检测抗核抗体谱对自身免疫性疾病的临床应用

目的:分析自身免疫性疾病患者抗核抗体谱检测结果,探讨抗核抗体谱检测在自身免疫性疾病诊断中的应用。方法:分别采用间接免疫荧光法和免疫印迹法检测130例自身免疫性疾病患者和20例健康人的ANA和抗核抗体谱。结果:ANA在各种自身免疫性疾病中均有一定的阳性检出率,ANA在SLE中的检出率最高,阳性率为89.6%,其次为ITP、MCTD和SS。抗核抗体谱中的各种自身抗体在不同的自身免疫性疾病中有不同的敏感性和特异性。结论:采用间接免疫荧光法对ANA的检测对自身免疫性疾病有重要的筛查意义,抗核抗体谱检测对自身免疫性疾病的诊断有重要意义。     

蛋白芯片法在抗核抗体检测中的临床应用

目的：应用蛋白芯片法与欧蒙斑点法检测血清抗核抗体,并对其结果进行比较分析。方法：收集95例血清样本,其中45例确诊为自身免疫性疾病,阴性50例,同时采用蛋白芯片法和欧盟斑点法检测其抗核抗体（SSA、SSB、Sm、RNP、Scl—70、Jo-1、CENPB）,并对结果进行对比分析。结果：45例确诊病例中,蛋白芯片法阳性44份,欧蒙斑点法阳性41份,敏感度分别为97．78％和91．11％,特异度分别为98．95％和95．79％;按卡方检验进行结果统计,x^2=1．75,P〉0．05,差异无统计学意义。结论：蛋白芯片可用于临床检测自身免疫性疾病、治疗监测、疗效评估和预后判断。     

抗核抗体谱十八项检测在系统性红斑狼疮中的临床应用

目的:采用抗核抗体谱(ANA谱)十八项检测系统性红斑狼疮(SLE)患者,探讨其在SLE诊治中的临床应用价值。方法:选择2011年2月至2012年12月我院风湿科收治的370例患者,其中系统性红斑狼疮(SLE)患者158例、其他自身免疫性疾病患者142例,其他疾病患者70例,均采用间接免疫荧光法和免疫印迹法检测其ANA谱十八项,并对结果进行回顾性分析。结果:SLE患者ANA谱十八项中ANA(96.84%、55.47%、27.10%,P0.01)、Anti-SSA/Ro60(55.06%、14.34%、3.39%,P0.01)、Anti-SSA/Ro52(46.20%、12.83%、1.69%,P0.01)、Anti-Sm D1(31.65%、2.64%、1.69%,P0.01)、Anti-U1-sn RNP(25.95%、2.26%、0%,P0.01)、Anu A(25.32%、0.75%、0%,P0.01)、Anti-SSB/La(25.32%、5.66%、0.85%,P0.01)、Anti-ds DNA(24.05%、0.38%、0%,P0.01)、AHA(20.89%、0.38%、0%,P0.01)、Anti-P0(18.35%、0.38%、0%,P0.01)的阳性率均显著高于其他自身免疫性疾病患者和其他疾病患者。96.84%SLE患者被检测出ANA阳性,以颗粒型为主(占51.63%)。81.65%的SLE患者一次性检出2项及以上抗体。结论:ANA谱十八项检测有助于系统性红斑狼疮的筛查和诊断。     

白癜风患儿抗核抗体、免疫球蛋白及补体检测的临床分析

目的:探讨白癜风患儿中抗核抗体(ANA)、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)以及补体(C3、C4)的表达及临床意义。方法:收集2014年10月至2016年5月我院收治的30例白癜风患儿为病例组,并于同期随机选取30例健康体检儿童为对照组,患儿的血清ANA、12种自身抗体谱分别采用间接免疫荧光法及免疫印迹法进行检测,IgG、IgA、IgM,C3、C4水平采用免疫透射比浊法进行检测。结果:病例组中ANA阳性率为13.33%(4/30),与对照组的3.33%(1/30)比较,差异无统计学意义(P0.05)。12种自身抗体谱中,分别有1例(3.33%)患儿dsDNA、SmDNA、SS-A/Ro60KD、SS-B/La、CENP-B阳性,与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。病例组患儿血清IgG、IgA、C4水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。ANA阳性患儿血清IgG、IgA、IgM水平高于ANA阴性患儿,而补体C3、C4水平低于ANA阴性患儿,差异有统计学意义(P0.05)。结论:白癜风患儿ANA阳性表达与健康儿童无明显区别,体液免疫功能有明显异常,临床有重要的参考价值。     

抗中性粒细胞胞浆抗体、抗核抗体联合检测对类风湿关节炎的诊断价值

目的：探讨抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）与抗核抗体（ANA）联合检测对类风湿关节炎的临床意义。方法：采用IIF法对82例RA患者（RA组）、74例非RA自身免疫疾病患者（非RA组）和52例健康体检者（正常对照组）的血清ANCA和ANA谱进行了检测分析,并用ELISA法进行抗丝氨酸蛋白酶3（PR3）、抗髓过氧化物酶（MPO）、ANA谱的定量检测。结果：RA组82例患者中,64例ANCA阳性,阳性率为78．08％,其中核周型（PANCA）37例,阳性率为45．1％,胞浆型（CANCA）27例,阳性率为32．9％;非RA组74例患者中有7例ANCA阳性率分别为9．4％;正常对照组50例中没有一例ANCA阳性。利用Elisa法对患者血清进行检测,分别能够特异的检测到PR3、MPO、抗双链DNA抗体（抗ds—DNA抗体）、抗SS—A等抗体、抗ss—A抗体、抗PM—SCL抗体的存在。结论：联合ANCA、ANA检测有助于提高类风湿关节炎的诊断。     

烟雾病5 例临床分析

目的:研究烟雾病(moyamoya disease,MMD)的临床及影像学特征。方法:回顾性分析5例烟雾病患者,分析其临床及影像学特点。结果:本组病例既往均无阳性病史,中、青年起病,男性居多,均以缺血性脑血管病起病,肢体瘫痪不重,经颅多普勒(TCD)及头颅核磁改变明显,数字减影血管造影(DSA)检查均存在血管闭塞及侧支开放,烟雾血管网形成,1例MRA证实烟雾血管网形成。结论:对于无既往史的中、青年脑卒中患者,要考虑MMD的可能,需完善TCD、头核磁检寻找证据,最后完善数字减影血管造影确诊。     

烟雾病5例临床分析

目的：研究烟雾病（moyamoya disease,MMD）的临床及影像学特征。方法：回顾性分析5例烟雾病患者,分析其临床及影像学特点。结果：本组病例既往均无阳性病史,中、青年起病,男性居多,均以缺血性脑血管病起病,肢体瘫痪不重,经颅多普勒（TCD）及头颅核磁改变明显,数字减影血管造影（DSA）检查均存在血管闭塞及侧支开放,烟雾血管网形成,1例MRA证实烟雾血管网形成。结论：对于无既往史的中、青年脑卒中患者,要考虑MMD的可能,需完善TCD、头核磁检寻找证据,最后完善数字减影血管造影确诊。     

抗中性粒细胞胞浆抗体、抗核抗体联合检测对类风湿关节炎 的诊断价值

目的:探讨抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)与抗核抗体(ANA)联合检测对类风湿关节炎的临床意义。方法:采用IIF法对82例RA患者(RA组)、74例非RA自身免疫疾病患者(非RA组)和52例健康体检者(正常对照组)的血清ANCA和ANA谱进行了检测分析,并用ELISA法进行抗丝氨酸蛋白酶3(PR3)、抗髓过氧化物酶(MPO)、ANA谱的定量检测。结果:RA组82例患者中,64例ANCA阳性,阳性率为78.08%,其中核周型(PANCA)37例,阳性率为45.1%,胞浆型(CANCA)27例,阳性率为32.9%;非RA组74例患者中有7例ANCA阳性率分别为9.4%;正常对照组50例中没有一例ANCA阳性。利用Elisa法对患者血清进行检测,分别能够特异的检测到PR3、MPO、抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗体)、抗ss-A等抗体、抗SS-A抗体、抗PM-SCL抗体的存在。结论:联合ANCA、ANA检测有助于提高类风湿关节炎的诊断。     

自身抗独特型抗体的产生及其在免疫应答调节中的作用

自身抗独特型抗体(auto—ald)广泛存在于机体对多种抗原的免疫应答过程中,并通过与独特型(Id)相互作用,参与体液和/或细胞免疫应答的调节。auto-aId的调节作用包括:(1)通过抑制B细胞合成相应的Id抗体或激活Id特异性T细胞,后者作用于效应细胞,而反馈性抑制机体对起始抗原的免疫应答(向下调节);(2)内影像auto-aId模拟抗原,促进相应Id的表达(向上调节)。其调节作用在多数情况下对机体有利,如维持体内Id—抗—Id网络的稳定性,促进某些自身免疫病的恢复等。但在某些情况下则对机体有害,甚至导致某些受体自身免疫病的发生。     

自身抗体检测蛋白芯片制备条件的优化及初步应用

选择临床上常用的用于自身免疫性疾病抗体检测所对应的12种抗原, 运用NBT/BCIP显色反应策略, 研制一种可同时检测12种常用自身抗体的蛋白芯片检测系统。应用NBT/BCIP终点检测体系对每一种抗原的点样液、点样浓度、血清稀释度进行优化, 制备出可同时检测12种自身抗体的蛋白芯片, 并通过对678例病人血清和120例非病人血清的检测进行敏感度和特异度评价。优化的点样液为0.1%TBST, 血清稀释度为1:4, 12种抗原的最佳点样浓度分别为: ANA 520 mg/mL, Ro-60/SSa 465 mg/mL, La/SSb 530 mg/mL, Jo-1 530 mg/mL, Scl-70 525 mg/mL, Sm 520 mg/mL, Ro-52/SSa 615 mg/mL, RF 340 mg/mL, CCP 465 mg/mL, u1RNP 410 mg/mL, CENP-B 490 mg/mL, dsDNA 580 mg/mL; 通过对678份阳性血清和120份阴性血清的检测, 该蛋白芯片技术对12种自身抗体检测的敏感度在80%~96.3%之间, 特异度在86.7%~100%之间, 与传统的检测技术有较高的符合率。我们研究的自身抗体检测蛋白芯片技术体系具有快速、方便、高通量、廉价等优势, 易于商业化, 适合不同条件的临床需要。     

成人烟雾病合并后循环病变的相关因素分析

目的:探讨成人型烟雾病合并后循环病变发生的相关危险因素,以期指导临床诊治.方法:回顾性分析2009年3月～2010年1月于解放军307医院神经外科就诊并住院的成人烟雾病患者418例,根据是否合并后循环病变(大脑后动脉病变为主)分为合并后循环病变组130例,未合并后循环病变组为288例.分别记录患者的的性别、年龄、籍贯、临床表现类型、铃木分期、既往病史(高血压、高脂血症、高血糖)、不良生活习惯(吸烟、饮酒),是否有烟雾病家族史.对其进行组间对比及logistic回归法进行变量分析.结果:阳性家族史是成人烟雾病患者合并后循环病变的独立危险因素(OR=3.898,95％CI:1.103～13.776,P=0.035),而其余观察指标均无明显相关性(P＞0.05);相对于只存在前循环病变的患者,成人烟雾病合并后循环病变的患者较易出现卒中及头痛,脑出血相对较少;此类患者于31-40岁组出现小高峰.结论:阳性家族史是成人烟雾病患者合并后循环病变的独立危险因素,患者的临床表现较重,治疗后仍可出现反复卒中.     

血清抗角蛋白抗体谱测定对类风湿关节炎骨侵蚀的预测价值

目的：探讨血清抗角蛋白抗体谱对类风湿关节炎预后的判断价值。方法：选择早期、活动性类风湿关节炎患者82例（病程≤6个月）,分为病例组（抗角蛋白抗体谱阳性组,n=39）和对照组（抗角蛋白抗体谱阴性组,n=43）,均给予相同的治疗方案,在治疗前、治疗后12个月、治疗后24个月分别记录全部患者的关节肿胀数、关节压痛数、晨僵时间和红细胞沉降率的变化,通过治疗前及治疗后24个月分别记录手足X线正位片、Sharp评分和DAS28评分标准进行评价。结果：治疗12个月后病例组临床指标的改善较对照组差（P〈0.01）;24个月后病例组X线分期变化情况进展明显大于对照组（P〈0.01）。结论：抗角蛋白抗体阳性谱患者的临床指标和影像学变化情况较抗角蛋白抗体谱阴性患者对治疗的反应较差,更易发生关节破坏。     

乙氧基磷酸酯类有机磷农药单克隆抗体的制备与鉴定

制备针对乙氧基磷酸酯类有机磷农药的单克隆抗体,以此为基础建立该类农药的快速免疫筛选检测方法．以二乙基磷酸乙酸为通用结构半抗原,分别使之与牛血清白蛋白和鸡卵清蛋白共价偶联,合成免疫原和包被原并对其进行结构鉴定．偶联成功后的免疫原用于免疫Balb/c小鼠．将免疫成功小鼠的脾细胞与小鼠SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选能稳定分泌抗乙氧基磷酸酯类有机磷农药单克隆抗体的杂交瘤细胞株．获得的小鼠腹水用辛酸-硫酸铵法纯化,所得纯化抗体以琼脂双扩散法鉴定其免疫球蛋白类型,间接竞争ELISA方法测定其对半抗原的灵敏度、特异性和亲和性．结果表明,该抗体分泌IgG1亚类的单克隆抗体,且与二乙基磷酸乙酸的亲和性较高(1.4×10⁷ L/mol),所得抗体对毒死蜱、对硫磷、丙溴磷、氧化乐果、除线磷、二嗪农、溴硫磷、辛硫磷、喹硫磷、三唑磷等农药有特异性反应．该检测技术可用于上述农药的快速定性或定量检测．     

Changes in Follicular Helper T Cells in Idiopathic Thrombocytopenic Purpura Patients

Background: Idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP) is a primary autoimmune disease with a decreased platelet count caused by platelet destruction mediated mainly by platelet antibodies. T follicular helper (TFH) cells have demonstrated important roles in autoimmune diseases. The aim of this study is to explore the might role of TFH cells in the patients of ITP.Methods: Twenty-three ITP patients and 12 healthy controls (HC) were enrolled in this study. The frequency of circulating TFH cells in both the patients and HC was analyzed by flow cytometry. Serum interleukin (IL)-21 and IL-6 levels were measured using ELISA, and platelet antibodies were tested using a solid phase technique. Additionally, IL-21, IL-6, Bcl-6 and c-Maf mRNA expressions in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were detected using real-time PCR.Results: The percentages of circulating CXCR5⁺ CD4⁺TFH cells with ICOS^high or PD-1^high expression were significantly higher in the ITP patients than in the HC. Moreover, the frequencies of circulating CXCR5⁺ CD4⁺TFH cells with inducible costimulator (ICOS)^high or programmed death-1 (PD-1)^high expression were notably higher in ITP with platelet-antibody-positive ( ITP (+) ) patients than in ITP with platelet-antibody-negative ( ITP (-) ) patients and HC, as were the serum IL-21 and IL-6 levels (significant). Moreover, a positive correlation was found between the CXCR5⁺CD4⁺TFH cells with ICOS^high or PD-1^high expression and the serum IL-21 levels of ITP (+) patients. Additionally, the mRNA expression levels of IL-21, IL-6, Bcl-6 and c-Maf were significantly increased in ITP patients, especially in ITP (+) patients.Conclusions: This study demonstrated TFH cells and effector molecules might play an important role in the pathogenesis of ITP, which are possible therapeutic targets in ITP patients.     

蛋白质组学在疾病研究中的应用

蛋白质组学是在蛋白质水平定量、动态、整体地研究生物体的一门学科。双向电泳技术、质谱技术和生物信息学是蛋白质组学的三大支撑技术。近年来,蛋白质组学技术从整体水平出发,在更贴近生命本质的层次上去发现和理解并应用于许多疾病的早期预警、诊断和治疗。我们对蛋白质组学在心血管疾病、肝病、胰腺疾病和自身免疫性疾病等研究中的应用做了简单阐述,揭示了蛋白质组学技术在许多重大疾病研究方面具有十分诱人的发展前景。     

单克隆抗体仿制药物的结构分析策略

市场高达数千亿美元的单克隆抗体药物即将结束专利保护期,这对发展中国家产业升级,提高国民医疗水平,都是一次难得的战略机遇。然而,单抗类蛋白仿制药的研发与质控工作难度巨大,必须使用液相色谱-质谱联用技术进行分析。针对单抗仿制药结构必须进行的分析项目(氨基酸序列表达正确性、糖基化修饰形态相似性、以及高级结构统一致性)的液质分析方法进行了系统介绍。此外还就分析工作效率及质控过程的法规依从问题予以讨论。     

猴B病毒相关抗体及B病毒抗体检测的比较研究

本文比较了用ＨＳＶ－１（ＩＥＡ）和Ｂ病毒（ＩＦＡ）的方法检查猴Ｂ病毒相关抗体和Ｂ病毒抗体的结果：ＩＥＡ检查出的Ｂ病毒相关抗体阴性猴,经ＩＦＡ检查,全部为Ｂ病毒抗体阴性。用ＩＦＡ检查了Ｂ病毒相关抗体阴性的恒河猴,在单笼隔离饲养六个月后,有９８．３％的动物Ｂ病毒相关抗体仍为阴性,表明ＩＲＡ的阴性结果有较好的一致性。本文讨论了建立无Ｂ病毒感染猴群的可行性。