高分辨质谱库和特征组分诊断比值法快速鉴别食品中非法添加淫羊藿

建立了一种基于高分辨质谱库和特征组分诊断比值法鉴别食品中非法添加淫羊藿的方法。采用高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱仪构建淫羊藿6种特征组分高分辨质谱库进行初步筛查,将不同产地和采摘时间的淫羊藿中药材模拟配制酒、代用茶和饮料样品,构建3种基质中淫羊藿特征组分液相色谱分析方法,选取受产地、采摘时间、加工工艺等影响较小,不同基质组间无显著性差异的3组特征组分峰面积诊断比值DR1(朝藿定A/朝藿定B)、DR3(朝藿定A/淫羊藿苷)和DR7(朝藿定B/淫羊藿苷),合并后绘制箱图确定各诊断比值非异常值范围分别为0.60~0.96、0.26~0.64和0.35~0.91,以此作为鉴别指标。对实际样品配制酒、代用茶及饮料进行分析,1批次配制酒样品与淫羊藿6种特征组分高分辨质谱库匹配一致,且3组特征组分诊断比值DR1、DR3、DR7分别为0.73、0.28、0.38,均在规定区间内,推断该配制酒样品中加入了淫羊藿中药材。该方法准确、快捷、稳定性好,可快速鉴别食品中非法添加淫羊藿,为打击食品中非法添加淫羊藿违法行为提供技术支撑。     

川产淫羊藿属植物中淫羊藿苷的提取分离工艺研究

对四川产地的不同淫羊藿属植物中淫羊藿苷的含量进行测定,筛选出含量较高的原料为宣汉产巫山淫羊藿,含量达2.67%,最佳提取分离工艺为:80%乙醇70℃下以10倍、8倍、6倍量(v/w)分别提取2.0、1.5、1.0h。总收率达1.8%以上,含量超过98%。     

高效液相色谱法测定配制酒中6种人工合成色素

建立了高效液相色谱法测定配制酒中6种人工合成色素(柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝)的方法。采用C18色谱柱,以甲醇与0.02 mol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1 mL/min,紫外检测器检测波长为254 nm和600 nm,柱温为25℃,在此条件下进行检测。结果显示,该方法测定检出限为2.5μg/mL,线性范围为0.010~0.120 mg/mL,加标回收率为92.0%~104.4%,相对标准偏差在1.4%~4.5%之间。该方法操作简便、准确、快速,能够同时检测6种合成色素的含量。     

不同地区商品淫羊藿中朝藿定、淫羊藿苷、总黄酮含量变异及抗氧化活性分析

为了了解我国商品淫羊藿的质量现状,为淫羊藿功能性食品的生产提供依据,采用高效液相色谱法测定了33批市售淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C与淫羊藿苷的含量,采用紫外分光光度法测定了总黄酮的含量,采用DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）与ABTS（2,2’-连氨-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二氨盐）方法分析了淫羊藿醇提物的抗氧化活性。结果发现,朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷与总黄酮的含量分别在0.37³.01、0.25⁵.22、0.46¹9.27、0.41¹3.40、18.29⁶8.73mg/g范围内,淫羊藿醇提物清除DPPH自由基与ABTS+自由基的EC50值分别在0.27³.51、4.71²1.96μg/mL范围内,所有淫羊藿样品的DPPH自由基清除率均高于抗坏血酸（VC）。不同地区商品淫羊藿中黄酮类化合物含量及抗氧化活性差异较大。淫羊藿醇提物的抗氧化活性与朝藿定C、总黄酮之间具有较高的相关性（相关系数在0.5648⁰.8626之间）,与朝藿定A、朝藿定B、淫羊藿苷的相关性较低（相关系数在0.3550⁰.6395之间）。      

淫羊藿甙的抑菌试验

研究了淫羊藿甙的抑菌作用。结果表明，淫羊藿甙对常见的几种食品污染菌均有一定的抑制作用，且淫羊藿甙经瞬时高温处理后，仍具有较强的抑菌作用。另外，对黑曲霉的最低抑菌浓度为0．23％，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0．12％，对枯草杆菌、青霉、酵母菌的最低抑菌浓度均为0．05％。     

淫羊藿保健酒澄清工艺研究

为了寻求一种保健酒澄清的最佳方法.试验分别应用ZTC-Ⅲ天然澄清剂和膜分离技术处理淫羊藿保健酒,同时测定处理前后酒中黄酮、多糖含量以及酒的色度、透光率、pH值等指标.处理后的淫羊藿酒稳定性明显提高,放置一段时间后仍具有较高澄清度,透光率在90%以上.同时黄酮、多糖等主要成分损失很小,澄清剂和膜处理后黄酮保留率分别为,92.97%、93.19%;多糖保留率分别为,61.29%、94.19%.通过比较应用膜技术澄清淫羊藿保健酒不仅可以改善澄清度,同时保留了多糖、黄酮等有效成分,更适用于淫羊藿保健酒的澄清,在保健酒澄清方面具有广阔应用前景.     

酶转化在淫羊藿苷提取中的应用

目前生产淫羊藿苷的过程中,其副产物朝藿定A、B、C等黄酮未被利用好。筛选出了将淫羊藿苷废渣中朝藿定A、B、C等黄酮转化成淫羊藿苷的A.sp.y39菌酶,将其应用于以淫羊藿提取物为原料制备淫羊藿苷的工艺。将150 g西安岳达淫羊藿提取物,溶解于60%乙醇、经D-280脱色柱脱色、结晶得到30.5 g淫羊藿苷;其废渣朝藿定A、B、C混合黄酮,经A.sp.y39菌酶转化,又得到16.6 g淫羊藿苷。共得到纯度90%以上的淫羊藿苷47.1 g;淫羊藿苷的提取率由传统的20.3%提高到31.4%;相比于传统方法,淫羊藿苷的提取率提高了50%以上。本文为节约淫羊藿资源提供了依据。      

膜分离纯化药酒中淫羊藿总黄酮的工艺研究

本文利用膜分离和浓缩的科学方法和手段,研究和探讨分离一种药酒主要成分淫羊藿总黄酮的工艺参数,为以淫羊藿黄酮为主要成分的药酒的规模化生产提供一种新工艺,也为进一步提取与分离其他有效成分提供理论数据。     

淫羊藿多糖提取方法的优化

药用植物成分的研究是中药现代化的一个重要组成部分,而活性多糖的研究是目前药用植物研究的一个热点。对淫羊藿多糖的提取工艺进行了初步研究,为进一步开发利用这种中药材提供了有价值的参考数据。     

基于高分辨质谱库和特征组分诊断比值法鉴别配制酒和代用茶中非法添加补骨脂

目的:建立一种基于高分辨质谱库筛查和特征比值法确证配制酒和代用茶中非法添加补骨脂的高效液相色谱检测方法。方法:采用高效液相色谱—四极杆—飞行时间质谱仪建立补骨脂中药材特征组分筛查库,结合液相特征组分诊断比值法,对不同采摘时间和产地的共20批次补骨脂模拟的补骨脂配制酒、代用茶样品进行特征组分分析,从13种特征成分中选出2组受产地、采摘时间、加工工艺等影响较小,不同基质组间无显著性差异的特征组分峰面积诊断比值作为确证指标。结果:建立了补骨脂中药材特征组分筛查库,选定出2组特征组分CoryliA/补骨脂酚和补骨脂素/异补骨脂素,绘制箱图确定CoryliA/补骨脂酚的非异常值范围为0.061~0.115,补骨脂素/异补骨脂非异常值范围为1.14~1.68。通过市售样品对建立的筛查和确证方法进行验证。结论:该方法简单高效,适用于配制酒和代用茶中非法添加补骨脂的检测。     

前处理方法对蒸馏酒及其配制酒中甲醇测定的影响

目的:研究GB 5009.266-2016《食品安全国家标准食品中甲醇的测定》在颜色深浅不一的蒸馏酒及其配制酒中,采用直接进样法与蒸馏前处理法的前处理方法的适用性。方法:以蒸馏酒及其配制酒为研究对象,按照该国家标准的要求,采用上述两种前处理方法进行检测数据比较。结果:样品颜色的深浅未能影响其中甲醇含量的测定结果,而且测定结果重现性及准确性都符合要求。结论:直接进样法操作简便、经济快速,适用于白酒、伏特加、朗姆酒、威士忌、白兰地这5种无论颜色深浅不一,但非复杂基质样品的蒸馏酒中,甲醇含量的快速测定。但是配制酒属于复杂基质样品,即使颜色很浅,如不进行蒸馏前处理的话,易对气相色谱仪器造成严重的污染,因此建议配制酒应采用蒸馏前处理法。     

高效液相色谱-串联质谱法测定白酒、配制酒中58种解热镇痛类非法添加化学药物

目的：建立一种高效液相色谱-串联质谱法测定白酒、配制酒中58种解热镇痛类非法添加化学药物的方法。方法：样品经甲醇超声提取后,以甲酸铵溶液-甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,外标法定量。结果：58种待测化合物在相应的线性范围内呈良好的线性关系,相关系数大于0.995;定量限范围为0.1～2.5mg/kg;在3个添加水平下,58种待测物的平均回收率基本为85.0%～131%,进样精密度和重复性的相对标准偏差为＜12.31%(n=6)。结论：该方法简单、快速、重复性好、稳定性强,适用于白酒、配制酒中清热镇痛类非法添加化学药物的检测。     

固相萃取-超高效液相色谱法同时测定辣椒制品中非法添加苏丹红染料

目的 建立了一种同时测定辣椒干、辣椒酱、辣椒油等辣椒制品中非法添加4种苏丹红染料（苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ）的固相萃取-快速液相色谱分析方法。方法 样品经正己烷超声提取,提取液经ProElutTMSDH苏丹红专用柱净化富集,采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18柱(4.6 mm×100 mm, 3.5 μm)以乙腈-水为流动相梯度洗脱分离,二极管阵列检测器测定,检测波长为500 nm（苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）、520 nm（苏丹红Ⅳ）,利用保留时间和光谱图定性,外标法定量。结果 表明,苏丹红Ⅰ~Ⅳ可在6.5 min内实现完全分离,4种目标物在0.1~5.0 μg/L范围内线性关系良好,相关系数（r）均大于0.9999;方法的检出限为8~15 μg/kg,定量下限为26~48 μg/kg。在0.05、0.3、1.5、4.0 mg/kg的加标回收率为84.4%~98.5%,相对标准偏差为0.3%~5.7%(n=6)。结论 该方法操作简便、准确、快速、灵敏、稳定,易推广应用于常规实验室辣椒制品中非法添加苏丹红染料的检测。     

浓香型纯粮白酒鉴别方法的研究

根据纯粮白酒在碱性加热条件下在波长363 nm处存在吸光度值差异的原理,可以通过纯粮白酒标准曲线来确定该酒样中纯粮白酒的比例。通过盲样酒的实际检测比对,4个样品的准确度均＞90%,相对标准偏差RSD均＜1%,证实了碱性实验在鉴别纯粮白酒及其在酒精勾兑白酒中的比例含量上的可行性。     

高效液相色谱法同时测定保健食品中9种非法添加降脂类药物

目的建立采用高效液相色谱法同时测定调节血脂类保健食品中烟酸、普伐他汀钠、瑞舒伐他汀钙、苯扎贝特、阿托伐他汀钙、氟伐他汀钠、吉非罗齐、洛伐他汀及辛伐他汀9种非法添加药物的方法。方法以甲醇为样品提取溶剂,采用Inertsil ODS-3色谱柱,以0.02 mol/L乙酸铵-甲醇为流动相梯度洗脱;流速为1.0m L/min;检测波长为230 nm,柱温为30℃,利用保留时间定性、外标法定量,分析9种非法添加药物。结果本方法可以在20 min内定性并定量分析烟酸、普伐他汀钠、瑞舒伐他汀钙、苯扎贝特、阿托伐他汀钙、氟伐他汀钠、吉非罗齐、洛伐他汀及辛伐他汀9种化学药物。9种非法添加药物在1.0~100μg/m L之间线性关系良好,相关系数均大于0.999;除阿托伐他汀钙在袋泡茶中回收率较低外,平均加标回收率范围为77.9%~102.9%,相对标准偏差范围为0.42%~5.8%。结论该方法线性关系良好,线性范围广,准确度及精密度高,可同时鉴定是否非法添加上述9种化学药物。     

高效液相色谱-串联质谱法测定中国劲酒中 甜菜碱含量

目的建立高效液相色谱-串联质谱法测定中国劲酒中甜菜碱。方法采用Agilent SB-C_(18)色谱柱,以0.1%甲酸-甲醇溶液(85:15,V:V)为流动相,流速为0.2 mL/min。质谱采用电喷雾正电离源模式(electronic spray ion,ESI+)和多反应监测模式(multiple reactions monitoring,MRM)监测,监测离子m/z分别为1 1 8.2/53.2和118.2/42.3,以外标法定量。结果甜菜碱在3.99~39.9μg/g范围内具有良好的线性关系,相关系数大于0.999,检出限为0.1μg/g,平均回收率为99.5%,相对标准偏差为0.46%(n=9)。结论本法简便易行、结果准确、重现性好,可适用于中国劲酒中甜菜碱的含量测定。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定减肥类保健食品中27种违法添加化学药品

目的:建立一种高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）同时测定减肥类保健食品中27种违法添加化学药品的方法。方法:采用Agilent Eclipse Plus C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8μm）,以10 mmol/L乙酸铵（用甲酸调节pH至4.0）溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速为0.2 m L/min。通过HPLC-MS/MS系统中多反应监测模式（MRM）对减肥类保健食品中27种违法添加化学药品进行定性和定量分析。结果:该方法线性R²均大于0.99,精密度相对标准偏差小于8.0%,不同质量浓度样品平均回收率为74.5%¹06.7%,检出限为0.2²04.2 ng/g。结论:此方法测定快速、准确、灵敏度高、分离度高,可用于减肥类保健食品中27种违法添加化学药品的检测。      

仙灵脾改善小鼠睡眠功效成分的分离鉴定

仙灵脾提取物经大孔树脂粗分,利用小鼠助眠及自主活动模型进行筛选。活性分离组分经MCI、ODS层析柱进一步筛选分离有效组分得4个单体成分。经核磁共振结构鉴定,4个单体分别为:朝藿定C、朝藿定、淫羊藿苷、淫羊藿次苷。经动物试验筛选得出朝藿定C和淫羊藿苷有效提高小鼠入睡率、延长睡眠时间及减少活动次数和站立次数,并且朝藿定C效果更优。结果表明:仙灵脾具有改善睡眠作用的主要功效成分为朝藿定C,淫羊藿苷也具有较好助眠功能。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定海蛇药酒中11种化学成分

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定海蛇药酒中多种成分的含量。方法 采用Agilent EC-C18色谱柱(4.6 mm×50 mm, 1.8 μm),以水(0.1% 甲酸)-乙腈(0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速0.2mL/min,进样量10 μL柱温为30℃;采用电喷雾离子源进行正离子模式监测,多反应监测模式(MRM)用于定量分析。结果 1-甲基海因、紫丁香苷、绿原酸、升麻素苷、芦丁、香草酸、木犀草苷、阿魏酸、黄芩苷、槲皮素、蛇床子素分别在0.1234～6.170(r=0.9991)、0.03340～1.670(r=0.9996)、0.2578～12.89(r=0.9998)、0.3220～16.10(r=0.9992)、0.04975～2.488(r=0.9992)、0.02592～1.296(r=0.9991)、0.1001～5.005(r=0.9991)、0.1054～5.270(r=0.9994)、0.000685～0.03425(r=0.9986)、0.00542～0.2710(r=0.9996)和0.2822～14.11 mg.L^-1(r=0.9993)线性关系良好,平均回收率在97.4%～103.5%,精密度RSD为0.34%～2.02%。结论 该方法快速、专属性强、灵敏度高,可用于海蛇药酒的质量控制。