神经节苷脂对过氧化氢诱导PC12细胞凋亡的影响

目的探讨神经节苷脂对过氧化氢(H_2O_2)诱导PC12细胞凋亡的影响。方法将200μmol/L H_2O_2诱导的PC12细胞分为模型组,神经节苷脂低、中、高浓度组(12.5、25.0、50.0μmol/L),同时设立空白对照为正常组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,Annexin V/PI流式双染检测细胞凋亡,探针法检测活性氧簇(ROS)荧光强度,比色法检测天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3、Caspase9活性,Western印迹法检测核因子(NF)-κB信号通路激活情况及B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果与正常组比较,模型组细胞活力降低,细胞凋亡率、ROS荧光强度及Caspase3、9活性提高,Bax、p-NF-κB p65及p-IκBα表达量上调,Bcl-2表达量下调,差异均有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,神经节苷脂低、中、高浓度组细胞活力提高,细胞凋亡率、ROS荧光强度及Caspase3、9活性降低,Bax、p-NF-κB p65及p-IκBα表达量下调,神经节苷脂中、高浓度组Bcl-2表达量上调,差异均有统计学意义(均P0.01)。结论神经节苷脂通过抑制NF-κB信号通路进而抵抗H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡。     

骆驼蓬碱对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

背景:骆驼蓬碱可通过下调环氧合酶-2(COX-2)表达抑制胃癌细胞增殖,但其分子机制尚未完全明确。目的:研究骆驼蓬碱对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,探讨PTEN/Akt/MDM2信号通路在该过程中的作用。方法:以不同浓度(2、4、8、16、32μg/m L)骆驼蓬碱干预人胃腺癌细胞株SGC-7901和MKN-45 24 h、48 h和72 h,分别采用MTT法和Hoechst染色检测细胞增殖和凋亡情况;蛋白质印迹法检测PTEN、COX-2表达以及Akt、MDM2磷酸化水平。结果:骆驼蓬碱呈剂量和时间依赖性地抑制SGC-7901、MKN-45细胞增殖,并诱导其发生典型的凋亡形态学改变。骆驼蓬碱呈剂量依赖性地上调PTEN表达、抑制Akt、MDM2磷酸化以及COX-2表达。结论:骆驼蓬碱可能通过PTEN/Akt/MDM2信号通路下调COX-2表达,抑制胃癌细胞增殖并诱导其凋亡。     

三羟基异黄酮对转染APP695基因PC12细胞凋亡和功能的影响

目的以APP695MT基因转染PC12细胞为细胞模型,研究三羟基异黄酮(GST)对模型细胞凋亡和功能的影响。方法用pIRES2-EGFP空载体和pIRES2-EGFP/APP695MT表达载体转染正常的PC12细胞,将细胞分为对照组、APP695转染组、GST干预组。应用激光共聚焦显微技术检测PC12细胞凋亡率,荧光分析法测定儿茶酚胺类(CA)分泌量。结果 APP695转染组与对照组比较,PC12细胞凋亡率明显升高(P<0.01),CA分泌量明显降低(P<0.01);GST干预组与APP695转染组比较细胞凋亡率降低(P<0.01),CA分泌量均明显增加(P<0.01)。结论 GST可降低APP695MT基因转染引起的PC12细胞凋亡率,同时也可提高CA的分泌量,对转染细胞有一定的保护作用,并能改善其生理功能。     

银杏叶内酯N对PC12细胞凋亡的保护作用

目的探讨银杏内酯N对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法用H2O2诱导PC12细胞损伤,刺激其凋亡,给予不同剂量的受试药物干预。用MTT法检测细胞存活率;用吖啶橙染色检测银杏内酯N对PC12细胞凋亡的作用;用流式细胞术检测银杏内酯N对PC12细胞活性氧(ROS)的影响,荧光定量RT-PCR法、Western印迹法分别检测Bcl-2、Bax mRNA和相应蛋白的表达。结果银杏内酯N可对抗H2O2诱导的PC12损伤,提高存活率和抑制凋亡,降低PC12细胞ROS水平,与模型组比较均有显著差异(P<0.05);Bcl-2蛋白及mRNA表达量升高,而Bax mRNA和Bax蛋白及表达量降低,与模型组比较均有显著差异(P<0.05),且呈一定的量效关系。结论银杏内酯N可对抗H2O2的神经毒性,其机制与调节凋亡相关基因及蛋白的表达有关。     

琐琐葡萄多糖对β淀粉样蛋白诱导PC12细胞凋亡的影响

目的探讨琐琐葡萄多糖(VTP)对β淀粉样蛋白(Aβ25~35)诱导PC12细胞凋亡的影响及作用机制。方法 Aβ25~35诱导PC12细胞建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,VTP(20、40、80 mg/L)作用于细胞模型,CCK-8法检测各组细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Real-time PCR检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达。结果 VTP可提高PC12细胞活性,降低细胞凋亡率,增强Bcl-2 mRNA表达,抑制Bax mRNA表达。结论VTP对Aβ25~35诱导的PC12细胞凋亡具有明显的保护作用,其机制可能是通过增强Bcl-2 mRNA表达、降低Bax mRNA表达,抑制细胞凋亡。     

去氢骆驼蓬碱通过下调COX-2表达抑制胃癌细胞迁移和侵袭

目的探讨去氢骆驼蓬碱对人胃癌MKN-45细胞环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达、迁移和侵袭的影响。方法 MKN-45细胞接种于含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中,常规培养24h后加去氢骆驼蓬碱(2、4、8、16、32μg/ml),同时设置对照组不加药物,空白组只加培养液不含细胞,分别培养24h、48h、72h,MTT法检测细胞增殖率;western blot法检测COX-2表达;划痕损伤愈合实验及Transwell小室基质侵袭实验检测胃癌细胞体外迁移和侵袭。结果去氢骆驼蓬碱剂量依赖性抑制MKN-45细胞COX-2表达(P0.01);与对照组相比,去氢骆驼蓬碱组MKN-45细胞迁移和侵袭能力明显下降(P0.01)。结论去氢骆驼蓬碱可能通过下调COX-2表达抑制胃癌细胞迁移和侵袭。     

Presenilin-1突变对全反式维甲酸诱导的PC12细胞生长和凋亡的影响

目的　观察Presenilin 1(PS 1)突变型L2 86V对全反式维甲酸 (RA)诱导的PC12细胞生长和凋亡的影响。　方法　运用脂质体介导的基因转染技术建立稳定表达PS 1WT和突变型L2 86V基因的细胞克隆 ,采用MTT法、流式细胞仪检测细胞生长曲线、生长周期及细胞凋亡情况。　结果　 (1)PS 1突变型L2 86V对RA诱导的PC12细胞生长具有抑制作用 ;主要表现为G1期细胞增多、S期细胞减少 ,细胞增殖指数降低 ;(2 )在正常培养条件下 ,对照组细胞凋亡率 (% )为 0 31±0 0 9、野生型组为 0 4 3± 0 11、L2 86V组为 0 6 2± 0 2 7;无血清培养 1、2、3d ,对照组细胞凋亡率 (% )分别为 0 5 5± 0 0 7、1 2 3± 0 4 7、5 5 9± 2 91;野生型组为 1 0 9± 0 73、3 2 1± 1 4 1、7 79± 2 78;L2 86V组为 4 6 5± 1 0 4、10 5 4± 3 18、14 4 7± 3 5 3;PS 1突变型L2 86V对RA诱导的PC12细胞均具有促进细胞凋亡的作用 ,以无血清培养时表现得更为明显。　结论　PS 1突变型L2 86V对RA诱导的PC12细胞生长具有抑制作用 ;在有和无血清培养条件下均具有促进细胞凋亡的作用 ,以无血清培养时表现得更为明显。     

维生素A和4HPR对Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究维生素A、N-(4-羟基苯基)维生素甲酰胺(4HPR)对Hela细胞增殖与凋亡的影响.方法 通过集落形成试验和裸鼠致瘤试验观察维生素A和4HPR对Hela细胞增殖的影响;通过电子显微镜及细胞DNA琼脂糖凝胶电泳法观察维生素A和4HPR对Hela细胞凋亡形态的影响及生物化学特征.结果 维生素A和4HPR对Hela细胞集落形成有明显抑制作用,并可抑制Hela细胞对裸鼠的致瘤作用(P<0.01);维生素A的抑瘤作用强于4HPR(P<0.01);电镜下可见细胞固缩,核膜扭曲,核染色体聚集成块并靠近核膜等凋亡细胞特征;细胞DNA被降解,在琼脂糖凝胶电泳中呈现典型的"阶梯状"图谱.结论 维生素 A和4HPR可抑制Hela细胞增殖,诱导Hela细胞凋亡.     

奥氮平对MPP+诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的探讨非典型性抗精神病药物奥氮平对MPP＋诱导的PC12细胞凋亡的防护作用。方法以不同浓度的MPP＋作用于培养的PC12细胞，MTT法检测PC12细胞存活率，荧光染料吖啶橙（AO）染色观察MPP＋作用PC12细胞后的凋亡变化。用不同浓度的奥氮平预处理细胞后，加入MPP＋共孵育，测MTT并AO染色，观测奥氮平的防护作用。结果在MPP＋终浓度为250μmol／L时，细胞存活率降低为60．14％，与对照组差异显著，而奥氮平（200μmol／L）的最高防护作用是79％。绪论奥氮平能拮抗MPP＋诱导的PC12细胞的凋亡。该药具有的防护作用可能与抑制MPP＋诱导的凋亡有关。     

一氧化氮可能参与多巴胺对PC12细胞凋亡的诱导作用

目的：探讨多巴胺（DA）诱导的PC12细胞凋亡是否与内源性一氧化氮（NO）生成有关。方法：酶还原法测定NO浓度，RT－PCR法检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS)和caspase-3 mRNA表达水平，免疫细胞化学方法和蛋白印迹法分别检测活化型caspase-3蛋白和iNOS蛋白水平。结果：在多巴胺诱导PC12细胞凋亡过程中，iNOS mRNA和蛋白表达明显增加，内源性NO生成增多，caspawse-3mRNA和活化型caspase-3蛋白的表达也明显增加，结论：内源性NO可能参与多巴胺对PC12细胞凋亡的诱导作用。     

醒脑启智胶囊药物血清对缺氧诱导的PC12细胞凋亡及凋亡基因的影响

目的 探讨醒脑启智（XNQZ）胶囊药物血清对缺氧诱导的PCI2细胞凋亡及其相关基因bcl-2、bax表达的影响。方法 采用血清药理学方法，体外培养PCI2细胞，以药物血清孵化后用连二亚硫酸钠（Na2S2O4）缺氧诱导，观察PCI2细胞凋亡及bcl-2、bax表达的变化。结果 缺氧诱导后，PC12细胞的bax蛋白表达上调，使细胞凋亡趋势增强。XNQZ药物血清可使bcl-2基因表达量增加，bax基因表达量降低，细胞凋亡率下降。结论 XNQZ可通过调节bcl-2、bax表达，抑制细胞凋亡，提高细胞抗损伤和修复能力，以达到对抗神经元迟发性死亡，抑制智力减退的作用，并呈现一定的剂量依赖关系。     

羟基喜树碱对HSC-T6细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨羟基喜树碱(HCPT)对体外培养大鼠肝星状细胞(HSC)的增殖与凋亡的影响.方法 大鼠肝星状细胞(HSC-T6)和大鼠正常肝细胞(BRL-3A)分别在实验组(分别以含HCPT浓度为0.008、0.016、0.031、0.063、0.125,0.25、0.5、1、2、4、8、16、32mg/L的培养液培养)和对照组(单纯培养)体外培养24 h.用四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖情况,找出HCPT对HSC-T6细胞增殖抑制的最佳作用浓度;流式细胞仪检测细胞凋亡率;透射电子显微镜下观察细胞凋亡的形态学变化情况;琼脂糖凝胶电泳法检测DNA片段化.多个样本均数的比较采用单因素方差分析,两样本均数的比较采用t检验.结果 HCPT对HSC-T6细胞和BRL-3A细胞的增殖抑制率随着药物浓度的升高而逐渐升高;当HCPT浓度＞0.5mg/L时,对BRL-3A细胞的毒性作用显著增高(P值均<0.05);0.5 mg/L对HSC-T6细胞增殖抑制作用最大,为HCPT对HSC-T6细胞增殖的最佳抑制浓度.0.125、0.25、0.5 mg/L的HCPT作用HSC-T6细胞24h,流式细胞仪检测显示细胞凋亡率分别为13.46%±2.42%、26.25%±5.65%、47.05%±8.76%,与对照组(4.89%±1.80%)相比,差异有统计学意义(F=34.24,P<0.01).0.5mg/L的HCPT作用HSC-T6细胞24 h,透射电子显微镜下可见细胞体积缩小,核仁消失,染色质浓缩聚集成团块状,沿核膜排列等凋亡形态学改变;琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA梯度带形成.结论 HCPT在体外可以明显地抑制HSC-T6细胞的增殖、诱导HSC-T6细胞凋亡,作用强度呈剂量依赖性.     

去氢骆驼蓬碱衍生物DH-330体外对细粒棘球蚴线粒体凋亡通路中Cyt-C和Caspase-3的影响

目的探讨去氢骆驼蓬碱衍生物DH-330体外诱导对细粒棘球蚴线粒体凋亡通路中Cyt-C和Caspase-3的影响。方法体外培养细粒棘球蚴,随机分为空白对照组、溶剂对照组(终体积浓度为1%DMSO)、阳性对照组(阿苯达唑亚砜组,ABZSO,培养液中终浓度为6.25、12.50、25.00、50.00、100.00μg/L)及DH-330处理组(培养液中终质量浓度为6.25、12.50、25.00、50.00、100.00μg/L),连续用药6d,染色观察各组细粒棘球蚴存活率,通过酶联免疫吸附试验检测评价DH-330对细粒棘球蚴线粒体Cyt-C释放量、Caspase-3酶活性的影响,绘制活力曲线。结果 DH-330干预后对细粒棘球蚴形态产生显著影响,50、100μg/L DH-330处理3d和6d细粒棘球蚴存活率分别为59.33%、43.25%和21.45%、3.25%,DH-330浓度组(培养液中终质量浓度为12.50、25.00、50.00、100.00μg/L)对细粒棘球蚴的杀伤作用呈时间、浓度依赖性。作用6d,ED50值为25.44μg/L。给予不同剂量的DH-330干预后Caspase-3酶活性显著增高(P0.01),且呈浓度依赖性与时间依赖性;作用3d时随着药物浓度的增加,细粒棘球蚴Cyt-C表达水平逐渐增高(P0.05),6d时随着药物浓度的增加,细粒棘球蚴Cyt-C表达水平逐渐降低(P0.05)。结论药物干预过程中,Caspase-3酶活性和Cyt-C释放量显著增加,表明线粒体凋亡通路可能参与DH-330诱导的细粒棘球蚴凋亡过程,具体机制有待进一步研究。     

右美托咪定对多塞平诱导PC12细胞凋亡的影响

目的观察右美托咪定对多塞平诱导PC12细胞凋亡的影响。方法将PC12细胞接种于培养板中,采用随机数字表法分为4组,正常对照组不做任何处理;多塞平组培养液中加入多塞平,终浓度为120μmol/L;右美托咪定组培养液中加入右美托咪定,终浓度为1μmol/L;多塞平+右美托咪定组培养液中加入多塞平和右美托咪定,终浓度分别为120μmol/L和1μmol/L。各组孵育24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,倒置显微镜下观察细胞形态并采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与正常对照组相比,多塞平组能够促进PC12细胞凋亡,并降低其存活率,差异具有统计学意义(P0.05),而右美托咪定组对PC12细胞无实际影响,多塞平加右美拉咪定组能够改善多塞平诱导细胞凋亡的现象,提高细胞存活率,与多塞平组相比差异显著(P0.01)。结论右美托咪定能明显改善多塞平诱导的PC12细胞凋亡。     

蛋白酶体抑制剂诱导PC12细胞凋亡作用的研究

目的研究蛋白酶体抑制剂诱导PC12细胞凋亡的作用，探讨帕金森病神经元的死亡机制。方法使用MTT法、荧光染色和电镜检测蛋白酶体抑制剂PSI对PC12细胞的捅亡诱导作用。培果PSI能够剂量、时间依赖性地诱导PC12细胞的凋亡，荧光染色见核固缩等凋亡表现,电镜下见核浓缩、染色质边集等凋亡特征。绪论蛋白酶体功能受抑制诱导PC12细胞凋亡发生，蛋白酶体抑制可能参与帕金森病的病变过程。     

吲哚美辛对胃黏膜细胞凋亡和增殖功能的影响

临床及实验研究显示非甾体类抗炎药(NSAIDs)可导致胃黏膜损伤，但其确切机制不明。有研究显示NSAIDs可抑制黏膜细胞DNA合成及增殖功能，同时可导致胃黏膜细胞凋亡。本研究采用吲哚美辛(IND)灌胃的方法建立急性胃黏膜损伤动物模型，选择增殖细胞核抗原(PCNA)作为反映黏膜细胞增殖功能的指标，采用脱氧核苷酰转移酶介导     

软脉胶囊含药血清对PC12细胞缺氧损伤细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的 通过软脉胶囊含药血清对PC12细胞缺氧损伤细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,探讨软脉胶囊治疗血管性痴呆（VD）的机制.方法 采用TUNEL法和流式细胞仪检测PC12细胞的凋亡率及Bcl-2和Bax蛋白的表达率.结果 软脉胶囊含药血清可明显对抗缺氧引起的PC12细胞的凋亡率,使Bcl-2蛋白的表达率明显增加,同时使Bax蛋白表达率明显降低.结论 软脉胶囊对VD具有治疗作用.     

肺癌组织与细胞凋亡和增殖的关系

目的　探讨肺癌与细胞凋亡和增殖的关系。方法　对 38例肺癌组织及 2 1例肺部良性组织 ,应用 TUNEL 技术对细胞凋亡情况进行检测 ,应用免疫组织化学法对增殖细胞核抗原(PCNA)等进行检测 ,并对细胞凋亡和 PCNA阳性细胞进行计数 ,分别定义凋亡指数和增殖指数。结果　肺癌组织中凋亡指数 [(3.73± 2 .42 ) % ]和增殖指数 [(13.86± 15 .0 5 ) ]%均高于肺部良性组织 [(0 .77± 0 .5 0 ) %、(0 .91± 3.19) % ],P <0 .0 1。结论　细胞凋亡和 PCNA均可作为肺癌的标志物