铁在阿尔茨海默病APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠模型脑组织内的沉积

目的:研究铁在阿尔茨海默病(AD)APPswe/PS1ΔE9转基因小鼠脑区中的沉积情况以及与老年斑的对应关系,并探讨铁在AD发病机制中的作用。方法:将PCR鉴定为阳性的APPswe/SI△E双转基因4及8月龄小鼠为实验组,通过Thioflavine S,Perl’s-DAB,Aβ免疫组化染色,观察铁在脑组织中的沉积并与同月龄野生型小鼠(对照组)对照比较。结果:实验组小鼠基底神经节处均见到铁的沉积,在皮质及海马处呈棕褐色沉积,其分布与老年斑的分布相类似;而对照组小鼠的皮质及海马未见铁的沉积。结论:脑内过多铁的沉积可能是Aβ蛋白在脑内聚集,从而形成老年斑的原因之一,提示铁螯合剂疗法有可能成为治疗AD的一个新的靶点。     

铁在阿尔茨海默病APPswe／PSl△E9双转基因小鼠模型脑组织内的沉积

目的：研究铁在阿尔茨海默病（AD）APPswe／PSl△E9转基因小鼠脑区中的沉积情况以及与老年斑的对应关系，并探讨铁在AD发病机制中的作用。方法：将PCR鉴定为阳性的APPswe／S1△AE双转基因4及8月龄小鼠为实验组，通过ThioflavineS，Perl’s—DAB，Aβ免疫组化染色，观察铁在脑组织中的沉积并与同月龄野生型小鼠（对照组）对照比较。结果：实验组小鼠基底神经节处均见到铁的沉积，在皮质及海马处呈棕褐色沉积，其分布与老年斑的分布相类似；而对照组小鼠的皮质及海马未见铁的沉积。结论：脑内过多铁的沉积可能是Aβ蛋白在脑内聚集，从而形成老年斑的原因之一，提示铁螯合剂疗法有可能成为治疗AD的一个新的靶点。     

阿尔茨海默病APPswe/PS1△E9双转基因小鼠脑区中老年斑的分布

目的:观察老年斑在不同月龄的APPswe/PS1△E9双转基因小鼠脑区中的分布.方法:将雄性的杂合子小鼠与C57BL/6J雌鼠交配,所生的小鼠提取鼠尾DNA,PCR扩增目的基因.取鉴定为阳性的2.5、4.5、8月龄的杂和子小鼠各3只,进行Thioflavine S和Aβ免疫组织化学染色,观察老年斑的沉积.结果:共生产小鼠F1代39只,鉴定为阳性的有17只,阳性率为43.6%.组织学染色发现2.5月龄小鼠的脑区未见老年斑沉积,而4.5月龄及8月龄小鼠的皮质及海马可见老年斑沉积,并且随着月龄的增加,老年斑的数目增多,面积增大.结论:APP-swe/PS1△E9双转基因小鼠在4月龄时已有老年斑的沉积,为研究AD提供了很好的载体.     

阿尔茨海默病APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠脑区中老年斑的分布

目的:观察老年斑在不同月龄的APPswe/PS1ΔE9双转基因小鼠脑区中的分布。方法:将雄性的杂合子小鼠与C57BL/6J雌鼠交配,所生的小鼠提取鼠尾DNA,PCR扩增目的基因。取鉴定为阳性的2.5、4.5、8月龄的杂和子小鼠各3只,进行Thioflavine S和Aβ免疫组织化学染色,观察老年斑的沉积。结果:共生产小鼠F1代39只,鉴定为阳性的有17只,阳性率为43.6%。组织学染色发现2.5月龄小鼠的脑区未见老年斑沉积,而4.5月龄及8月龄小鼠的皮质及海马可见老年斑沉积,并且随着月龄的增加,老年斑的数目增多,面积增大。结论:APP-swe/PS1ΔE9双转基因小鼠在4月龄时已有老年斑的沉积,为研究AD提供了很好的载体。     

阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因小鼠对挥发性吸入麻醉药药物敏感性的变化

目的:研究阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因小鼠对挥发性吸入麻醉药药物敏感性的变化.方法:C57BL/6J雌鼠与C3H/HeJ雄鼠交配得到F1代.再将F1代与3月龄的APPswe/PSldE9双转基因小鼠交配得到F2代.F2代小鼠提取鼠尾DNA,PCR扩增目的基因并鉴定.选8月龄F2代同窝小鼠根据是否含APP和PSI基因分为转基因组和野生对照组,用夹尾法分别测定两组异氟醚、七氟醚和地氟醚3种挥发性吸入麻醉剂的最低肺泡有效浓度(MAC值).结果:繁育F2代小鼠12只,其中转基因组7只,野生对照组5只.转基因组小鼠3种挥发性吸入麻醉剂MAC值分别为异氟醚1.129 ±0.160,七氟醚1.900±0.153,地氟醚5.614±0.363,均较野生对照组低,但是无统计学差异(P>0.05).结论:APP/PSI双转基因对8月龄小鼠异氟醚、七氟醚、地氟醚3种挥发性吸入麻醉剂的MAC值无明显影响.     

阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的行为学研究

目的:研究APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的感觉运动活性/移动探索活性、情感和物体识别能力。方法:采用旷场实验和新颖物体辨别实验分别对6月龄(雌、雄)和12月龄(雄)的APPswe/PS1dE9转基因小鼠进行行为学研究,以同窝同龄同性别野生型小鼠为对照。结果:在旷场实验中,与野生型小鼠相比,双转基因小鼠在12月龄时出现探索活性降低且可能更具有焦虑倾向(P<0.05);而在物体识别任务中,各研究组间差异无统计学意义。结论:APPswe/PS1dE9双转基因小鼠能较好地模拟AD患者的部分精神行为症状,为AD的发病机制和治疗研究提供了有价值的工具。     

转基因阿尔茨海默病小鼠脑内炎症反应的诱发因素研究

目的 观察炎症反应在转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠脑组织中的变化,探讨AD脑内炎症反应的诱发因素.方法 选用3、12个月龄转人β-淀粉样前体蛋白/早老素-1(APP/PS1)基因AD小鼠及正常野生型(WT)小鼠,分别应用免疫组织化学法和ELISA法观察脑内淀粉样斑块、炎性因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)α、前列腺素(PGE)2]的变化.结果 3个月龄APP/PS1基因AD小鼠脑组织中无淀粉样斑块沉积,未发现激活的星型胶质细胞和小胶质细胞,炎性因子IL-1β、IL-6、TNFα、PGE2的含量与WT小鼠差异无统计学意义(P均＞0.05).12个月龄转APP/PS1基因AD小鼠脑组织中有大量淀粉样斑块沉积,并伴有大量激活的星型胶质细胞和小胶质细胞,炎性因子IL-1β、IL-6、TNFα、PGE2的含量[分别为(56.02±9.04)、(8.66±0.83)、(97.48±26.58)、(72.18±21.01)ng/g]较WT小鼠[分别为(29.81±6.03)、(7.73±0.74)、(61.98±11.11)、(37.23±10.96)ng/g]及3个月龄转APP/PS1基因AD小鼠[分别为(30.05±3.53)、(7.43±1.17)、(59.34±10.47)、(42.56±5.93)ng/g]显著增加(P＜0.05或P＜0.01).结论 在淀粉样斑块形成之前,转APP/PS1基因AD小鼠脑组织中无明确的炎症反应;而淀粉样斑块沉积之后,脑组织中有显著的炎症反应;AD脑内炎症反应与淀粉样斑块形成密切相关,淀粉样蛋白(Aβ)沉积是导致脑内炎症反应的直接诱发因素.

Abstract：

Objective To observe the changes of cerebral inflammation-related markers in brain of a transgenic mouse model of Alzheimer's disease (AD) ,and to determine the causative factor to the development of cerebral inflammation in AD. Methods 3- and 12-month-old β-amyloid protein precursor ( APP)/presenilin (PSI) transgenic mice and age-matched wild-type mice (WT) were used in the study. The changes of amyloid plaques, inflammatory factors ( interleukin 1β ( IL-1β ); interleukin 6( IL-6 ); tumor necrosis factor α (TNFα) ;prostaglandin E2 (PGE2)) in the brains among these mice were measured by immunohistochemistry and ELISA. Results Immunohistochemical analysis revealed that no amyloid plaques and activated astrocytes as well as microglia were observed in the 3-month-old APP/PS1 mice. There were no significant differences in the levels of inflammatory factors (IL-1β, IL-6 ,TNFα,and PGE2) between the 3-month-old APP/PS1 and WT mice ( Ps ＞ 0. 05 ). However, abundant amyloid plaques accompanied by a remarkable increase of activated astrocytes and microglia were found in the brain of the 12-month-old APP/PS1 mice. The levels of inflammatory factors (IL-1β,IL-6,TNFα, and PGE2 ) were significantly increased in the 12-month-old APP/PS1 mice ([56. 02 ±9. 04] ng/g, [8. 66 ±0.83] ng/g, [97.48 ±26.58] ng/g, [72. 18 ±21.01] ng/g) than in the WT mice ([29. 18 ± 6. 03] ng/g, [7. 73 ± 0. 74] ng/g, [61.98 ±11.11] ng/g, [37. 23 ± 10. 96] ng/g) and the 3-month-old APP/PS1 mice ( [30. 05 ± 3.53] ng/g, [7.43 ± 1.17] ng/g, [59.34 ± 10. 07] ng/g, [42. 56 ±5.93] ng/g) (P＜0.05,or P＜0.01,respectively). Conclusion This study demonstrates that the APP/PS1mice did not show cerebral inflammation before the appearance of amyloid plaques, and exhibited remarkable inflammation after amyloid plaque deposition. These findings suggest that the induction of cerebral inflammation is tightly associated with amyloid plaque formation, and deposition of amyloid-beta protein (Aβ) may be the direct causative factor to the development of cerebral inflammation in AD.     

过表达精神分裂断裂基因1对APP/PS1转基因阿尔茨海默病小鼠突触可塑性及学习记忆能力的改善

目的 探索精神分裂断裂基因1(DISC1)对APP/PS1转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)小鼠突触可塑性及学习记忆能力的影响.方法 Western blot比较正常人和AD患者脑组织中DISC1的表达情况;体外培养C57胎鼠神经元,分为GFP组、GFP+Aβ组、DISC1+Aβ组,激光...     

黄连解毒汤对APP/PS1双转基因AD小鼠海马区病理形态学及脑内β-APP基因mRNA的影响

目的:探讨黄连解毒汤(HLJDD)对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马CA1区的病理形态学及脑内β-淀粉样前体蛋白(β-APP)基因mRNA的影响。方法:选用3月龄的APP/PS1双转基因AD小鼠模型50只,随机分为对照组、安理申组、HLJDD大剂量组、HLJDD中剂量组、HLJDD小剂量组各10只,分别给予安理申或不同剂量HLJDD灌胃治疗6个月,对照组不予治疗,记录并比较各组死亡率;分别于6月龄和10月龄时采用HE染色观察各组海马CA1区神经细胞形态,采用改良甲醇刚果红染色观察各组老年斑形成情况;于末次灌胃治疗后,通过实时荧光定量PCR检测各组脑内β-APPmRNA水平。结果:各组小鼠死亡率差异无统计学意义;10月龄HLJDD各剂量组海马CA1区神经损伤情况较对照组明显减轻,老年斑数量少于对照组(P0.05);HLJDD各剂量组β-APPmRNA水平低于对照组(P0.05),其中以中剂量组水平降低最明显(P0.01)。结论:HLJDD能保护海马神经细胞。     

APP/PS1转基因AD小鼠脑内淀粉样斑块与铁沉积的磁敏感成像研究

目的 应用三维增强磁敏感成像(3D-enhanced susceptibility weighted angiography,ESWAN)技术检测APPswe/PSEN1de9基因突变型小鼠(购自美国Jackson Laboratory,简称为APP/PS1转基因小鼠)脑不同部位的平均相位值(mean phase value,MPV),并探讨其与铁蛋白及淀粉样斑块分布的相关性。材料与方法 APP/PS1转基因小鼠及野生型对照组小鼠行T1WI、T2WI和ESWAN序列扫描,测量小鼠脑皮质区、海马区及丘脑区MPV。对鼠脑组织进行铁蛋白和Aβ蛋白的免疫组化染色,并分别计数感兴趣区内染色斑块数量和面积所占百分比。对感兴趣区MPV与斑块数量、斑块面积百分比采用Pearson检验进行相关分析。结果 APP/PS1转基因小鼠与对照组小鼠皮质区(t=-2.201,P=0.045)和海马区(t=-2.524,P=0.024)的MPV值差异均具有统计学意义。APP/PS1转基因小鼠与对照组小鼠丘脑区的MPV差异不具有统计学意义(t=-2.094,P=0.055)。APP/PS1转基因小鼠每组中的MPV与铁蛋白斑块数量与范围分别具有显著相关性(P0.05);淀粉样斑块与铁蛋白的数量与范围分别具有相关性(P0.05)。结论 APP/PS1转基因小鼠脑内MPV与脑内铁沉积具有显著相关性。APP/PS1转基因小鼠脑内皮质区、海马区及丘脑区的铁沉积持续进行,并且与淀粉样斑块的形成具有相关性。     

电针刺激对APP/PS1双转基因阿尔兹海默病模型小鼠皮质老年斑形成的影响及机制研究

目的:研究电针刺激对APP/PS1双转基因阿尔兹海默病(AD)模型小鼠学习记忆和空间探索能力、皮质内老年斑(SP)的变化及形成机制的影响。方法:将3月龄雄性小鼠随机分为4组:对照组、模型组、电针两疗程组和三疗程组,每组6只;对照组为野生型小鼠,其余三组为APP/PS1双转基因小鼠。通过电针刺激小鼠百会穴和肾俞穴,频率为2Hz,电流2m A,持续15min,每天1次,7天1疗程。应用水迷宫实验观察学习记忆和空间探索能力,Western Blot分析各组皮质区的顶叶和颞叶APP、IDE和BACE1蛋白的表达水平,免疫组化检测皮质区SP的表达。结果:行为学实验结果发现,与对照组相比,模型组小鼠的逃避潜伏期和搜索路径均明显增加(P0.05),穿越平台的次数明显减少(P0.0001);而与模型组相比,治疗组小鼠的逃避潜伏期和搜索路径均明显缩短(P0.05),穿越平台的次数明显增加(P0.01);与电针两疗程组相比,电针三疗程组的逃避潜伏期和搜索路径也明显缩短(P0.05),穿越平台的次数明显增加(P0.05)。免疫组化结果显示:对照组小鼠皮质区的顶叶和颞叶没有SP;与模型组相比,电针三疗程组的SP数目明显降低(P0.01)。Western Blot检测结果显示,模型组小鼠皮质区的顶叶和颞叶APP、BACE1的水平明显高于对照组(P0.0001),IDE的水平明显低于对照组(P0.0001);而与模型组相比,两个治疗组APP、BACE1的表达明显下调(P0.05;P0.001),IDE的表达明显上调(P0.05;P0.01);电针三疗程组APP、BACE1的水平明显低于电针两疗程组(P0.01)。结论:电针刺激能够改善APP/PS1双转基因AD模型小鼠的学习记忆和空间探索能力;另外,电针刺激可能通过影响皮质区APP、BACE1以及IDE等蛋白表达来调节Aβ的浓度,从而减少SP的形成和沉积。     

经鼻给予神经生长因子联合运动训练对APP/PS1转基因小鼠神经保护作用及学习记忆的影响

目的探讨经鼻给予神经生长因子（NGF）联合运动训练对APP/PS1转基因小鼠神经保护作用及对其学习记忆功能的影响。 方法采用随机数字表法将24只6月龄APP/PS1转基因小鼠分为对照组、NGF组、运动组及NGF联合运动训练组（简称联合组）。对照组小鼠每日给予50μl生理盐水滴鼻;NGF组小鼠每日经鼻滴入50μl含NGF（0.1mg/ml）生理盐水溶液;运动组小鼠每日给予50μl生理盐水滴鼻,同时辅以小强度跑台运动,每次持续训练30min;联合组小鼠每日8∶00经鼻滴入50μl含NGF（0.1mg/ml）生理盐水溶液,下午14∶00辅以小强度跑台运动,持续训练30min。采用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力变化;于实验进行21d时取各组小鼠脑标本进行免疫组化染色,观察大脑皮质APP、Ki-67及海马区NeuN阳性细胞表达情况。 结果Morris水迷宫定向航行实验中4组小鼠找到平台的潜伏期组间差异具有统计学意义（P<0.05）,其中NGF组、运动组及联合组潜伏期分别为（21.8±5.9）s、（20.2±5.6）s、（12.3±4.2）s,均明显短于对照组水平［（30.7±9.6）s］,并且联合组潜伏期亦显著短于NGF组及运动组（P<0.05）;空间探索实验中各组小鼠目标象限时间百分比组间差异具有统计学意义（P<0.05）,其中联合组目标象限时间百分比［（36.3±6.6）%］明显大于NGF组［（27.1±11.9）%］及运动组［（26.7±8.5）%］,组间差异具有统计学意义（P<0.05）。免疫组化检查结果显示,联合组与其他3组比较,其神经元排列整齐、细胞致密,APP蛋白表达明显减弱,Ki-67及NeuN阳性细胞表达均显著增强。 结论NGF滴鼻联合运动训练能显著提高APP/PS1转基因小鼠空间学习及记忆能力,其治疗机制可能与抑制APP表达、减少神经元损伤、促进内源性神经细胞增殖及存活有关。     

阿尔茨海默病转基因小鼠早期记忆功能障碍与氧化应激损伤关系的实验研究

目的 观察转APP/PS1基因阿尔茨海默病(AD)小鼠(APP/PS1小鼠)早期空间学习记忆功能及相关氧化应激反应指标的变化,并探讨它们之间的相关性.方法 应用Morris水迷宫评定APP/PS1小鼠及相应野生型(WT)小鼠的空间学习记忆功能,采用ELISA方法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性以及丙二醛(MDA)和蛋白质羰基的含量,并进行相关性分析.结果 2组小鼠的空间学习能力无明显差异(P＞0.05),而APP/PS1小鼠在目标象限(定位航行实验中平台所置第二象限)中航行时间占总时间的百分比(29.02±4.27)%较WT小鼠(47.39±6.01)%显著下降(t=0.000,P＜0.05),APP/PS1小鼠在目标象限中航行路程占总路程的百分比(28.85±3.77)%较WT小鼠(46.70±5.60)%也显著下降(t=0.000,P＜0.05),提示APP/PS1小鼠的空间记忆功能较WT小鼠显著下降.2组小鼠脑组织中的MDA含量、SOD和GSH-PX活性均无明显差异(P均＞0.05),而APP/PS1小鼠脑组织中的蛋白质羰基含量(2.67±0.19)较WT小鼠(2.38±0.15)显著增加(t=0.0088,P＜0.05).相关性分析表明:APP/PS1小鼠蛋白质羰基含量与目标象限航行时间百分比呈显著负性相关(r=-0.639,P＜0.05),APP/PS1小鼠蛋白质羰基含量与目标象限航行路程百分比呈显著负性相关(r=-0.636,P＜0.05).结论 APP/PS1小鼠早期空间记忆功能损害与脑组织中的蛋白质羰基含量升高呈负性相关,提示氧化应激导致的蛋白质羰基化在AD早期记忆损害发病过程中具有重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the spatial learning and memory ability,the changes of indicators of oxidative stress,and their relationship in transgenic APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease(APP/PS1 mice). Methods The spatial learning and memory ability were assessed by Morris water maze test,and the activity or content of SOD, GSH-PX, MDA, and protein carbonyl in brain tissues were measured by ELISA in the APP/PS1 and wild type (WT) mice. Furthermore, the relationship between the learning and memory performances and the indicators of oxidative stress was examined. Results No significant difference in the spatial learning was observed between the APP/PS1 and WT mice (P ＜0. 05). The spatial memory which was measured as the percentage of time traveling in the targeted quadrant to the total traveling time was significantlydeclined in the APP/PS1 mice(29. 02 ± 4. 27) % as compared with the WT mice(47. 39 ± 6. 01) %(t =0. 000 ,P ＜0. 05). The percentage of length of traveling in the targeted quadrant to the total length traveled was significantly lower in the APP/PS1 mice(28. 85 ±3.77)% compared with the WT mice(46. 70 ±5.60)% (t =0. 000,P ＜0. 05). These findings indicated that the spatial learning and memory ability of APP/PS1 mice was significantly decreased compared to WT mice. There was no significant difference in activity or content of SOD,GSH-PX,and MDA in brain tissues between the APP/PS1 and WT mice (P ＜ 0. 05), while the content of protein carbonyl was significantly elevated in the APP/PS1 mice (2. 67 ±0. 19) than in the WT mice (2. 38 ±0. 15)(t = 0. 008, P ＜ 0. 05). Correlation analysis revealed that the elevated protein carbonyl was negatively correlated with the percentage of length traveled in the targeted quadrant(r = - 0. 639, P ＜ 0. 05) and the percentage of time traveled in the targeted quadrant(r = - 0. 636 ,P ＜ 0. 05). Conclusion The spatial memory impairment was negatively correlated with the elevated protein carbonyl in the APP/PS1 mice, suggesting that protein carbonylation caused by oxidative stress might play an important role in the development of memory impairment in the early stage of Alzheimer's disease.     

阿尔茨海默病转基因小鼠早期记忆功能障碍与氧化应激损伤关系的实验研究

Objective To investigate the spatial learning and memory ability,the changes of indicators of oxidative stress,and their relationship in transgenic APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease(APP/PS1 mice). Methods The spatial learning and memory ability were assessed by Morris water maze test,and the activity or content of SOD, GSH-PX, MDA, and protein carbonyl in brain tissues were measured by ELISA in the APP/PS1 and wild type (WT) mice. Furthermore, the relationship between the learning and memory performances and the indicators of oxidative stress was examined. Results No significant difference in the spatial learning was observed between the APP/PS1 and WT mice (P ＜0. 05). The spatial memory which was measured as the percentage of time traveling in the targeted quadrant to the total traveling time was significantlydeclined in the APP/PS1 mice(29. 02 ± 4. 27) % as compared with the WT mice(47. 39 ± 6. 01) %(t =0. 000 ,P ＜0. 05). The percentage of length of traveling in the targeted quadrant to the total length traveled was significantly lower in the APP/PS1 mice(28. 85 ±3.77)% compared with the WT mice(46. 70 ±5.60)% (t =0. 000,P ＜0. 05). These findings indicated that the spatial learning and memory ability of APP/PS1 mice was significantly decreased compared to WT mice. There was no significant difference in activity or content of SOD,GSH-PX,and MDA in brain tissues between the APP/PS1 and WT mice (P ＜ 0. 05), while the content of protein carbonyl was significantly elevated in the APP/PS1 mice (2. 67 ±0. 19) than in the WT mice (2. 38 ±0. 15)(t = 0. 008, P ＜ 0. 05). Correlation analysis revealed that the elevated protein carbonyl was negatively correlated with the percentage of length traveled in the targeted quadrant(r = - 0. 639, P ＜ 0. 05) and the percentage of time traveled in the targeted quadrant(r = - 0. 636 ,P ＜ 0. 05). Conclusion The spatial memory impairment was negatively correlated with the elevated protein carbonyl in the APP/PS1 mice, suggesting that protein carbonylation caused by oxidative stress might play an important role in the development of memory impairment in the early stage of Alzheimer's disease.     

小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型的实验研究

目的::探索在短时间内建立小鼠心肌内转基因后压力超负荷模型,为深入研究心脏肥大的分子机制提供可靠的实验对象。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为升主动脉缩窄组(手术组)和同期假手术组(对照组),手术组根据暂时阻断主动脉血流5s、10s、20s、30s同时左心腔内分别注射Ad-LacZ或PBS后又分为LacZ组和PBS组,观察术后4周不同时间小鼠体重、颈动脉血压和心脏超声等变化HE染色和X-gal染色分别观察心肌肥厚情况和基因转染情况。结果:手术成活率88.8%。升主动脉缩窄小鼠的血压较对照组明显升高。缩窄术后2周心肌明显肥厚,4周时出现失代偿性心力衰竭。X-gal染色显示阻断血流5s以上心脏有蓝染,但10s、20s、30s之间无明显区别。结论:该方法简单有效,重复性好,可在短时间内建立小鼠心肌内转基因和压力超负荷心肌肥厚模型,为心脏肥大的深入研究提供可靠的实验对象。左心室心腔直接注射转染Ad-LacZ基因同时阻断升主动脉血流10s以上可以使目的基因有较好的表达。     

APP/PS1转基因AD小鼠磁共振波谱及行为学的对照观察

目的 探讨氢质子磁共振波谱(1H-MRS)成像对APP/PS1转基因AD小鼠代谢变化的显示及其早期诊断价值.方法 35只APP/PS1AD小鼠(实验组)和20只同源野生型小鼠(对照组)在6、9月龄时接受Morris水迷宫测试及1H-MRS成像.1H-MRS测量小鼠大脑海马区N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、肌醇(mI)和肌酸(Cr)的峰下面积,计算NAA/Cr和mI/Cr比值并进行两样本均数t检验.结果 与对照组比较, 实验组小鼠6月龄时mI/Cr比值明显升高(t=2.904,P＜0.05),NAA/Cr比值明显降低(t=-7.535,P＜0.05).免疫组化检查显示海马区出现Aβ沉积斑块,周围包绕活化的胶质细胞;而行为学差异在9月龄时才有统计学意义(P＜0.05),表现为小鼠学习和记忆方面的损害.结论 1H-MRS是早期评价AD的高敏感性、高特异性的方法,mI、NAA的变化早于行为学改变.     

PLZF-RARα/RARα-PLZF双阳性转基因小鼠发生白血病模型研究

本研究目的是从生物整体水平上研究PLZF-RARα/RARα-PLZF双融合基因的表达在急性早幼粒细胞白血病（APL）发病中的作用及发病机制.通过交配建立PLZF-RARα/RARα-PLZF双阳性转基因小鼠（TM）模型;采用PCR、RT-PCR方法检测融合基因的整合和表达;应用血象、骨髓象、病理和流式细胞术等对疾病表型进行检测分析;并观察全反式维甲酸（ATRA）或ATRA与tricostatin A（TSA）联合用药对PLZF-RARα/RARα-PLZF双阳性转基因小鼠骨髓细胞的作用.结果表明,在近18个月的时间观察到51只PLZF-RARα/RARα-PLZF双阳性转基因小鼠中有5只小鼠发病,发病率约10%,与我所同期的仅PLZF-RARα转基因阳性小鼠11.3%的发病率相似.发病时间均在6月龄以后,与PLZF-RARα转基因阳性发病小鼠相比示提前,但疾病表型不同,2只（40%）为急性早幼粒细胞白血病（APL）改变,3只（60%）为慢性粒细胞白血病（CML）改变.ATRA处理组的骨髓细胞形态无改变,而ATRA＋TSA组骨髓原始细胞核浆比例降低,染色质固缩,呈现粒细胞分化趋势.结论PLZF-RARα/RARα-PLZF TM小鼠发病存在异质性,其骨髓细胞对ATRA无反应,而ATRA与TSA联合用药可诱导骨髓原始早幼粒细胞分化.     

小檗碱对三转基因阿尔茨海默病小鼠海马组织Aβ和Bcl-2、Bax表达的影响

目的:观察旋小檗碱对APP/PS1/Tau三转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠海马组织β-淀粉样蛋白(Aβ)和Bcl-2、Bax表达的影响。方法:20只三转基因AD小鼠随机分为对照组和给药组,各10只。加药组给予小檗碱50 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,对照组给予等容量生理盐水灌胃,共3个月。Western Blot检测小鼠海马组织蛋白Aβ、Bcl-2和Bax表达,免疫组化测定小鼠海马Aβ表达,ELISA检测小鼠海马Bcl-2、Bax表达。结果:给药组海马组织Aβ表达较对照组降低(P0.05);与对照组比较,给药组海马组织Bcl-2表达增加而Bax表达减少(P0.05)。结论:小檗碱能降低三转基因AD小鼠的Aβ表达,其机制可能与Bcl-2和Bax表达改变有关。     

天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能的影响

背景：药物治疗早、中期阿尔茨海默病患者已证实有一定的疗效，可延缓其进展。 目的：观察天泰1号对自发阿尔茨海默病模型学习记忆功能的影响。 设计：随机对照实验。 单位：深圳市中西医结合研究所。 材料：实验在深圳市中西医结合临床研究所二级动物实验室完成。实验动物为昆明种小鼠。 方法：从21个月龄昆明种小鼠筛选出自发阿尔茨海默病（记忆障碍）鼠52只，随机分为4组即老年痴呆组、西药对照组、天泰1号6．80g/kg组、天泰1号20．41g／kg组，另设13只老年学习记忆正常鼠为老年正常组。西药对照组给以Hydergine 0．6mg/kg，天泰1号6．80g/kg，20．41g／kg组分别予正交优化的天泰1号方6．80g／kg及20．41g／kg，以上均研配成0．5mL液体灌胃给药，连续60d，老年正常组和老年痴呆组均灌以等量双蒸水。用跳台实验检测学习记忆成绩，比较各组的学习错误次数、记忆错误次数、学习训练逃避潜伏期和记忆测试安全平台潜伏期。 主要观察指标：天泰1号对自发性老年痴呆鼠学习记忆的改善作用。 结果：实验过程中实验动物无脱失，均进入结果分析。天泰1号6．80g/kg组，20．41g/kg组的学习、记忆错误次数均小于老年痴呆组（5．08&;#177;2．18，3．77&;#177;1．48，931&;#177;3．65；1．85&;#177;1.221，1.54&;#177;0．88，4.27&;#177;9.58），且天泰1号6．80g/kg组的学习、记忆错误次数多于天泰1号20．41g/kg组；天泰1号6．80g/kg组，20．41g／kg组的学习训练逃避潜伏期小于老年痴呆组，记忆测试安全平台潜伏期大于老年痴呆组[（18．9&;#177;7．5），（19．9&;#177;5．9），（33．7&;#177;9．3）s；（91．7&;#177;32．0），（101．5&;#177;40．9），（43．6&;#177;20．7）s]，且天泰1号6．80g/kg组的学习、记忆测试安全平台潜伏期小于天泰1号20．41g/kg组。 结论：自发阿尔茨海默病模型小鼠有明显的智能行为障碍，天泰1号可显著改善其学习记忆障碍，其作用呈现一定的量效相美美系．     

淀粉样β蛋白42及其亚单位疫苗预防接种对APPSWE转基因小鼠学习记忆能力的保护作用

背景：研究表明，淀粉样β蛋白42疫苗接种可以诱导阿尔茨海默病转基因小鼠产生特异性抗淀粉样β蛋白42抗体，清除其脑内的淀粉样β蛋白沉积，改善其学习记忆能力，在对阿尔茨海默病的防治中具有良好的应用前景。目的：研究淀粉样β蛋白42及其亚单位肽疫苗预防接种对APPSWE转基因小鼠学习记忆能力的影响。设计：以动物为研究对象，完全随机分组实验。单位：一所大学医学院人体解剖学教研室脑研究室。材料：实验于2003—04／2004—02在中山大学实验动物中心和人体解剖学教研室脑研究室进行。5月龄APPSWE转基因小鼠32只，购自美国Taconic company，在本室繁育成功。实验随机分成对照组、淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白1-15组和淀粉样β蛋白36-42组，每组8只。干预：淀粉样β蛋白42及其亚单位疫苗配伍MF59佐剂，基础接种采用皮下注射，加强接种采用鼻黏膜免疫，共接种8个月。疫苗接种前用Y迷宫作行为学测试，接种后用Morris水迷宫作行为学测试。主要观察指标：空间学习记忆能力，平均逃避潜伏期，穿过平台次数，第一象限游泳距离百分率，20％边缘区游泳距离百分率。结果：疫苗接种前对照组、淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白1．15组和淀粉样β蛋白36-42组APPSWE转基因小鼠Y迷宫作行为学测试10次中正确反应的次数分别为7．50&;#177;0．81．7．06&;#177;0．71．7．19&;#177;0．91．7．50&;#177;0．86，各组小鼠间的空间学习记忆能力差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；疫苗接种8个月后，对照组、淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白1．15组和淀粉样β蛋白36．42组小鼠定位航行试验8个单元训练的平均逃避潜伏期分别为(67．3&;#177;2．8)s，(23．6&;#177;1．6)s，(26．4&;#177;2．0)s和(36．5&;#177;2．2)s，淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白1．15组和淀粉样β蛋白36-42组较对照组明显缩短，淀粉样β蛋白42组，淀粉样β蛋白1．15组和淀粉样β蛋白36-42组之间差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；对照组、淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白45组和淀粉样β蛋白36—42组小鼠空间探索试验穿过平台次数分别为0．71&;#177;0．29，8．14&;#177;1．37，7．28&;#177;1．34和3．29&;#177;0．67，第一象限游泳距离百分率分别为[24．3&;#177;2．9)％，[50．6&;#177;11．6)％，[49．9&;#177;9．3)％和(35．4&;#177;7．0)％，20％边缘区游泳距离百分率分别为(46．4&;#177;7．3)％，(11．6&;#177;3．9)％．(14．4&;#177;2．6)％和(25．8&;#177;3．3)％，淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白45组，淀粉样β蛋白36．42组较对照组穿过平台次数显著增多、第一象限游泳距离百分率升高和20％边缘区游泳距离百分率降低，其中淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白45组，淀粉样β蛋白36—42组比较差异无显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：淀粉样β蛋白42及其亚单位疫苗预防接种可有效减轻APPSWE转基因小鼠学习记忆能力的损害。