不同提取溶剂对当归赤芍药对主要活性成分溶出率的影响

目的:研究当归赤芍药对不同提取溶媒中活性成分的溶出率。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS及UPLC-TQ-MS液质联用集成技术,研究当归赤芍药对中阿魏酸、香草酸、没食子酸等酚酸类成分,芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷、没食子酰芍药苷等单萜苷类成分,洋川芎内酯、藁本内酯等苯酞类成分在水及不同浓度乙醇中的溶出率。结果:当归赤芍药对中酚酸类成分,单萜苷类成分随醇浓度的升高溶出率下降,苯酞类成分则反之;在水及低浓度醇中多数活性成分溶出率较高。结论:液质联用集成技术是一种适合在缺少对照品条件下开展多成分综合评价中药制备工艺的可行方法,可为优选工艺参数提供参考。     

基于网络药理学探讨赤芍-白芍药对治疗系统性红斑狼疮的作用机制

目的:探讨二芍治疗系统性红斑狼疮(SLE)的潜在生物学机制。方法:利用TCMSP数据库,结合文献研究的方法,收集白芍、赤芍2味药物所包含的活性成分,以口服吸收利用度(OB)≥30%,药物相似性(DL)≥0.18作为筛选条件,得到赤芍、白芍的有效活性成分群。通过化学成分靶点预测的方式获取2味药物的重要成分和潜在生物学靶点。利用Drugbank、TTD等数据库获取系统性红斑狼疮的作用靶点。将药物靶点与疾病靶点映射后得到交集靶点,再利用软件Cytoscape3.6.0进行靶点-疾病网络的构建及拓扑分析。利用Metascape数据库对芍药的作用靶点进行PPI网络构建、GO分析和KEGG富集分析,预测作用机制。结果:共筛选出赤芍、白芍的重要有效活性成分21个,其中赤芍16个,白芍8个,二者共同有效成分3个,分别为谷甾醇、β-谷固醇和芍药苷。预测到芍药潜在生物学靶点608个,得到疾病作用靶点114个,二者交集靶点40个。PPI网络中Degree值排名靠前的5个靶点为CYP3A4、CYP2C9、HSPA5、MAPK3、和CYP2C19。GO分析和KEGG富集分析表明,二芍主要参与类固醇代谢过程、对外源刺激的反应、对细菌起源分子的反应等多个过程以及抗叶酸抵抗、ABC转运蛋白和卵巢类固醇生成等多条通路。结论:赤芍、白芍对于SLE的调控具有多成分、多靶点、多通路、多层次的特点,其主要生物学机制可能与细胞色素P450酶、类固醇代谢过程、抗叶酸抵抗通路等相关。     

黄脚胡蜂脂溶性成分的GC-MS分析

目的:测定黄脚胡蜂的脂溶性成分的组成。方法:采用浸渍法提取脂溶性成分,并用气相色谱-质谱联用仪检测其化学成分。结果:从黄脚胡蜂脂溶性成分中鉴定了12个化合物,其主要成分为油酸乙酯(57.82%)、亚油酸乙酯(11.76%)、棕榈酸乙酯(8.32%)、苯乙醇(8.08%)、丁二酸二乙酯(3.48%)。结论:黄脚胡蜂的脂溶性成分中含量较高的亚油酸乙酯和棕榈酸乙酯具有抗炎的作用,这与云南民间将黄脚胡蜂用酒浸泡后用来治疗佐剂性关节炎和类风湿性关节炎相一致,为民间的用法提供了理论依据。     

不同产地倒地铃挥发油化学成分GC-MS分析

目的:研究不同产地倒地铃挥发油的化学成分。方法:采用超临界CO_2萃取法提取挥发油,用气相色谱-质谱联用法分析鉴定其化学成分,用面积归一化法确定其相对含量。结果:南宁产倒地铃挥发油共鉴定出21个化合物,占总挥发油的90.82%,主要成分为棕榈酸(27.50%)、亚麻酸(11.19%)、甲氧基肉桂酸乙酯(6.96%)、亚油酸(5.05%),烷烃类化合物占的比重为23.74%;柳州产倒地铃挥发油共鉴定出25个化合物,占总挥发油的89.4%,主要成分为1-二十六(碳)烯(12.71%)、甲氧基肉桂酸乙酯(8.53%)、棕榈酸甲酯(6.17%)、叶绿醇(5.90%)、棕榈酸乙酯(5.79%),烷烃类占的比重为37.92%。结论:超临界CO_2萃取法提取得到的南宁产地倒地铃主要成分以棕榈酸、亚麻酸、甲氧基肉桂酸乙酯和亚油酸为主,柳州产地倒地铃主要成分以1-二十六(碳)烯、甲氧基肉桂酸乙酯、棕榈酸甲酯、叶绿醇和棕榈酸乙酯为主,两种不同产地倒地铃的挥发性成分及含量有较大的差异。     

双黄连抗结肠癌活性组分中药的发现和验证

目的:应用网络药理学方法,从双黄连方剂中预测具有抗肿瘤活性的组分中药,并通过离体细胞实验与动物实验对其抗CT26结肠癌活性进行初步验证。方法:基于中药系统药理学数据库(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database,TCMSP),《中药活性成分分析手册》,药品生物信息学和化学信息学数据库(DrugBank),信号通路数据库(Reactome)及人类蛋白质参考数据库(Human protein reference database,HPRD),构建蛋白-蛋白相互作用网络(proteinprotein interactions network,PPI)和化合物靶标网络,挖掘化合物的药理作用,发现与PPI网络节点距离较短的化合物,确定组成中药的配伍。以CT26结肠癌细胞为实验材料,结合离体和在体实验初步验证组分中药的抗肿瘤作用。结果:从双黄连组分中预测并发现"黄芩苷、连翘酯苷A和绿原酸"3个化合物配伍具有潜在抗肿瘤活性。验证结果表明,细胞实验中,与空白组比较,双黄连组分中药能显著抑制CT26细胞的增殖和迁移(P0. 01);动物实验中,与荷瘤模型组比较,双黄连组分中药治疗组小鼠皮下肿瘤体积增长缓慢、肿瘤重量显著降低(P0. 01)。结论:结合数据库挖掘和化合物靶点网络构建、分析等方法从双黄连方剂中发现具有抗肿瘤活性的组分中药"黄芩苷、连翘酯苷A和绿原酸"。经验证,该组分中药具有较好的抗CT26结肠癌活性。     

高效液相色谱法同时测定清热护肝方中葛根素、栀子苷和芍药苷的含量

正清热护肝方由葛根、栀子、芍药、柴胡、枸杞、茵陈、五味子、板蓝根、垂盆草、紫草组成,具有清热解毒、保肝护肝的功效。其中葛根、栀子、芍药是其重要成分。目前,未见同时测定清热护肝方多个成分含量的报道。笔者采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定清热护肝方葛根中活性成分葛根素、栀子中活性成分栀子苷和芍药中活性成分芍药苷的含量,并进行方法学考察,以期为有效控制该制剂的质量提供参考。1仪器与试药     

不同产地鸡矢藤挥发油成分的GC-MS分析

目的:对不同产地鸡矢藤挥发油成分进行GC-MS分析。方法:采用水蒸气蒸馏法提取鸡矢藤挥发油,利用GC-MS、主成分分析法及聚类分析法,对不同产地的鸡矢藤挥发油成分进行分析。结果:11批样品共鉴定出109种化合物,有10种共有成分(即棕榈酸、藁本内酯、棕榈酸乙酯、叶绿醇、亚油酸乙酯、二甲基三硫、十五烷酸、肉豆蔻酸、苯乙醛及2-正戊基呋喃);对11批鸡矢藤10种共有成分进行主成分分析,前3个主成分的累计贡献率达到76.820%;聚类分析将11批鸡矢藤分为4类。结论:该研究为鸡矢藤的进一步开发利用提供了实验依据。     

HepG2细胞胰岛素抵抗模型的建立及在筛选两色金鸡菊活性化合物中的应用

目的:体外建立人肝癌细胞(HepG2)胰岛素抵抗模型,并初步筛选两色金鸡菊中可有效改善胰岛素抵抗的萃取部位及活性化合物。方法:用不同浓度的胰岛素、棕榈酸或葡萄糖分别对HepG2细胞进行不同时间的诱导,通过MTT法对细胞活性进行评价及葡萄糖氧化酶法对HepG2细胞葡萄糖消耗量测定,明确建立稳定的HepG2胰岛素抵抗模型的试剂诱导浓度及诱导时间。模型建立后,应用不同浓度的两色金鸡菊粗提物、各萃取部位及七个单体化合物奥卡宁(Okanin,2)、3',4',8-三羟基黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3',4',8-trihydroxyflavone-7-O-β-D-glucopyranoside,3)、槲皮素(Quercetin,4)、黄诺马苷(Flavanomarein,5)、马里苷(Marein,6)、豆甾醇(Stigmasterol,13)、紫铆花素(Butein,16)预处理细胞24 h,再用55 mmol·L-1葡萄糖刺激24h,用葡萄糖氧化酶法或2-NBDG荧光标记葡萄糖法分别观察不同浓度的上述成分对胰岛素抵抗模型HepG2细胞糖消耗或糖吸收的影响。MTT法对各组细胞活性进行评价。结果:HepG2细胞在10-7mol·L-1浓度的胰岛素中作用24 h,或在55 mmol·L-1的葡萄糖中刺激24 h,细胞葡萄糖消耗量明显减少(P0.01)且稳定性良好,并且对细胞存活率未造成影响,可作为胰岛素抵抗模型;而棕榈酸组虽然糖消耗显著下降但细胞存活率也显著降低。两色金鸡菊总提物、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位及2号、3号、5号和16号化合物均有改善细胞胰岛素抵抗作用,其中5号黄诺马苷和6号马里苷效果较好。结论:黄诺马苷和马里苷可能是两色金鸡菊中改善胰岛素抵抗的主要活性成分。     

基于网络药理学和分子对接技术研究黄芪-赤芍治疗COPD的作用机制＊

目的 基于网络药理学和分子对接技术探究黄芪-赤芍配伍对治疗慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）的作用机制。方法 利用TCMSP，Pharmmaper数据库，筛选黄芪-赤芍治疗COPD的活性成分和潜在靶点；结合Genecards数据库挖掘的COPD相关靶点，对黄芪-赤芍药对与COPD靶点进行PPI网络构建，交互处理得到黄芪-赤芍药对治疗COPD的关键靶点，并进行GO分析和KEGG通路富集分析；并采用分子对接技术将主要活性成分与TNF-α（肿瘤坏死因子），IL-6（白细胞介素6）等进行分子对接；最后利用A549炎症细胞与人脐静脉内皮细胞缺氧损伤模型进行体外细胞实验对结果加以验证。结果 黄芪-赤芍药对中44个有效成分作用于COPD，核心成分为：槲皮素、山奈酚、丁子香萜、芍药苷、（2R，3R）-4-methoxyl-distylin、二氢异黄酮；黄芪-赤芍药对通过IL6、PTGS2、TNF等113个靶蛋白，调控Ras、PI3KAkt、IL-17等多条信号通路治疗COPD，且分子对接结果显示槲皮素、山奈酚、丁子香萜、芍药苷与IL-6、PTGS2、TNF大分子蛋白有良好的结合性，体外细胞试验证实，槲皮素与山奈酚均能减少IL-8，MMP-9炎症因子的分泌，具有不同程度的抗炎效果；芍药苷有明显的扩血管、抗血栓之效。结论 黄芪-赤芍药对治疗COPD具有多成分、多靶点、多通路、整体调节的作用特点。初步揭示了黄芪-赤芍药对通过抑制炎症反应、调节上皮细胞生长增强保护屏障等预测出黄芪-赤芍药对治疗COPD的潜在作用机制，以期为其活性成分的药效物质基础提供理论研究和思路。     

桂枝茯苓胶囊中主要成分对人子宫肌瘤细胞增殖及小鼠离体子宫收缩活动的影响

目的:初步评价桂枝茯苓胶囊中17个主要成分抗子宫肌瘤细胞增殖及抗痛经作用。方法:人子宫肌瘤细胞以4×103个/孔接种于96孔板中,加入终质量浓度为25 mg·L~(-1)的17个主要成分作用48 h,每组设6个复孔,采用Hoechst33342/碘化丙啶(PI)双染分析考察17个成分对人子宫肌瘤细胞的体外抑制作用;采用缩宫素(PGF2α)诱导的小鼠离体子宫收缩模型评价17个主要成分的抗痛经生物效应,每组实验重复10次。结果:与空白组比较,槲皮素,桂皮醛,丹皮酚,茯苓酸,去氢土莫酸,白芍苷,芍药苷7个成分能明显抑制子宫肌瘤细胞的增殖,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);与空白组比较,没食子酸,芍药苷,丹皮酚,苦杏仁苷,苯甲酰芍药苷,五没食子酰葡萄糖6个成分对小鼠离体子宫平滑肌收缩有明显抑制作用(P0.01)。结论:槲皮素,桂皮醛,丹皮酚,茯苓酸,去氢土莫酸,白芍苷,芍药苷7个成分可能是桂枝茯苓胶囊治疗子宫肌瘤的主要活性成分;没食子酸,芍药苷,丹皮酚,苦杏仁苷,苯甲酰芍药苷,1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖6个成分可能是桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经的主要活性成分。     

Hepatoprotective effect of flavonoid glycosides from Lespedeza cuneata against oxidative stress induced by tert-butyl hyperoxide

The aerial parts of Lespedeza cuneata G. Don, perennial legume native to Eastern Asia, have been used therapeutically in traditional Asian medicine to protect the function of liver, kidneys and lungs. However, little is known about the pharmaceutical effect of extracts from this plant. In the present study, the aerial parts of L. cuneata were used to prepare an ethanol extract, which was then tested for hepatoprotective effects against injury by tert-butyl hyperoxide (t-BHP). At a dose of 20 μg/mL, the ethanol extract significantly protected HepG2 cells against the cytotoxicity of t-BHP. Further fractionation of the extract with ethyl acetate allowed the isolation of five flavonoid compounds that were structurally identified by 1H and 13C NMR spectroscopy as isovitexin, hirsutrin, trifolin, avicularin and quercetin. Hirsutrin, avicularin and quercetin (10 μM) showed clear hepatoprotective activity against injury by t-BHP in HepG2 cells, whereas isovitexin and trifolin showed no protective effects. The observed hepatoprotective effect of the investigated compounds showed a high correlation with radical scavenging activity, which followed the structure-activity relationships of the flavonoid aglycones.     

湖北栝楼果皮挥发油化学成分的研究

 目的：对葫芦科植物湖北栝楼果皮的挥发油中性部分进行化学成分的研究。方法：采用水蒸汽蒸馏法提取挥发油。以碱水从其乙醚溶液中除去酸性部分后得到的中性部分用于实验。以气质联用对化学组分进行分离和鉴定，通过标准图谱对照确定化合物名称。以气相色谱归一化法测定其百分含量。结果：鉴定了38个化合物，其含量之和占挥发油中性部分的76.01%。结论：湖北栝楼果皮的挥发油含有棕榈酸乙酯、亚油酸乙酯、棕榈酸甲酯、亚麻酸乙酯、亚麻酸甲酯和亚油酸甲酯等长链脂肪酸的甲酯和乙酯化合物共16个，还含有十六醛和六氢金合欢基丙酮等其它结构类型的化合物22个。     

New phenolic constituents obtained from Polygonum multiflorum

Objective: To isolate the phenolic compounds obtained from the dried roots of Polygonum multiflorum and investigate their pharmacological activities. Methods: The chemical constituents were isolated and purified by combining them with a macroporous resin (DM-8), MCI gel, and Sephadex LH-20 and by performing ODS column chromatography. Their structures were elucidated by 1D and 2D NMR analyses, as well as mass spectrometry. The isolated compounds were evaluated to determine their hepatoprotective and α-glucosidase inhibitory activities in vitro. Results: Two phenolic compounds, namely, polygonimitin E (1) and polygonimitin F (2), were isolated from the dried roots of P. multiflorum. Compound 2 (10 μmol/L) only showed moderate hepatoprotective activity against N-acetyl-p-aminophenol (APAP)-induced HepG2 cell damage. Unfortunately, these two compounds exhibited no α-glucosidase inhibitory activity. Conclusion: Compounds 1 and 2 were new compounds. Compound 2 could be one of the potential hepatoprotective constituents of P. multiflorum.     

银花泌炎灵片挥发油化学成分的GC-MS分析

目的:采用气相色谱-质谱联用法对银花泌炎灵片的挥发油成分进行分析,以丰富该制剂的化学成分研究,并为其质量控制提供理论基础.方法:采用《中国药典》一部(2010年版)附录XD挥发油测定法对银花泌炎灵片的挥发油进行提取,用气相色谱-质谱法对化学成分进行鉴定,以毛细管柱进行分析,面积归一化法测定其相对含量.色谱柱为Agilent19091M-436弹性石英毛细管色谱柱(0.25 mm×30 m,0.25 μm);程序升温,起始温度为60℃,以10℃·min-1升温至280℃,保持12 min;进样口温度为280℃.质谱条件:电子轰击(EI)离子源,电离电压70 eV,离子源温度230℃,扫描范围m/z 20～500.结果:共分离出30个化学成分,鉴定出其中的21种成分,相对含量超过5％的成分有棕榈酸(34.15％)、棕榈酸乙酯(21.01％)、1,5,9-三甲基-12-异丙烯基-1,5,9-十四烷环三烯(10.82％)、(Z,Z,Z)-9,12,15-亚油酸乙酯(7.71％).结论:银花泌炎灵片中挥发油成分主要包含棕榈酸,棕榈酸乙酯,亚油酸乙酯类成分等.     

川楝子中肝毒性成分的快速筛查研究

使用荧光探针FDA标记的HepG2细胞模型及细胞荧光显微图像自动分析法,对川楝子的23个化学组分进行快速筛查,发现5个组分具有明显毒性.对其中的2个组分进行液质联用分析,推测鉴定了10个化学成分,制备并鉴定出其中3个成分的分子结构(meliasenin B,trichilinin D,1-O-tigloy-l-O-debenzoylohchinal).进一步实验研究发现,这3个成分对HepG2细胞呈量-毒关系,提示川楝子中这些成分可能引起肝毒性.     

Hepatoprotective phenolic constituents of Rhodiola sachalinensis on tacrine-induced cytotoxicity in Hep G2 cells

Two hepatoprotective phenolic compounds, kaempferol (2) and salidroside (4), were isolated from the roots of Rhodiola sachalinensis together with two inactive compounds cinnamyl alcohol (1) and daucosterol (3) based on the hepatoprotective activity against tacrine-induced cytotoxicity in human liver-derived Hep G2 cells. The EC(50) values of compounds 2 and 4 were 33.5 and 51.3 micro m, respectively. Silybin as a positive control showed an EC(50) value of 68.4 micro m.     

Antioxidant and anticancer activities of organic extracts from Platycodon grandiflorum A. De Candolle roots

This study examined the antioxidant and anticancer activities of the petroleum ether extracts from the roots of Platycodon grandiflorum A. DC, which is a plant used as both a herbal medicine and food in Asia. Extracts from Platycodon grandiflorum in petroleum ether were fractionated (fractions I-V) by silica gel column chromatography using gradient solvents (petroleum ether: ethyl ether, 9:1-5:5, v/v). The antioxidant activities of the fractions were evaluated in terms of their inhibition of lipid peroxidation as well as their free radical scavenging activity. Fraction II, which was extracted at an 8:2 mixture of petroleum ether and ethyl ether, exhibited the greatest antioxidant activity among the fractions. On the other hand, the cytotoxicity of each fraction, which was evaluated by the MTT assay using human cancer cell lines (HT-29, HRT-18 and HepG2), was greatest in fraction III, which was extracted with a 7:3 petroleum ether and ethyl ether mixture. Both fractions, II and III, were sub-fractionated by thin layer chromatography, and the sub-fractions each were screened for their antioxidant and anticancer activities. In addition, the antioxidant activity was closely related to the content of phenolic compounds, and the anticancer active fraction exhibited a typical UV absorbance spectrum of polyacetylene.     

Hepatoprotective activity in the rat of ursolic acid isolated from eucalyptus hybrid

Ursolic acid has been evaluated for its choleretic, anticholestatic and hepatoprotective activities in rats. It produced a dose-dependent (5–20 mg/kg) choleretic effect. Significant anticholestatic activity (27.9–100%) was observed against paracetamol (2.0 g/kg) induced cholestasis. The compound also showed a marked hepatoprotective activity against paracetamol and galactosamine (800 mg/kg) induced hepatotoxicity by reversing the altered values in viability of the isolated hepatocytes and the altered biochemical liver and serum parameters. The activity of ursolic acid compared well with the known hepatoprotective drug, silymarin.     

瑶药黄酮化合物体外抗肿瘤活性研究

目的：研究瑶族药用植物中黄酮化合物的体外抗肿瘤活性，并初步分析它们的构效关系。方法：采用四甲基偶氮唑盐（MTT）吸收减少实验，测定6个黄酮化合物对2种正常细胞的毒性和对7种肿瘤细胞的增殖抑制作用。结果：6种化合物中，圣草苷、柚皮苷、槲皮素和槲皮苷对2种正常细胞非洲绿猴肾细胞Vero和人黑色素细胞MC基本不显示出毒性，柚皮素对这2种细胞的毒性都较大，而圣草酚对Vero细胞毒性很小，对MC细胞的毒性非常大。柚皮素有较广谱的抗肿瘤活性，它对7个受试肿瘤细胞都显示出较强的增殖抑制，尤其对乳腺癌细胞MCF-7的半数抑制浓度达到了50μg/ml。在7种肿瘤细胞中，MCF-7和肝癌细胞HepG2对受试黄酮化合物最为敏感，两者都被圣草酚、柚皮素和槲皮素以较低浓度有效地抑制。这些化合物对肿瘤细胞的抑制作用都显示出浓度依赖性。结论：圣草酚、柚皮素和槲皮素对肿瘤细胞的生长有较好的抑制作用．而官们的葡萄糖苷的细胞毒性较小．     

木香降血糖有效部位及有效成分研究

目的筛选木香中降血糖活性部位及主要成分。方法制备木香乙醇提取物,乙醇提取物醋酸乙酯部位、正丁醇部位和水提取部位;用HepG2细胞消耗葡萄糖模型和四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型测定各提取物的降血糖活性;降血糖活性强的醋酸乙酯部位用柱色谱法继续分离、精制,得2个化合物,经NMR等鉴定化合物结构;并对2个化合物进行降血糖活性研究。结果木香醋酸乙酯部位有较强的降血糖作用,从木香醋酸乙酯部位中分离得到木香烃内酯和去氢木香内酯,且两者均可降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的血糖,并显示很好的抗氧化作用。结论木香烃内酯和去氢木香内酯可能是木香的降血糖活性成分,抑制氧化应激从而减轻胰岛素抵抗可能是其降血糖机制。