PI3K/Akt信号通路及其抑制剂的研究进展

磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/丝氨酸-苏氨酸激酶（Akt）信号通路在信号转导的调控中扮演着重要角色,能调节细胞增殖、凋亡、代谢、运动、血管生成等生物过程。与其他信号通路相比,PI3K/Akt信号通路的组成部分更庞大,在肿瘤中更多见。目前已证实多种肿瘤中存在PI3K/Akt信号通路的超活化,对肿瘤细胞的存活、生长、运动、血管生成和代谢意义重大。因此,抑制PI3K和与通路相关的成分可能会使肿瘤生长受抑,使患者预后改善。PI3K/Akt信号通路抑制剂包括针对单一成分的抑制剂和双重抑制剂。目前大量的PI3K抑制剂已在临床前期研究中取得良好结果,有些已经在血液恶性肿瘤和实体肿瘤中进行了临床试验。在此综述中,我们简单的总结了PI3K-AKt通路的研究成果,讨论了PI3K抑制剂从临床前研究到临床研究的发展前景。     

乳腺癌中KRT1和PI3K的表达及其临床意义

目的探讨KRT1和PI3K在乳腺癌组织中的表达和意义,分析其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化PV 6000法检测50例乳腺癌及其癌旁正常组织中KRT1及PI3K的表达,分析两者的表达与临床病理特征及其相关性。结果 KRT1及PI3K在乳腺癌组织中阳性率明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P 0.05);两者的表达呈负相关(r=-0.343,P 0.05); KRT1的表达与乳腺癌患者ER、PR状态、术后2年是否复发有关; PI3K的表达与乳腺癌患者ER状态、术后2年是否复发有关(P均0.05)。结论乳腺癌中KRT1和PI3K的异常表达共同影响患者的预后,有望成为乳腺癌的潜在生物学标志物。     

P13K抑制剂对胶质瘤Akt2、p-Akt表达影响的研究

目的探讨P13K抑制剂LY294002对胶质瘤Akt2、p-Akt表达的影响。方法试验分组：取对数生长期的胶质瘤U251细胞,调整细胞浓度为1×104个/ml,24 h后换液,LY294002组中DMEM高糖培养基含LY294002的浓度设四个梯度,其终浓度分别为5、10、20、40μmol/L 对照组为含等量含有机溶剂DMSO（浓度为0.4%）的DMEM高糖培养基。分别用免疫细胞化学法和Western blot法检测Akt2、p-Akt蛋白的表达。结果胶质瘤细胞株U251细胞中存在Akt2和p-Akt蛋白的高表达,应用P13K抑制剂LY294002可抑制该细胞株细胞中Akt2和p-Akt蛋白的表达,而且其表达呈浓度依赖型降低。结论LY294002可通过抑制P13K活性,抑制Akt的表达及活化,使Akt2和p-Akt蛋白的表达降低,提示抑制P13K/Akt途径可能是LY294002发挥抗肿瘤作用的重要机制,P13K/Akt可能成为胶质瘤治疗的靶点。     

蛇床子素调节PI3K/Akt/mTOR信号通路对妊娠高血压大鼠氧化应激损伤的影响

目的 探讨蛇床子素（OST）调节磷脂酰肌醇3-激酶/苏氨酸蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR信号通路对妊娠高血压（HDCP）大鼠氧化应激损伤的影响。方法 通过灌胃左旋亚硝酸精氨酸甲酯（L-NAME）法建立HDCP大鼠模型。并将SPF级雌性大鼠随机分为：对照组（Control组）、模型组（Model组）、低剂量OST组（OST-L组,40 mg/kg）、高剂量OST组（OST-H组,80 mg/kg）、高剂量OST+PI3K抑制剂组（OST-H+LY294002组,80 mg/kg OST+5 mg/kg LY294002）,每组12只。于大鼠妊娠第12、16、17和21天检测大鼠尾动脉血压和24 h尿蛋白含量。RT-PCR法检测HDCP大鼠胎盘组织中Flt-1和PIGF mRNA的表达。取大鼠全血血清进行ELISA检测,检测可溶性Flt-1、PIGF、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和谷胱甘肽（GSH）水平。Western blot检测HDCP大鼠胎盘组织中PI3K、Akt、mTOR蛋白表达。结果 与Control组相比,Mod...     

PI3K和MAPK信号通路对A549细胞FOXO1蛋白表达及其亚细胞定位的调节

目的探讨非小细胞肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/AKT和丝裂原活化蛋白激酶MAPK/ERK信号通路对Forkhead转录因子(Fox蛋白家族)FOXO1活性的影响及分子机制。方法体外培养人非小细胞肺癌系A549,分别选用PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002和MAPK/ERK信号通路特异性抑制剂UO126及两种抑制剂联合处理细胞之后,MTT比色法检测其对细胞增殖的影响;Western blot检测蛋白FOXO1、p-FOXO1及信号下游蛋白Bim表达的变化;免疫荧光法检测FOXO1蛋白在A549细胞中亚细胞的定位的变化。结果与对照组相比,LY294002和UO126都能明显地抑制A549细胞的增殖,且具有时间依赖性。Western blot结果显示,FOXO1的蛋白水平未见显著性变化,而FOXO1的磷酸化水平明显下降,Bim的表达相应增加。免疫荧光结果显示,FOXO1在A549细胞中的核转位增多。LY294002和UO126联合处理A549细胞时,较药物单独作用效果明显增加。结论 PI3K/AKT和MAPK/ERK信号通路能调节FOXO1磷酸化水平,且具有协同作用,抑制其转录活性。FOXO1通过激活Bim蛋白,促进细胞凋亡,抑制细胞的增殖。     

HCV NS5A基因在hepG2细胞中的表达以及对PI3K的影响

目的：探讨HCV—NS5A对PI3K表达的影响。方法：应用PCR技术从含有HCV全长开放阅读框的质粒中获得NS5A全长基因片段，利用基因重组技术将其克隆至真核表达载体pcDNA3．0（-）中。通过酶切、PCR及测序鉴定，NS5A基因已正确插入到pcDNA3．0（-）中，再利用脂质体转染HepG2细胞。结果：经RT—PCR及Western blot检测，HCV的NS5A基因在HepG2细胞中获得表达，而且在表达重组NS5A的转染HepG2细胞中，检测到PI3K蛋白的表达。结论：NS5A可在体外激活PI3K及其信号通路。     

PI3K/Akt信号通路在乳腺癌内分泌治疗耐药中的作用及对策

乳腺癌是女性最常见的肿瘤,大约75％的乳腺癌表达雌激素受体和/或孕激素受体.激素受体阳性的转移性乳腺癌患者通常采用内分泌治疗,然而由于内分泌治疗耐药的产生,其应用受到了限制.近年来发现,PI3K/Akt(丝氨酸/苏氨酸激酶)信号通路在乳腺癌的发展中发挥着重要作用.本文对PI3K/Akt信号通路在乳腺癌内分泌治疗耐药中的作用进行了综述,以期为雌激素受体阳性乳腺癌治疗提供新对策.     

连翘酯苷A通过抑制PI3K/Akt通路并激活Nrf2/HO-1通路抑制LPS诱导的炎症及氧化应激

目的 探讨连翘酯苷A(forsythiaside A,FSA)对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症和氧化应激的影响.方法 建立LPS诱导RAW 264.7巨噬细胞模型,给予不同质量浓度连翘酯苷A,以观察其对炎症介质(NO和PGE2)生成和促炎细胞因子(TNF-α和IL-1β)表达的影响,并探讨其可能机制.结果 ...     

巨噬细胞PI3K/Akt通路与动脉粥样硬化的研究进展

动脉粥样硬化(AS)是冠心病的主要病理机制,巨噬细胞参与的免疫炎症反应伴随AS发生发展。PI3K/Akt通路可通过影响巨噬细胞极化、脂质代谢、自噬等多种功能参与AS调节进程,是AS治疗潜在靶点。本文将综述PI3K/Akt信号通路对巨噬细胞功能与AS调节作用的研究进展。     

大蒜素调控VEGF/PI3K/AKt促进SKOV3细胞的凋亡

目的探讨大蒜素调控VEGF/PI3K/AKt促进卵巢癌细胞凋亡的作用研究。方法浆液性卵巢癌(SKOV3)细胞株给予0、25、50和100μg/mL大蒜素培养12 h、24 h和48 h后,细胞计数CCK-8法检测SKOV3细胞的存活率;流式细胞仪检测检测SKOV3细胞凋亡和细胞周期改变;Western blot法检测SKOV3细胞磷酸化蛋白VEGF、PI3K、AKt和Caspase3蛋白表达水平。结果与对照组相比,随着大蒜素给药时间的延长和剂量的增加,细胞存活率显著降低,细胞凋亡明显发生,差异有统计学意义(P<0.05);VEGF、PI3K、AKt蛋白的表达含量均明显下降,Caspase3蛋白含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大蒜素调控VEGF/PI3K/AKt促进卵巢癌细胞凋亡,具有时间剂量反应关系。     

PI3K/Akt通路在滋养细胞增殖中的调控机制研究

旨在探讨PI3K/Akt信号转导通路在滋养细胞增殖中的作用及具体调控机制。体外培养滋养细胞系EVT。应用MTT法检测不同浓度表皮生长因子（EGF）刺激后EVT的增殖情况;应用流式细胞技术检测不同处理组EVT凋亡情况。使用PI3K抑制剂LY294002处理细胞后,检测以上各项结果的变化。结果发现：1.随EGF浓度增高,EVT增殖呈现增强趋势,EGF在10ng/ml及其以上时效应明显;2.EGF能够显著降低EVT的凋亡发生;3.使用PI3K抑制剂LY294002明显逆转EGF的促进EVT增殖的效应。提示表皮生长因子可以活化滋养细胞的PI3K/Akt信号通路,进而促进细胞增殖,并且抑制其凋亡,PI3K抑制剂可以明显抑制EGF的促EVT增殖作用。     

PI3K/AKT信号通路在SjCystatin诱导M2巨噬细胞分化过程中的影响

目的:进一步确定日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Sj Cystatin)诱导M2巨噬细胞分化的亚型及相关机制。方法:用ELISA、RT-q PCR或Western blot法测定IL-10、IL-12、巨噬细胞亚型表面标志物LIGHT(M2b)及Arg-1(M2a+M2c)的表达;用Western blot法测定AKT的磷酸化水平。结果:Sj Cystatin处理组在6 h、12 h和24h时IL-10表达量持续增加;处理12 h,LIGHT的mRNA和蛋白表达量增加但Arg-1的mRNA和蛋白表达量降低;AKT磷酸化水平增加。PI3K/AKT抑制剂处理组IL-10的释放量在12 h和24 h持续降低;24 h,LIGHT的mRNA和蛋白表达量降低但Arg-1的mRNA和蛋白表达量增加;AKT的磷酸化水平减少。结论:Sj Cystatin促进了活化的M2巨噬细胞分化为M2b亚型巨噬细胞,并且PI3K/AKT信号通路参与了这一过程。     

PI3K/mTOR双重抑制剂PF-04691502诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡

 目的：检测PI3K/mTOR双重抑制剂PF-04691502对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响及可能的分子机制。方法：MTT法检测细胞活力;流式细胞术分析细胞周期变化;Annexin V-FITC/PI双标法测定细胞凋亡;免疫印迹分析细胞内蛋白表达的变化。结果：PF-04691502处理SGC-7901细胞后,降低细胞的活力并促进细胞阻滞于G1期,同时抑制cyclin D1的表达并上调p21的蛋白水平。PF-04691502可明显诱导SGC-7901细胞凋亡,其机制与其促进caspase家族成员的活化并切割聚（腺苷二磷酸核糖）聚合酶［poly(ADP-ribose)polymerase, PARP］ 底物密切相关。结论：PI3K/mTOR 双重抑制剂PF-04691502能够通过阻滞细胞周期来抑制SGC-7901细胞的增殖,同时能够激活细胞内caspase,使PARP发生剪切而诱导细胞凋亡。     

GPNMB通过PI3K/Akt通路调节小胶质细胞M2极化减轻缺血性脑卒中后神经损伤的机制研究

目的：探讨糖蛋白非转移性黑色素蛋白B(GPNMB)调节小胶质细胞M2极化减轻缺血性脑卒中（CIS）后神经损伤的机制。方法：采用SD大鼠建立大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,缺氧缺糖（OGD）培养神经元、星形胶质细胞与小胶质细胞,Western blot测定组织与细胞GPNMB的表达情况;分别向大鼠脑组织注射腺病毒相关病毒（AAV）包裹的Gpnmb或sh RNA-Gpnmb过表达或抑制GPNMB,采用改良神经功能缺损评分（mNSS）、转棒疲劳试验（Rotarod）与胶带去除试验测试大鼠神经功能,TTC染色测定脑梗死比例,免疫荧光与RT-PCR检测小胶质细胞M1/M2极化标志物,Western blot测定磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/丝氨酸/苏氨酸激酶（Akt）通路表达情况;体外OGD培养小胶质细胞,过表达Gpnmb的同时使用LY294002抑制PI3K表达,测定M1/M2极化标志物。结果：与正常大鼠/正常培养细胞比较,MCAO模型/OGD培养的小胶质细胞中GPNMB表达均上调（P<0.05）;在MCAO大鼠脑组织内过表达Gpnmb后,mNSS评分下降,Rotarod延迟降落时...     

PI3K信号通路调控动脉粥样硬化发生发展的研究进展

磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)信号通路参与动脉粥样硬化、肿瘤及免疫系统疾病的发生、发展。调节PI3K可以调控细胞凋亡、自噬、炎性反应等病理生理过程,为疾病的治疗提供了新思路。     

PTTG抑制PI3K/AKT信号通路诱导皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的机制

目的探讨垂体肿瘤转化基因(pituitary tumoRtransforming genes,PTTG)对皮肤鳞状细胞癌细胞活力、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法将设计合成的PTTG特异性siRNA(si-PTTG)转染人皮肤鳞癌细胞系A431(si-PTTG组),无干扰作用siRNA(NC组)及未转染的空白细胞(空白组)作为对照组,LY294002作为PI3K/AKT信号通路的抑制剂。通过MTT法、Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒及ROS检测试剂盒分别检测细胞活力、凋亡率和ROS含量。Western blot法检测PTTG、AKT、p-AKT、Cyclin D1和Bax蛋白表达。结果si-PTTG转染A431细胞后,PTTG表达明显降低(P<0.05)。与空白组比较,si-PTTG组和LY294002组细胞活力明显降低,凋亡率明显升高,si-PTTG组ROS含量明显升高,p-AKT和Cyclin D1蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达明显升高(P<0.05)。A431细胞转染si-PTTG,并用LY294002处理,细胞活力明显低于LY294002组,凋亡率高于LY294002组(P<0.05)。结论沉默PTTG表达可抑制皮肤鳞状细胞癌细胞活力,诱导细胞凋亡,其机制与细胞ROS水平增高及PI3K/AKT通路抑制有关。     

PI3K/Akt信号通路与骨破坏：问题与机制

文题释义：PI3K/Akt信号通路：PI3K/Akt信号通路是由酶联受体介导的能够调节细胞生命活动的信号通路,该通路可以在多种生长因子、细胞因子、细胞外基质等参与下引起信号通路的活化,同时还在细胞增殖、凋亡、组织炎症、肿瘤生长侵袭等方面起着重要作用。近年的研究表明,PI3K/Akt信号通路参与骨质疏松、骨关节炎、骨肉瘤等病理性骨病,并且在破骨细胞和成骨细胞的增殖、分化及凋亡方面扮演着重要角色。 骨破坏：当破骨细胞发挥了骨吸收的功能时,会吸收大量骨质,形成骨吸收陷窝,使骨吸收量大于骨形成量,形成骨质的破坏。 背景：近年来研究表明,PI3K/Akt信号通路与骨破坏相关的疾病密切,并且对靶向该信号通路的抑制剂也在进行大量的研究,这为临床上骨破坏相关疾病的药物治疗提供了新思路。 目的：就PI3K/Akt信号通路在骨破坏中的研究做一综述。 方法：检索1998年1月至2019年8月 PubMed 数据库及万方医学数据库。英文检索词为“PI3K/Akt signaling pathway,osteoclasts,osteoblasts,bone destruction”,中文检索词为“PI3K/Akt信号通路;破骨细胞;成骨细胞;骨破坏”。经过文题、摘要的筛选,排除与研究目的相关性差及内容陈旧、重复的文献,对最终符合标准的67篇文献进行综述。 结果与结论：①成骨细胞和破骨细胞介导的骨形成与骨吸收之间的适当平衡对于维持骨稳态是必要的,这两个生物学过程之间的失衡将导致骨破坏;②PI3K/Akt信号通路是调节细胞生命活动的信号转导通路,在细胞增殖、凋亡、分化等方面起着重要作用;③PI3K/Akt细胞信号通路通过促进成骨细胞增殖、分化和骨形成而参与骨质疏松的抑制;④结果提示,可以研究该信号通路在骨破坏相关疾病中的抑制剂,从而为临床药物治疗提供新思路。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

microRNA-124通过调控PI3K/Akt2信号通路改善七氟醚诱导的新生大鼠神经缺陷

目的 探讨microRNA-124对七氟醚诱导新生大鼠神经缺陷的影响及可能机制。方法 40只SD大鼠随机分为对照组（CON）、七氟醚组（SEV）、Agomir NC+SEV组、miR-124 Agomir+SEV组,每组10只。Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力;双染法检测海马神经元凋亡情况;RT-qPCR方法检测大鼠BDNF、PI3K、Akt2 mRNA的表达;Western blot检测海马组织中BDNF、 PI3K、Akt2蛋白表达。结果 与CON组比较,SEV组逃避潜伏期延长,目标象限时间百分比缩短,穿越平台次数减少,海马组织中BDNF、 PI3K、Akt2蛋白表达降低（P<0.001）,海马神经元细胞凋亡增加;与SEV组比较,miR-124 Agomir+SEV组目标象限时间百分比延长（P<0.01）、逃避潜伏期缩短（P<0.05）,穿越平台次数增加（P<0.05）,海马组织中BDNF、PI3K、Akt2蛋白表达升高（P<0.01）,海马神经元细胞凋亡减少。结论 miR-124可能通过调控PI3K/Akt2信号通路改善七氟醚诱导的大鼠神经功能...