经穴Ca2+浓度的分布及针刺对Ca2+影响的实验研究

在技术方法方面,研制成功了可用于在体测量的Ca²⁺选择性针型电极,可对活体细胞外Ca²⁺进行连续动态的在体测定,实时提供Ca²⁺活度变化的信息;改良了同轴复合式推挽灌流管,以平行并外式推挽灌流管代替之,可刺入外围组织观察细胞外液中成分。     

K+和Ca2+通透性离子通道调控血管干细胞作用的研究进展

干细胞具有自我更新和多向分化潜能,参与维持机体稳态、组织修复和再生过程。近年来研究发现血管上存在多种不同类型的血管干细胞,被特定条件激活可分化为内皮细胞和平滑肌细胞,参与血管损伤后修复和结构功能重塑。离子通道是生物电信号产生的基础,是细胞与周围环境进行物质交换和信息交流的门户,在维持细胞正常形态和功能调控中发挥重要作用。但目前对血管干细胞离子通道的研究相对较少。K⁺和Ca²⁺是细胞内的重要信号分子,通透K⁺和Ca²⁺的离子通道协调调控生理和病理状态下血管的舒缩活性和功能重构。最新研究表明,这些离子通道参与调控干细胞的增殖、迁移和分化,预示其在血管干细胞的生物学活性调控中具有潜在作用。本文将对血管上主要分布的可通透K⁺和Ca²⁺的离子通道在干细胞中作用的研究进展进行综述,揭示这些离子通道对干细胞生物学活性调控的作用机制,进一步探讨在血管干细胞的增殖、迁移和分化过程中这些离子通道的结构重塑和电重塑机制,为心血管疾病的防治和靶向性药物的研发提供参考。     

白虎汤加减方中Ca2+浓度测定

目的：测定白虎汤加减方中Ca²⁺浓度，为中国剂改提供一定依据。办法：在白虎汤加减方中，改变石膏用量，用EDTA滴定法测其水煎液Ca²⁺浓度。结果：表明Ca²⁺浓度与方剂组成有关系。4.结论：在方剂的剂量有一定的根据，临床和剂改中不应轻易变动。     

Wnt/Ca2+信号通路的生理及病理生理学研究进展

<正>1982年,美国加利福尼亚大学NUSSE等^[1]将分别来自果蝇的Wingless蛋白和小鼠的Int蛋白的具有同源性、富含半胱氨酸残基的2种分泌型糖蛋白合称为Wnt蛋白。Wnt信号通路的启动主要依靠Wnt配体蛋白、Wnt受体及相关配件。目前,Wnt配体蛋白在人类和哺乳动物中已发现有19种,Wnt受体主要由卷曲蛋白(Frizzled)家族和非Frizzled家族类蛋白构成。     

腹主动脉狭窄致心功能不全大鼠主动脉Na+/Ca2+交换功能变化

探讨压力负荷增高致心功能不全大鼠主动脉Na     

DL0805抑制血管紧张素Ⅱ通过Ca2+依赖和非Ca2+依赖途径引起的大鼠胸主动脉环收缩

目的 探讨Rho激酶抑制剂DL0805抑制血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)收缩大鼠胸主动脉环的机制。方法体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC),在有/无1.8 mmol/L Ca²⁺的环境下采用Fura2/AM荧光探针法测定细胞内游离钙(intracellular calcium, ［Ca²⁺］_i)的变化。应用Western blotting检测大鼠胸主动脉环肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(myosin phosphatase target subunit 1, MYPT1)和Akt蛋白磷酸化,以及Rho激酶1(Rho kinase 1, ROCK1)蛋白表达水平。结果 DL0805(1、10 μmol/L)抑制Ang Ⅱ(100 nmol/L)引起的VSMC细胞内钙释放和外钙内流。DL0805 (25、50 μmol/L)抑制 Ang Ⅱ(100 nmol/L)引起的MYPT1和Akt磷酸化水平以及ROCK1蛋白表达水平增高。结论 DL0805能抑制Ang Ⅱ通过Ca²⁺依赖和非Ca²⁺依赖途径引起的大鼠胸主动脉环收缩。     

芍药苷对大鼠背根神经元细胞内Ca2+的影响

摘要：目的：建立一种评价中药活性成分对大鼠背根神经节(DRG)神经元细胞内游离Ca2 浓度影响的方法。方法：显微解剖获取大鼠背根神经节，通过胰蛋白酶消化，过筛，用DF-12和抗有丝分裂培养液交替培养纯化，获得原代大鼠DRG神经元细胞，并采用细胞免疫荧光技术测定DRG神经元细胞纯度；采用激光共聚焦显微成像技术（LSCM），观察细胞内Ca2 荧光强度的变化，并对Ca2 荧光强度变化率进行分析，探讨芍药苷对DRG细胞内游离钙离子浓度及辣椒素受体的影响。结果：采用上述方法分离得到的DRG细胞纯度可高达95%以上，辣椒平可通过阻断辣椒素激活的瞬时受体电位通道（TRPV1）的作用而抑制细胞内Ca2 的增加。芍药苷表现出与CAP类似的作用，可以阻断细胞外Ca2 内流。结论：芍药苷可能是通过作用于TRPV1通道，而抑制DRG细胞内Ca2 大量增加，本方法可以用于评价药物对大鼠DRG细胞内Ca2 浓度的影响。     

mSiO2-IDA对Cu2+、Cd2+金属离子的吸附

在介孔二氧化硅（mSiO₂）的表面接枝了亚氨基二乙酸官能团（IDA）合成了mSiO₂-IDA吸附剂,研究了mSiO₂-IDA对Cu²⁺、Cd²⁺两种金属离子的吸附效果。通过元素分析仪（EA）、傅里叶红外型光谱仪（FT-IR）等表征手段表明IDA成功地接枝到mSiO₂的表面,考察了溶液的pH、初始浓度和吸附时间对吸附Cu²⁺、Cd²⁺的影响。结果显示,当pH=5,t=30 min时,2 g/L mSiO₂-IDA对溶液中的Cu²⁺、Cd²⁺去除率分别达到97.9%和92.1%。通过吸附动力学数据可知,拟二级动力学方程能更好地描述mSiO₂-IDA对Cu²⁺、Cd²⁺的吸附过程,它属于Langmuir等温吸附模型;多功能光电子能谱仪（XPS）研究显示mSiO₂-IDA对Cu²⁺、Cd²⁺的吸附机制并不相同。     

The effects of local anesthetics on intracellular Ca2+ release from ryanodine-sensitive Ca2+ stores in gerbil hippocampal neurons

Objective To examine the effects of procaine and lidocaine on intracellular Ca(2+) release from sarcoplasmic reticulum ryanodine-sensitive Ca(2+) stores. Methods The experiment was performed on hippocampal slices from 60-80 g male Mongolian gerbils. Levels of intracellular Ca(2+) concentration in the slices were measured by microfluorometry. The slices were perfused with 50 mmol/L KCl containing medium for 30 seconds. Then, the medium was switched to physiological medium. After 5 min of incubation, the slice was perfused with 20 mmol/L caffeine containing physiology medium for 2 min. Following incubation, the slice was superfused with physiological medium until the end of the experiment. The effects of procaine and lidocanin (100 μmol/L) on caffeine-evoked Ca(2+) release were evaluated by adding them to the medium after high K(+) medium perfusion. Results Caffeine induced a marked increase in intracellular Ca(2+) concentration which was then decreased 12% upon the addition of procaine (P&lt;0.05); however, lidocaine, did not induce a similar inhibitory reaction.Conclusion Procaine inhibits ryanodine-receptor mediated Ca(2+) release from intracellular Ca(2+) stores, while lidocaine may inhibit Ca(2+) release through other mechanisms.     

脑梗塞患者ET与红细胞膜Na^＋-K^＋，Ca^2＋-Mg^2＋ ATP酶的关系及其对血液粘度的影响

目的探讨脑梗塞患者(CI)血浆内皮素(ET)水平与红细胞膜Na+-K+、Ca2+-Mg2+ATPase活力的关系及其对血液粘度的影响.方法测定49例CI和29例健康人的ET、Na+-K+ATPase、Ca2+-Mg2+ATPase以及血液粘度等指标.结果CI组ET水平与Na+-K+ATPase、Ca2+-Mg2+ATPase活力呈明显负相关(P均＜0.05);与ηb、ηp、ηre、HCT、K值、EAT、TK呈明显正相关.多元逐步回归统计分析ηb与ET的关系最为密切(P＜0.01).结论①ET、Na+-K+,Ca2+-Mg2+ATP酶活力的变化能引起血液粘度改变.其中ET主要是通过收缩血管,改变红细胞膜Na+-k+泵、Ca2+泵的活性,导致红细胞变形能力下降.②临床上采用保护血管张力的药物、稀释血液等综合治疗,能有效地预防和治疗脑动脉粥样硬化和CI.     

中电导钙激活性钾通道在人多发性骨髓瘤细胞增殖中的作用

目的 探讨中电导钙激活性钾通道(intermediate-conductance Ca2+-activated K+channels,IKCa1)在人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞增殖中的作用.方法 通过台盼蓝拒染法检测IKCa1阻滞剂CLO对MM细胞株RPMI 8226和U266生存活力的影响,应用流式细胞仪检测CLO作用于RPMI 8226和U266细胞后细胞周期分布及细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)变化.结果 CLO以浓度依赖方式显著抑制RPMI 8226和U266细胞生长,10 μmoL/L CLO作用48 h后,RPMI 8226细胞和U266细胞周期明显被阻滞于G0/G1期,S期显著减少.10 μmol/L CLO作用1min后,RPMI 8226和U266细胞内Fluo-3/AM荧光强分别为(448.3 ±32.8)和(675.9 ±45.8),分别与对照组(56.5±7.2)和(31.8±4.5)相比具有显著差异(P＜0.05).结论 钙激活性钾通道阻断剂克霉唑抑制MM细胞增殖,其机制可能与CLO通过调节细胞内钙水平引起细胞周期阻滞于G0/G1期有关.     

葛根素参与的可注射钙离子敏感型水凝胶生物相容性研究

[目的] 将用于关节炎治疗的钙离子敏感型葛根素-海藻酸钙可注射水凝胶进行体内生物相容性评价研究。[方法] 制备不同处方配比的葛根素-海藻酸钙水凝胶,通过大鼠皮下注射埋植实验,考察葛根素-海藻酸钙水凝胶的体内降解情况;同时通过实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和酶联免疫吸附（ELISA）分别测定注射水凝胶周围组织炎性相关因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的基因表达和蛋白分泌变化;通过组织切片苏木精-伊红（HE）染色观察不同埋植时间点水凝胶周围组织病理变化。[结果] 不同观察时间点各实验组凝胶直径无下降趋势,凝胶体内降解速率缓慢;与假手术组比较,葛根素-海藻酸钙凝胶周围组织中炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白浓度显著降低,而IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达无显著变化;组织切片HE染色结果表明在皮下结缔组织层产生短期物理损伤炎症反应,长期埋植后葛根素-海藻酸钙凝胶周围组织无炎症反应,具有良好的生物相容性。[结论] 研究中构建的可注射葛根素-海藻酸钙凝胶,体内降解缓慢,生物相容性良好,有望成为治疗骨关节炎的良好药物及细胞载体。     

丁酸盐激活CaMKK促进紧密连接重组装的研究

目的 探讨丁酸盐激活AMPK从而调节紧密连接的重组装的途径。方法 使用丁酸盐、CaMKK特异抑制剂(STO-609)处理上皮屏障模型Caco-2细胞,在转钙过程中检测电阻(TER)值、细胞内ATP水平以及CaMKK和AMPK的磷酸化状况,从而判断丁酸盐促进紧密连接重组装的上游信号通路。结果 丁酸盐处理Caco-2细胞后,其TER值显著增高(P＜0.05),CaMKK和AMPK均被磷酸化激活,而上述作用可被STO-609部分减弱。结论丁酸盐可通过钙离子途径磷酸化激活CaMKK,继而活化AMPK促进紧密连接的重组。     

葛根素参与的可注射钙离子敏感凝胶构建和性质研究

[目的]构建一种葛根素(Pu)参与的海藻酸钙水凝胶,具有可注射性和钙离子敏感性,可用于控释药物或负载间充质干细胞,用于骨关节炎治疗。[方法]以海藻酸钠(SA)、氯化钙(CaCl_2)和Pu为原料制备不同处方凝胶,黏度计实验考察处方原料对凝胶黏度的影响,通过流变学方法筛选最佳处方,并考察Pu对凝胶强度的影响,观察冻干凝胶的微观结构,通过溶胀实验、体外降解实验和药物释放实验考察凝胶溶胀率、体外稳定性和药物缓释性能。[结果]通过物理搅拌得到均一透明凝胶,处方中原料对凝胶强度影响大小顺序为CaCl_2SAPu,筛选最佳处方为0.2%Pu+0.6%SA+6 mmol/L CaCl_2,扫描电微镜下凝胶呈现三维网孔结构,表征实验表明Pu对凝胶强度有促进作用,Pu使凝胶溶胀率由75倍减小至45倍,体外初始降解时间由12 d增加至24 d,该凝胶对粉防己碱具有良好的缓释作用。[结论]Pu参与海藻酸钙凝胶构建,增加胶凝强度并改善凝胶溶胀和体外降解性质,该凝胶强度适宜并呈三维网孔结构,对粉防己碱有缓释作用,是良好的可注射型药物或干细胞载体用于骨关节炎的治疗。     

海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca^2＋]i的影响

目的　揭示海嘧啶诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法　采用激光扫描共聚焦技术观察海嘧啶对肿瘤细胞内[Ca2 ]i 的影响及 [Ca2 ]i 变化时 Ca2 的来源 ,采用定磷法测定海嘧啶对肿瘤细胞膜钙泵活性的影响。结果　海嘧啶可显著升高肿瘤细胞内 [Ca2 ]i 的浓度 ,[Ca2 ]i 升高时 ,Ca2 同时来源于细胞外钙内流和细胞内钙释放。海嘧啶可显著降低肿瘤细胞膜钙泵活性。结论　海嘧啶通过升高肿瘤细胞内 [Ca2 ]i 的浓度 ,从而启动肿瘤细胞凋亡机制 ,诱导肿瘤细胞凋亡 ;海嘧啶升高肿瘤细胞内的作用是通过开放肿瘤细胞膜钙通道、引起肿瘤细胞内钙库释放、降低肿瘤细胞钙泵活性 3条途径达到的。