Ael亚型1例

1病例简介献血者,女,汉族,18岁,首次无偿献血,无特殊疾病,无输血、妊娠史。献血初筛时纸板法正定型为O型,对血型进行常规复检时发现正定型为O型,反定型为A型,正反定型不符,怀疑为A亚型。进一步的鉴定证明该献血者ABO血型为Ael亚型。2血型血清学检查2.1试剂抗-A、抗-B(20040606,长春生物制品研究所);抗-AB、抗-H、抗-A1、A1细胞(NAB040516、NH040617、NA1040410、CA1041108,加拿大Dominion公司);A2细胞、谱红细胞(20041105、20041023,上海市血液中心);ABO试剂红细胞(本单位自制)。2.2方法均按照文献[1]方法进行。2.3血型鉴定结果…     

献血者Ael亚型1例

资料与方法 1临床资料献血者,男,35岁,首次无偿献血,在街头采血车经健康征询、体检、化验均符合《献血者体检标准》后采血。献血初筛时纸板法正定型为O型,采血后复检正反定型不一致：正定型为0型,反定型为A型,怀疑为A亚型。经血清学方法进一步检查发现该献血者ABO血型为Ael亚型。     

Ael亚型伴有抗-A_11例

我们在鉴定1名献血者ABO血型时,发现其正反定型不符,经进一步鉴定确定其为Ael亚型,同时血清中伴有抗-A1,报告如下.     

Ael亚型引起产科备血困难2例

正血型是人体稳定的遗传性状,正确的血型鉴定结果是临床安全用血的重要前提。输血技术的提升和广泛应用挽救了更多的生命,也促进了输血研究的长足发展,越来越多的血型亚型被发现,给临床输血提出新的挑战。随着国家二胎政策全面放开,高龄、瘢痕子宫、妊娠合并症等高危妊娠数量增加,产科和新生儿科输血风险随之增加,给输血带来了新的挑战。本科遇遗传因素引起血型Ael亚型导致产科备血困     

罕见的Ael亚型1例

红细胞上 A抗原的两个主要亚型是 A1 和 A2 ,检查献血者血型时 ,最主要的是避免把各种弱 A亚型错定为 O型。当把弱 A亚型的红细胞输给 O型受血者时 ,就会引起输血反应。笔者发现 1例罕见的 Ael亚型 ,现报告如下。一般材料献血者 ,男 ,3 8岁 ,涟水县人。 2 0 0 1年 1月来献血时 ,正定型为 O型 ,反定型时发现其血清与 A型红细胞的反应为很弱的凝集 ,经进一步检测 ,确定为罕见的 Ael亚型。血型血清学检查1　血型鉴定结果　抗 -A、抗 -B试剂血清由南京红十字血液中心提供 ,抗 -H血清由上海血液中心提供 ,A、B、O型试剂红细胞由本室自制 ,…     

一例罕见AB亚型的分子生物学研究分析

目的 分析研究一名献血者ABO血型形成的分子生物学机制。方法 用血清学方法检测ABO和H抗原,应用聚合酶链式反应(polymerase chain reation,PCR)检测其基因型,再对ABO基因第6,7外显子进行直接测序。结果 该献血员血清学检测为AB亚型,PCR结果为A2/Bw12,直接测序结果为A205/Bw12。结论 该献血员血型是一例比较罕见的AB双侧亚型。为保障输血安全,在该献血员不含抗体的情况下,其血液可以输注给配血相合的AB型患者。     

1例B(A)亚型的血清学及分子生物学特征分析

正ABO血型系统是最具临床意义的血型系统,供受者ABO血型不合常引起溶血性输血反应、新生儿溶血病和移植排斥反应等。ABO血型除了常见的A型、B型、O型和AB型外,还会有一些抗原性较弱的亚型被发现,这些亚型通常表现为正反定型不一致或凝集强度的改变。ABO亚型的出现给血型鉴定、交叉配血和临床输血带来极大困难,严重影响输血的安全性[1-2]。2016年,青岛市胶州中心医院输血科在血型鉴定工作     

Ael亚型1例

一般资料 献血者,女,多次献血,本次来血站无偿献机采血小板后复查血型,发现正定型为0型而反定型为A型。随后对献血者标本进行基因分型,证实为A亚型中的Ael亚型。     

ABO血型新等位基因Ael08的分子生物学研究

目的研究ABO新等位基因Ael08的分子机制。方法利用单克隆抗体检测先证者标本红细胞ABO血型抗原,标准A、B、O红细胞检测血清中的ABO抗体,吸收放散试验检测红细胞上微量抗原;采用PCR技术扩增先证者ABO基因的第5~7外显子序列,PCR产物经双酶切后直接测序分析6和7外显子;扩增产物经TOPO TA克隆到质粒载体中获得单链,对所得克隆作ABO基因第6、7外显子双向测序分析;家系调查采集先证者父亲和哥哥的标本作血型血清学试验和ABO基因第6和7外显子直接测序分析。结果先证者红细胞上表达很弱的A抗原,只有通过吸收放散才能有效检出,同时其血浆中存在较强的抗-B和较弱的抗-A;直接测序分析发现:6号外显子第261位缺失杂合,7号外显子第297位A/G、467C/T、646T/A、681G/A、771C/T、829G/A、804insG/G杂合;克隆测序发现1个为常见的O02等位基因,另1个为1种新的等位基因(已被dRBC NCBI命名为Ael08),与A102比较,Ael08在第804位碱基处插入G,这导致氨基酸第268位后阅读框架发生改变,编码产物比正常A1转移酶多37个氨基酸。家系调查显示:先证者Ael08等位基因从父亲遗传所得。结论发现1个ABO新等位基因Ael08,α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因(A基因)第804位碱基处插入G突变导致产生Ael表型。     

B(A)02亚型分子生物学鉴定1例

目的采用分子生物学方法进行疑难血型鉴定及其遗传发生机制分析,探究分子生物学在红细胞血型分型技术中的必要性和可行性。方法使用血清学和分子生物学方法,对1例二次献血时血型与首次记录不符且ABO正反定不符的献血者,进行血型鉴定。结果献血者血清学:与抗-A血清反应呈弱阳性(2+),与抗-B及抗-H血清反应均为强阳性(4+);与A1型红细胞呈弱阳性(2+),但与B和O型红细胞不反应;直接、间接抗球蛋白试验结果均为阴性、血清抗体筛查结果为阴性。献血者分子生物学:ABO基因第6、7外显子区存在9处变异,与A101等位基因进行比对,确定血型为B(A)02。结论分子生物学方法可以避免血清学疑难血型鉴定中的诸多影响因素,及时准确地鉴定B(A)亚型。     

A novel blood group B subgroup: serological and genetic studies

A discrepancy in the ABO blood groups between a newborn child and her parents was identified. Serological and DNA investigative techniques were performed. A weak variant of B (B(w)) was detected on the erythrocytes of the child, her grandmother and great-uncle. Adsorption-elution studies showed that their erythrocytes adsorb and yield anti-B on elution. The B(w) antigenic strength of the A(1)B(w) cells of her mother and maternal aunt was reduced when compared to that of the A(2)B(w) from another family member. Only one of 15 different anti-B sera agglutinated the A(1)B(w) erythrocytes. Agglutinin anti-B that reacted strongly with normal B erythrocytes and did not agglutinate the B(w) cells, was found in the sera of the A(1)B(w) individuals. The B(w) serum glycosyltransferase could not convert O cells into B cells and no B substance was found in saliva. All family members with the B(w)/AB(w) phenotypes were heterozygous for a B allele and DNA sequencing revealed a novel missense mutation in exon 7 of the B allele (556A > G), resulting in M186V. This substitution changes a highly conserved region of the enzyme, proposed to be a disordered loop near the enzyme cleft, and is expected to diminish the enzyme's activity, leading to this B(w) phenotype.     

cisAB亚型第6、7外显子及侧翼内含子序列分析

目的 研究汉族ABO血型系统cisAB亚型的分子遗传基础。方法 在标准血清学鉴定和PCR－SSP基因分型的基础上,对汉族cisAB亚型进行第6,7外显子及侧翼内含子DNA扩增,PCR产物经割胶纯化后直接序列分析。结果 血清学鉴定表明2例标本分别为A2B3和A3B,先证者的PCR－SSP基因分型肯定了其中的B和O1基因。DNA序列分析表明,其第6外显子有261G缺失／不缺失杂合;第7外显子与A1基因相比,有T467C杂合和C803G杂合,796位为正常C,表明其血型为罕见的cisAB亚型。结论 467T,796C和803C三处核苷酸的独特性决定了cisAB亚型的分子遗传基础。     

罕见B放散型分子遗传背景的分析

目的分析一例罕见B放散型的ABO基因分子遗传背景。方法对一例血型血清学正反定型不符的无偿捐血者样本进行了包括吸收放散、血型物质检测等系列血清学实验后,采用PCR-SSP方法、第6、7外显子PCR产物直接测序,进行ABO基因定型;并对第6、7外显子及第6内含子进行基因克隆序列分析,以及采用PCR扩增样本的ABO基因5端调控(CBF/NF-Y增强子)区域,扩增产物经胶回收后进行直接序列测定。结果经过吸收放散等血型血清学实验鉴定为Bel表现型,在此样本中发现了一个ABO*B变异等位基因,它是在ABO基因的第7外显子695核苷酸位出现T>C突变,导致232位氨基酸由Leu转变为Pro。ABO基因微卫星增强区域序列测定为4个43个碱基长度的重复,第1个重复中nt41为C/G杂合,其余3个重复序列中nt41均为G,定为G/C型(B101/O01等位基因型)。结论在中国人群中再次报道nt695位突变的ABO新等位基因,表明ABO基因的第232位氨基酸对决定ABH糖基转移酶活性是至关重要的。     

B抗原减弱表型的表型频率与ABO基因分析

目的对血清学表现为B抗原减弱的血液样本进行筛查和ABO基因分析,了解其分布特征和分子遗传学基础。方法筛查并收集B抗原减弱（与抗-B血清试管法凝集强度中等）的样本,采用血型血清学方法进行鉴定分析,采用直接测序的方法对ABO基因的第6、7外显子及第6内含子进行序列分析,对可追踪家庭进行家系分析。结果从241952份样本中检出13例B抗原减弱表型,其中B型9例、AB型4例;所有样本的红细胞与抗-H反应均增强;其中2例可检出不规则抗-B;ABO基因型分别为A102／Bw12（1例）、BIOI／B101（2例）、B10I／002（3例）、A102／B101（3例）、B101／001（4例）。在1例基因型为B101／001个体的家系成员（父亲）中检出相同表型。结论该类表型在B型人群中的频率约为1：7000;除1例样本的B等位基因存在278C〉T突变（Bw12）外,其余样本在第6、7外显子和第6内含子中均未检出突变;ABO基因酶催化活性区域编码序列以外的基因变异,可能是导致B抗原减弱的原因之一。     

罕见B(A)血型的分子遗传学研究

目的以核苷酸序列分析鉴定出血型血清学分型困难标本的ABO血型基因型。方法对常规血清学方法难以做ABO血型准确定型的3例被捡血样,采用PCR方法扩增其ABO等位基因的第6、7外显子,PCR产物采用直接测序和克隆测序的方法,以确定其基因型。结果 3例被检血样的血型血清学结果相似:红细胞与抗-A弱凝集,与抗-B强凝集,不与抗-A1凝集,其血清中存在抗-A,初步定型为AWB;经直接测序和克隆测序发现:3例被检血样都含有O等位基因,且它们的B等位基因在第7外显子都存在700CG突变,证实其为B(A)02等位基因。结论核苷酸序列分析证实这3例血清学表现为AWB亚型个体均为B(A)表现型,基因型均为罕见的B(A)02/O型。     

Gene analysis of two cases with CisAB/B blood subgroup

Objective

To identify the precise ABO blood type subgroups with genotyping.

ABO血型A201等位基因表达A抗原活性的分析

目的了解ABO血型系统中A201等位基因表达的A抗原活性。方法采用血型血清学方法检测1个家系2代3人血液和唾液各1份标本的ABO血型表型;应用Identifiler法医基因分析试剂盒作亲缘关系鉴定;PCR扩增ABO基因所有外显子区后作DNA测序分析,PCR-RFLP法同步检测A201等位基因中的序列变异。结果亲缘关系鉴定显示在Identifiler的15个遗传标记系统中,父母均能够提供全部相应的等位基因给孩子,确定存在亲缘关系;然而采用不同来源的3份抗体作ABO血型检验时,出现其中之一的正定型试验否定母子关系、反定型不能排除母子关系的矛盾现象。3个标本ABO基因的测序:父、母、子的基因型分别为O01/O01、A201/B101和A201/O01,支持反定型结果,提示A201等位基因在AB和A表型中所表达的A抗原活性存在明显的差异。PCR-RFLP法成功地同步鉴定出A201等位基因中的2个主要变异点467C/T和1059-1061delC。结论 ABO血型A201基因在AB和A表型中表达A抗原活性可能因检测抗体不同表现出一定的差异;基因测序与PCR-RFLP法同步分析可简便快速地鉴定A201等位基因中的467C/T和1059-1061delC。     

1例罕见AB3亚型的分子机制

目的探讨1例罕见AB3亚型的分子机制。方法对1例ABO血型正反定型不符患者的血型通过血清学鉴定、PCR-SSP、ABO基因直接测序、TA克隆单体型分析等方法分析其分子机制。结果该患者血型鉴定为比较少见的A102/B301亚型,该亚型是由于ABO基因第七外显子存在1054C/T杂合导致R352W氨基酸改变所致。结论 ABO基因存在1054CT,该突变可能是导致B301亚型的分子遗传基础之一。关健词:     

Molecular genetic analysis and structure model of a rare B(A)02 subgroup of the ABO blood group system

BackgroundSerological analysis of ABO blood group has been widely applied in transfusion medicine. However, ABO subgroups with different expression of blood group antigens sometimes cannot be determined by serological methods. Therefore, genotyping is useful to understand the variant ABO phenotypes.Material and MethodsExon 6 to exon 7 and adjacent introns of the ABO gene from a donor with ABO typing discrepancy were amplified and sequenced. Cloning sequencing was also performed to identify the allele. To explore the effect of mutation, three dimensional model of mutant p.Pro234Ala was built and optimized.ResultsThe variant B (c. 700C > G) allele expressed an AweakB phenotype with anti-A in his serum with a ABO*B(A)02/O02 heterozygote genotype. Cloning sequencing confirmed that the c.700C > G single nucleotide polymorphism was associated with a B101 allele. Three dimensional molecular modeling suggested that p.Pro234Ala might affect the conformation of His233, Met266 and Ala268, which were known as critical residues for donor recognition.ConclusionABO genotyping is needed for correct identification subgroups to improve accuracy evaluation of blood typing and increase the safety of blood transfusion. Alteration of DNA sequence in the ABO gene resulted in amino acid substitutions and led to a weak or missing expression of ABO antigens.