固相萃取-高效液相色谱法测定七种痕量生物胺

研究了固相萃取-高效液相色谱法测定痕量7种生物胺(色胺、酪胺、组胺、腐胺、尸胺、精脒、精胺)的方法。7种不同生物胺的标样混合溶液与荧光衍生剂丹酰氯在特定条件下衍生,衍生后通过C18固相萃取柱净化、富集,InertsilODS-3色谱柱分离,荧光检测器检测,流动相为乙腈和水梯度洗脱20min,流速为1mL/min。变异系数(CV%)为0.51～2.23,检测低限为1.29×10-6～2.57×10-4μg/mL。     

柱前DCI衍生-固相萃取-高效液相色谱法快速测定干酪中的6种生物胺

研究了利用RP-HPLC对干酪中6种生物胺进行测定,分别采用三氯醋酸、高氯酸、盐酸、无水乙醇、无水甲醇作为提取溶剂对干酪样品中的生物胺进行提取,经丹磺酰氯(DCI)柱前衍生后,利用固相萃取装置萃取生物胺衍生产物,然后上机检测,采用乙腈-超纯水为流动相,梯度洗脱,流速1 mL/min,利用荧光检测器进行检测.结果表明,采用浓度为0.1 mol/L的盐酸作为干酪中生物胺的提取试剂比其他4种溶剂更为适宜;固相萃取步骤的引入对进一步富集,纯化衍生产物起到了重要作用;干酪中的6种生物胺在25 min内被快速检出,6种生物胺的整体回收率较高,相对标准偏差(RSD)为1.7％～6.7％,最低检出限0.0037～0.0182 mg/L.该方法是一种针对干酪中6种常见生物胺的快速高效的检测方法.     

固相萃取-高效液相色谱法测定羊肉风干肠中生物胺

采用固相萃取(SPE)-高效液相色谱法(HPLC)检测羊肉风干肠中色胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺和精胺6种生物胺(BAs)。对比了液液萃取和采用不同萃取柱(ODS-C18萃取柱、阳离子SCX萃取柱、阴离子萃取SAX柱)进行固相萃取对样品中生物胺的净化效果。通过研究发现,固相萃取法对生物胺具有较好的净化、富集作用,其中强阳离子SCX萃取柱效果最佳,生物胺线性回归范围在0.5~25 mg/L,方法的检出限在0.01~0.1 mg/L之间,定量限在0.1~1.0 mg/L之间。羊肉风干肠中加标回收率为74.25%~98.37%,相对标准偏差(RSD,n=6)为9.36%~17.27%,方法的准确性和回收率较高,可以有效检测羊肉风干肠中生物胺含量。     

固相萃取-高效液相色谱法测定酱油中10种防腐剂

文章建立了固相萃取-高效液相色谱法测定酱油中10种防腐剂的检测方法.方法采用90%甲醇提取、沉淀后,滤液经PEP-SPE固相萃取柱净化,采用Plus C18柱:5 μm,250 mm×4.6 mm;流动相:乙腈为0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH=4.0)(梯度洗脱).流速:1.0 mL/min,检测波长230 nm和254 nm;柱温30℃;进样量10μL.该方法的检出限在1.0～2.0 mg/L,线性范围1.0～100.0 mg/L,加标回收率72.8%～100.9%之间.相对标准偏差(RSD)0.42%～6.87%(n=4),该方法简单、快速、灵敏度高,并具有良好的精密度与准确度,可作为酱油中检测这10种防腐剂的有效定量方法.     

固相萃取-高效液相色谱法测定白砂糖中丙烯酰胺

建立了固相萃取-高效液相色谱法测定白砂糖中丙烯酰胺助剂残留的方法。采用Oasis HLB和Ac- cBond ODS-C_(18)固相萃取柱对样品进行净化,在Spherisorb NH_2柱上以乙腈-水(体积比为75:25)为流动相进行分离,流速0.8mL/min,柱温25℃,检测波长200nm,对白砂糖中丙烯酰胺助剂残留进行了测定。方法的线性范围为25～1000μg/L,线性相关系数为0.9992。方法的检出限为6μg/L,低、中、高3个浓度水平的加标回收率为90.2%～93.8%,相对标准偏差<5.5%。该法用于白砂糖中丙烯酰胺的测定,结果令人满意。     

固相萃取-高效液相色谱法测定果醋中7种有机酸

目的：建立果醋中7种有机酸同时测定的高效液相色谱方法。方法：用水提取果醋中有机酸,后经LC-SAX固相萃取柱净化,以Atlantis T3 C18色谱柱进行分离,二极管阵列检测器检测。结果：在优化色谱条件下,7种有机酸在15min内分离良好,各组分回收率在97.5%～105.1%,相对标准偏差不大于1.31%,最低检出限在0.30～1.80μg/mL范围。结论：该方法具有简便、快速、准确等优点,可应用于果醋中有机酸的测定。     

柱前衍生HPLC同时测定鱼中多种生物胺及其变化规律

目的:采用高效液相色谱法同时测定鱼中7种生物胺(即色胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺和精胺)的含量,研究在不同贮藏条件下鱼体生物胺的变化规律。方法:样品用5%三氯乙酸溶液提取后,用丹磺酰氯进行柱前衍生,经C18色谱柱(4.6mmI.D.×150mm)分离,用水和乙腈进行梯度洗脱,于波长254nm处检测。考察大黄鱼和黄鲷在-20、4和25℃贮藏不同时间时生物胺的变化情况。结果:20min内7种生物胺得到良好的分离,在0.1~20.0mg/kg范围具有良好的线性关系(r>0.999)。生物胺的平均回收率73%~101%,RSD5.9%~20.1%。所测的7种新鲜海鱼中,除金线鱼具有较高的生物胺含量(170.8mg/kg)外,其它鱼的生物胺含量很低(3.95~23.63mg/kg)。在-20℃条件下大黄鱼和黄鲷中生物胺的总量无显著变化(p<0.05),而在4℃和25℃时,鱼体中的生物胺总量随贮藏时间的延长而增加。其中腐胺、尸胺、组胺和酪胺含量变化敏锐,随着贮藏时间的延长和温度的上升,其含量显著增加(p<0.05)。结论:低温贮藏可有效控制鱼体中生物胺的形成。腐胺、尸胺、组胺和酪胺可作为判断鱼体新鲜度的质量指标。     

固相萃取-高效液相色谱法测定葡萄酒多酚物质

通过对同相萃取柱萃取条件选择优化,确定了利用高效液相色谱法测定葡萄酒中多盼物质时最佳样品预处珲条件.结果表明,乙醚作为洗脱剂时,沈脱液体积为15mL,酒样pH值为葡萄酒自然pH值时,各多酚类物质分离效果最佳,提取率均较高.     

固相萃取-高效液相色谱法测定卤菜中的蒂巴因

建立一种快速、高效测定卤菜中的蒂巴因的固相萃取-高效液相色谱方法。样品前处理采用乙腈-水溶剂提取,经固相萃取柱净化后检测。以乙腈-0.01%三乙胺水溶液(70∶30, V/V)作为流动相,用荧光检测器检测,外标法峰面积定量。结果表明,蒂巴因在0.5～50.0μg/mL质量浓度范围内线性关系良好,相关系数r2为0.999 9,检出限为0.20μg/kg,定量限为0.60μg/kg,在1.0, 10.0和50.0μg/kg三个添加水平进行加标回收试验(n=5),加标回收率达到91.5%～94.2%。该方法具有前处理简单、净化效果好、灵敏度高和检测速度快的优点,适用于卤菜样品中蒂巴因的分离和定量检测。     

高效液相色谱法同时测定香肠中6种生物胺

采用丹磺酰氯为衍生试剂,建立反相高效液相色谱法同时测定香肠中腐胺、尸胺、酪胺、组胺、亚精胺和精胺6种生物胺的方法.色谱条件:C18色谱柱分离,以甲醇和0.1%乙酸溶液为流动相梯度洗脱,流速0.8mL/min,二极管阵列检测器,检测波长254 nm.以1,7-二氨基庚烷为内标,在设定的试验条件下,6种生物胺实现了良好的分离,并呈良好的线性相关性(r>0.999).方法的检测限:腐胺、亚精胺、尸胺和酪胺均为0.8μg/mL,组胺和精胺均为4 μg/mL.本检测方法具有良好的重现性和回收率.对发酵香肠样品中的生物胺含量进行了分析,其中部分香肠中含有一定量的生物胺,最高可达1.09mg/g.     

高效液相法测定市售腌制蔬菜商品中8种生物胺的含量

采用丹磺酰氯为衍生试剂,建立反相高效液相色谱法同时测定腌制蔬菜中色胺,β-苯乙胺,腐胺,尸胺,组胺,酪胺,亚精胺和精胺含量的方法。色谱条件:C18色谱柱分离,以水和乙腈为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL/min,紫外检测器,检测波长:254 nm。在设定的试验条件下,8种生物胺在30 min内实现了良好的分离,待测生物胺峰面积同其相应浓度呈良好的线性相关性(R2>0.998)。仪器重复性良好(RSD<0.63%),方法重复性在可接收范围内(RSD<10%),8种生物胺的平均回收率在89.19%～103.02%之间。结果表明生物胺的HPLC检测方法,灵敏度高,精密度和重复性好,可快捷、准确地对腌制蔬菜中的生物胺进行检测。对市售腌制蔬菜样品中的生物胺含量进行了分析,检测出生物胺总量范围在39.38～628.82 mg/kg,属于目前我国安全标准范围之内。     

高效液相色谱法测定大豆发酵制品中的生物胺

目的从生物胺角度初步探讨大豆发酵制品的食用安全性,为确定大豆发酵制品的推荐安全摄入水平提供初步参考。方法采用柱前衍生高效液相色谱法检测大豆发酵制品中生物胺的含量,以0.4 mol/L高氯酸为提取液,以丹酰氯为衍生试剂,紫外检测波长254 nm。结果样品组分分离及测定结果重现性较好,豆豉、豆酱、酱油3种大豆发酵制品均有部分品牌组胺含量超过危害作用水平(即500 mg/kg),8个样品中有7种超过100 mg/kg,同类不同品牌大豆发酵制品间组胺含量没有明显差别;色胺均未检出;除组胺外,3种大豆发酵制品中尚可能存在2-苯乙胺、腐胺及尸胺。结论大豆发酵制品的色胺未检出,组胺含量较高,大量食用可能影响人体健康。     

Determination of biogenic amines in wines by HPLC with precolumn dansylation and fluorimetric detection

Thirty-two samples of commercially available Greek wines were analysed in order to determine the content of biogenic amines. The method involves pre-column dansylation of the amines and subsequent solid phase extraction (SPE) of the derivatives through C₁₈ cartridges. For the analysis, RP-HPLC (reversed phase-high performance liquid chromatography) coupled with fluorimetric detection at excitation and emission wavelengths of 320 and 523 nm, respectively was used. All amines measured had recoveries over 85%. The highest detection limit was for agmatine (0.18 mg l⁻¹). Putrescine, cadaverine, histamine and isoamylamine are the most abundant amines in the samples analysed. The relative concentrations of biogenic amines expressed in mg l⁻¹ had as follows: putrescine > histamine > isoamylamine > ethylamine > methylamine > cadaverine = tyramine = agmatine = tryptamine. Higher amounts of biogenic amines were generally detected in wines, aged for long periods in barrels or in bottles. However, young wines contained lower amounts of these compounds as they were directly bottled after winemaking and have not undergone any further maturation processing. Moreover, less acid wines gave rise to higher histamine contents.     

Determination of biogenic amines in traditional Chinese fermented foods by reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC)

A survey of biogenic amine content of traditional Chinese fermented foods (douchi, sufu, fermented sausage, yulu, and shrimp paste) was carried out. Eight major biogenic amines including putrescine, cadaverine, histamine, phenylethylamine, tyramine, spermine, spermidine and tryptamine were separated by reversed-phase HPLC-DAD on Inertsil ODS-SP column after pre-column derivatisation with dansyl chloride. The results showed that spermine (1.65–3.96 mg 100 g^?1), putrescine (0.20–10.89 mg 100 g^?1), cadaverine (3.60–12.14 mg 100 g^?1), and histamine (0.57–20.24 mg 100 g^?1) were the most represented amines. All amines were detected in yulu, while sufu showed a much higher content of most amines. Shrimp paste showed the lowest level of total biogenic amines. Moreover, the composition and content of eight biogenic amines in the selected samples varied among different food types, origins and batches. Although the average content for each amine is within the range that may elicit direct adverse reactions, consumers should be aware of the potential synergistic effect among different amines and limit their consumption at each meal.     

高效液相色谱法测定市售泡凤爪中的生物胺

采用丹磺酰氯为柱前衍生,建立高效液相色谱法同时测定市售泡凤爪中色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺8种生物胺含量的方法。色谱条件:C18色谱柱分离,以水和乙腈为流动相梯度洗脱,流速0.8mL/min,紫外检测器,检测波长:254nm。在此条件下,8种生物胺在23min内实现了良好的分离,该方法标准曲线相关系数均在0.998以上,精密度在可接收范围内（RSD<5%）,8种生物胺的平均回收率在90.41%⁹9.66%之间。结果表明该方法灵敏度高,精密度和重复性好,可快捷、准确地对市售泡凤爪中的生物胺进行检测。检测出生物胺总量范围在72.42⁴09.67mg/kg,其中,色胺、组胺、腐胺、尸胺、亚精胺的检出率为100%,其平均含量分别为47.53、26.20、35.65、12.94、8.15mg/kg。      

反相高效液相色谱法同时检测海产品中8种生物胺

目的建立一种可同时快速测定海产品中8种生物胺的丹磺酰氯柱前衍生反相高效液相色谱法。方法样品经5%三氯乙酸提取,丹磺酰氯柱前衍生后,采用Agilent zorbax SB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇和水作为流动相,进行梯度洗脱。柱温30℃,流速为1.5 m L/min,采用UV紫外检测器,检测波长254 nm,对8种生物胺进行分离分析。结果结果显示,色胺、2-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺和精胺在15 min内得到有效分离,在1~100 mg/L范围内线性系数r~2﹥0.999,8种生物胺测定方法的检出限范围为0.02~0.17 mg/L,定量限范围为0.067~0.57 mg/L,且重复性良好,向秋刀鱼中分别添加生物胺标准品20.0、50.0、100.0 mg/L 3个含量水平,8种生物胺平均回收率介于79%~117%之间,相对标准偏差为0.84%~12.57%。采用该方法测定了秋刀鱼等5类海产品中8种生物胺的含量,结果显示生物胺总含量在23~208 mg/kg之间。结论该方法简单、快速,灵敏度和准确度符合要求,适用于海产品中多种生物胺的同时检测。     

高效液相法测定草鱼糜发酵过程中生物胺变化

本文采用纳豆芽孢杆菌和戊糖片球菌组成的混合发酵剂对草鱼鱼糜进行发酵,建立了发酵鱼制品中六种生物胺(色胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺)的高效液相色谱分析方法,研究了鱼糜发酵过程中生物胺含量的变化以及微生物数量的变化。结果发现,在30 min内各种生物胺得到很好的分离,且线性关系良好(R2>0.999),回收率在97.35%~103.00%,精密度、重现性RSD均小于10%。添加混合发酵剂可以明显抑制金黄色葡萄球菌、假单胞菌和大肠杆菌等杂菌的生长,降低发酵过程中腐胺、尸胺、组胺和酪胺含量的积累;利用纳豆芽孢杆菌,戊糖片球菌组成的混合发酵剂以及一系列负控脱羧酶活动能有效抑制鱼糜发酵过程中生物胺的形成,抑制腐败菌和致病菌的生长,提高鱼糜发酵食品的品质。      

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定红酒中4种生物胺含量

摘 要: 目的 建立QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)同时检测红酒中组胺、酪胺、色胺和苯乙胺4种生物胺的分析方法。方法 红酒样品经改进的 QuEChERS混合填料净化后, 经ACQUITY UPLC? BEH Amide色谱柱（2.1mm×100mm,1.7μm）和0.1%(V/V)甲酸-15mmol/L乙酸铵水溶液和乙腈梯度洗脱分离,质谱(ESI+)采用多反应监测模式(multiple response monitoring, MRM), 外标法定量。结果 组胺、酪胺、色胺和苯乙胺4种目标化合物在色谱柱上有很好的保留,在1.00～800 μg/L范围内具有良好线性（R2>0.9995）,4种目标化合物的检出限为1.0μg/L,4种化合物的回收率范围为94.7%～106.7%,相对标准偏差（RSD, n=6）为3.7%～8.1% 结论 该方法简单快、快速、结果准确、灵敏度高, 适合测定红酒中组胺、酪胺、色胺和苯乙胺4种生物胺。     

Dabsyl derivatisation as an alternative for dansylation in the detection of biogenic amines in fermented meat products by reversed phase high performance liquid chromatography

The commonly applied HPLC method to determine biogenic amines in dry fermented meat after dansylation was compared with an alternative dabsylation procedure. The use of dabsyl chloride at 70 °C resulted in a 25-min reduction of the derivatisation time, in comparison with the dansylation at 40 °C. Furthermore, the use of irritating ammonia to remove the excess of dansyl chloride can be avoided. Introduction of the SPE cleaning procedure on the C18 cartridge resulted in a reliable and sensitive method of biogenic amines determination in a complex protein–fat matrix, which is typical of dry fermented sausages.