鸡腿蘑深层发酵培养基的优化

以胞外多糖含量和菌丝体生物量为测定指标对鸡腿蘑深层发酵培养基的优化进行了研究。结果表明:鸡腿蘑深层发酵优化培养基的配方为玉米淀粉4.0%,黄豆饼粉0.2%,蔗糖3.0%,KH2PO40.1%,MgSO40.1%,CaSO40.05%,玉米浆0.5%。     

拟青霉发酵生产胞外多糖的研究

探讨拟青霉属产胞外多糖和菌丝体生物量最大时的液体培养条件的优化,主要考察培养基组分、碳氮比和物理参数这三方面的影响。结果表明,最适培养基配方为葡萄糖30 g/L、酵母膏20 g/L、KH_2PO_40.5 g/L,Mg SO_40.1 g/L。最适培养条件为27℃,摇床转速400 r/min,培养时间为7 d。在此条件下,拟青霉属胞外多糖的产量为2.51 g/L,菌丝体生物量为23.5 g/L。     

常熟虞山松蕈优良菌株选育及深层发酵条件的优化

针对常熟虞山松蕈菌株筛选及深层发酵条件优化展开研究。以松蕈深层液体发酵的生物量、菌丝球直径、菌丝体密度及菌丝体日生长速率为指标,筛选得到松蕈2号菌株。进一步优化了该菌株的发酵条件。通过单因素实验研究了培养温度、摇床转速及发酵周期对松蕈深层发酵的影响。最后,通过响应面实验优化得到最佳发酵条件为温度25℃,摇床转速170 r/min,发酵周期8.5 d。在此条件下培养后,松蕈菌丝体干重达14.5 mg/m L。     

细脚拟青霉深层发酵菌丝体核苷类成分分析

以已知核苷为标样,并以冬虫夏草生药作对比,利用反相高效液相色谱法对细脚拟青霉RCEF0441 深层发酵菌丝体中核苷类化学成分进行分析。结果表明,细脚拟青霉RCEF0441 菌丝体中主要含有胞苷、尿苷、鸟苷、肌苷、胸苷和腺苷6 种核苷,其中胞苷的含量为冬虫夏草生药的3 倍左右,肌苷和鸟苷的含量则分别是冬虫夏草生药的7 和9 倍左右,尿苷和腺苷的含量也显著高于对照品冬虫夏草生药(p<0.05)。     

不同中药水提物对蝉拟青霉液体深层发酵和产物活性的影响

通过分别向培养基中添加不同的中药水提物进行蝉拟青霉液体发酵培养,探究其对蝉拟青霉发酵过程中生物量、胞外和胞内多糖的产量及其产物活性的影响。结果表明,黄芪、薏苡仁、枸杞的水提物分别对蝉拟青霉生物量、胞外和胞内多糖的合成促进效果最为显著(p0.05),分别较对照实验提高了135.82%、48.90%、137.18%;而金银花和山楂水提物不利于蝉拟青霉的发酵培养;对于产物活性,结果显示枸杞水提物能同时显著(p0.05)提高蝉拟青霉胞外和胞内多糖对DPPH自由基的清除能力,分别为对照实验的1.17倍和1.38倍。综合比较上述结果,枸杞水提物是蝉拟青霉液体发酵的最适中药成分,其最佳添加量为10g/L。     

激素对蝉拟青霉深层液体发酵生长代谢的调控作用

以生物量、腺苷产量、胞内多糖产量和虫草素产量为指标,考察不同添加量的细胞分裂素6- 苄氨基嘌呤(6-BA)和保幼激素Ⅲ对蝉拟青霉深层液体发酵的调控作用。各实验组在整个发酵过程中的生长代谢节奏与对照组有一定的差异性,两种激素均具有提高蝉拟青霉生物量的作用,其中6-BA 添加量为4mg/L 时比对照组提前12h 到达生物量最大值,并且其最大生物量较对照组最大生物量提高了28.96%。两种激素均可调节蝉拟青霉菌丝体中活性物质的代谢节奏,低剂量6-BA 可显著提高胞内多糖产量(P ＜ 0.05);而保幼激素Ⅲ中、高两剂量组则在培养36h以后表现出了明显抑制多糖合成的作用(P＜0.05)。虫草素和腺苷产量分析结果也表明激素可改变两种活性物质的代谢节奏。     

中国被毛孢液体发酵培养条件优化

以中国被毛孢为试验菌株对药瓶发酵培养基配方和发酵条件进行优化。在单因素试验的基础上进行正交试验结果表明最佳发酵培养基配方:葡萄糖3%,蚕蛹粉2%,土豆20%,KH_2PO_4 0.2%,MgSO_40.1%,水解酪蛋白0.1%,复合维生素0.07%。最佳摇瓶发酵条件:初始pH 6.5,装液量100 mL/500 mL,接种量为5%,温度为16℃,摇床转速150 r/min。菌丝体干重为16.53 g/L,腺苷含量为1.85 mg/g。与优化前相比,菌丝体干重提高了36.2%,腺苷含量提高了46.8%。     

细脚拟青霉活性成分分析及清除自由基活性研究

以冬虫夏草生药为对照品,对细脚拟青霉RCEF0441的深层发酵菌丝体和发酵液冻干粉进行活性成分分析。结果表明：RCEF0441 菌丝体和发酵液冻干粉中粗蛋白和氨基酸总量均明显高于冬虫夏草生药;菌丝体中多糖、麦角甾醇、甘露醇及腺苷等多种物质的含量亦高于冬虫夏草生药;RCEF0441 深层发酵菌丝体和发酵液冻干粉中还含有丰富的对人体健康非常重要的Zn、Fe、Ca 等元素。用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)-TLC 法和DPPH 酶标仪法对RCEF0441菌丝体和发酵液冻干粉的甲醇- 乙酸乙酯混合液提取物清除DPPH自由基活性进行分析,发现两种提取物均具有较强的清除自由基活性,在浓度为5.0mg/ml,于37℃下保温10min 时,两种提取物对0.4 mg/ml 的DPPH自由基的清除率分别达到61.28% 和81.12%。     

古尼拟青霉小孢变种的主要有效成分分析

对古尼拟青霉小孢变种RCEF0864的深层发酵产物进行了有效成分分析,结果表明,菌丝体和发酵液中氨基酸总量明显高于冬虫夏草生药;菌丝体中粗蛋白、总糖、麦角甾醇、甘露醇及腺苷等多种物质的含量亦高于冬虫夏草生药;RCEF0864深层发酵菌丝体和发酵液中均含有丰富的对人体健康非常重要的Zn、Fe、Ca等元素,尤以Ca的含量最高;用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)-TLC法和酶标仪法对RCEF0864菌丝体和发酵液冻干粉甲醇提取物中的清除自由基活性物质进行了分析,发现2种提取物均具有较强的清除自由基活性,在浓度为5.0 mg/mL,37℃下保温10 min时,2种提取物对0.4 mg/mL的DPPH自由基的清除率分别为53.86%和59.66%。     

花脸香蘑菌丝体液体发酵研究

对花脸香蘑液体发酵培养基进行优化,以菌丝体生物量为指标,采用单因素分析,优化培养基中碳源、氮源、p H值、无机盐以及菌龄。结果表明,液体发酵培养基中,最佳碳源为土豆粉;最佳氮源为NH_4Cl;最佳p H值为7;无机盐为Cu SO_4和Fe SO_4;菌龄对菌丝体生物量没有影响。采用正交试验的方法,筛选出适合于花脸香蘑深层发酵培养配方为:碳源为土豆粉;氮源为NH_4Cl;p H值为7;无机盐为Fe SO_4;菌龄12 d。     

马勃液体培养条件的研究

试验以马勃发酵液中菌丝生物量为指标研究了碳源、氮源及无机盐对马勃在液体培养条件下生长的影响,并采用正交试验优化了马勃液体培养的培养基。结果表明：玉米粉为最佳碳源,黄豆粉为最佳氮源,优化培养基配方为：玉米粉3.0%、黄豆粉1.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.1%。最适合马勃菌丝体生长的液体发酵条件是：培养温度26℃,pH值6.5,摇瓶装液量为250ml装80ml,摇床转速130r/min,接种量15%。     

深层发酵生产红菇菌丝体和多糖的培养基优化研究

研究了采用液体发酵法生产红菇菌丝体及红菇多糖的发酵培养基。研究了碳源、氮源和金属离子对红菇细胞生长及红菇多糖的影响。结果表明:葡萄糖作为最佳碳源有利于细胞生长和胞内外多糖等代谢产物的积累而获得高的多糖产率;酵母膏作为最适氮源能获得最高的菌丝生物量、胞外多糖产量和多糖产率,尽管此时胞内多糖处于一个稍低水平;金属离子也对细胞生长具有影响,在锌离子存在的情形下能够获得最佳的细胞生长及代谢产物累积效果。在最优化培养基的条件下,细胞干重、胞外多糖、胞内多糖、总多糖及多糖产率分别达到20.94g/L,1.54g/L,78.11mg/g,2.95g/L和8.13%。     

富硒冬虫夏草发酵工艺优化

采用冬虫夏草作为富硒的载体,啤酒糟为基质,进行富硒冬虫夏草液态深层发酵试验,研究冬虫夏草对无机硒的生物转化能力.利用正交试验设计,对富硒冬虫夏草液态深层发酵条件如摇床转速、接种量、pH等进行了优化.结果表明,冬虫夏草能在含有低质量浓度亚硒酸钠（10～25mg/L）的培养基中生长,并在菌丝体内富集硒,最佳发酵工艺为摇床频率180r/min、培养10d的条件下,装液量50mL/250mL,pH值为7.0,接种量15％,温度20℃,亚硒酸钠质量浓度25 mg/L,啤酒糟质量浓度20 mg/L.在此优化的发酵条件下,富硒冬虫夏草菌丝体总富硒量为5808.20 μg/L.     

桑黄液体培养工艺的优化试验

试验研究了桑黄在液体培养条件下碳源、氮源及无机盐对菌丝生物量的影响,并利用正交试验优化了桑黄液体培养的培养基。结果显示:最佳的碳源是玉米粉,最佳的氮源是黄豆粉,优化培养基配方为:玉米粉4%、黄豆粉1.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.1%。最适合桑黄菌丝体生长的液体发酵条件是:培养温度26℃,pH值6.5,摇瓶装液量为250ml三角瓶装100ml,摇瓶转速130r/min,接种量15%,发酵时间7天。     

营养因子对长根菇液体发酵的影响

研究了各种营养因子对长根菇液体发酵的影响 ,确定了合适的碳源、氮源、C/N比、无机盐、生长因子的浓度 ,以玉米粉 2 %、豆饼粉 0 2 %、KH2 PO4 0 3 %、MgSO4 ·7H2 O 0 2 %、棕榈酸0 1 5 %、VB10 1mg/mL为发酵培养基 ,长根菇深层发酵结果最佳 ,在 7L发酵罐上进行发酵动力学试验 ,长根菇适宜发酵周期为 1 1 0h ,发酵液胞外多糖最高可达 2 85 g/L。     

木瓜酒和木瓜醋发酵工艺及其有机酸组成分析

以光皮木瓜为原料,发酵木瓜干酒,再通过液态深层发酵酿制木瓜醋,确定了木瓜干酒和木瓜醋的发酵工艺,并对木瓜酒和醋主要有机酸进行分析。光皮木瓜经榨汁、调整糖度后进入发酵工序,酒精发酵采用带皮渣半固态发酵方式,条件为加水比例1.5∶1（m/m）、初始糖度18%、果酒干酵母接种量0.1%、在24 ℃条件下发酵64 h,木瓜酒酒度（乙醇体积分数）为9.45%。醋酸发酵采用半连续式液态深层发酵法,调整初始酒度7%,醋酸菌接种量10%,在34 ℃条件下醋酸发酵80 h,木瓜醋总酸度为4.52%;分割留种发酵仅需24 h即可完成醋酸发酵。采用反相高效液相色谱法从木瓜干酒和木瓜醋中检出10 种有机酸,分别是草酸、酒石酸、甲酸、苹果酸、α-酮戊二酸、乳酸、醋酸、柠檬酸、富马酸和琥珀酸。实验确定的发酵工艺以及有机酸的分析与鉴定可为木瓜干酒及木瓜醋产品的开发提供理论依据。     

含香兰素冬虫夏草发酵液的制备工艺研究

该研究采用传统培养分离法从大曲、酒醅等原料中分离筛选能以葡萄糖为底物产香兰素的芽孢杆菌,并通过分子生物学技术对其进行鉴定。利用该菌株发酵冬虫夏草,并以香兰素含量为评价指标,采用单因素试验及响应面试验对其发酵工艺进行优化。结果表明,分离筛选得到一株香兰素产量较高的菌株B4-9,经鉴定,为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,其发酵冬虫夏草的最佳工艺参数为料液比1∶30、装液量20%、pH 7、接种量10%、培养温度43℃、摇床转速200 r/min,发酵时间9 d,在此条件下,冬虫夏草发酵液中香兰素含量可达到4.6 mg/L。     

北虫草液态发酵天然培养基的优化研究

对北虫草液态发酵天然培养基进行优化研究,经比较确定适宜液态发酵的北虫草菌株及最佳氮源,之后采用混料设计对发芽糙米浆、麦芽汁和豆粕汁三种原料的组成配比进行优化,确定适宜北虫草液态发酵的最佳培养基。研究表明:北虫草CM-3菌株适宜液态发酵,且该菌在以豆粕为氮源时生长最好;发芽糙米浆、麦芽汁和豆粕汁(可溶性固形物含量分别为6%)混料比为55:5:40时,CM-3的菌丝干重达最高(17.0g/L)。     

黑牛肝菌液体发酵条件的优化

讨论了黑牛肝菌液体的发酵培养基最佳组成及培养条件。采用响应曲面法分析了葡萄糖、蛋白胨、装液量三个关键影响因素对菌丝体生物量的影响。结果表明:黑牛肝菌发酵的最佳培养基为葡萄糖37.5g/L、蛋白胨8.5g/L、KH2PO42g/L、MgSO4.7H2O1g/L、VB10.01g/L、CaCO32g/L;培养条件为装液量96mL,培养温度28℃,转速160r/min,初始pH5.5。此时可达到最大菌丝体生物量25.4801g/L。     

蜜环菌多糖生产培养基的研究

进行了蜜环菌深层发酵产胞外多糖的培养基的研究,研究结果表明：以豆粕粉作氮源时,菌丝得率最高,以麸皮作氮源时,多糖产量最高;红薯粉为蜜环菌菌丝生长和多糖产量的最适碳源,最适培养基配方为：红薯粉3%,葡萄糖1%,豆粕粉1.5%,KH2PO40.15%,机械搅拌对菌丝的生长和多糖的产生都不利;接种后当即上摇床比接种后静置一段时间再上摇床的菌丝干重及多糖含量都多;培养基中加1%的乙醇对菌丝的生长和多糖的产生都不利;600ml发酵试验中,发酵液多糖含量可达0.485mg/ml,菌丝干重可达20.8g/L。当发酵液pH降为5.0左右,颜色开始变为棕褐色,菌丝亮光由强变弱时,即可终止发酵。