乳杆菌胞外多糖抗氧化活性研究

从本实验室保藏的8株产胞外多糖的乳杆菌:干酪乳杆菌-Y3,干酪乳杆菌-Y4,干酪乳杆菌-Y16,植物乳杆菌-Y41,植物乳杆菌-Y42,植物乳杆菌-Y44,干酪乳杆菌-Y35,鼠李糖乳杆菌LGG中,筛选出1株产抗氧化活性多糖的菌株,评价其抗氧化性并分析其结构。采用酸沉醇提法从8株乳杆菌的MRS培养液中提取胞外多糖,并用苯酚硫酸法和考马斯亮蓝法测定粗多糖和蛋白含量,同时测定胞外多糖的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)清除率、2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)自由基(ABTS)清除率、羟自由基(·OH)清除率、铁离子还原力(FRAP)、氧自由基吸收能力(ORAC)及对ABAP氧化损伤HT-29细胞的保护作用,以评价8株菌胞外多糖抗氧化活性。通过主成分分析法得到产高抗氧化活性胞外多糖的菌株为Y42。进一步研究发现:随着菌株Y42胞外多糖作用浓度的降低,对ABAP氧化损伤HT-29细胞的保护作用降低,然而都显著高于氧化损伤组(P0.05)。菌株Y42胞外多糖显著上调HT-29细胞过氧化物酶和超氧化物歧化酶的表达量(P0.05),HT-29细胞内谷胱甘肽过氧化物酶活性也显著高于氧化组(P0.05)。菌株Y42胞外多糖由中性多糖和酸性多糖组成,其单糖组成为甘露糖、葡萄糖醛酸、氨基葡萄糖、氨基半乳糖、半乳糖,它们的物质的量比为11.30∶3.51∶10.64∶7.53∶7.19。红外光谱扫描显示菌株Y42胞外多糖具有典型的特征吸收峰,属于吡喃糖环的骨架模式。     

植物乳杆菌发酵马齿苋陈皮工艺优化及发酵液抗氧化活性分析

研究植物乳杆菌发酵马齿苋陈皮的工艺条件及发酵液的抗氧化活性。以总黄酮含量为指标,通过试验确定发酵工艺;通过测定DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率和还原力,评价其抗氧化活性。结果表明发酵最佳工艺为发酵时间32 h,料液比1∶20（g/mL）,菌种接种量3%,发酵温度33℃。在最佳发酵工艺条件下所得发酵液的总黄酮含量为0.69 mg/mL,比发酵前总黄酮含量（0.52 mg/mL）提高了32.69%;发酵液DPPH自由基清除率提高了8.84%,羟基自由基清除率提高了38.14%,还原力提高了26.64%。     

植物乳杆菌NDC75017抗氧化活性研究

目的：研究酸奶中所筛选的植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）NDC75017在不同体系中的抗氧化作用模式。方法：测定了活细胞、无细胞提取物、胞外分泌物及菌体灭活物质的自由基清除能力、总抗氧化能力（totalantioxidant capacity,T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）、总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）活性、还原能力和金属离子螯合能力。结果：株菌能够耐受一定浓度的过氧化氢（H2O2）,无细胞提取物的超氧阴离子自由基（O2－•）和DPPH自由基清除能力最强,胞外分泌物的羟自由基（•OH）清除作用最好。无细胞提取物和胞外分泌物的T-AOC效果最佳,与另外两组差异显著（P＜0.05）。胞外分泌物的GSH-Px和T-SOD酶活性最高,明显比无细胞提取物和菌体灭活组效果好（P＜0.05）。4 组样品都具有还原能力和金属离子螯合能力,但Cu2+螯合能力不如Fe2+螯合能力效果好。结论：菌株具有抗氧化活性,其抗氧化本质可能与其具有金属离子螯合能力、提供电子和清除自由基等作用模式有关。     

副干酪乳杆菌胞外多糖抗氧化活性分析

为评价干酪乳杆菌生物合成胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)抗氧化活性,本文分离纯化高产胞外多糖的三株副干酪乳杆菌(3号、5号和7号)的胞外多糖,并对其DPPH·、·OH和O₂^-清除率分别进行测定,评价其体外抗氧化活性。通过分析EPS对H₂O₂诱导氧化损伤293T细胞的保护作用,评价其胞内抗氧化活性。结果表明,当EPS浓度为400 μg/mL时,其DPPH·、·OH和O₂^-的清除率最高,分别为8.87%(5号)、88.94%(7号)和34.55%(7号),其中对·OH清除能力高于抗坏血酸(65.87%),且三株菌株之间没有明显差异。3号副干酪乳杆菌所产EPS显著提高超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)活性并抑制了丙二醛(MDA)的生成(P<0.05),且与多糖浓度呈正相关。因此,3株副干酪乳杆菌胞外多糖具有良好的抗氧化活性,作为天然抗氧化剂具有良好的应用潜力。     

植物乳杆菌C88联合人参多糖的免疫调节作用

以环磷酰胺诱导昆明小鼠建立免疫抑制模型后,分别给其灌胃人参多糖、人参多糖联合植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）C88。实验结束后,采用酶联免疫吸附实验检测了小鼠血清中的白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）、白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）、白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）、干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、免疫球蛋白G（immunoglobulin G,IgG）,并利用碳廓清法检测了小鼠吞噬细胞吞噬能力,评价了人参多糖（water-soluble ginseng polysaccharides,WGPA）联合植物乳杆菌C88的体内免疫调节作用。结果表明WGPA联合益生菌C88可明显增强免疫抑制小鼠吞噬细胞的吞噬能力和迟发型超敏反应,显著上调血清中IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α、IgG水平,下调IL-10水平,并呈现剂量依赖性,且联合用药组的作用明显强于人参多糖WGPA单独用药组。综上所述,植物乳杆菌C88联合人参多糖可以发挥一定的免疫调节作用。     

不同益生元对植物乳杆菌生长的影响

研究不同益生元对植物乳杆菌在不同培养条件下的促增殖作用。选用5株生理特性不同的植物乳杆菌为研究对象,利用Bioscreen检测它们的生长情况,进一步通过Baranyi模型拟合曲线,从而得到最大比生长速率和迟滞期。结果表明:在MRS培养基下,添加5种不同的益生元对植物乳杆菌无明显促增殖作用;在以益生元替代葡萄糖作为碳源的MRS培养基中,植物乳杆菌对不同的益生元具有选择偏好性,且具有菌株特异性;在模拟肠道体系下,与对照相比,益生元能明显促进所有植物乳杆菌的增长,其中低聚果糖与低聚半乳糖最优。实验结论显示,模拟肠道体系可以作为最精确和快速的益生元筛选体系。     

植物乳杆菌生物转化南瓜多糖工艺优化

目的：提高南瓜多糖抗氧化性。方法：分别考察温度、料液比(m南瓜粉∶V蒸馏水)、接种量、摇床转速4个因素对生物转化南瓜多糖提取率的影响,并研究南瓜多糖对DPPH自由基的清除能力。结果：植物乳杆菌生物转化南瓜多糖的最优工艺条件为温度37 ℃,接种量1%,料液比1∶30 (g/mL),摇床转速100 r/min,此条件下的植物乳杆菌生物转化南瓜多糖对DPPH自由基的清除率为(54.61±1.58)%,其体外抗氧化活性显著高于南瓜多糖。结论：采用植物乳杆菌nbkBC299进行生物转化能提高南瓜多糖的抗氧化活性。     

植物乳杆菌发酵对猕猴桃抗氧化物质含量及抗氧化活性的影响

该文研究了植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）发酵对猕猴桃果浆理化指标、抗氧化物质（总酚酸、总黄酮、维生素C）含量和抗氧化能力的影响,分析抗氧化物质与抗氧化能力之间的相关性,并采用液质联用（LC-MS）仪对其酚酸和黄酮的组成进行测定。结果表明,与发酵前相比,猕猴桃果浆中植物乳杆菌（L. plantarum）活菌数、总酸含量升高,pH值下降;发酵后猕猴桃果浆对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基和2,2'-联氮-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺盐（ABTS）自由基的清除能力分别提高了60.82%、26.72%;总酚酸和总黄酮的含量分别提高了62.89%、68.97%;DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力与总酚酸、总黄酮的含量呈显著正相关（P＜0.05）;植物乳杆菌发酵后的猕猴桃果浆中新生成了2,6-二羟基香豆素、芥子酸和原儿茶酸,咖啡酸则未检出。     

基于非靶向代谢组学技术筛选植物乳植杆菌P9抑黄曲霉物质

为解析共培养下植物乳植杆菌P9代谢产生的抑黄曲霉物质,本研究将植物乳植杆菌P9与黄曲霉进行共培养处理,分析植物乳植杆菌P9单菌及共培养中活菌数的差异,依据活菌数差异,分别在共培养9 h和13 h取样,进行非靶向代谢组学分析,并对取样点的差异代谢物及其通路富集情况进行研究。结果显示:共培养下植物乳植杆菌P9可以显著抑制黄曲霉,共培养产生的差异代谢物主要集中在能量代谢途径,包括:糖酵解/糖异生途径,柠檬酸循环,丙酮酸代谢途径,氨基酸代谢途径,叶酸生物合成途径及有机酸代谢途径。与已报道的植物乳植杆菌产生的抑菌物质进行比对,鉴定到的差异代谢物中可能对黄曲霉起拮抗作用的物质主要为2-氨基-3-羟基丁酸、十六烷酸、2,3-二羟基苯甲酸等有机酸,以及杆菌肽等氨基酸类物质,本研究为深入探寻植物乳植杆菌抑黄曲霉物质提供参考。     

发酵乳杆菌CECT 5716产胞外多糖培养基成分优化及抗氧化活性研究

采用单因素和正交试验对发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)CECT 5716产胞外多糖(EPS)的培养基成分进行优化,并通过评价胞外多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基的清除活性以及其总抗氧化能力和Fe³⁺总还原力考察胞外多糖的抗氧化活性。结果表明,发酵乳杆菌CECT 5716产胞外多糖的最优培养基配方：麦芽糖2.0%、蔗糖1.0%、酵母膏2.5%、L-半胱氨酸盐酸盐0.2%、乙酸钠0.5%、磷酸氢二钾0.2%、硫酸镁0.02%、硫酸锰0.005%、柠檬酸氢二胺0.2%、吐温80 0.1%。在此条件下,EPS产量为(1 575±22.91)mg/L,是优化前的6.38倍。胞外多糖具有较好的抗氧化活性,并与其质量浓度成正比,当胞外多糖的质量浓度为8 mg/m L时,对DPPH自由基的清除率为(84.17±1.30)%、对ABTS自由基的清除率为(35.37±1.24)%,总抗氧化能力为0.31±0.01、Fe³⁺总还原力为0....     

蒸汽爆破预处理对粉葛总黄酮及抗氧化性的影响

实验选取爆破压力1.0、2.0 MPa,维持压力时间30、40、60、80 s,对粉葛进行预处理。利用紫外分光光度法表征爆破前后总黄酮的变化,旨在探讨蒸汽爆破预处理对粉葛总黄酮及抗氧化性的影响。抗氧化活性利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）清除率进行评价。结果表明：经过蒸汽爆破预处理后,粉葛的总黄酮提取量、甲醇提取物得率和抗氧化性得到显著提高。在最优处理条件下,总黄酮（以葛根素计）提取量达到5.43 mg/g,是未经预处理粉葛提取量的2.32 倍;甲醇提取物得率为16.92%;抗氧化活性得到显著增加,DPPH清除活性的半数抑制浓度（50% inhibitory concentration,IC50）由30.65 g/L降低至10.10 g/L。将蒸汽爆破预处理应用于粉葛活性物质的提取,可实现提取量和抗氧化能力的有效提高。     

Production of bioactive peptides from tomato seed isolate by Lactobacillus plantarum fermentation and enhancement of antioxidant activity

Tomato seed contains proteins of high nutritional value and nutraceutical properties, which can be recovered for application as food additives. In this study, we investigated the use of a Lactobacillus plantarum strain to obtain high-added-value peptides from the fermentation process using tomato seed meal extract as the substrate. Potentially tomato seed meal extract have antioxidant activity which is correlated to the amino acid structures, compositions and sequences. After 24 h of fermentation, the radical scavenging activity of the isolated extract was increased by 87%. The increase of antioxidant activity is potentially attributed to the production of different bioactive peptides bio transformed during fermentation. L. plantarum growth on tomato seed meal extract as substrate reduced content of crude and soluble proteins by 18.44% and 68.99%, respectively, after 24 h of fermentation. Gel filtration chromatography showed a depolymerization of high molecular weight of polymers. HPLC analysis showed a significant decrease in the concentration of total amino acids, especially glutamic acid and aspartic acid. FTIR results showed that the fermentation favors the production of new amides and aromatic compounds. The production of protease by L. plantarum was investigated and results showed that highest activity (401.45 U/ml) were obtained after 20 h of fermentation. Results confirmed that L. plantarum could degrade and convert tomato seed proteins into bioactive peptides that contributed positively to the improvement of antioxidant activity of the protein isolate.     

一株植物乳杆菌体外抗氧化和耐药性的研究

目的:研究了植物乳杆菌KLDS 1.0386的体外抗氧化能力和10种抗生素的敏感性。方法:以过氧化氢耐受性、DPPH自由基清除力、羟自由基清除力、超氧阴离子清除能力、抗脂质过氧化能力、还原能力和螯合金属离子能力为指标进行体外抗氧化评定;检测KLDS 1.0386对β-内酰胺类、碳青霉烯类、糖肽类、氨基糖苷类、大环内酯类、林可酰胺类和酰胺醇类抗生素的敏感性。结果:KLDS 1.0386菌悬液、菌体菌体细胞破碎液和发酵上清液三者对比,菌悬液的抗氧化能力最佳;在抗生素敏感性上,植物乳杆菌KLDS 1.0386对氨苄西林、青霉素、亚胺培南、庆大霉素、红霉素和四环素表现为敏感;对万古霉素、卡那霉素、克林霉素和氯霉素表现为耐受。结论:实验获得一株具有潜在抗氧化能力和耐药性的植物乳杆菌。      

鼠李糖乳杆菌发酵液中水溶蛋白的提取及其抗氧化活性研究

采用硫酸铵沉淀法获得鼠李糖乳杆菌B10发酵液中水溶蛋白粗提物,并进行葡聚糖凝胶SephadexG-100柱纯化,分离得到不同的蛋白组分峰Ⅰ、峰Ⅱ和峰Ⅲ,分别对各组分DPPH自由基清除能力、清除超氧自由基(O2-·)和羟自由基(·OH)的能力及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性进行分析。结果表明,纯化前后各样品均对DPPH·有清除作用,其中纯化后的峰Ⅰ对DPPH·清除能力最强,峰Ⅱ、峰Ⅲ次之,均高于水溶蛋白粗提物;纯化后的峰Ⅰ对O2-·和·OH的清除能力最强,均高于5mmol/L的Vc溶液和水溶蛋白粗提物对O2-·和·OH的清除作用,峰Ⅱ和峰Ⅲ均未检测到对O-·和·OH的清除能力。     

植物乳杆菌与酿酒酵母共发酵对薏仁米发酵液品质及抗氧化活性的增效性

该文研究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,LP)与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae,SC)共发酵对薏仁米发酵液的品质和抗氧化活性的增效性。以基础理化特性(pH、总酸、还原糖和可溶性蛋白)、有机酸、多肽分子质量分布、游离氨基酸、总黄酮、总多酚、总三萜和可溶性膳食纤维等物质的含量及体外抗氧化活性为指标,比较分析LP、SC和LP与SC共发酵(LP+SC)薏仁米发酵液的差异。结果表明,与LP组和SC组相比,发酵结束后LP+SC组的pH分别降低了2.22%(P>0.05)和30.89%(P<0.05)、还原糖含量分别降低了23.79%(P>0.05)和49.87%(P<0.05)、可溶性蛋白含量分别降低了28.81%(P<0.05)和8.69%(P>0.05)、总酸含量分别提高了9.89%(P<0.05)和521.15%(P<0.05)、总黄酮含量分别提高了27.15%(P<0.05)和13.06%(P<0.05)、总多酚含量分别提高了6.35%(P>0.05)和13.59%(P...     

粉葛多糖改善金黄地鼠非酒精性脂肪肝及对肠道菌群的调节作用

目的 研究粉葛多糖对高脂饮食诱导的金黄地鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholicfattyliverdisease,NAFLD)的改善作用及与肠道菌群的关系。方法 金黄地鼠随机分为空白组、高脂模型组、粉葛多糖高剂量组(100 mg/kg)、粉葛多糖低剂量组(50 mg/kg)。15周后,测定肝脏质量、肝指数、血脂及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)水平,肝脏及结肠切片苏木素-伊红染色,结肠内容物16S rRNA测序。结果 与高脂模型组相比,粉葛多糖显著降低了肝脏质量及肝指数,改善了总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平,甘油三酯及LPS水平显著降低,可改善肠道屏障损伤及肝脏脂肪变性;在肠道菌群门水平上,粉葛多糖能降低肠源性LPS主要来源菌门Proteobacteria的相对丰度至0.05%,在属水平上,粉葛多糖能促进与肥胖呈负相关的Parabacteroides及与肠道黏膜修复相关的Lachnospiraceae NK4A136 group富集。结论 粉葛多糖可能通过调节肠道菌群改善高脂饮食诱导的金黄地鼠NAFLD。     

低聚半乳糖对植物乳杆菌生长及部分代谢的影响

以一株能产细菌素的植物乳杆菌KLDS1.0391为研究对象,将MRS培养基中的葡萄糖用等量的低聚半乳糖替代,采用体外发酵方式,研究37℃培养36 h过程中活菌数、p H和滴定酸度的变化,同时分别测定培养28 h和24 h时有机酸和细菌素的产量。结果表明:随培养时间的延长,培养物的p H先迅速下降,至12 h后下降速度逐步平稳,以低聚半乳糖作为碳源时促生长作用显著高于葡萄糖(p<0.05),且菌体衰退较为缓慢。而且该菌株代谢低聚半乳糖时所产生的有机酸及抑菌活性均更高,其中有机酸主要为乳酸、乙酸和丙酸。      

植物乳杆菌发酵对沙棘原浆主要成分、抗氧化性及挥发性物质的影响

以沙棘原浆为原料,选用植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）ATCC 14917进行发酵,研究苹果酸-乳酸发酵（MLF）对沙棘原浆糖、有机酸、抗氧化能力及挥发性物质的影响。结果表明,发酵72 h后,活菌数为9.21 lg（CFU/mL）,葡萄糖和果糖分别降低9.82%和10.09%;苹果酸含量降低了82.55%,乳酸含量升高6.36倍,pH值从初始3.99增加至4.21。总酚含量增加16.07%,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）自由基清除能力及铁离子还原/抗氧化能力（FRAP）为基础的抗氧化能力分别提高5.26%、23.05%和13.93%。采用顶空固相微萃取-气质联用（HS-SPME-GC-MS）分析发酵过程中挥发性物质的动态变化,发酵前后共鉴定出73种挥发性风味物质;发酵后总量提高4.67%,酯类和醇类分别增加22.47%和125.56%;消失了13种挥发性物质,形成了10种新的风味挥发物质。综上,MLF显著降低沙棘原浆苹果酸含量,增加pH值和乳酸含量,提高其抗氧化能力,且赋予沙棘浆更浓郁的果香。