的可行性。【结果】STR连锁分析结果显示该患者为父源缺失型PWS。【结论】STR连锁分析是一种可准确诊断PWS并明确其分子缺陷类型的好方法：国人相关区域的STR位点及其多态信息等有待进一步研究．以完善并最终建立该方法。     

Prader-Willi综合征分子分型诊断方法的初步研究

 【目的】探讨Prader—Willi综合征（PWS）的短串联重复序列（STR）连锁分析诊断方法，为遗传咨询提供相关信息。【方法】对一例临床疑似病例经甲基化特异性PCR（MS—PCR）确诊为PWS后．应用15号染色体特定区域的STR进行家系连锁分析，探讨其在PWS分子缺陷类型诊断方面的可行性。【结果】STR连锁分析结果显示该患者为父源缺失型PWS。【结论】STR连锁分析是一种可准确诊断PWS并明确其分子缺陷类型的好方法：国人相关区域的STR位点及其多态信息等有待进一步研究．以完善并最终建立该方法。     

杭州汉族人群17个 STR 基因座的遗传多态性调查及法医学应用

目的：调查17个 STR 基因座在杭州汉族人群中遗传多态性,为其法医学应用提供基础数据。方法采用 AGCU 17＋1 STR 荧光标记复合扩增试剂盒,对杭州汉族506份无关个体进行扩增,利用3130XL 遗传分析仪对扩增产物进行电泳分型,统计17个 STR 基因座的等位基因频率和法医学参数。结果17个 STR 基因座累积个人识别率0.999999999999999999996184739142和累积非父排除率分别为和0.9999999955351207。结论17个 STR基因座组成的复合扩增系统在杭州汉族人群中具有较高的遗传多态性和识别能力,可以应用于法医学个人识别和亲子鉴定。     

马鞍山地区汉族人群15个STR基因座遗传多态性调查

目的:调查292名马鞍山地区汉族无关个体15个STR基因座的等位基因类型及其频率。方法:用硅珠法提取DNA,采用AmpFISTR Identifiler荧光标记复合扩增系统进行复合扩增;扩增产物用ABI3130xl型遗传分析仪检测,得到STR分型结果后统计15个基因座的基因频率。结果:15个STR基因座,累计个人识别率达0.999 999 999 999 999 985,累计非父排除率为0.999 998 96。结论:该系统在马鞍山地区汉族人群中具有高度多态性,适用于法医学亲权鉴定、个体识别以及DNA数据库的建立。     

利用重新设计的引物对三个Y-STR基因座进行复合扩增

目的改良一种同步检测Y—STR基因座的方法。方法采用重新设计的Y—STR基因座引物，用优化的复合扩增技术同时扩增3个Y—STR基因座(DYS390、DYS391、DYS393)。结果成功地同步扩增出3个Y—STR基因座，将其中DYS391基因座的片段大小由279～287bp缩短至142～150bp，同时还提高了DYS393基因座的男性特异性。结论利用重新设计的Y—STR基因座引物进行复合扩增，为快速检测多个基因座提供了有效的途径，是法科学领域中一种值得推荐的方法。     

混合斑的DNA鉴定

目的：探讨性犯罪中混合斑的PCR－STR分型鉴定技术，获得可靠的精子DNA分型，从而认定或排除作案嫌疑人，方法：用差异消化法分离混合斑提取精子DNA，多STR基因座同步PCR扩增，PAGE电泳分离，完成混合斑个人识别鉴定35例。结果：PCR－STR分型成功34例（97．143％），认定嫌疑人作案21例（60．00％），排除嫌疑人作案13例（37．143％），分型失败1例（2．857％），结论：差异消化法分离混合斑提取精子DNA进行PCR－STR分型结果满意，10个STR基因座分型相同，偶合概率小于10^-10，认定嫌疑人作案。     

汉族人群Y染色体多拷贝基因座DYS464遗传多态性

【目的】 研究Y染色体多拷贝基因座DYS464遗传多态性在汉族群体中的分布规律。【方法】 选择106例汉族无亲缘关系男性个体作为研究对象，荧光标记引物PCR扩增DYS464基因座片段，ABl377自动测序仪上变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析PCR产物，并对不同重复序列分别测序。【结果】 DYS464基因座在106例汉族男性无关个体中发现有8种片段。变异11～18次。根据其中任意4种片段的组合，即片段大小和峰高的比率来命名等位基因，E-型命名方法，观察到61种等位基因，其中36种等位基因只出现1次。基因多样性和个体识别力分别为0．9853和0．9760，比目前报道的单个Y-STR基因座的多态性都高。【结论】 多拷贝基因座DYS464具有高度多态性，非常适于法医学实践和人类进化的研究。     

6个STR基因座在广东潮汕地区汉族人群多态性研究

目的调查6个STR基因座在中国广东潮汕地区汉族人群中的基因频率分布。方法应用四色荧光标记引物复合扩增技术对251名广东潮汕地区汉族无关个体血样的6个STR基因座进行多态性研究。结果在广东潮汕地区汉族人群中6个STR基因座个体识别概率在0．798到0．925之间，杂合度在0．645到0．765之间，多态性信息含量在0．567到0．758之间。6个STR个体识别概率基因座总值为0．999994。所有基因座经x^2检验符合Hard～Weinberg平衡。结论上述6个STR基因座在广东潮汕地区汉族人群中等位基因分布较好，个体识别率高，适合法医个体识别和亲子鉴定。     

常染色体STR鉴定同胞的应用探讨

 【目的】探讨常染色体STR遗传标记鉴定两个体同胞关系的可行性。【方法】用PowerPlex^TM 16体系15个常染色体STR基因座检测50对全同胞、25对半同胞和50对无关个体，ITO法计算全同胞关系指数（PSI）、半同胞关系指数（HSI）和PSI：HSI值，比较3组两个体间等位基因匹配情况，并进行组间差异的x^2检验。【结果】全同胞的FSI均大于1；19对半同胞的HSI大于1；无关个体FSI均小于1；49对无关个体HSI小于1，1对为1．297。46对全同胞的FSI：HSI值大于1，22对半同胞的FSI：HSI值小于1。全同胞组两个体间1对等位基因全相同、半相同、全不同的基因座数平均值分别为6．06个、7．52个、1．42个；半同胞组分别为2．96个、8．48个、3．56个；无关个体组分别为1．24个、7．22个、6．54个。x^2检验3组两个体间1对等位基因全相同和全不同的基因座数差异有显著意义，半相同的基因座数差异无显著意义。【结论】PowerPlex^TM 16体系在全同胞一无关个体的鉴定中效率较高，在鉴定半同胞一无关个体或全同胞一半同胞时效率降低。全同胞一半同胞关系鉴定时，PSI：HSI值是一个较有效的指标：大于1倾向于为全同胞，小于1倾向于为半同胞。     

常染色体STR鉴定同胞的应用探讨

【目的】探讨常染色体STR遗传标记鉴定两个体同胞关系的可行性。【方法】用PowerPlex^TM 16体系15个常染色体STR基因座检测50对全同胞、25对半同胞和50对无关个体，ITO法计算全同胞关系指数（PSI）、半同胞关系指数（HSI）和PSI：HSI值，比较3组两个体间等位基因匹配情况，并进行组间差异的x^2检验。【结果】全同胞的FSI均大于1；19对半同胞的HSI大于1；无关个体FSI均小于1；49对无关个体HSI小于1，1对为1．297。46对全同胞的FSI：HSI值大于1，22对半同胞的FSI：HSI值小于1。全同胞组两个体间1对等位基因全相同、半相同、全不同的基因座数平均值分别为6．06个、7．52个、1．42个；半同胞组分别为2．96个、8．48个、3．56个；无关个体组分别为1．24个、7．22个、6．54个。x^2检验3组两个体间1对等位基因全相同和全不同的基因座数差异有显著意义，半相同的基因座数差异无显著意义。【结论】PowerPlex^TM 16体系在全同胞一无关个体的鉴定中效率较高，在鉴定半同胞一无关个体或全同胞一半同胞时效率降低。全同胞一半同胞关系鉴定时，PSI：HSI值是一个较有效的指标：大于1倾向于为全同胞，小于1倾向于为半同胞。     

用荧光复合扩增体系检测5个X染色体短串联重复 序列基因座的多态性

 【目的】 为了研究X染色体短串联重复序列(X-STR)基因座的遗传多态性,我们检测了DXS6803､DXS981､DXS6809､DXS6789和DXS7132 5个基因座在广东汉族人群中的多态性｡ 【方法】 利用荧光标记引物PCR技术复合扩增上述5个基因座,并用ABI PRISM 3100毛细管电泳及GeneMapper ID3.1软件进行基因分型｡【结果】 在363个广东汉族无关个体(男性:181个,女性:182个)中5个基因座共检出54个等位基因｡多态性信息含量为0.6935 ~ 0.8177;女性个体识别率为0.8976 ~ 0.9562｡三联体非父排除率为0.7805 ~ 0.8467｡【结论】 这5个基因座多态性较高,在个体识别和亲权鉴定中具有重要的应用价值｡     

Identifiler & STRtyper-10F/G系统在单亲亲子鉴定中的应用分析

目的应用AmpFISTR IdentifilerTM和STRtyper-10F/G PCR扩增试剂盒,检测195例亲子鉴定案例,分析2个系统在单亲亲子鉴定中的应用价值。方法采用Chelex-100法提取全血基因组DNA,通过IdentifilerTM和STRtyper荧光标记试剂盒对24个STR基因座进行检测,判定基因分型。结果 195例单亲亲子鉴定中,认定亲生血缘关系182例(93.33%),累计PI值大于或等于10 000,RCP>99.999 9%。排除亲生血缘关系13例(6.67%),排除STR位点数5~16范围。在IdentifilerTM检测系统中,1个案例的vWA出现一步突变,1/182(0.55%),其他基因座检测结果均符合遗传规律。结论应用Identifiler和STRtyper系统的24个STR基因座进行DNA亲权鉴定,能准确地提高亲子鉴定判断结果,有效力地避免错误判性发生。