犬低血流心肌缺血诱导GLUT1基因表达增加

目的：通过检测低血流心肌缺血后心肌细胞葡萄糖转运子1(GLUT1)基因的表达,探讨心肌细胞对葡 萄糖摄取增加的代谢机制。方法：建立犬低血流心肌缺血模型,放射 性核素标记方法检测心肌葡萄糖摄取量和GLUT1数量,采用Northern印迹法分析缺血心肌GLU T1 mRNA表达,采用免疫印迹法分析心肌GLUT1多肽表达。结果：与正 常心脏比较,低血流心肌缺血后,缺血心肌GLUT1 mRNA和GLUT1多肽表达明显增加,分别为 正常心肌的3.6倍和1.6倍(P<0.01)。无论在正常或缺血心脏,GLUT1表达均无部位差异 。结论：心肌缺血能诱导缺血心肌局部GLUT1表达增加,致使心肌细胞 在低血流心肌缺血过程中葡萄糖摄取和代谢增强。GLUT1表达增强可能是一种重要的心肌缺 血后代偿性保护机制。     

胰岛素与低血流缺血刺激犬心肌GLUT4基因表达呈相加作用

目的：观察胰岛素与低血糖缺血刺激心肌葡萄糖转运子4（GLUT4）基因是否呈相加作用。方法：采用North-ernblot法分析心肌GLUT4mRNA,采用免疫印迹法分析心肌GLUT4基因表达。结果：输注胰岛素使局部低血流心肌GLUT4mRNA和GLUT4基因表达增加2.3-2.5倍,同时伴随心肌葡萄糖摄取明显增多达4倍.结论:胰岛素与低血流缺血刺激心肌致GLUT4mRNA和GLUT4表达呈相加作用,其结果使GLUT4数量明显增加,进而使心肌葡萄糖摄取量增加,此机制在缺血心肌能量代谢过程中起着重要的代谢性调节作用。     

GLUT4表达调节与糖尿病相关问题研究

本文主要从葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的特点、转运表达调节以及对2型糖尿病慢性并发症的影响,综述GLUT4在机体糖代谢中的调节作用.糖尿病明显的特征是高葡萄糖血症,外周组织细胞摄取葡萄糖障碍,其中GLUT4含量降低和活动异常是主要原因.GLUT4是胰岛素敏感组织的主要葡萄糖转运蛋白,主要存在于脂肪和肌肉组织,对维持机...     

胰岛素促进犬缺血心肌GLUT4移位和葡萄糖摄取

目的 :观察胰岛素能否刺激缺血心肌葡萄糖转运子 4(GL U T4)移位和葡萄糖摄取。方法 :利用自动分析仪测定血浆葡萄糖、乳酸和游离脂肪酸浓度 ,应用 Western印迹法分析并检测 GL U T4含量。 结果 :胰岛素使缺血心肌细胞质膜 GL U T4明显增加 ,从 (2 5± 4) %增至 (4 0± 6 ) % (P<0 .0 5 ) ;细胞器膜 GL U T4则相应减少。同时伴随葡萄糖摄取量明显增加 ,是单纯缺血心肌葡萄糖摄取量的 2倍。结论 :胰岛素刺激可引起 GL UT4移位 ,使缺血心肌葡萄糖摄取增加。提示心肌缺血时 ,应用胰岛素有助于增加心肌葡萄糖的摄取和利用     

EGCG对Goto-kakizaki大鼠骨骼肌组织GLUT4表达的影响

目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对自发性Ⅱ型糖尿病GK大鼠的作用及对骨骼肌组织葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）表达的影响.方法 自发性2型糖尿病大鼠GK大鼠40只,同系健康对照Wistar大鼠10只,大鼠随机分为：正常对照组、Ⅱ型糖尿病组、Ⅱ型糖尿病低剂量EGCG（50 mg/kg）治疗组、中剂量（100 mg/kg）EGCG、高剂量EGCG（300 mg/kg）治疗组,6周后测血糖、血脂和骨骼肌GLUT4的水平.结果 EGCG可明显改善GK大鼠的OGTT及血脂,增加大鼠模型骨骼肌胞膜上GLUT4蛋白表达.结论 EGCG可降低TIIDM大鼠血糖水平,其机制与提高糖尿病大鼠骨骼肌中GLUT4表达有关.     

心肌细胞缺氧通过激活AMPK促进GLUT4移位和葡萄糖摄取

目的：探讨心肌缺氧时ＡＭＰ激活的蛋白激酶（ＡＭＰＫ）激活对葡萄糖转运子４（ＧＬＵＴ４）移位和葡萄糖摄取的作用。方法：大鼠心室肌经５００μｍｏｌ／Ｌ腺嘌呤－９－β－Ｄ－阿糖呋喃腺苷（ａｒａＡ）处理后,分别与胰岛素、氰化钾、５－氨基咪唑－４－氨基甲酰－１－β－Ｄ核糖呋喃腺苷（ＡＩＣＡＲ）孵育,用放射性核素分析技术测定其葡萄糖摄取量和ＡＭＰＫ活力,应用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析心肌细胞ＧＬＵＴ４含量。结果：ＡＭＰＫ特异性激活剂ＡＩＣＡＲ和氰化钾可使心肌葡萄糖摄取增加（１倍和１．５倍）,但均受ａｒａＡ抑制。ＡＩＣＡＲ增加心肌ＡＭＰＫ活力和葡萄糖摄取,而ａｒａＡ则有抑制作用。心肌细胞质膜ＧＬＵＴ４分布明显增加而细胞器膜ＧＬＵＴ４分布相应减少。结论：氰化钾所致的心肌缺氧与ＡＩＣＡＲ一样可通过ＡＭＰＫ激活途径,促进ＧＬＵＴ４移     

Axin1调节骨骼肌GLUT4蛋白表达的作用研究

目的：探讨体轴发育抑制因子（Axin1）调节骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达的作用及其机制。方法：利用RNAi干扰的Axin1腺病毒（Ad-siAxin1）感染C2C12小鼠骨骼肌细胞敲低Axin1,荧光显微镜和MTS实验明确Ad-siAxin1最佳感染浓度和时间。分别用携带绿色荧光蛋白的腺病毒（Ad-GFP）、Ad-siAxin1、载体质粒（vector）和Axin1质粒转染C2C12小鼠骨骼肌细胞敲低或过表达Axin1蛋白,Western印迹检测Axin1、端锚聚合酶蛋白（TNKS）和GLUT4蛋白水平。结果：荧光显微镜和MTS实验结果显示,在C2C12小鼠骨骼肌细胞中Ad-siAxin1作用的最佳浓度和时间分别为160μL和48 h。Western印迹结果显示,与Ad-GFP组相比,Ad-siAxin1组中Axin1蛋白降低（t=6.746,P<0.01）。Ad-siAxin1组TNKS蛋白水平降低（t=4.019,P<0.05）,GLUT4蛋白水平下调（t=3.248,P<0.05）。与vector组相比,转染Axin1质粒后,Axin1蛋白水平上...     

同型半胱氨酸对骨骼肌细胞GLUT4表达和分布的影响

目的 研究高同型半胱氨酸血症对骨骼肌细胞GLUT4表达和膜分布的改变,探讨同型半胱氨酸对葡萄糖摄取的影响.方法 20只6周健康小鼠随机分为对照组(10只)和高同型半胱氨酸血症组(10只),含1.5%的蛋氨酸饮水3个月制造高同型半胱氨酸血症模型;测定空腹状态下血糖和胰岛素;HE染色观察骨骼肌组织形态改变;免疫组织化学和Western Blot检测骨骼肌细胞GLUT4表达和细胞膜上分布.结果 高同型半胱氨酸血症组与对照组比较空腹血糖和空腹胰岛素增加(P＜0.05),骨骼肌组织结构完整,细胞膜上GLUT4分布降低,GLUT4蛋白质表达无明显差异(P＞0.05).结论 在骨骼肌组织中,同型半胱氨酸可能通过抑制GLUT4在细胞膜上分布,降低骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取.     

余甘子对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌PKB表达和GLUT4 mRNA表达的影响

目的：观察余甘子提取物对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌PKB表达和GLUT4 mRNA表达的影响.方法：SD大鼠30只,随机分为正常对照组10只,给予基础饲料;模型组20只,给予高脂饲料.模型组大鼠给予高脂喂养6wk后,随机分为2亚组：胰岛抵抗组,继续高脂饮食;余甘子组：给予高脂饲料同时进行2mL剂量3.5g/kg余甘子提取物灌胃.干预6wk后,分别检测3组大鼠骨骼肌PKB表达和GLUT4 mRNA表达的差异.结果：高脂饮食成功诱导了胰岛素抵抗,余甘子提取物显著改善了胰岛素抵抗,胰岛素抵抗组大鼠骨骼肌PKB表达和GLUT4 mRNA表达显著低于安静对照组和余甘子组,余甘子组与安静对照组相比无显著差异.结论：余甘子提取物明显改善胰岛素抵抗,可能与其提高大鼠骨骼肌PKB表达和GLUT4 mRNA表达有关.     

蓬灰对糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4 mRNA表达的影响

目的:探讨蓬灰对糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达的影响。方法:将高脂高热卡饲料喂养的SD大鼠一次性腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)(35mg/kg体重)制作糖尿病模型。成模后将大鼠随机分为糖尿病组、蓬灰高、中、低剂量组。高、中、低剂量组分别给予蓬灰150,100,50mg/kg灌胃,正常对照组及糖尿病组则给予等量生理盐水灌胃。灌胃8周后,应用免疫组化SABC法检测各组大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表达情况,检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛β细胞功能(HOMA-β)、胰岛素敏感指数(HOMA-ISI)水平等。结果:与正常对照组比较,糖尿病组,低、中、高剂量蓬灰组FBG、FINS明显升高,体重、HOMA-β、骨骼肌GLUT4mRNA表达明显减低(P<0.05);与糖尿病组比较,高剂量蓬灰组FBG、FINS明显升高,体重、HOMA-β、HOMA-ISI、骨骼肌GLUT4mRNA表达显著减低(P<0.05);与糖尿病组比较,中、低剂量蓬灰组体重、FINS、HOMA-ISI、骨骼肌GLUT4mRNA表达差别无统计学意义(P<0.05)。结论:蓬灰可降低糖尿病大鼠骨骼肌组织GLUT4mRNA表达水平,降低胰岛素敏感性和胰岛β细胞功能,加重胰岛素抵抗,使血糖波动明显。     

严重烧伤大鼠肝脏葡萄糖转运体1蛋白表达的实验研究

目的　探讨严重烧伤大鼠早期肝脏葡萄糖转运体 1(Glucosetransporter 1,GLUT 1)蛋白及其转录活性的变化和意义。方法　采用 3 0 %TBSAⅢ度烧伤大鼠模型 ,以正常大鼠为参照 ,WesternBlot法检测伤后 0 5、1、2、4、8、16h肝脏总蛋白中GLUT 1的表达 ;体外转染含有大鼠GLUT 1全长调控序列的报告基因构建体A ,2 4h后 ,1%氧浓度诱导表达 ,以 β 半乳糖苷酶为参照 ,分析报告基因表达强度的变化。结果　①与正常对照相比 ,严重烧伤后 1h大鼠肝脏Glut 1蛋白表达明显增加 (增加约 1 3 2倍 ) (P <0 0 5 ) ,在伤后 4～ 8h变化最为明显 ,约为正常对照的 2倍 (P <0 0 5 ) ,烧伤后 16h ,GLUT 1蛋白含量降低 (P <0 0 5 ) ;②构建体A转染 2 4h后 ,缺氧处理 3h ,报告基因的表达明显升高 ,增高约 3 19倍 (P <0 0 5 ) ,缺氧6h ,报告基因的表达增强 2 2 3倍 ,与 3h相比无明显差异 (P >0 0 5 )。本试验观察期内 ,缺氧处理 12h报告基因的表达强度最大 ,诱导表达倍数约 5 3 4倍 ,与缺氧 3、6h存在显著差异 (P <0 0 1)。结论　①严重烧伤以后 ,大鼠肝脏的GLUT 1蛋白含量增加。②缺氧诱导了大鼠GLUT 1基因 5′侧翼区全长序列介导的报告基因的表达     

缺氧诱导肝细胞中葡萄糖转运体1表达变化机制的实验研究

目的探讨缺氧诱导肝细胞中葡萄糖转运体1(GLUT-1)蛋白表达变化的机制.方法以含有GLUT-1全长调控序列的表达载体(构建体A)为模板,构建野生型(构建体N)和突变型(构建体M)缺氧反应元件(hypoxia response element, HRE)表达质粒,转染体外培养的肝细胞BRL,与含有全长缺氧诱导因子1α(HIF-1α)cDNA的质粒p(HA)HIF-1共转染,1%氧浓度诱导表达,分析报告基因的表达及变化.结果成功构建了构建体N和构建体M,转染BRL细胞后,缺氧明显诱导了构建体N和构建体M中报告基因的表达,与转染空载体的对照相比,报告基因的表达分别增加了7.2倍(P<0.05)和3.1倍(P<0.05),且两者之间具有明显的差异(P<0.05).构建体N与p(HA)HIF-1共转染,报告基因的表达增强了16倍,而构建体M与p(HA)HIF-1共转染时,与单独转染构建体M相比,两者没有显著差异(P>0.05).结论 HRE中的HIF-1结合位点在GLUT-1mRNA的缺氧诱导中起重要的作用.     

老年糖尿病隐匿性心肌缺血患者的动态血糖分析

目的:探讨老年2型糖尿病(T2DM)隐匿性心肌缺血(SMI)患者动态血糖波动的特点及临床意义.方法:85例老年受试者分为T2DM SMI组(35例)、单纯T2 DM无SMI组(NSMI组,35例)和正常对照组(NC组,15例)3组,行72 h动态血糖监测,并对监测结果进行对比分析.结果:SMI组日内平均血糖波动幅度(MAGE)和血糖波动系数(BGFC)均明显高于NSMI组(P＜0.05),夜间无症状低血糖发生率也明显升高(P＜0.05).结论:异常的血糖波动可能参与了老年T2DM患者SMI的发生与发展.     

Dynamic expression of glucose transporters 1 and 3 in the brain of diabetic rats with cerebral ischemia reperfusion

Background Blood glucose control improves the outcome of diabetic patients with stroke, but the target range of blood glucose control remains controversial. The functional recruitment of ischemia penumbra is extremely important to the recovery after stroke. The present study aimed to explore the expression of brain-type glucose transporters （GLUT1 and GLUT3） in cerebral ischemic penumbra at different blood glucose levels and different ischemic-reperfusion time in diabetic hypoxia-ischemia rats. The results might provide an experimental basis for clinical treatment of diabetic patients with stroke. Methods The Wistar rats included in this study were randomly assigned to 4 groups （50 rats each）： normal control group （NC）, uncontrolled diabetic group （DM1）, poorly-controlled diabetic group （DM2）, and well-controlled diabetic group （DM3）. Diabetic rats were induced by single intraperitoneal injection of streptozotocin, and the focal ischemic rat model of middle artery occlusion （MCAO） was made by insertion of fishing thread in 6 weeks after the establishment of the diabetic model. Each group was divided into 5 subgroups （10 rats each）： four focal ischemic subgroups at different ischemic-reperfusion time （at 3,12, 24 and 72 hours after reperfusion, respectively） and one sham-operated subgroup. The mRNA and protein expression of GLUT1 and GLUT3 was assessed by RT-PCR and Western blotting, respectively. Results There was significant difference in the mRNA expression of GLUT1 and GLUT3 between the four focal ischemic subgroups and the sham-operated subgroup at different reperfusion time in each group. The mRNA expression of GLUT1 and GLUT3 in the 4 ischemic groups began to increase at 3 hours, peaked at 24 hours after reperfusion and maintained at a higher level even at 72 hours compared with that of the sham-operated subgroup. The mRNA expression of GLUT1 increased more significantly than that of GLUT3. The mRNA expression of GLUT1 and GLUT3 was significantly different between the diabetic groups and normal control group. The mRNA expression of GLUT1 and GLUT3 was increased more significantty in the diabetic groups than that in the normal control group. There was a significant difference in the mRNA expression in the groups with different blood glucose levels. The mRNA expression tended to decrease with increased blood glucose levels. The expression trend of GLUT1 and GLUT3 protein was similar to that of GLUT1 and GLUT3 mRNA. Conclusions GLUT1 and GLUT3 expression was notably up-regulated in the penumbra region after cerebral ischemia in this study. But the up-regulated amplitude of GLUT1 and GLUT3 in the diabetic rats with cerebral ischemic injury became smaller than that of the normal controls. In the treatment of diabetic patients with cerebral embolism, blood glucose control should not be too strict, otherwise the up-regulation of GLUT1 and GLUT3 induced by cerebral ischemic injury might not be able to meet the needs of energy metabolism in cells. Chin Med J 2009; 122（ 17）： 1996-2001     

Effect of Huanglian Jiedu Decoction (黄连解毒汤) on glucose transporter 4 expression in adipose and skeletal muscle tissues of insulin resistant rats

Objective： To investigate the effects of Huanglian Jiedu Decoction （黄连解毒汤, HLJDD） on glucose transporter 4 （GLUT4） protein expressions in insulin-resistant murine target tissues. Methods： The experimental male Wistar rats were established into insulin resistant models by injecting streptozotocin （STZ 30 mg/kg） via caudal vein and feeding them with high fat high caloric diet, and randomly divided into the model group, the aspirin group and the HLJDD group. Besides, a normal group was set up for control. Changes of body weight （BW）, levels of serum fasting blood glucose （FBG）, serum fasting insulin （FINS） and oral glucose tolerance test （OGTT） were routinely determined. The expression of GLUT4 protein in adipose and skeletal muscle tissues before and after insulin stimulation was determined with Western blot. Results： In the HLJDD group after treatment, BW and FBG got decreased, OGTT improved, and the expression and translocation of GLUT4 protein elevated obviously, either before or after insulin stimulation, as compared with those in the model group, showing significant differences respectively. Conclusion： The mechanism of improving insulin resistance by HLJDD is probably associated with its effect in elevating GLUT4 protein expression and translocation in adipose and skeletal muscle tissues of insulin resistant rats.     

有氧运动对高脂膳食金黄地鼠葡萄糖转运蛋白4、血糖及胰岛素的影响

目的探讨有氧运动对高脂膳食金黄地鼠葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GluT4)、血糖及胰岛素的影响。方法将健康雄性清洁级金黄地鼠20只随机分为运动组和对照组,每组10只,均给予质量分数10%高脂膳食。运动组金黄地鼠作跑台运动10周,对照组在原有条件下饲养,不作跑台运动。10周后检测金黄地鼠血糖、胰岛素及骨骼肌和脂肪组织中GluT4的基因表达。结果跑台运动10周后运动组金黄地鼠空腹血糖为(12.89±3.35)mmol.L-1,低于对照组的(19.23±2.45)mmol.L-1,差异有统计学意义(P<0.05);运动组血清胰岛素水平[(20.95±6.96)mmol.L-1]、胰岛素抵抗指数(2.47±0.35)均低于对照组[分别为(31.70±6.51)mmol.L-1、6.39±0.14],差异有统计学意义(P<0.01);运动组骨骼肌GluT4 mRNA表达(0.35±0.06)高于对照组(0.10±0.05),差异有统计学意义(P<0.01),肾周脂肪组织中GluT4 mRNA表达运动组(0.21±0.09)也高于对照组(0.09±0.03),差异有统计学意义(P<0.01)。运动组骨骼肌和脂肪组织中GluT4 mRNA的表达与血糖和胰岛素水平呈显著负相关。结论有氧运动可以降低血糖和胰岛素水平,增强GluT4 mRNA表达并向细胞膜转移,促进骨骼肌细胞及脂肪细胞对葡萄糖的摄取和利用,改善胰岛素抵抗。     

三甲氧苄嗪对低流量灌流大鼠心肌细胞葡萄糖转运蛋白-1、4 mRNA表达的影响

目的通过离体心脏灌注模型,观察低流量缺血及TMZ对大鼠心肌细胞葡萄糖转运蛋白-1、 4(glucose transporter type1、4,GLUT1/4)mRNA表达的影响.方法成年、雄性Wistar大鼠,分为(1)对照组(N);(2)缺血再灌注组(R);(3)缺血组(Ⅰ);(4)预处理/缺血(PI);预处理/缺血/再灌注组(PR).另取12只雄性Wistar大鼠,喂以TMZ14日,随机分为TMZ对照组(TC)和TMZ缺血/再灌注组(TR).各组均测定灌流液LDH、CK含量,并用RT-PCR方法观察心肌GLUT-1/GLUT-4 mRNA表达的变化.结果预处理和TMZ饲喂明显降低心肌缺血及再灌注期间LDH和CK的释放;GLUT-1 mRNA含量Ⅰ组、R组、PI组、PR组、TC组和TR组明显高于正常对照组(P值均小于0.05);R组、PI组和PR组含量明显低于Ⅰ组(P值均小于0.05);PR组和R组或PI组间比较,差值没有显著意义;TR组GLUT-1 mRNA含量明显高于R组及PR组(P值均小于0.05);而TR组和Ⅰ组比较则无显著差异.各组间GLUT-4 mRNA含量变异大,没有显著差异.结论低流量缺血显著增加了心肌GLUT-1 mRNA的表达,丽对GLUT-4 mRNA的含量没有显著的影响;而再灌注后,GLUT-1 mRNA含量较再灌注开始前有所下降,但仍高于基础状态.口服TMZ增加非缺血心肌在正常氧供状态下GLUT-1 mRNA表达,有助于提高心脏对低流量缺血的耐受性,并减轻再灌注对心肌细胞的损伤程度.