雷藤氯内酯醇的半合成研究——雷公藤内酯醇和雷公藤内酯酮的结构改造

通过HCl对雷公藤内酯醇(triptolide)的12-C进行选择性亲核进攻,将雷公藤植物中分离获得的雷公藤内酯醇(triptolide)和雷公藤内酯酮(triptonide)结构,改造为具有强抗炎、免疫抑制和雄性抗生育活性的雷藤氯内酯醇(tripchlorolide)。并通过二维NMR谱和选择性远程DFPT等图谱分析,归属了雷公藤内酯醇、雷公藤内酯酮和表雷公藤内酯醇(epitriptolide)NMR谱的全部碳和氢的信号。     

雷公藤中雷藤氯内酯醇（T4）的分离与结构测定

A new compound named tripchlorolide was isolated from Total Glucosides (T II) extracted from the woody part of the root of Tripterygium wilfordii Hook. f. Tripchlorolide (T4) was obtained as white needle-like crystals, mp 256-258 degrees C. Its molecular formula is C20H25O6Cl. The structure of T4 was elucidated on the basis of spectral (UV, IR, MS, FTMS/SCI, 1H-NMR, 13C-NMR, 1H-1H cosy, 13C-1H cosy) analyses, X-ray and chemical evidence. In preliminary pharmacologic assay, tripchlorolide showed definite anti-inflammatory actions and strong immunosuppressive and antifertile activities, the potency of the latter being 100 times stronger than that of T II.     

HPLC法测定雷公藤内酯醇和内酯酮的含量

目的 测定雷公藤内酯醇和内酯酮的含量. 方法采用高效液相色谱法(HPLC法),色谱柱:Diamonsil C18(2)柱,流动相:乙腈—水[25:75( 10 min)→45:55( 15 min)→45:55(20 min)],流速:1mL/min,检测波长:218nm. 结果 在此色谱条件下,2种成分可以完...     

雷藤氯内酯醇对大鼠睾丸间质细胞的影响

20只雄性SD大鼠随机分成二组.用药组(n=10)灌报雷藤氯内酯醇,剂量为每日50μg/kg混悬于1%CMC中.对照组(n=10)灌服等量1%CMC.每周用药6天,灌药6周后雄性大鼠生育力降至零时取材实验.结果表明:与对照组相比,用药组睾酮靶器官睾丸及前列腺的重量,血清睾酮含量及睾丸间质细胞的形态均无明显变化.体外培养雷藤氯内酯醇对睾丸间质细胞产生睾酮的抑制作用不随药物浓度增加而改变.用药组睾丸间质细胞睾酮基础分泌量和HCG刺激后分泌量均明显下降.据此作者认为,抗生育剂量雷藤党内酯醇对大鼠睾丸间质细胞有轻度抑制作用.     

雷藤氯内酯醇（T4）的抗生育作用机理

雷藤氯内酯醇（Ｔ_４）的抗生育作用机理左晓春，王乃功（中国医学科学院，中国协和医科大学，药物研究所，北京１０００５０）雷藤氯内酯醇（Ｔ４）是在分离雷公藤单体过程中得到的一个含氯单体［１］，它具有雷公藤多甙的抗炎免疫抑制和抗生育活性，其抗生育活性效价约?..     

雷藤氯内酯醇对围产期小鼠内脏器官及其胎鼠的影响

给围产期昆明鼠喂服０．６及０，３ｍｇ·ｋｇ~（－１）／ｄ的雷藤氯内酯醇（Ｔ４），可导致部分母鼠产后泌乳减少，仔鼠缺奶死亡；引起母鼠肝脏线粒体损伤，琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）活性分布改变，糖原合成减少，肝细胞空泡变性；肾脏小管细胞空泡变性；但不引起心脏、脾脏的病理改变。另于雌鼠怀孕第５天喂服Ｔ_４，于孕第１７天取材，用药组吸收胎及死胎未见高于对照组，亦未发现明显的宫内发育畸形。本实验说明Ｔ_４确是一种对胚胎毒性小的药物。     

雷藤氯内酯醇对雄性猕猴的抗生育药效及可复性观察

观察了雷公藤单体雷藤氯内酯醇 (T4)对雄性猕猴的抗生育作用及其可逆性。 1 2只性成熟雄性猴等分 4组 ,口服 T4剂量分别为 5 0、2 5、1 0、0μg· (kg· d) - 1,每周 6次 ,连续8周。 3个剂量组猕猴分别于给药第 8、7、5周其射出精液达到死精、无精、或严重寡精 (<1× 1 0 6 / ml)。射出精子最先出现的改变是颈体弯曲、继之头尾分离、但头部形态基本正常。给药期间各受试猴自发射精频率、电刺激射精反应、精液量、睾丸容积、血清睾酮水平及精浆果糖浓度等与对照组相比 ,没有显著差异。精浆肉毒碱浓度有变化但不甚规律。 3个剂量组猕猴分别于停药后 1 0、8、4周其射出精子密度和活率恢复到药前水平。交配试验亦证实各受试猴已恢复使雌猴受孕的能力。表明 T4对雄性猕猴具有明显的抗生育药效而且是可逆的     

HPLC法测定雷公藤内酯醇生物贴中雷公藤内酯醇

目的 建立雷公藤内酯醇生物贴的质量标准,雷公藤内酯醇生物贴中雷公藤内酯醇的定量测定方法。方法 雷公藤内酯醇生物贴经甲醇超声提取。色谱柱为Agilent Zorbax SBC₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为乙腈-水(3∶7)，检测波长为220 nm。结果 雷公藤内酯醇在5～120 μg/mL，线性关系良好(r＝0.9981)。平均回收率96.5%(n＝9)。RSD＜3%。结论 本方法重现性好，灵敏度高。     

毛细管气相色谱法测定不同产地雷公藤中雷公藤甲素的含量

建立了雷公藤中雷公藤甲素的柱前衍生化毛细管气相色谱分析法,测定了15个不同产地雷公藤去皮根和7种雷公藤根皮中雷公藤甲素的含量。供试品用氯仿提取,酸处理除去生物碱,经重氮甲烷甲酯化,三甲基硅基咪唑衍生化后直接进行气相色谱分析,正三十六烷为内标,线性范围为25—75μg/ml,最低检测量为25ng,相对标准差为9.2%。     

雷公藤内酯醇对红白血病K562细胞株增殖和凋亡的影响

目的探讨雷公藤内酯醇对人类红白血病K562细胞株增殖和凋亡的影响。方法运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞术(FCM)等检测雷公藤内酯醇对K562细胞株增殖和凋亡的影响。结果雷公藤内酯醇能明显抑制K562细胞的增殖,呈时间与剂量依赖性,作用24h时其半数抑制浓度IC50为25nmol/L。且经雷公藤内酯醇处理后K562细胞G1/S期所占的百分比较对照组上升(P<0.05)。雷公藤内酯醇作用48h,其浓度的变化与K562细胞凋亡率具有相关性(r=0.97,P<0.05),而作用24h时,则无明显诱导凋亡的作用。结论雷公藤内酯醇有明确的抗白血病细胞增殖的能力,干扰K562细胞周期,上调细胞G/S期检测点,并具有促进细胞凋亡的作用。     

HPLC法测定双藤痹痛凝胶膏剂中雷公藤甲素和青藤碱的含量

目的控制双藤痹痛凝胶膏剂的质量。方法用HPLC法测定双藤痹痛凝胶膏剂中雷公藤甲素和青藤碱的含量。结果雷公藤甲素的线性范围为1.5216~15.2160μg/mL,平均回收率为98.07%;青藤碱的线性范围为8.5524~85.5240μg/mL,平均回收率为98.32%。结论 HPLC法操作简便快速,结果准确,重现性好,可用于双藤痹痛凝胶膏剂的质量控制。     

雷公藤甲素与双氢青蒿素配伍对大鼠佐剂性关节炎的免疫学研究

目的：从病理及免疫学的角度观察小剂量的雷公藤甲素与双氢青蒿素配伍对大鼠佐剂性关节炎的影响,探讨能否通过减少雷公藤甲素的用量而降低药物的毒性。方法：将70只雄性SD大鼠随机分为7组（即正常组,模型组,雷公藤甲素高、低剂量组,雷公藤甲素双氢青蒿素高、中、低剂量组）。动物模型用弗氏完全佐剂于SD大鼠右后足跖皮内诱导关节炎发生。给药组治疗1个月后取血并处死动物,取关节进行病理学分析,并运用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群、免疫组化染色法检测踝关节软骨上的IL-6、TNF-α的表达。结果：与模型组相比,雷公藤甲素双氢青蒿素配伍可明显抑制AA大鼠的关节病理损伤,能显著降低外周血CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋水平及降低踝关节软骨上的IL-6、TNF-α的表达（P〈0.01）,且与雷公藤甲素高剂量组比较则无差异（P〉0.05）,优于雷公藤甲素低剂量组（P〈0.05）。结论：通过与双氢青蒿素配伍可以减少雷公藤甲素的用量。     

雷公藤内酯醇对胶原诱导的大鼠关节炎关节腔和外周血清中细胞因子的影响

目的:观察雷公藤内酯醇对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠外周血清和关节腔中IL-6、IL-10、TNFα的影响,探讨雷公藤内酯醇治疗CIA的可能机制。方法:以胶原诱导的W istar大鼠关节炎为动物模型,将模型复制成功的20只大鼠随机分为模型组和雷公藤内酯醇组。雷公藤内酯醇按40μg/kg BW肌注给药,每3 d 1次,31 d处死动物,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清和膝关节腔液中TNFα、IL-6和IL-10含量。结果:与正常对照组大鼠相比,CIA模型大鼠关节腔液和血清中TNFα、IL-6含量升高IL-10含量降低(P<0.01),经过雷公藤内酯醇治疗后,关节腔液和血清中TNFα、IL-6含量降低,IL-10含量升高,模型组与治疗组相比,差异有显著性(P<0.01)。结论:雷公藤内酯醇可能通过调节细胞因子变化而达到治疗CIA,这也可能是雷公藤治疗类风湿关节炎的机制之一。     

雷公藤甲素对大鼠脑皮质Fas蛋白表达的影响及时间节律性研究

目的:本实验观察雷公藤甲素对大鼠脑皮质Fas蛋白表达的影响并探讨其时间节律性,为临床合理用药提供实验数据和理论依据。方法:雄性SD大鼠40只随机分为4组,包括空白对照组;雷公藤甲素Ⅰ组20μg/kg,bid(8am,8pm);雷公藤甲素Ⅱ组40μg/kg,qd(8am);雷公藤甲素Ⅲ组40μg/kg,qd(8pm)。连续灌胃7周后断头处死,用免疫细胞化学染色法观察大鼠脑皮质Fas蛋白的表达变化。结果:雷公藤甲素Ⅰ组大鼠脑皮质FAS蛋白的免疫反应的表达最高,雷公藤甲素Ⅲ组FAS蛋白的免疫反应仅次于雷公藤甲素Ⅰ组,而雷公藤甲素Ⅱ组仅可见少量表达;空白对照组未见大鼠脑皮质FAS蛋白的免疫反应。结论:雷公藤甲素可通过死亡受体介导细胞凋亡的途径诱导细胞凋亡,从而发挥其抗肿瘤、免疫抑制作用,且雷公藤甲素的作用具有时间节律性。