阻断胰腺癌平衡型核苷转运载体对5-氟尿嘧啶诱导细胞凋亡及细胞周期改变的影响

目的研究应用潘生丁(DP)阻断平衡型核苷转运载体(hENTs)后,5-氟尿嘧啶(5-FU)对胰腺癌细胞株Panc-1凋亡及细胞周期的影响。方法将Panc-1细胞分为hENTs未阻断组和hENTs阻断组,hENTs阻断组再根据DP浓度分为5μmol/L DP组和10μmol/L DP组。各组细胞分别在含有1.5×106ng/L 5-FU或不含5-FU的培养液中培养24 h后,流式细胞仪检测细胞的凋亡率和细胞周期改变。结果①各组细胞凋亡检测结果:在含有1.5×106ng/L 5-FU培养液中培养24 h后,5μmol/L及10μmol/L DP组的细胞凋亡率明显高于未阻断组(P<0.05),10μmol/L DP组又明显高于5μmol/L DP组(P<0.05);在不含5-FU的培养液中培养24 h后,各组之间细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。②各组细胞周期检测结果:在含有1.5×106ng/L 5-FU培养液中培养24 h后,未阻断组细胞进入合成期(S期)的比例减少,停滞在合成前期(G1期),5μmol/L DP组及10μmol/L DP组的细胞进入合成期(S期)的比例较未阻断组进一步减少(P<0.05),且随着DP浓度的增加,细胞进入合成期(S期)的比例减少得更多(P<0.05),5μmol/L DP组和10μmol/L DP组进入合成期(S期)的比例分别是未阻断组的87.09%和74.06%。5-FU对细胞合成后期(G2期)的影响较小,除5μmol/L DP组较未阻断组G2期细胞数量增加有统计学意义(P<0.05)外,其余各组之间差异均无统计学意义(P>0.05);在不含5-FU的培养液中培养24 h后,各组细胞周期中各期无明显改变,各组之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在胰腺癌细胞株Panc-1中,DP阻断细胞膜上hENTs后,能显著增强5-FU对胰腺癌细胞促凋亡作用及抑制胰腺癌细胞分裂增殖的作用,这种增强作用可能与阻断hENTs后细胞内5-FU浓度提高有关,而与DP本身作用无关。     

胰腺癌细胞膜平衡型核苷转运载体和集中型核苷转运载体的检测

目的：检测胰腺癌细胞膜上Na+非依赖的平衡型核苷转运载体（ENT）和Na+依赖性的集中型核苷转运载体（CNT）,并对ENT进行定量检测。方法：将胰腺癌细胞株（Panc-1）在含潘生丁（100 μmol/L）的培养基中分别温育8,15,60,120 min,收集细胞用乙腈裂解,荧光分光光度计测定细胞悬液中潘生丁的荧光强度,依据平行悬液中的细胞数量计算出单个细胞表面ENT的数量;再将Panc-1分别在含5-氟尿嘧啶（5-FU）和5-FU+潘生丁两种培养基中分别温育15,30,60,120,240 min,毛细管区带电泳法测定5-FU含量;根据平行悬液中的细胞数量和单细胞体积计算单细胞中5-FU的浓度,间接判定细胞膜上是否存在CNT载体。结果：Panc-1在含潘生丁的培养基温育8 min后即能检测到细胞的荧光强度,15 min达高峰20.2×10-19 mol;借助潘生丁测得单个细胞表面有1.25×105个ENT。用潘生丁阻断ENT后,5-FU仍可被转运入胰腺癌细胞中,且细胞内的5-FU最高浓度达到（138.3±9.77）mg/L,明显高于培养基中5-FU的浓度（P=0.011）。结论：与潘生丁结合后,通过荧光法可以定量检测细胞表面的ENT;通过阻断ENT并测定细胞中5-FU浓度,可以判断胰腺癌细胞膜上存在CNT,从而对合理应用化疗药物,提高化疗效果提供依据。

     

干扰素-α诱导肾癌细胞胸苷磷酸化酶表达对5-FU化疗敏感性的影响

目的 探讨干扰素-α诱导肾癌细胞胸苷磷酸化酶（thymidine phosphorylase，TP）表达对5-氟尿嘧啶（5-FU）化疗敏感性的影响。方法采用不同浓度的干扰素-α2b处理肾癌细胞株786—0，应用RT—PCR和免疫印迹方法分别检测TP mRNA和TP蛋白水平变化。MTT法检测不同处理组786—0细胞中5-FU的半数抑制浓度（IC50）。建立肾透明细胞癌移植瘤动物模型，观察干扰素-α2b联合5-FU化疗对移植瘤生长的影响，免疫组化检测移植瘤中TP的表达，TUNEL检测肿瘤细胞的凋亡。结果 干扰素-α2b3000和6000IU／ml处理组，TP mRNA表达量（灰度峰值）分别为0．5733±0．0231和0．8233±0．0404，TP蛋白表达量分别为0．6347±0．0719和0．8735±0．0640。干扰素-α对TP的表达有剂量依赖性增强作用（P〈0．01）。在干扰素-α2b作用下，5-FU对786—0半数抑制浓度由（13．9467±3．7140）μmol／L下降至（5．3200±0．1039）μmol／L，化疗敏感性增加（P〈0．01）。联合用药组移植瘤体积为（0．0940±0．0492）cm^3，小于单纯5-FU组的（0．5424±0．1591）cm^3（P〈0．05）。单纯5-FU组和联合用药组移植瘤中肿瘤细胞凋亡指数差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 干扰素-α2b诱导的TP增强表达参与了干扰素-α联合5-FU化疗增效作用，TP是干扰素-α2b的靶基因之。     

一氧化氮在5-氟尿嘧啶诱导人胰腺癌细胞株BXPC-3细胞凋亡中的作用

5-氟尿嘧啶(5-FU)是胰腺癌化疗治疗中应用最早最广泛的药物,但对晚期胰腺癌患者的观察,其反应率仅为7％。一氧化氮(NO)是生物体内一种简单的自由基,参与各项生理活动。有研究结果显示,NO除了自身的抗肿瘤作用以外,还可以加强肿瘤细胞对包括5-FU在内的化疗药物的敏感性。本实验旨在观察NO在5-FU诱导胰腺癌细胞凋亡过程中的作用。 一、材料和方法 1.试剂:NO测定试剂盒、一氧化氮合酶(NOS)测定试剂盒购自南京建成生     

在细胞膜水平提高5-FU在胰腺癌细胞中的浓度

胰腺癌发现时往往已属晚期,虽采用以手术为主的综合治疗,但预后极差[1].5-FU是常用的化疗药物,但疗效不佳.5-FU在细胞内代谢为一磷酸脱氧核糖氟尿嘧啶核苷(FdUMP)和三磷酸氟尿嘧啶核苷(FUTP)后产生细胞毒性,因此增加细胞内5-FU的浓度将能增强其化疗效果.     

胸苷酸合成酶在乳腺癌中的表达及其与预后的关系

目的:研究乳腺癌组织中胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)的表达水平,评估TS作为5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的判断指标的可行性。方法:应用S-P免疫组化方法检测94例乳腺癌组织和40例乳腺非癌组织中TS的表达情况及其与临床各病理参数的关系。结果:①TS低表达率为55.3%(52/94),高表达率44.7%(42/94),与良性对照组比较有显著差异(P0.05)。③TS高表达组的5年生存率为26.5%,TS低表达组的5年生存率为58.7%。TS低表达组的生存期及5年生存率均高于TS高表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌组织中TS的表达与病人对5-FU化疗敏感性及预后密切相关,可作为判断5-FU化疗敏感性及预后的指标。     

CCL5及其受体在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的检测趋化因子CCL5及其受体在浸润性乳腺癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法应用SYBR Green Ⅰ real time-PCR定量检测33例浸润性乳腺癌患者癌组织及其癌旁组织的CCL5及其受体CCR1、CCR3、CCR5 mRNA的表达。结果各期癌组织CCR1及CCR3 mRNA的相对表达量与癌旁正常组织差异无统计学意义（P〉0．05），CCR5及CCL5 mRNA的相对表达量均高于癌旁正常组织（P〈0．05），Ⅰ期和Ⅱ期乳腺癌组织CCL5 mRNA的表达量差异无统计学意义（P〉0．05），Ⅲ期乳腺癌组织CCL5 mRNA的相对表达量为2．477，Ⅳ期乳腺癌组织CCL5 mRNA的相对表达量最高（3．710）。CCR5及CCL5 mRNA的表达高度相关（Pearson相关系数为0．971）。结论趋化因子CCL5及其受体CCR5 mRNA在Ⅳ期乳腺癌组织中的表达水平最高，CCL5可能以自分泌方式与受体CCR5结合促进乳腺癌生长和转移。     

丝裂霉素、5-氟尿嘧啶、三苯氧胺联合应用对人乳腺癌细胞株的作用

目的观察丝裂霉素 (mitomycin ,MMC)、5 氟尿嘧啶 (5 fluorouracil,5 Fu)、三苯氧胺(tamoxifen ,TAM)联合应用对人乳腺癌细胞株MCF 7和MDA MB 4 35S的作用。方法采用MTT法 (四甲基偶氮唑蓝比色法 ,3 (4,5 dimethyl 2 thiazoly) 2 ,5 diphenyl 2H tetrazolium bromide)利用中效原理判断药物联合应用的效应。结果MMC、5 Fu单用及联合应用时 ,随着药物浓度增加其效应也增加 ;TAM与MMC、5 Fu合用时 ,TAM +MMC中效浓度为 1 6 5× 10 -5mmol/L ,TAM +5 Fu中效浓度为 0 0 32 6mmol/L ,对MCF 7细胞作用加强 ,而对MDA MB 4 35S细胞作用不明显 ;MMC与5 Fu高浓度合用时呈协同作用 (CI <1) ,低浓度时呈拮抗作用 (CI >1) ;两药合用时浓度比例变化及给药时间次序对效应影响不大。结论TAM与MMC、5 Fu合用时 ,对MCF 7细胞作用加强 ,而对MDA MB 4 35S细胞作用不明显。     

5-FU植入剂联合静脉化疗在乳腺癌新辅助化疗的临床观察

目的 对比CAF方案与植入型5-氟尿嘧啶（5-FU）替代CAF方案治疗II-III晚期乳腺癌的近期疗效与毒性反应。方法 将63名II-III期乳腺癌患者随机分组，植入型5-FU替代CAF方案为试验组，CAF（静脉给药）方案为对照组。结果 1）标准组有效率为56.3％，试验组为83.9％，差异有统计学意义；3）试验组消化道反应及III-IV度白细胞下降发生率较对照组低。结论 植入型5-FU可以提高II-III期乳腺癌新辅助化疗有效率，且毒性反应较低。肿瘤药物局部植入是一种有效安全的给药途径。     

脾源性酪氨酸激酶基因的再表达对乳腺癌细胞生长、转移的影响

目的 探讨脾源性酪氨酸激酶（Syk）基因的再表达对裸鼠乳腺癌肿瘤生长和转移的影响。方法 5-氮-2’-脱氧胞苷处理人乳腺癌细胞株MDA-MB-435s，甲基化特异性PCR（MSP）检测Syk基因的甲基化，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Syk基因的再表达，并用此处理过的细胞株和未经处理的细胞株分别接种于10裸鼠皮下，观察裸鼠成瘤率及肿瘤转移情况。结果 MSP检测用5-氮-2’-脱氧胞苷处理过的人乳腺癌MDA-MB-435s细胞株，Syk基因启动子没有甲基化，RT-PCR可检测到Syk基因，用有Syk基因再表达的MDA-MB-435s细胞株接种于10只裸鼠皮下，8周后有2只形成肿瘤，无1例肺部转移。而无Syk基因表达细胞株10只都形成肿瘤，并在肺部形成转移灶。对照组的成瘤率及肺转移率显著高于治疗组。结论 5-氮-2’-脱氧胞苷通过去甲基化使MDA-MB-435细胞株中Syk基因再表达。Syk基因的再表达可抑制荷瘤裸鼠乳腺癌的生长和转移。     

乳腺癌干细胞与基因分型

目的 总结乳腺癌干细胞与基因分型的研究进展,并分析二者之间的相关性.方法 分析近年来有关乳腺癌干细胞与基因分型研究的文献报道.结果 乳腺癌干细胞与基因分型的相关性研究支持了乳腺癌的肿瘤干细胞起源学说,解释了乳腺癌基因分型的复杂性及其异质性.结论 乳腺癌干细胞和基因分型的相关性研究能为从细胞分子水平研究乳腺癌的形成机理和生物学特性找到新的途径,有望为乳腺癌的诊断和治疗提供新的策略与手段.     

尿多酸肽对乳腺癌细胞周期的影响

目的研究肿瘤细胞分化诱导剂尿多酸肽（CDA-Ⅱ）对乳腺癌细胞周期的影响。方法将CDA-Ⅱ与乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231进行体外培养，同时以维甲酸为阳性对照，观察其对乳腺癌细胞生长曲线、细胞周期、形态学等方面的影响。结果CDA-Ⅱ可减缓两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力，使乳腺癌细胞的细胞周期的分布出现S期比例减少，G0／G1期增加。结论CDA-11可抑制不同生物学特性的两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力，细胞周期出现G0／G1期阻滞，为CDA-Ⅱ治疗乳腺癌提供了实验依据。     

外源性透明质酸酶对人乳腺癌细胞侵袭力及血管形成能力的影响

目的　探讨外源性透明质酸酶(hyaluronidase, Hyase)对人乳腺癌细胞ZR 75 30 侵袭潜力及血管形成能力的影响。方法　通过建立体外侵袭模型和应用双室联合培养技术,观察外源性Hyase对ZR 75 30细胞穿透Matrigel(人工基底膜)的能力以及诱导血管内皮细胞形成血管能力的影响。结果　实验组的穿膜细胞数为(70.625±11.64)个,明显高于对照组的(22.125±6.09)个(P<0.01); 实验组的血管管腔数目为(34.5±2.4)条,明显高于对照组的(8.5±1.5)条(P<0.01)。结论　外源性Hyase有促进人乳腺癌细胞侵袭及诱导血管形成的作用。     

凋亡相关基因PDCD5对前列腺癌细胞PC-3M-1E8促凋亡作用的研究

目的：观察外源性PDCD5对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M-1E8的促凋亡作用。方法：扩增重组质粒PCI-neo-PDCD5,利用脂质体介导将其瞬时转染前列腺癌细胞PC-3M-1E8,RT-PCR检测转染后表达情况;撤除血清培养16h后,通过四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞存活率,原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡指数,透射电子显微镜观察细胞形态。结果：MTT结果显示转染重组质粒组细胞较转染空载体和对照组细胞生长速度明显减慢,存活细胞明显减少（P〈0.001）;通过TUNEL与透射电镜观察,发现转染组细胞凋亡程度和数量明显增加,凋亡指数较对照组明显增高（P〈0.001）。结论：PDCD5在撤出血清因素的诱导作用下能显著抑制前列腺癌细胞PC-3M-1E8在体外的生长,明显促进其凋亡。     

抗肿瘤相关糖蛋白-72单抗在人乳腺癌中的表达

目的 检测肿瘤相关糖蛋白-72（TAG-72）在人乳腺癌细胞系的表达，为利用抗TAG-72单链抗体（single chain variable fragment，scFv）诊治乳腺癌提供实验依据。方法 将人乳腺癌细胞系MCF-7和Bcap-37通过细胞培养至对数生长期，并固定于载玻片上。用原核表达的抗TAG-72scFv经免疫细胞化学方法检测TAG-72在乳腺癌细胞中的表达。结果 TAG-72在乳腺癌细胞系MCF-7中表达为阳性，在Bcap-37中表达为阴性，表明TAG-72在部分人乳腺癌细胞中得以表达。结论 TAG-72在人部分乳腺癌中阳性表达，表明TAG-72抗原可作为一个肿瘤标志物在临床中应用，也为抗TAG-72scFv在乳腺癌诊治中应用奠定了实验基础。     

金雀异黄素与5-氟尿嘧啶对SGC-7901细胞的抑制作用

目的研究金雀异黄素（genistein，Gen）与5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）对人胃癌细胞SGC-7901的抑制作用。方法采用MTT法检测Gen和5-FU对SGC-7901细胞的抑制作用，流式细胞术检测细胞周期分布，并在透射电镜下观察细胞超微结构改变。结果Gen和5-Fu单用或联合应用对胃癌SGC-7901细胞的生长均有显著的增殖抑制作用，且呈剂量和时间依赖性。两药联合应用时，当药物效应在0．2～0．8时，具有协同或相加作用（CI≤1）；18．8btmol／L的Gen作用后，62．97％的SGC-7901细胞阻滞在G2／M期；8．84μmol／L的5-FU作用后，63．76％的SGC-7901细胞阻滞在s期；3．06μmol／L的Gen与7．96μmol／L的5-Fu联合应用后，67．46％的SGC-7901细胞阻滞在G0／G1期。Gen和5-FU均可诱导SGC-7901细胞凋亡。结论Gen与5-FU通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制胃癌细胞的生长，对胃癌细胞的增殖抑制具有协同作用。     

家属参与模式对乳腺癌患者围术期并发症及乳房美观性的影响

目的 探讨家属参与模式对乳腺癌患者围术期并发症及乳房美观性的影响。方法 选择2022年 1月-10月于南京市妇幼保健院行乳腺癌手术的患者68例,随机分成对照组和观察组,每组34例。对照组行 常规护理,观察组在对照组基础上增加了家属参与模式,比较两组乳房美观评分、家庭关怀度、并发症发生 率。结果 观察组乳头移位、瘢痕增生、乳房凹陷程度评分均优于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）; 观察组干预后APGAR评分为（7.35±1.35）分,高于对照组的（5.48±1.39）分,差异有统计学意义（P＜0.05）; 观察组并发症发生率为2.94%,低于对照组的11.76%,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 家属参与模式可降 低乳腺癌患者围术期并发症发生率,提升乳房美观度和家属关怀度。     

预见性护理对乳腺癌整形保乳术患者乳房美观度的影响

目的 观察预见性护理应用于乳腺癌整形保乳术后对患者乳房美观度的影响。方法 选择2022年 5月-2023年2月于我院行乳腺癌整形保乳术的44例患者为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和研究 组,每组22例。对照组给予常规护理,研究组给予预见性护理,比较两组乳房美观度、乳房美容效果及心 理状况。结果 研究组乳头纵向移位距离、乳头横向移位距离、乳房凹陷程度、瘢痕增生、乳房对称性评 分均高于对照组（P＜0.05）;研究组乳房美容优良率为90.91%,高于对照组的59.09%（P＜0.05）;研究组 护理后HAMD评分、HAMA评分均低于对照组（P＜0.05）。结论 为乳腺癌整形保乳术后患者提供预见性 护理能有效改善乳房美容度,提升乳房美容效果,有利于调节患者的不良情绪,值得临床应用。     

Effect of Obesity on Presentation of Breast Cancer

Background Obesity has been shown to be associated with reduced survival in patients with invasive breast cancer (IBC), although the mechanisms for this finding are unclear. The objective of this study was to examine the effect of obesity on the presentation and pathologic staging of IBC. Methods From February 15, 2002, to February 15, 2004, all patients undergoing surgery for primary IBC at two institutions were enrolled in a prospective cohort study. National Institutes of Health criteria were used to categorize patients: normal or underweight (NW; body mass index <25 kg/m²), overweight (OW; body mass index 25–29.9 kg/m²), and obese or severely obese (OB; body mass index ≥30 kg/m²). Presentation and pathologic factors were then compared among groups. Results The study cohort consisted of 519 patients; 166 (32%) were NW, 177 (34%) were OW, and 176 (34%) were OB. OW (46%) and OB (39%) patients were more likely to be diagnosed with IBC via screening mammography compared with NW (31%) patients (P = .01), although no differences were found between groups with respect to previous use of screening mammography. Aggressive pathologic features, including lymph node metastases, advanced tumor-node-metastasis stage, and grade were found more commonly among OB patients. Conclusions OW and OB patients were more likely to receive a diagnosis via screening mammography, thus suggesting that mammography may play a more important role in OW and OB patients. Despite this, OB patients presented with larger, more advanced tumors; this may help to explain obesity-associated survival differences in IBC patients. This is important information given the prevalence of obesity in North America.